實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)用禽基本操作技術(shù)規(guī)程

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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用禽基本操作技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了雞、鴨、鵝、鴿、鵪鶉、山雞等常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)用禽在隔離器中開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)涉及的常規(guī)操

作技術(shù)，包括準(zhǔn)備工作、給藥（疫苗接種、攻毒、治療、麻醉）、樣品采集（采血、拭子）、安樂(lè)死等

操作技術(shù)要求。

本文件適用于禽的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、流行病學(xué)調(diào)查、疫情監(jiān)測(cè)、疫苗免疫效果評(píng)估等涉及的常規(guī)技術(shù)操作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB/T35823實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通用要求

GB/T35892實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南

GB/T39760實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死指南

GB/T27416實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)質(zhì)量和能力的通用要求

NY/T1952-2010動(dòng)物免疫接種技術(shù)規(guī)范

RB/T173-2018動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)評(píng)審指南

RB/T061-2021實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1藥物

本標(biāo)準(zhǔn)中藥物是應(yīng)用于禽的化學(xué)藥物、生物制品、微生物、寄生蟲(chóng)的代稱(chēng)和統(tǒng)稱(chēng)。

3.2人道終點(diǎn)

即考慮人道對(duì)待動(dòng)物的要求和實(shí)驗(yàn)要求，合理終止動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)的時(shí)機(jī)。

3.3安樂(lè)死

安樂(lè)死是以科學(xué)人道的理念和方式，使動(dòng)物生理和心理痛苦最小化而采取的動(dòng)物意識(shí)迅速喪失的處

死過(guò)程。

4準(zhǔn)備工作

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4.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)審查

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前應(yīng)審查實(shí)驗(yàn)方案、動(dòng)物福利倫理。如涉及病原微生物，應(yīng)進(jìn)行生物安全評(píng)估和制定處

置預(yù)案等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)全過(guò)程應(yīng)接受動(dòng)物福利倫理、生物安全監(jiān)督和檢查。

4.1.1福利倫理審查

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)福利、倫理審查參照GB/T35823、GB/T35892規(guī)定執(zhí)行。

4.1.2人道終點(diǎn)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)的確定是科學(xué)目的與動(dòng)物福利相權(quán)衡的結(jié)果。如何科學(xué)合理地確定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的人

道終點(diǎn)，在實(shí)現(xiàn)研究目的的同時(shí)，最大程度地減輕或結(jié)束實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所承受的疼痛和痛苦，是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方

案中一項(xiàng)重要的工作。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)的設(shè)定參考RB/T173-2018原則執(zhí)行。

4.1.3生物安全審查

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全審查參照GB19489規(guī)定執(zhí)行。

4.2人員

4.2.1操作人員應(yīng)具備獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)相關(guān)資質(zhì)，了解實(shí)驗(yàn)用禽習(xí)性、實(shí)驗(yàn)藥物相關(guān)知識(shí)。

4.2.2操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)知識(shí)學(xué)習(xí)和技能培訓(xùn)，取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員資質(zhì)。

4.2.3操作人員技術(shù)熟練、規(guī)范，按照動(dòng)物實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)相關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)，嚴(yán)格遵守相關(guān)管理規(guī)定和

操作規(guī)程。

4.3實(shí)驗(yàn)用禽

4.3.1實(shí)驗(yàn)用禽

4.3.1.1根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求使用相應(yīng)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)用禽。

4.3.1.2無(wú)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證》的實(shí)驗(yàn)用禽，應(yīng)按動(dòng)物實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)相關(guān)規(guī)定，排除人畜共患病及本動(dòng)

物的烈性傳染病，才能進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施。

4.3.1.3實(shí)驗(yàn)用禽需閉環(huán)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入隔離器，按規(guī)定隔離、檢疫，觀(guān)察和記錄狀態(tài)。待動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境、狀

態(tài)穩(wěn)定后才能用于開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

4.3.2斷喙

如實(shí)驗(yàn)周期較長(zhǎng)，為防止大齡時(shí)啄肛、啄羽，宜將實(shí)驗(yàn)用禽在幼齡時(shí)斷喙，常用于雞?？紤]雛禽生

理狀態(tài)和應(yīng)激因素，宜在6～10日齡斷喙。用斷喙器將禽上喙自喙尖至鼻孔1/2處，下喙自喙尖至鼻孔

1/3處切去。斷喙前1天宜在飲水中添加復(fù)合維生素，防止應(yīng)激，減少出血。

4.3.3標(biāo)識(shí)

4.3.3.1翅標(biāo)：標(biāo)記位置在禽翅膀外側(cè)的白色、透明、無(wú)血管、神經(jīng)部位。較大體型實(shí)驗(yàn)用禽可使用中

大型動(dòng)物（豬、羊、牛）的耳號(hào)代替翅標(biāo)，操作方便且不易脫落。

4.3.3.2腳環(huán)：須隨實(shí)驗(yàn)用禽日齡增大放松內(nèi)徑，以免妨礙生長(zhǎng)。腳環(huán)易脫落，易傷腿部皮膚。

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4.3.3.3顏色標(biāo)識(shí)：實(shí)驗(yàn)周期較短可采用顏色標(biāo)記方法，如動(dòng)物用記號(hào)蠟筆、3%～5%苦味酸溶液（黃

色）、0.5%中性品紅（紅色）、2%硝酸銀溶液（咖啡色）、結(jié)晶紫等對(duì)動(dòng)物無(wú)害的染料類(lèi)標(biāo)記羽毛。

實(shí)驗(yàn)中注意及時(shí)補(bǔ)色。

4.3.3.4臨時(shí)標(biāo)識(shí)：可使用記號(hào)筆在喙、羽毛部位臨時(shí)標(biāo)記和區(qū)分。

4.4器具

器具應(yīng)以密閉容器盛放，整體消毒或滅菌。按照動(dòng)物實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)相關(guān)操作規(guī)程，表面消毒后傳遞進(jìn)入

實(shí)驗(yàn)區(qū)。

4.4.1點(diǎn)眼器、滴鼻器：滴管、專(zhuān)用點(diǎn)眼瓶滴量不夠精確，一般應(yīng)用于現(xiàn)地免疫；實(shí)驗(yàn)條件下一般使用

1mL注射器，如需精確操作可使用定量移液器。

4.4.2注射器：根據(jù)實(shí)驗(yàn)用禽種類(lèi)、日齡、實(shí)驗(yàn)操作類(lèi)型，選擇適合的一次性注射器。

4.4.3刺種器：可選用翼膜刺種針或刺翼注射器。

4.4.4采樣拭子：可使用棉拭子或植絨拭子。幼齡禽常用6～8cm長(zhǎng)度拭子，成年禽或體型較大禽宜適

當(dāng)增加咽拭子長(zhǎng)度。

4.4.5其他：75％酒精棉球、干棉球、塑料離心管、自封塑料袋、記號(hào)筆、剪、鑷等。

4.5藥物

物品傳遞和人員進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施的流程耗時(shí)較長(zhǎng)，生物類(lèi)藥物應(yīng)采取措施防止活性或滴度降低。

此類(lèi)藥物不宜提前稀釋?zhuān)瑧?yīng)將原液置于碎冰中保存、傳遞，現(xiàn)用現(xiàn)配。

4.6防護(hù)用具

按照動(dòng)物實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)相關(guān)規(guī)定穿戴防護(hù)服、口罩、手套等。

5保定

5.1根據(jù)實(shí)驗(yàn)用禽種類(lèi)、體型，以保障人及動(dòng)物安全、便于實(shí)驗(yàn)操作為原則，采取適宜的保定方式。

5.2雙人保定系由助手協(xié)助保定動(dòng)物，便于操作者操作。

5.3單人保定系由操作者一人保定和操作，常用于體型較小實(shí)驗(yàn)用禽。在隔離器中開(kāi)展實(shí)驗(yàn)操作，操

作者常利用上臂與隔離器內(nèi)壁之間的空間擠壓保定動(dòng)物。

6給藥

6.1皮下注射

6.1.1頸背部皮下注射

注射部位為頸背部下1/3處，不應(yīng)靠近頭部，以免藥液向頭部擴(kuò)散造成腫頭。用食指和拇指提起頸

背部皮膚，使表皮和肌肉間形成氣窩，針頭與皮膚呈30°～45°角，朝背部方向?qū)⑺幬镒⑷霘飧C內(nèi)。應(yīng)

保持注射器與背平行，以免傷及血管、神經(jīng)和骨膜。注射完畢緩慢拔出針頭，減少藥物外溢。

6.1.2胸部皮下注射

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胸部皮下注射較為精細(xì)，宜雙人操作。由助手將實(shí)驗(yàn)用禽胸部朝上平放保定，操作者以食指和中指

撥開(kāi)羽毛，在胸部上1/3處，龍骨突兩側(cè)，針頭呈15～45°角進(jìn)針，從羽毛梗部位將藥物注入，應(yīng)在皮

下呈乳白色片狀擴(kuò)散。拔出針頭同時(shí)以左手食指按壓注入部位，以使藥物充分?jǐn)U散，防止外溢。

6.1.3腿部皮下注射

將實(shí)驗(yàn)用禽腿內(nèi)側(cè)羽毛撥開(kāi)，針頭約呈30°角左右刺入皮下注入藥物，注射后按壓針口。

6.2肌肉注射

實(shí)驗(yàn)用禽肌肉注射部位常選擇胸肌。腿部大血管和神經(jīng)較多，又是禽負(fù)重主要部位，一般不宜選擇

做肌肉注射。特殊情況可選擇翅部肌肉注射。禽類(lèi)肌肉較薄，為減少局部肌肉損傷，利于藥物快速吸收，

應(yīng)將藥液分次多點(diǎn)肌肉注射。

6.2.1胸部肌肉注射

實(shí)驗(yàn)用禽可以仰臥或直立姿勢(shì)保定，胸部朝向操作者。在胸部上1/3處、龍骨突兩側(cè)肌肉厚實(shí)處進(jìn)

針。進(jìn)針?lè)较虼笾屡c胸骨平行、與胸肌呈約30°角，勿垂直刺入傷及內(nèi)臟。回抽無(wú)血再注入藥液，針

頭深度：雛禽為0.5～1.0cm，成年禽為1.0～2.0cm。

6.2.2腿部肌肉注射

腿肌注射部位為大腿外側(cè)肌肉上1/3處。固定腿須注意不要損傷關(guān)節(jié)。針頭與腿骨大致平行、約呈

30°～45°角刺入肌肉，勿傷及血管、神經(jīng)和骨膜?；爻闊o(wú)血再注入藥液。

6.2.3翅根肌肉注射

注射部位為禽翅膀根部?jī)?nèi)側(cè)肌肉。一手持雙翅翅根，暴露翅根部，針頭平行于翅膀骨骼、垂直于禽

體刺入，回抽無(wú)血注入藥液。

6.3翅靜脈注射

翅靜脈注射部位為翼下靜脈基部，鴨為肱靜脈，位于翅膀內(nèi)側(cè)中部羽毛較少的凹陷處。成禽只需左

手握住翅膀翻到內(nèi)側(cè)，即可見(jiàn)到充盈較好的靜脈。體型較小實(shí)驗(yàn)用禽，左手握住翅膀，禽頭部朝向左手

方向并被左手遮擋，用酒精棉球消毒注射部位兼刺激擴(kuò)張血管，左手中指和無(wú)名指拉開(kāi)翅膀，食指壓緊

靜脈基部使血管充盈，拇指固定進(jìn)針部位。右手持注射器使針頭沿血管壁大致平行刺入，見(jiàn)回血后緩慢

注入藥液。拔針后針口用手指或干棉球壓迫止血至少3min。

6.4腹腔注射

助手保定實(shí)驗(yàn)用禽，呈頭低尾高姿勢(shì)，胸部朝向操作者。操作者左手拇指和食指提起腹壁，右手持

注射器針頭穿過(guò)腹壁進(jìn)入腹膜腔，回抽無(wú)渾濁液體表明針頭未進(jìn)入腸管，緩慢注入藥物。

6.5腦內(nèi)注射

常用1日齡左右雛禽。左手握住雛禽，以拇指、食指固定露出的頭部。進(jìn)針區(qū)域位于大腦后側(cè)，可

用胰島素注射器或1mL注射器連接4.5號(hào)針頭，以減少對(duì)腦組織的損傷。以頭頂中心為原點(diǎn)，腦的左

右中線(xiàn)、前后中線(xiàn)形成“十”字型，選擇“十”字下部，靠近左右、前后中線(xiàn)，垂直進(jìn)針刺穿腦膜，不

宜過(guò)深，緩慢注入藥液。針頭稍停留幾秒緩慢抽出，減少藥物外溢。

6.6皮內(nèi)注射

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禽一般在肉髯部。局部消毒后針頭平行刺入皮膚，緩慢注射，注射部見(jiàn)有小水泡狀隆起即為操作正

確。注藥量一般不超過(guò)0.1mL。

6.7氣管內(nèi)注射

左手握禽頭部，拇指和食指固定上下喙結(jié)合部擴(kuò)張口腔，盡量暴露喉頭。操作者戴頭燈照射口腔，

可清晰見(jiàn)到氣管和食管開(kāi)口，氣管口在食管下方。右手持注射器連接尖端平滑的灌胃針，針頭沿舌根部

下順至喉頭處，繼續(xù)下順稍進(jìn)入氣管，操作應(yīng)輕柔，以免損傷氣管或食管。沿氣管壁緩慢注入藥液，防

止冒出氣泡使藥液外溢。

6.8眶下竇內(nèi)注射

眶下竇是禽類(lèi)唯一的鼻旁竇，位于眼球前下方和上頜的外側(cè)，略呈三角形與鼻腔相通。左手握住禽

頭部，拇指和食指固定喙，左手食指摸到眶下緣，右手持注射器，自鼻翼旁約1cm處，針頭與皮膚呈

45°角，向后、向外進(jìn)針，可直接刺入眶下孔完成注射。刺入不可過(guò)深，以免傷及眼球。

6.9滴鼻、點(diǎn)眼、滴口

滴鼻、點(diǎn)眼。左手握住禽頭頸部，拇指和食指固定頭部防止其甩動(dòng)。食指堵住一側(cè)鼻孔，使頭側(cè)偏，

另一側(cè)鼻孔朝上。右手持1mL注射器或移液器，將藥液近距離滴入鼻孔，可見(jiàn)藥物全部流入；待眼瞼

張開(kāi)時(shí)將藥液滴在眼球上，眼瞼閉合時(shí)會(huì)自然吸入，眼周無(wú)殘留液體。雙側(cè)鼻孔和眼球宜均勻滴入。水

禽鴨、鵝鼻孔距離咽部較遠(yuǎn)，且有呷水習(xí)性，滴入藥液易甩出。應(yīng)在滴入藥液后捏緊喙使其豎立，靜止

片刻待藥液吸收完全。

滴口。一手握住禽頭頸部，食指輕壓喉部使其張口，另一只手持滴瓶、注射器或移液器將藥物滴入

口腔中，咽部有吞咽動(dòng)作后將動(dòng)物放開(kāi)。

6.10刺種

左手握住翅尖，右手持刺種針蘸滿(mǎn)藥物，于翅膀翼膜內(nèi)側(cè)無(wú)血管、呈半透明色三角區(qū)刺入，勿傷及

肌肉、血管、神經(jīng)和骨。3天后檢查刺種部位，有結(jié)痂、紅斑或腫塊表明刺種成功。

6.11滴肛或涂肛

助手將禽倒提，用手握腹使肛門(mén)粘膜翻出，操作者手持滴瓶將藥物滴入肛門(mén)黏膜，或用無(wú)菌棉簽蘸

取藥物涂擦肛門(mén)黏膜3～4次，至黏膜發(fā)紅為止。

6.12毛囊涂搽法

將禽腿部羽毛拔出幾根，用棉球蘸藥物逆羽毛生長(zhǎng)方向涂搽。3天后檢查見(jiàn)毛囊發(fā)紅或腫脹表明成功。

7樣品采集

7.1采血

應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)用禽的種類(lèi)、體型、動(dòng)物后繼是否繼續(xù)使用等情況選擇采血部位和采血方法。

7.1.1翅靜脈采血

保定方式、進(jìn)針?lè)绞酵犰o脈注射。采血針平行刺入翅靜脈，抽栓見(jiàn)回血后放松對(duì)靜脈近心端的按

壓，保持針頭位置不動(dòng)緩緩吸入血液，拔針后需壓迫止血。翅靜脈每次可采血樣1.5～5mL。若需多次

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采血，應(yīng)自靜脈遠(yuǎn)心端開(kāi)始，以免發(fā)生栓塞影響整條靜脈。采血后將注射器活塞外拉預(yù)留血清析出空間。

7.1.2翅靜脈針刺法采血

將禽保定，展開(kāi)單翅，用左手拇指壓迫靜脈使其充血，刺破翅膀中段關(guān)節(jié)位置較細(xì)的靜脈血管，用

離心管盛接流出的血液。此方法每次可采血樣0.5mL左右。

7.1.3心臟采血

7.1.3.1側(cè)臥采血

禽右側(cè)臥、左側(cè)朝上保定。自龍骨突起前緣引一直線(xiàn)到翅基，再由線(xiàn)中點(diǎn)向髖關(guān)節(jié)引一直線(xiàn)，此線(xiàn)

前1/3和中1/3的交界處有一凹陷，即為進(jìn)針部位。或?qū)ふ矣尚毓亲呦蚣珉尾康钠は麓箪o脈，心臟約在

該靜脈的分支下側(cè)，觸摸可感覺(jué)到心臟搏動(dòng)明顯。酒精消毒后可用碘酊標(biāo)記采血部位。針頭刺入時(shí)，如

觸及胸骨可稍調(diào)整針頭角度向里刺入，邊刺邊抽動(dòng)針芯，若刺入心臟即有血液涌入注射器。

7.1.3.2仰臥采血法

禽類(lèi)仰臥采血應(yīng)在嗉囊空虛時(shí)進(jìn)行較為方便。禽仰臥保定，頭部朝向采血者，于嗉囊下方凹窩處消

毒，持注射器，靠凹窩左側(cè)與軀體約成45°度向斜下方刺入，邊刺邊回針，有血液涌入表明刺入心臟。

7.1.3.3手提倒立式采血

適合單人操作。左手將實(shí)驗(yàn)用禽雙翅、雙腿提起呈倒立狀，胸部朝向操作者。進(jìn)針部位和方式同仰

臥采血法。

7.1.4水禽跖靜脈采血

將水禽雙腿提起呈倒立狀，可見(jiàn)清晰暴露的跖靜脈血管，注射器針頭與皮膚約成10°角順血管進(jìn)

針采血，也可刺破血管少量接血。

7.1.5頸靜脈采血

剪掉或拔掉頸部右側(cè)部分羽毛，暴露皮膚便于觀(guān)察頸靜脈。左手握住頸部，壓迫靜脈近心端使頸靜

脈隆起，右手持注射器，針頭向遠(yuǎn)心端方向進(jìn)針采血。

7.2咽喉、泄殖腔拭子采集

7.2.1咽拭子

左手固定實(shí)驗(yàn)用禽頭部，食指和拇指打開(kāi)口腔，右手持無(wú)菌拭子深入喉頭及上頜腭裂處，來(lái)回旋轉(zhuǎn)

3～5次蘸取喉頭分泌液，要求可見(jiàn)明顯黏液。拭子取出放入離心管內(nèi)，折斷或剪去多余部分。

7.2.2泄殖腔拭子

如禽體型適中，操作者可單人保定、操作。左手握提雙腿及雙翅呈倒立狀，或者左手將動(dòng)物仰臥保

定，稍按壓下腹部使肛門(mén)突出。將棉簽慢慢插入泄殖腔內(nèi)約1.5cm～2.0cm，由深處貼著腸壁慢慢旋轉(zhuǎn)

至出來(lái)，并沾取少量糞便。

8安樂(lè)死

8.1適用范圍

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8.1.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)需對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死。

8.1.2按照人道終點(diǎn)的設(shè)定對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死。

8.1.3其他不適合繼續(xù)飼養(yǎng)的原因，需對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死。

8.2基本原則

8.2.1實(shí)驗(yàn)用禽安樂(lè)死的基本原則參照GB/T39760、RB/T061-2021規(guī)定執(zhí)行。

8.2.2實(shí)驗(yàn)用禽安樂(lè)死常用麻醉劑及藥劑見(jiàn)附錄A。

8.2.3安樂(lè)死方法選擇應(yīng)能兼顧實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，以及后繼的組織評(píng)估、檢查或使用。實(shí)驗(yàn)用禽推薦性安樂(lè)死

方法見(jiàn)附錄B。

8.2.4采用過(guò)量麻醉方法對(duì)實(shí)驗(yàn)用禽實(shí)施安樂(lè)死后，應(yīng)首先確定動(dòng)物失去反射，再輔以物理方式確保動(dòng)

物死亡。物理方式包括頸部放血、下頜靜脈放血、頸椎脫臼等。

8.2.5瞬膜反射可用于檢查實(shí)驗(yàn)用禽是否死亡。禽類(lèi)的瞬膜也稱(chēng)第三眼瞼，是從眼內(nèi)角上方、下眼瞼內(nèi)

面的粘膜皺襞伸出的透明薄膜，能向上或斜向運(yùn)動(dòng)遮住角膜。如動(dòng)物未死觸摸眼角會(huì)引起反射。

8.3常用操作技術(shù)

8.3.1雛禽頸椎脫臼法

頸椎脫臼法是單體實(shí)驗(yàn)用禽常用的安樂(lè)死方法。麻醉狀態(tài)下，將雛禽頭頸部交界部位按壓在一個(gè)突

出的棱角上，快速向兩邊按壓即達(dá)到頸椎脫臼目的。目前也有專(zhuān)用頸椎脫臼工具，形似鈍的“剪刀”。

8.3.2成年禽折頸脫臼法

一手將動(dòng)物擠靠在隔離器內(nèi)壁或身體一側(cè)固定動(dòng)物，另一只手抓住頭部，將頸部盡力向前伸展，然

后迅速向后折，以分離頸椎并切斷脊髓。

8.3.3頸部血管放血

拔除頸部部分羽毛，剪斷頸部?jī)蓚?cè)頸靜脈或頸部腹側(cè)動(dòng)脈，使動(dòng)物失血死亡。

8.3.4下頜靜脈放血

用剪刀伸向禽口腔深處，刀刃向上用力割破上頜靜脈，將禽倒置即可放盡血液。

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附錄A

（規(guī)范性）

實(shí)驗(yàn)用禽安樂(lè)死常用麻醉劑及藥劑

A.1實(shí)驗(yàn)用禽安樂(lè)死常用麻醉劑及藥劑

表A.1實(shí)驗(yàn)用禽安樂(lè)死常用麻醉劑及藥劑

麻醉劑/藥劑英文名使用方法備注

戊巴比妥鈉Barbiturates靜脈或腹腔注射-

舒泰Zoletil靜脈或肌肉注射-

速眠新-靜脈或肌肉注射-

異氟烷Isoflurane吸入-

氟烷Halothane吸入-

安氟醚Enflurane吸入-

雛禽、新出殼禽需要延長(zhǎng)時(shí)間；

二氧化碳Carbondioxide吸入

不適用于水禽。

氯化鉀Potassiumchloride靜脈注射僅在動(dòng)物麻醉狀態(tài)下使用

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附錄B

（規(guī)范性）

實(shí)驗(yàn)用禽推薦性安樂(lè)死方法

B.1實(shí)驗(yàn)用禽推薦性安樂(lè)死方法

表B.1實(shí)驗(yàn)用禽推薦性安樂(lè)死方法

安樂(lè)死方法是否推薦使用限制條件

巴比妥類(lèi)藥物注射首選的安樂(lè)死方法-

過(guò)量注射麻醉劑首選的安樂(lè)死方法-

靜脈注射氯化鉀

條件性接受的安樂(lè)死方法僅在動(dòng)物麻醉狀態(tài)下使用

（1-2mg/kg）

雛禽、新出殼禽需要延長(zhǎng)時(shí)間；

二氧化碳條件性接受的安樂(lè)死方法

不適用于水禽。

須有科學(xué)必要性且經(jīng)倫理委員會(huì)審

深麻狀態(tài)下放血條件性接受的安樂(lè)死方法

核通過(guò)方可使用

須有科學(xué)必要性且經(jīng)倫理委員會(huì)審

深麻狀態(tài)下頸椎脫臼條件性接受的安樂(lè)死方法

核通過(guò)方可使用

僅在無(wú)其他方法可用情況下，并經(jīng)

深麻狀態(tài)下斷頭條件性接受的安樂(lè)死方法

倫理委員會(huì)審核通過(guò)方可使用

僅在無(wú)其他方法可用情況下，并經(jīng)

清醒時(shí)斷頭條件性接受的安樂(lè)死方法

倫理委員會(huì)審核通過(guò)方可使用。

須有科學(xué)必要性且經(jīng)倫理委員會(huì)審

核通過(guò)方可使用；

清醒時(shí)頸椎脫臼條件性接受的安樂(lè)死方法

操作人員需接受培訓(xùn)，并具備熟練

技術(shù)。

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參考文獻(xiàn)

[1]世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（WOAH）,《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典（第28版）》[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2019.

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Edition[M].Schaumburg:AmericanVeterinaryMedicalAssociation,2020.

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10

ICS65.020.20

B43

備案號(hào)：

DBDB23/T2XXXX—32020

黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB23/TXXXX-XXXX

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用禽基本操作技術(shù)規(guī)程

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

黑龍江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I

DB23/TXXXX—2020

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用禽基本操作技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了雞、鴨、鵝、鴿、鵪鶉、山雞等常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)用禽在隔離器中開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)涉及的常規(guī)操

作技術(shù)，包括準(zhǔn)備工作、給藥（疫苗接種、攻毒、治療、麻醉）、樣品采集（采血、拭子）、安樂(lè)死等

操作技術(shù)要求。

本文件適用于禽的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、流行病學(xué)調(diào)查、疫情監(jiān)測(cè)、疫苗免疫效果評(píng)估等涉及的常規(guī)技術(shù)操作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB/T35823實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通用要求

GB/T35892實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南

GB/T39760實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死指南

GB/T27416實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)質(zhì)量和能力的通用要求

NY/T1952-2010動(dòng)物免疫接種技術(shù)規(guī)范

RB/T173-2018動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)評(píng)審指南

RB/T061-2021實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1藥物

本標(biāo)準(zhǔn)中藥物是應(yīng)用于禽的化學(xué)藥物、生物制品、微生物、寄生蟲(chóng)的代稱(chēng)和統(tǒng)稱(chēng)。

3.2人道終點(diǎn)

即考慮人道對(duì)待動(dòng)物的要求和實(shí)驗(yàn)要求，合理終止動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)的時(shí)機(jī)。

3.3安樂(lè)死

安樂(lè)死是以科學(xué)人道的理念和方式，使動(dòng)物生理和心理痛苦最小化而采取的動(dòng)物意識(shí)迅速喪失的處

死過(guò)程。

4準(zhǔn)備工作

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4.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)審查

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前應(yīng)審查實(shí)驗(yàn)方案、動(dòng)物福利倫理。如涉及病原微生物，應(yīng)進(jìn)行生物安全評(píng)估和制定處

置預(yù)案等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)全過(guò)程應(yīng)接受動(dòng)物福利倫理、生物安全監(jiān)督和檢查。

4.1.1福利倫理審查

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)福利、倫理審查參照GB/T35823、GB/T35892規(guī)定執(zhí)行。

4.1.2人道終點(diǎn)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)的確定是科學(xué)目的與動(dòng)物福利相權(quán)衡的結(jié)果。如何科學(xué)合理地確定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的人

道終點(diǎn)，在實(shí)現(xiàn)研究目的的同時(shí)，最大程度地減輕或結(jié)束實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所承受的疼痛和痛苦，是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方

案中一項(xiàng)重要的工作。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)的設(shè)定參考RB/T173-2018原則執(zhí)行。

4.1.3生物安全審查

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全審查參照GB19489規(guī)定執(zhí)行。

4.2人員

4.2.1操作人員應(yīng)具備獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)相關(guān)資質(zhì)，了解實(shí)驗(yàn)用禽習(xí)性、實(shí)驗(yàn)藥物相關(guān)知識(shí)。

4.2.2操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)知識(shí)學(xué)習(xí)和技能培訓(xùn)，取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員資質(zhì)。

4.2.3操作人員技術(shù)熟練、規(guī)范，按照動(dòng)物實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)相關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)，嚴(yán)格遵守相關(guān)管理規(guī)定和

操作規(guī)程。

4.3實(shí)驗(yàn)用禽

4.3.1實(shí)驗(yàn)用禽

4.3.1.1根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求使用相應(yīng)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)用禽。

4.3.1.2無(wú)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證》的實(shí)驗(yàn)用禽，應(yīng)按動(dòng)物實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)相關(guān)規(guī)定，排除人畜共患病及本動(dòng)

物的烈性傳染病，才能進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施。

4.3.1.3實(shí)驗(yàn)用禽需閉環(huán)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入隔離器，按規(guī)定隔離、檢疫，觀(guān)察和記錄狀態(tài)。待動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境、狀

態(tài)穩(wěn)定后才能用于開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

4.3.2斷喙