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PAGE9-第36講微生物的培育與應(yīng)用及微生物的純化技術(shù)1.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的理解,錯誤的是(
)A.將牛肉膏連同稱量紙一起放在燒杯中加熱溶化是因為牛肉膏比較黏稠
B.在稱量牛肉膏和蛋白胨時動作要快速,稱后要剛好蓋上瓶蓋
C.因為滅菌的目的相同,故對培育基和培育皿的滅菌方法也相同
D.在加熱熔化瓊脂過程中要不斷攪拌以防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯裂開2.現(xiàn)有兩種固體培育基,已知其配制時所加的成分如下表,用這兩種培育基分別去分別土壤中的兩種微生物,它們適于分別的是()成分NaCl葡萄糖淀粉甲培育基含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培育基含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%——A.甲培育基適于分別酵母菌;乙培育基適于分別真菌B.甲培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌;乙培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌C.甲培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌;乙培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌D.甲培育基適于分別異養(yǎng)型共生細(xì)菌;乙培育基適于分別異養(yǎng)型共生固氮菌3.下列對滅菌和消毒的理解不正確的是() A.滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌都是采納物理方法殺滅微生物C.接種環(huán)一般用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等4.如圖是平板劃線示意圖,劃線的依次為1→2→3→4→5,則下列說法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作要在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在1,2,3,4,5區(qū)域中劃線前后都要灼燒接種環(huán)5.下圖是劃線分別法接種微生物的示意圖,下列敘述錯誤的是()A.該接種過程一般需灼燒接種環(huán)5次B.劃線結(jié)束可看到劃線末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落C.若培育的是尿素分解菌,可加入酚紅指示劑D.該接種方法不能精確計數(shù)培育液中微生物數(shù)量6.為了保持菌種的純凈須要進(jìn)行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對于頻繁運用的菌種,可以采納臨時保藏的方法,放入-4℃的冰箱保藏
B.臨時保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培育基上
C.臨時保藏的菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異
D.對于須要長期保存的菌種,可以采納甘油管藏的方法7.下列關(guān)于分別并檢測土壤中尿素分解菌的試驗操作,不正確的是()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,并用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B.用稀釋涂布平板法接種,接種操作要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行C.將試驗組和比照組的平板倒置,以免污染D.選擇菌落數(shù)在30~300之間的試驗組平板進(jìn)行計數(shù)8.下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培育基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、瓊脂、水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、瓊脂、水
D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水9.如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計數(shù)”試驗示意圖。據(jù)圖分析下列敘述正確的是(
)A.3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)為103倍
B.用4號試管中稀釋液進(jìn)行平板培育得到的菌落平均數(shù)約為5號試管的10倍
C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個
D.該試驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高10.由于石油等不行再生資源供應(yīng)日趨驚慌,開發(fā)各種再生纖維素纖維成為獲得新型紡織原料的主要渠道,而纖維素分解菌在轉(zhuǎn)化可再生纖維素方面具有巨大的應(yīng)用價值。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.富集纖維素分解菌時,應(yīng)用固體培育基培育B.分別纖維素分解菌時,培育基中應(yīng)加入適量的剛果紅C.可用平板劃線法對纖維素分解菌進(jìn)行純化培育D.培育纖維素分解菌時,接種后的培育基需倒置11.關(guān)于纖維素酶的敘述中,正確的是()A.牛、羊等草食動物可以合成纖維素酶,從而利用纖維素B.纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖異構(gòu)酶三種組分C.纖維素可被纖維素酶水解成葡萄糖,為微生物供應(yīng)碳源、氮源等養(yǎng)分D.分解纖維素的細(xì)菌、真菌、放線菌,都是通過產(chǎn)生纖維素酶來分解纖維素的12.如圖為纖維單胞菌(能產(chǎn)生纖維素酶)的獲得過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是()
A.①②③④培育基都應(yīng)以纖維素為唯一碳源
B.圖中所用培育基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法C.④所用的接種方法可對培育的微生物進(jìn)行計數(shù)
D.可用剛果紅染料鑒定,看菌落四周是否出現(xiàn)透亮圈13.下列關(guān)于微生物的培育與應(yīng)用的敘述正確的是()A.用涂布分別法分別細(xì)菌時,須要用接種環(huán)將菌液涂布到培育基平面上B.在尿素固體培育基上,產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落四周會出現(xiàn)白色的透亮環(huán)帶C.利用醋酸菌將果酒發(fā)酵成果醋,須要不斷向發(fā)酵裝置中通入無菌空氣D.利用微生物進(jìn)行發(fā)酵制成的泡菜美味可口,含有的成分對人體均有益14.為了減輕廢棄農(nóng)作物秸桿對農(nóng)村環(huán)境污染,某科研小組運用如圖所示接種方法分別純化分解纖維素的微生物并將其用于生產(chǎn)。請據(jù)圖回答下列問題:(1)圖示接種方法是,所用接種工具的名稱是。制備培育微生物的培育基時,滅菌與調(diào)pH的先后依次是。(2)步驟②中,將接種工具冷卻的緣由是。(3)為從富含纖維素的土壤中分別獲得分解纖維素的微生物的單個菌落,某同學(xué)配制了一個培育基(成分見表):成分酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂水培育基++++++注:“+”表示有據(jù)表分析,該培育基含有微生物所需的、氮源、水、無機鹽四大類養(yǎng)分物質(zhì)。該培育基(填“能”或“不能”)用于分別纖維素分解菌,緣由是。(4)對該微生物的優(yōu)良菌種進(jìn)行長期保存,可以采納的方法。15.纖維素酶在生物燃料制作、布料處理中起重要作用。目前,利用微生物提高纖維素酶產(chǎn)量是主要發(fā)展方向。如圖1為用紫外線照耀含有纖維素分解菌的土樣,分別、培育,再檢測各菌株的纖維素酶的產(chǎn)生量。請回答下列相關(guān)問題:1.從自然界獲得纖維素分解菌,采集土樣時應(yīng)選擇__________的環(huán)境。
2.紫外線照耀的目的是__________,A0組未經(jīng)紫外線處理,其作用是作為__________。3.上述培育皿中的培育基除含有水、無機鹽、酵母膏、水解酪素和瓊脂等外,還應(yīng)有__________,目的是篩選纖維素分解菌。4.上述檢測結(jié)果如圖2所示。由圖可知,__________組酶活力與A0組相同,最可能的緣由是__________。5.若用剛果紅染色法比較纖維素分解菌產(chǎn)生纖維素酶的量的多少,可通過視察平板培育基上以纖維素分解菌為中心的透亮圈(如圖3)的大小來比較,其中與A1組對應(yīng)的是圖中的__________。
6.若要保證圖3中透亮圈中均為單個細(xì)胞形成的菌落,操作要求是__________。
答案以及解析1.答案:C解析:牛肉膏比較黏稠,須要放在稱量紙上稱量,溶化時也須要連同稱量紙一起放入燒杯,A正確;由于牛肉膏和蛋白胨都簡單吸潮,稱取時動作要快速,稱后要剛好蓋上瓶蓋,B正確;對培育基的滅菌常用高壓蒸汽滅菌法,對培育皿的滅菌常用干熱滅菌法,C錯誤;加入瓊脂后須要熔化,此過程中要不斷用玻棒攪拌,防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯裂開,D正確。2.答案:B解析:(1)固氮菌中能獨立生存的是自生固氮菌,甲培育基中含有葡萄糖和淀粉,可以作為碳源和能源,由此推出該培育基適于分別異養(yǎng)型的自生固氮菌;
(2)乙培育基中不含有機碳源,所以可用來分別培育自養(yǎng)型的自生固氮菌。
故選:B。3.答案:B解析:A、滅菌是指運用劇烈的理化因素殺死環(huán)境中的全部微生物(包括芽孢和孢子),A正確;
B、滅菌是將處理物體中的一切生物全部殺滅,在經(jīng)過滅菌后的物體中,不再存在任何活著的生命;消毒是將物體中的微生物削減到不再危害人體(或其他須要愛護(hù)的生物體)的程度,所采納的方法有物理的或化學(xué)的,B錯誤;
C、金屬接種工具常用灼燒法滅菌,C正確;
D、微生物的培育過程中常用的滅菌方法有灼燒法、干熱滅菌法、高壓蒸氣滅菌法,D正確.
故選:B.4.答案:D解析:操作前要將接種環(huán)放在酒精燈的外焰進(jìn)行灼燒滅菌;整個操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行;1、2、3、4、5這五個區(qū)域都可能有所需菌落;在每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束時接種環(huán)上殘留的菌種,劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避開細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。
故選:D。5.答案:B解析:6.答案:A解析:A.對于頻繁運用的菌種,可以采納臨時保藏的方法,放在4℃的冰箱中保藏,A錯誤;B.臨時保藏的菌種一般就是接種到試管的固體斜面培育基上保存,B正確;C.臨時保藏的菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異,所以每3-6個月要重新將菌種從舊的培育基上轉(zhuǎn)移到新培育基上培育,C正確;D.對于須要長期保存的菌種,用甘油管藏的方法,放在低溫-20℃的冷凍箱中保存,D正確。7.答案:A解析:本題考查分別土壤中尿素分解菌的試驗。分別土壤中的尿素分解菌,所用培育基要以尿素為唯一氮源,不能用牛肉膏蛋白胨培育基,A錯誤;稀釋涂布平板法接種時,要在酒精燈火焰旁邊操作,因為酒精燈火焰旁邊無菌,B正確;將試驗組和比照組的平板倒置,可以避開水滴入培育基中造成污染,C正確;計數(shù)時要選擇菌落數(shù)在30~300之間的試驗組平板,D正確。8.答案:A解析:所用選擇培育基的基本要求是滿意分解尿素的細(xì)菌的生長條件,抑制或阻擋其他微生物的生長,且尿素是唯一的氮源,葡萄糖可以作為碳源,因此A正確;B選項缺少尿素,錯誤;C選項缺少葡萄糖作為碳源,錯誤;D選項中缺少尿素,且牛肉膏、蛋白胨也可供應(yīng)氮源,錯誤。綜上,A正確,B、C、D均錯。9.答案:B解析:將10g土樣加入到90mL無菌水中后,土樣稀釋10倍,再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品,故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍,A錯誤;4號試管中稀釋液進(jìn)行平板培育,其稀釋倍數(shù)為5號試管的10倍,假如稀釋倍數(shù)適當(dāng),操作等正確,其得到的菌落平均數(shù)可能是5號的10倍,B正確;5號試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明,每克土壤中的菌株數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109(個),),C錯誤;稀釋涂布平板法得到的菌落可能存在兩個或多個細(xì)菌長成一個菌落的狀況,因此該試驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要低,D錯誤。10.答案:A解析:在分別出纖維素分解菌之前,需對微生物進(jìn)行富集培育,此時應(yīng)用液體培育基,利于培育液與微生物充分接觸,加速微生物繁殖,A錯誤;在分別纖維素分解菌時,培育基以纖維素作為唯一碳源,且應(yīng)加入剛果紅染液,B正確;對纖維素分解菌進(jìn)行純化培育時,可采納平板劃線法或稀釋涂布平板法,C正確;接種后,為防止皿蓋上凝聚的水珠滴落在培育基上造成培育基污染,應(yīng)將培育基進(jìn)行倒置培育,D正確。11.答案:D解析:12.答案:C解析:培育基中以纖維素作為唯一碳源時,只有能利用纖維素的微生物才能生長繁殖,從而篩選出纖維素分解菌,A正確;對培育基滅菌常采納高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,對接種環(huán)常采納火焰灼燒法進(jìn)行滅菌,B正確;④的接種方法是平板劃線法,利用平板劃線法可對微生物進(jìn)行接種、純化、分別,但是不能對微生物進(jìn)行計數(shù),計數(shù)一般采納稀釋涂布平板法,C錯誤;剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無法形成,出現(xiàn)透亮圈,因此可通過是否產(chǎn)生透亮圈來鑒定纖維素分解菌,D正確。13.答案:C解析:用涂布分別法分別細(xì)菌時,所用的涂布工具是玻璃刮刀,A錯誤;在尿素固體培育基上,產(chǎn)脲酶細(xì)菌菌落四周會出現(xiàn)紅色環(huán)帶,因為細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生了氨,導(dǎo)致培育基呈堿性,培育基中的酚紅指示劑遇堿性條件會變紅,B錯誤;醋酸菌在有氧條件下才能將乙醇氧化成醋酸,所以利用醋酸菌將果酒發(fā)酵成果醋,須要不斷向發(fā)酵裝置中通入無菌空氣,C正確;利用微生物進(jìn)行發(fā)酵制成的泡菜中含有肯定量的亞硝酸鹽,其對人體是有害的,D錯誤。14.答案:(1)平板劃線法;接種環(huán);先調(diào)pH再滅菌(2)避開燙死接種菌種(3)碳源;不能;纖維素不是唯一碳源(4)甘油管藏解析:(1)圖中采納的接種方法是平板劃線法,其所用的接種工具是接種環(huán);制備培育微生物的培育基時,應(yīng)先調(diào)pH再滅菌。(2)步驟②中,將接種工具冷卻的目的是避開燙死接種菌種。(3)各種培育基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽,此外還要滿意微生物生長對pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。據(jù)表分析,該培育基含有碳源、氮源、水、無機鹽。分別纖維素分解菌的培育基應(yīng)當(dāng)以纖維素為唯一碳源,而該培育基中的碳源除了纖維素粉還有酵母膏、淀粉,因此不能用于分別纖維素分解菌。(4)長期保存菌種應(yīng)當(dāng)采納甘油管藏法。15.答案:1.富含纖維素;2.誘發(fā)基因突變,提高突變頻率,獲得高產(chǎn)纖維素酶的纖維素分解菌;比照組
3.纖維素;4.A5;沒有發(fā)生基因突變
5.④;
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