人類血液來源免疫細胞庫建設(shè)與管理規(guī)范

1人類血液來源免疫細胞庫建設(shè)與管理規(guī)范下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本GB2894-2008安全標志及GB7000.2-2008燈具第2-22部分：特殊要求應AQ3013-2008危險化學品從業(yè)單位安全標準化通用規(guī)范CNAS-CL05:2009實驗室生物WHOThirdEdition實驗室生物安全免疫細胞immunecell2指參與免疫應答或與免疫應答相關(guān)的所有細胞，主要包括T細胞、B細胞、NK細胞、單外周血單個核細胞peripheralbloodmononucle指人外周血中具有單個核的細胞群體，包括淋巴細胞和單核細胞。單核細胞經(jīng)細胞因指實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于允許水平，并符合相關(guān)法規(guī)和標準對實驗室生物安全責任的要求，避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害。3指使用化學物品時遵守一定的規(guī)范并有相應的緊急預案應對事故,防止危險化學品事故指具有完全民事行為能力的自然人，在充分獲取信息并準確理解其內(nèi)容后，作出參與生物安全評審委員會biosafetyreview4縮略詞NIH:美國國立衛(wèi)生研究院（NationalInstitutesofHealth）HIV:人類免疫缺陷病毒（HumanImmunoTP:梅毒螺旋體（TreponemaPalliduALT:谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AlanineAminotransferase)WHO:世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization）GMP:藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GoodManufacturingPraPBMC:外周血單個核細胞（PeripheralBloodMononuclearCells）DC:樹突狀細胞(DendriticCell)CIK:細胞因子誘導殺傷細胞(Cytokine-inducedKillAABB:美國血庫協(xié)會(AmericanAssociationofBloodBanks)ATCC:美國菌種保藏中心（AmericanTypeCultu5.1倫理審查委員會5.1.1細胞庫應設(shè)有倫理審查委員會。倫理審查委員會由醫(yī)藥學、倫理學、法學等專家以5.1.2倫理審查委員會應負責建立細胞庫的倫理準則和相應的倫理操作規(guī)范，對相關(guān)倫理5.1.3倫理審查委員會應在樣本相關(guān)研究項目開始前進行倫理審查及對已通過審查或正在5.2科學審查委員會45.2.1細胞庫應設(shè)有科學審查委員會?？茖W審查5.2.2科學審查委員會應負責對生物樣本采集5.3生物安全評審委員會5.3.2生物安全評審委員會負責細胞庫的生物安全政策和安全操作規(guī)范的審查。6.2.1細胞庫場地要符合長久儲存要求，避免頻繁更換儲存6.2.4細胞庫的建設(shè)應由具有相應資質(zhì)的施工單位進室的核心工作區(qū)的照度不低于350lx，其它區(qū)域不少于30分鐘，需安裝后備電池或者與后備發(fā)電機相連，并符提供保護。液氮罐應設(shè)有溫度報警和液面控制裝置。所有設(shè)備的選擇均應符合通用要57.1.1血液樣本的采集應符合《血站基本標準》中血液采集樣本提供者須做血液初、復檢，合格后方能采用。采集過程應符合無菌操作規(guī)程，所使用的一次性注射器、采血袋等耗材必須采血人員采集時應輕搖血液，防止凝WT/S400-2012血液運輸要求的規(guī)定。血液樣本運輸應使用專門的血液運輸箱，運輸過程應實時7.3.1樣本接收時，做好自我防護工作，應戴好手套與口罩，確認送達接收室的樣本7.3.2觀察樣本容器包裝的外觀，檢查有無破損并記錄，檢查信息記錄表上的信息免疫細胞的凍存需加入適當?shù)睦鋬霰Ｗo液，按照標準密度進行凍存7.6.1細胞入庫必須有嚴格的過程控制及完整的信息錄入、7.6.2將凍存好的細胞移至細胞暫存庫中儲存，儲存溫度為-196℃~-135℃,同時對細胞7.6.3將符合入庫標準的細胞從細胞暫存庫轉(zhuǎn)移至細胞儲存庫中，在儲存溫度為-196℃~6細胞出庫基本程序：需要使用細胞時，細胞庫出庫人員填寫能夠記錄細胞置變更的相關(guān)記錄后，在質(zhì)量管理人員監(jiān)督并簽字復核下，由細胞庫出庫人員進行出庫。臨床治療需使用細胞庫內(nèi)細胞時，細胞庫出庫人員需核對庫存細胞信息和細胞使用者信息，制定嚴格的細胞發(fā)放計劃，再進行出庫，并進一步跟蹤科研用途使用細胞庫的細胞時，需保證樣本提供者在充分知情并簽訂知情細胞庫內(nèi)部因整改、擴容或評估凍存細胞質(zhì)量細胞轉(zhuǎn)移操作應確保細胞及其凍存容器的溫度在-135℃以下，轉(zhuǎn)移過當樣本提供者提出撤銷知情同意書，要求銷毀所提供的樣本時，應遵從樣樣本銷毀應首先提出銷毀申請，通過倫理審查委員會和科學審查委員會的方可進行，細胞庫應建立銷毀的標準操作規(guī)范，并按照此規(guī)應對樣本的銷毀進行記錄，包括銷毀樣本的名稱與數(shù)量、銷毀的原因、批7.9.1當樣本提供者需要使用細胞庫內(nèi)本人細胞時，由細胞庫出庫人員填寫細胞出7.9.2將符合發(fā)放標準的細胞發(fā)放，并填寫發(fā)放記錄。質(zhì)量不合格的細胞需進行記7細胞庫應建立并實施質(zhì)量目標、質(zhì)量方針，遵循相關(guān)法律法規(guī)要求。明確在整個樣本采集、制備、儲存的全過程中的質(zhì)量要求，包括全面質(zhì)量保證（QA）和質(zhì)量控制系統(tǒng)（QC并以完整的質(zhì)量體系文件形式明確規(guī)定及監(jiān)控其有效性。確保所制備的免疫細胞規(guī)范，以及員工健康管理制度，避免因人員因素產(chǎn)生生物安生產(chǎn)管理人員應當至少具有相關(guān)專業(yè)本科學歷，具有至少三年從事免疫細胞驗室管理以及質(zhì)量管理的實踐經(jīng)驗，其中至少有一年的細胞庫管理經(jīng)驗，接受相關(guān)的b)樣本提供者需提供近3個月內(nèi)醫(yī)院的健康體檢報告和血液檢測報告，血液檢測報形成報告。樣本提供者健康信息采集表見附錄B，各項檢測指標合格者，具備提供工作人員必須系統(tǒng)的接受相關(guān)生物安全知識、法規(guī)制度培訓和業(yè)務(wù)崗位培訓與考每年應至少培訓并考核一次。考核未通過者，應重新接受培訓，成績合格后方可培訓及考核結(jié)果應有相關(guān)檔案記錄及查閱制度。如工作人員出現(xiàn)不宜從事實驗室相關(guān)工作的身體狀況時，不得進入相關(guān)區(qū)域工8細胞庫若發(fā)生生物安全暴露，相關(guān)人員應接受必要救治并制于出現(xiàn)異常情況者，應暫時調(diào)離工作崗位，或永久調(diào)離。若再次上崗需體檢合格應定期對消防系統(tǒng)和消防裝置進行檢應對實驗室工作人員進行防火安全訓練，壓力容器指壓力氣瓶及高壓滅菌裝置。壓力容器應由持有壓力容器操作資格證的專業(yè)人員操作。壓力容器使用應建立使用記錄檔案，并應按照相關(guān)規(guī)程定期檢驗、調(diào)整和檢修、壓力容器安全應符合《中華人民涉及到的有毒有害物質(zhì)，應建立分類儲存、使用、登記等管理制度。購進可能有危害的化學物品都必須附有材料安全數(shù)據(jù)表。所有危險化學品都需要以易于識別的形式進行標記，使專業(yè)和非專業(yè)人員很容易警覺其潛在的危險應建立危險化學用品事故危險評估和應急預案相關(guān)工作人員應接受處理危險化學品濺溢的培訓，以應對突出事故。工作人員在操作中接觸到液氮時，需使用防護面罩和隔熱手套并做好其它防凍措應確保維持正常使用至少3天的液氮供應量。細胞庫應定期檢應建立嚴格的生物安全及危害性評估方案、疾病傳播預防方案、生物安全審查制9細胞庫的生物安全制度應通過生物安全委員會及生命倫理委員會的批準后方可實應保證實驗室的安全運行，包括防止實驗室工作人員的感染、防止實驗室操作的實驗室發(fā)生病原微生物感染時，實驗室工作人員應當立即采取控制措施，防止擴散。應及時向相關(guān)領(lǐng)導報告事故情況，以對事故進行及時處細胞庫的疾病傳播預防應符合《中華人民共和國傳染病防治法》的規(guī)定。b)廢血要用容器封存，專用垃圾袋包裝，確認無滲漏后再行處理。d)廢液的處理，應符合國家的相關(guān)規(guī)定，根據(jù)廢液的性質(zhì)進行正確處理。細胞庫所用物料耗材需從具有專業(yè)資質(zhì)并經(jīng)過驗證核實的供應商處采購，且具備物料耗材包裝應保證完整無破損，入庫時嚴格進行分區(qū)，待抽檢結(jié)果合格后方可出庫使用。對于儲存條件和有效期，應具有定期的審查制度和特殊情況下庫存管理應符合細胞庫的工作實際，在具備一定量儲備的同時，避免長期積壓導物料的使用應具有嚴格的文件記錄制度，包括物料的標識、使用范圍、使用時間建立設(shè)備管理程序及標準操作程序，操作人員在操作前進行相應理論教育與實際應由專人進行維護、管理，設(shè)備的運行狀態(tài)應進行明確標識當設(shè)備出現(xiàn)故障或性能無法達到工藝要求時，需進行維修、升級或報廢。8.6.1應對樣本采集、細胞制備與凍存、入庫和出庫全過程進行質(zhì)量控制。樣本入庫、出庫前，質(zhì)量控制負責人應對樣本進行質(zhì)量評價，保證樣本符合質(zhì)量a)樣本的質(zhì)量評價應包括：主要制備生產(chǎn)工藝和質(zhì)量控制檢驗方慮實際生產(chǎn)條件和保證生產(chǎn)質(zhì)量必需的檢查、檢驗；所有必需的生產(chǎn)記錄和控制記錄填寫的完整性及經(jīng)相關(guān)人員簽名及復核；對變更或偏差處理完成所要的取樣、檢查、檢驗和審核；所有與該樣本有關(guān)的偏差均已有明確的解釋b)細胞樣本必須經(jīng)過質(zhì)量控制責任人審核，符合規(guī)定要求和質(zhì)量標準的細胞方可入制訂、驗證和實施所有質(zhì)量控制操作規(guī)程。嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行操作管理并做免疫細胞操作環(huán)境和儲存環(huán)境條件由專人進行監(jiān)控和維護，并形成記錄。質(zhì)量控制區(qū)應當與生產(chǎn)區(qū)分開。實驗室的設(shè)計應當確保其適能夠避免混淆和交叉污染，應當有足夠的區(qū)域用于樣品處置、留樣和穩(wěn)定性考察樣品樣本編碼規(guī)范統(tǒng)一，格式規(guī)整，數(shù)據(jù)完整可溯源。應對每一個錄入數(shù)據(jù)庫的樣本唯一的ID，對原始樣本ID和新增錄入ID進行樣本容器都必須標上含有樣本編碼的條形碼。細胞的編碼應遵循唯一性的總原則。在應有統(tǒng)一和完整的信息系統(tǒng)或數(shù)據(jù)庫用于樣本信息的記錄與儲存，并滿足樣本追所有樣本信息（采集、處理、儲存、使用信息、捐贈者相關(guān)信息）和體檢及臨床所有記錄應分別進行紙質(zhì)和電子版歸檔。紙質(zhì)記錄應用標簽分類存放，電子版記錄應匯編成表格類的形式存儲，以便快速的數(shù)據(jù)檢索和多屬性的組合查詢，獲取實應根據(jù)實際需求制定備份周期，按周期對樣本信息與數(shù)據(jù)進行備份，以應對信息細胞庫的信息管理系統(tǒng)宜與其他相關(guān)的數(shù)據(jù)系統(tǒng)兼容或關(guān)聯(lián)，以便共享樣本信息免疫細胞（ImmuneCell）是白細胞的俗稱，包別抗原、產(chǎn)生特異性免疫應答的淋巴細胞等。免疫細胞是人體內(nèi)清除各種細菌，病毒和血單個核細胞）并儲存，依據(jù)個人身體狀況采血量可能會心）；若決定退出，本中心將終止儲存您的樣本并對它進行統(tǒng)一處理，此舉不會對您?存在樣本制備失敗的風險，屬一般技術(shù)性風險XXX生命倫理委員會，郵箱：XXX，地址為XXX。XXX細胞中心：電話XXX，郵箱XXX，網(wǎng)站XXX，地址為XXX?！魽.無償捐贈予XXX；□B.按《醫(yī)療廢棄我已告知該樣本提供者可能的風險及獲益情況，給予他/她足夠的時間閱讀、與情同意書，并解答了其相關(guān)的問題；我已告知該同意書一式兩份，他/她將得到簽名后的一份知情同意書，上面包含我和他/她的簽名。我已詳細閱讀了知情同意書，項目專員已向我作了詳盡的說明，我完全了解參加我自愿參加本次樣本儲存，并同意按照本知情同意書的內(nèi)容配合細胞中心人員的真完成本次樣本儲存。本知情同意書一式兩份，我將得到簽名后的一份知情我已詳細閱讀了知情同意書，項目專員已向我作了詳盡的說明，我完我自愿參加本次樣本采集，并同意按照本知情同意書的內(nèi)容配合細胞中心人員的操作，認真完成本次樣本采集。本知情同意書一式兩份，我將得到簽名后的一份知情無聯(lián)系電話X109/L；HIV-Ab(I+II)(免疫缺陷病1)將血袋中的血轉(zhuǎn)移到離心管中，使用經(jīng)滅菌消毒的剪刀剪斷塑料管，小心把袋中3)離心完畢后分層，吸取上層血漿層到離心管中，貼上血漿編碼標記暫于4℃保4)下層血細胞稀釋：用生理鹽水按5)鋪層加樣：將稀釋的血液樣本緩慢勻速的加入到盛有室溫的淋巴細胞分離液上的分界面。離心：2000rpm，20min，室溫6)提取單個核細胞:離心完畢后，離