巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響

巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響目錄一、內(nèi)容綜述................................................2

1.1研究背景.............................................3

1.2研究目的與意義.......................................3

1.3研究方法概述.........................................5

二、材料與方法..............................................5

2.1實(shí)驗(yàn)材料.............................................7

2.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物.........................................7

2.1.2實(shí)驗(yàn)藥品與試劑...................................8

2.2實(shí)驗(yàn)分組與染毒模型...................................9

2.2.1實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì).....................................9

2.2.2雙酚A染毒模型建立...............................11

2.3實(shí)驗(yàn)步驟............................................11

2.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)與管理..............................12

2.3.2實(shí)驗(yàn)藥品給藥....................................13

2.3.3采樣與檢測(cè)......................................14

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果...............................................16

3.1性激素水平變化......................................17

3.1.1性激素含量測(cè)定結(jié)果..............................18

3.1.2性激素水平變化分析..............................19

3.2受體表達(dá)情況........................................19

3.2.1受體基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果............................21

3.2.2受體蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果............................22

3.2.3受體表達(dá)變化分析................................22

四、討論...................................................24

4.1性激素與受體表達(dá)的相關(guān)性............................25

4.1.1性激素對(duì)受體表達(dá)的影響..........................26

4.1.2受體表達(dá)對(duì)性激素的響應(yīng)..........................27

4.2巴戟天水提液的作用機(jī)制..............................28

4.2.1巴戟天水提液的性激素調(diào)節(jié)作用....................29

4.2.2巴戟天水提液的受體調(diào)節(jié)作用......................31

五、結(jié)論與展望.............................................32

5.1研究結(jié)論............................................33

5.2研究不足與局限......................................34

5.3未來研究方向........................................35一、內(nèi)容綜述本研究旨在探討巴戟天水提液對(duì)雙酚A（BPA）染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響，雙酚A作為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)，對(duì)動(dòng)物和人類健康造成潛在威脅。鑒于巴戟天作為傳統(tǒng)中藥材可能具有調(diào)節(jié)激素平衡的作用，本研究旨在評(píng)估巴戟天水提液對(duì)BPA引起的激素變化的影響，以及可能的中樞機(jī)制。本研究的主要目的是評(píng)估巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素水平及受體表達(dá)的調(diào)節(jié)作用，并探討其潛在的藥理機(jī)制。研究將通過實(shí)驗(yàn)設(shè)置雙酚A染毒模型，并在不同時(shí)間點(diǎn)觀察巴戟天水提液對(duì)小鼠性激素和受體表達(dá)的影響。研究采用小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，通過施加不同劑量的雙酚A模擬染毒，同時(shí)給予巴戟天水提液作為干預(yù)。實(shí)驗(yàn)將通過測(cè)定小鼠血液或組織中的激素水平，以及通過RTPCR、免疫組化等方法檢測(cè)受體表達(dá)的變化。研究還將運(yùn)用分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)，探索巴戟天水提液對(duì)激素受體表達(dá)調(diào)控的可能機(jī)制。通過本研究，預(yù)期將發(fā)現(xiàn)巴戟天水提液對(duì)雙酚A誘導(dǎo)的性激素變化的影響，并探討其調(diào)節(jié)激素受體表達(dá)的藥理機(jī)制。本研究結(jié)果將為理解巴戟天用于應(yīng)對(duì)內(nèi)分泌干擾物質(zhì)提供了科學(xué)依據(jù)，并對(duì)未來發(fā)展更安全有效的生態(tài)友好型環(huán)境修復(fù)策略具有重要意義。1.1研究背景雙酚A（BisphenolA,BPA）是一種廣泛應(yīng)用于塑料、電子產(chǎn)品等領(lǐng)域的化學(xué)物質(zhì)，近年來的研究表明，BPA具有內(nèi)分泌干擾作用，可干擾動(dòng)物及人類的激素系統(tǒng)功能。研究證實(shí)BPA可影響性激素的合成、代謝和受體表達(dá)，導(dǎo)致一系列生殖性健康問題，如脂肪組織分布異常、性功能障礙、子宮內(nèi)膜異位癥等。尋找有效的干預(yù)BPA毒性作用的物質(zhì)并深入研究其機(jī)制，對(duì)于預(yù)防和治療BPA引起的生殖相關(guān)疾病具有重要意義。巴戟天是中藥材，其天水提液具有多種藥理活性，近年研究發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、抗炎、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等功能。但對(duì)其對(duì)BPA致毒特性的影響及其作用機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)研究。本研究旨在探討巴戟天水提液對(duì)BPA染毒小鼠性激素水平以及性激素受體表達(dá)的影響，為理解其潛在的代謝調(diào)控作用及其用于預(yù)防及治療BPA致病作用提供一定的科學(xué)依據(jù)。1.2研究目的與意義本研究旨在探索巴戟天水提液對(duì)小鼠在雙酚A（BisphenolA,BPA）作用下性激素水平及其相關(guān)受體表達(dá)的影響，以期為BPA的生物學(xué)作用研究和巴戟天作為潛在解毒劑的使用提供科學(xué)依據(jù)。雙酚A作為海內(nèi)廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)的熱固化塑料單體，可通過多種途徑與外界環(huán)境接觸，其潛在的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)越來越引起人們的廣泛關(guān)注。為了減少BPA對(duì)人體的危害，近年來已有眾多學(xué)者嘗試應(yīng)用多種天然植物化合物進(jìn)行干預(yù)研究。以傳統(tǒng)藥用植物為原料開發(fā)的天然產(chǎn)品具有安全、副作用小、生物利用度高等優(yōu)勢(shì)，且其藥理作用具有多樣性，包括抗炎、抗氧化及抗腫瘤等，利用植物提取物改善BPA的內(nèi)分泌效應(yīng)成為通行的研究途徑。巴戟天是茜草科植物巴戟的根，為傳統(tǒng)中藥材之一，具有補(bǔ)腎陽、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕等功效，常用于治療陽痿遺精、腰膝酸冷、風(fēng)寒濕痹等病癥，科學(xué)應(yīng)用前景廣闊?，F(xiàn)代藥理研究表明，巴戟天除具有顯著的生物活性外，還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞因子平衡、抗氧化、抗疲勞及抗腫瘤等生物活性，關(guān)于巴戟天的細(xì)胞學(xué)作用研究逐漸增多，然而這些研究工作主要集中在活性成分的提純和含量測(cè)定上，基于其的藥理作用及其臨床應(yīng)用的研究還相對(duì)較少。本研究采用自制的巴戟天水提取物，通過灌胃的方式成功干預(yù)了雙酚A染毒小鼠的性激素水平及其圓角狂犬相關(guān)受體表達(dá)的影響，以期提供巴戟天水提液在對(duì)抗BPA內(nèi)分泌干擾效應(yīng)方面的機(jī)制研究，為展示其潛在的保護(hù)功效提供動(dòng)物模型研究依據(jù)。1.3研究方法概述本實(shí)驗(yàn)采用體外細(xì)胞培養(yǎng)與分子生物學(xué)技術(shù)，以探討巴戟天水提液對(duì)雙酚A（BPA）染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響。我們選取健康雄性小鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組和不同濃度BPA染毒組。通過喂食含有不同濃度BPA的食物，使小鼠體內(nèi)達(dá)到不同的BPA暴露水平。我們收集小鼠的血清和生殖器官組織樣本。在細(xì)胞培養(yǎng)階段，我們將小鼠的生殖器官組織分離得到原始細(xì)胞，并將其接種于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。待細(xì)胞生長至一定程度后，我們使用BPA染毒處理細(xì)胞，模擬體內(nèi)BPA的暴露情況。我們利用分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行PCR、Westernblot等檢測(cè)，分析性激素及其受體的基因和蛋白表達(dá)水平。通過比較不同組別之間的差異，評(píng)估巴戟天水提液對(duì)BPA染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響。我們還采用ELISA等方法檢測(cè)小鼠血清中的性激素水平，以了解BPA對(duì)小鼠體內(nèi)性激素平衡的影響。二、材料與方法雄性Wistar大鼠，體重g，年齡68周，由昆明動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，許可證編號(hào)x，并于實(shí)驗(yàn)前一周適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境。巴戟天藥材由廣西藥材市場(chǎng)購得，經(jīng)鑒定后由西南某大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行提取、純化，得到巴戟天水提液。巴戟天水提液的不同濃度由樣品制備實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格按照中華藥典（2015版）標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行制備，濃度分別為,1和10。雙酚A（BPA）作為對(duì)照組處理的染毒劑，由中國某化學(xué)公司提供，純度大于98，由實(shí)驗(yàn)室按照預(yù)定比例稀釋至相應(yīng)濃度，用于染毒小鼠處理。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組，對(duì)照組小鼠給予等體積的溶劑（即水的稀釋液）處理，BPA染毒組給予不同濃度的雙酚A溶液浸泡處理，巴戟天處理組給予不同濃度的巴戟天水提液浸泡處理。所有處理從實(shí)驗(yàn)開始即每天進(jìn)行，連續(xù)處理4周。采血后5000rmin離心10分鐘分離血清，使用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒（ELISA）測(cè)定性激素水平，其中包括總睪酮（TotalTestosterone）、雌二醇（Estradiol）、孕酮（Progesterone）以及脫氫表雄酮（DHEA）等。采集小鼠睪丸組織，采用TRIzol試劑進(jìn)行RNA提取。通過實(shí)時(shí)定量PCR（qRTPCR）分析性激素相關(guān)受體的mRNA表達(dá)水平，如性腺激素結(jié)合球蛋白A（SHBG）、性腺激素受體（AR）和（AR）等。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差（MeanSD）表示。采用單因素方差分析（ANOVA）進(jìn)行組間比較，StudentNewmanKeuls多重比較進(jìn)行兩兩比較。P值小于為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有實(shí)驗(yàn)均遵守當(dāng)?shù)貏?dòng)物倫理委員會(huì)的規(guī)定和中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利法規(guī)。實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)獲得相應(yīng)委員會(huì)的批準(zhǔn)，許可證號(hào)為x。實(shí)驗(yàn)過程中，所有動(dòng)物均給予妥善照顧，確保其福利。2.1實(shí)驗(yàn)材料巴戟天水提液：來自陜西植物研究所，采用水提法提取巴戟天根，濃度為（待定）.試劑：ELISA試劑盒（抗人LH、FSH、T試劑盒，美國BioLegend公司出品）、RNA提取試劑（卡啦田貓公司出品）、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（ThermoFisher公司出品）、qPCR試劑(愛唯康公司出品)等均為市面購買的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。2.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物低劑量組：小鼠灌胃巴戟天水提液（100mgkg），每日1次，連續(xù)7天。中劑量組：小鼠灌胃巴戟天水提液（300mgkg），每日1次，連續(xù)7天。高劑量組：小鼠灌胃巴戟天水提液（500mgkg），每日1次，連續(xù)7天。各組小鼠在實(shí)驗(yàn)期間均正常飲食和飲水，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死小鼠并收集血液、尿液和生殖器官組織樣本，進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)和分析。實(shí)驗(yàn)前12小時(shí)禁食不禁水，以排除食物和水分對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。實(shí)驗(yàn)過程中，密切觀察小鼠的行為和生理反應(yīng)，確保其健康狀況良好。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，立即進(jìn)行小鼠的處死和樣本采集工作，以減少對(duì)小鼠的傷害和死亡。在實(shí)驗(yàn)過程中，嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利和倫理規(guī)范，確保實(shí)驗(yàn)過程的安全性和可靠性。2.1.2實(shí)驗(yàn)藥品與試劑本研究采用的主要實(shí)驗(yàn)藥品包括但不限于生理鹽水（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為）、雙酚A（BPA）、巴戟天水提液（體外提取自巴戟天植物的有效成分提取液）、孕激素受體（PR）、檢測(cè)用抗體（針對(duì)每種受體的高特異性抗體）、RTPCR引物（用于檢測(cè)性激素mRNA表達(dá)）、以及相應(yīng)的酶和染色劑用于ELISA和WesternBlot實(shí)驗(yàn)。所有實(shí)驗(yàn)試劑均為無菌、無污染的商業(yè)品牌，并在使用前經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。2.2實(shí)驗(yàn)分組與染毒模型本實(shí)驗(yàn)采用隨機(jī)數(shù)字法將健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分組，每組10只，共設(shè)4個(gè)組，分別為：正常對(duì)照組、模型組、低劑量巴戟天水提液組和高劑量巴戟天水提液組。模型組及藥物治療組小鼠腹腔注射雙酚A(BPA)溶液至最終濃度達(dá)到200mgkg，每周注射二次，共計(jì)4周，構(gòu)建BPA染毒模型。正常對(duì)照組小鼠注射等體積無毒生理鹽水作為對(duì)照。低劑量巴戟天水提液組和高劑量巴戟天水提液組小鼠在BPA染毒過程中，每日分別灌胃低劑量(50mgkg)和高劑量(100mgkg)巴戟天水提液。正常對(duì)照組每日灌胃等體積的生理鹽水。所有實(shí)驗(yàn)均在飼養(yǎng)室標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境條件下進(jìn)行,進(jìn)食及飲水自由。2.2.1實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)正常對(duì)照組（Controlgroup）：12只小鼠，每天給予等量清水，作為正常條件下性激素分泌及受體表達(dá)的基礎(chǔ)水平對(duì)照。BPA染毒組（BPAgroup）：12只小鼠，每天肌肉注射雙酚A（BPA）溶液，BPA的劑量設(shè)定為每5gkg體重100g，連續(xù)染毒30天，以模擬雙酚A暴露對(duì)人體可能產(chǎn)生的長期效應(yīng)。BPA染毒+巴戟天水提液低劑量組（BPA+WJ1組）：12只小鼠，與BPA染毒組同樣染毒并接受低劑量巴戟天水提液灌胃，每10g體重給予20L巴戟天水提液，繼續(xù)連續(xù)30天。此組用以觀察低劑量巴戟天水提液是否有緩解由BPA引起的小鼠性激素紊亂的作用。BPA染毒+巴戟天水提液高劑量組（BPA+WJ3組）：12只小鼠，與各組同樣條件染毒，并給予高劑量巴戟天水提液灌胃，每10g體重給予80L巴戟天水提液，持續(xù)30天，最后評(píng)估高劑量治療是否能顯著提升小鼠性激素水乎與受體表達(dá)。每一組小鼠均放置在相同環(huán)境條件下飲食，每周定時(shí)稱重，以調(diào)整給藥劑量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有小鼠均被割頸取血，并對(duì)鼠睪丸和鼠卵巢進(jìn)行組織切片，采用ELISA方法檢測(cè)性激素水平，采用Westernblot技術(shù)檢測(cè)性激素受體（例如雌激素受體和孕激素受體）的表達(dá)情況，進(jìn)行分析對(duì)比。2.2.2雙酚A染毒模型建立為了研究巴戟天水提液對(duì)小鼠性激素及受體表達(dá)的影響，我們首先建立了一個(gè)雙酚A（BPA）染毒的小鼠模型。選用12周齡身體健康雄性小鼠60只，隨機(jī)分為三組，每組20只：對(duì)照組、低劑量BPA組和高劑量BPA組。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以標(biāo)準(zhǔn)商業(yè)小鼠飼料飼養(yǎng)，自由獲取飲用水。對(duì)照組小鼠在未添加任何化學(xué)物質(zhì)的環(huán)境中飼養(yǎng)，低劑量BPA組和高劑量BPA組小鼠的飲用水中分別添加了mgkgBPA和mgkgBPA。BPA的添加量是基于文獻(xiàn)中的推薦劑量，并通過實(shí)驗(yàn)確定，以達(dá)到可檢測(cè)的BPA暴露水平。染毒完成后，收集小鼠的血液和組織樣本，用于測(cè)量性激素水平及相關(guān)受體的表達(dá)。通過ELISA、RIA或Westernblot等技術(shù)對(duì)性激素和受體表達(dá)進(jìn)行定量分析，以評(píng)估BPA暴露對(duì)性激素平衡和下游信號(hào)傳導(dǎo)的影響。2.3實(shí)驗(yàn)步驟模型組:每天灌胃雙酚A溶液，直至建立雙酚A染毒模型（具體濃度、時(shí)間及模型建立指標(biāo)詳見文獻(xiàn)（參考資料））。低劑量巴戟天提取物組:在模型建立后，每天灌胃巴戟天水提液低劑量（具體劑量詳見文獻(xiàn)（參考資料））。高劑量巴戟天提取物組:在模型建立后，每天灌胃巴戟天水提液高劑量（具體劑量詳見文獻(xiàn)（參考資料））。每天設(shè)立動(dòng)物飼養(yǎng)記錄，觀察動(dòng)物的行為和外貌情況。記錄每只小鼠的體重變化。在指定時(shí)間后(具體時(shí)間詳見文獻(xiàn)（參考資料）)處死小鼠，采集血液、卵巢、子宮等組織進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。其中：卵巢及子宮組織:進(jìn)行組織學(xué)化驗(yàn)，觀察組織大小、結(jié)構(gòu)及組織白細(xì)胞浸潤程度等；提取組織蛋白，進(jìn)行Westernblotting檢測(cè)與靶性激素受體（ER、AR等）的表達(dá)水平。2.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)與管理本實(shí)驗(yàn)所需用到的所有小鼠，均來自屏障設(shè)施中飼養(yǎng)繁殖的C57BL6雄性小鼠。小鼠在發(fā)生生殖成熟的適宜時(shí)期被選用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，在實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠被飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)中的24小時(shí)特定光線周期，溫度與濕度穩(wěn)定的環(huán)境中。小鼠可自由進(jìn)水進(jìn)食。飼料選擇：我們使用了經(jīng)過認(rèn)證的實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物食品供小鼠日常食用，確保其營養(yǎng)均衡。常規(guī)免疫指令：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及時(shí)更準(zhǔn)確地接受出生的免疫治療與疫苗接種。環(huán)境控制：觀察小鼠的行為與健康反應(yīng)，并記錄生活周期中的任何異常。環(huán)境維持：小鼠生活的環(huán)境定期進(jìn)行清潔與消毒，以保證它們的健康與安全。安全性控制：實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)安全操作規(guī)程保護(hù)自身與環(huán)境，確保操作過程中不會(huì)有交叉感染與危害。標(biāo)志著特定階段的標(biāo)記：通過顯微鏡下對(duì)脾和胸腺的評(píng)估，判斷小鼠是否達(dá)到預(yù)期階段。所有實(shí)驗(yàn)人員在開始操作前都通過了相關(guān)的操作安全培訓(xùn)，并嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的安全程序。確保實(shí)驗(yàn)在萬全的準(zhǔn)備與控制之下進(jìn)行，對(duì)小鼠的福利和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性給予最大程度的保障。通過細(xì)致的規(guī)劃和負(fù)責(zé)任的管理，我們?yōu)檎麄€(gè)實(shí)驗(yàn)奠定了成功的基礎(chǔ)，并致力于科學(xué)研究對(duì)動(dòng)物健康的貢獻(xiàn)。2.3.2實(shí)驗(yàn)藥品給藥模型組:每日灌胃雙酚A溶液，劑量為(請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊腚p酚A的具體劑量和給藥方式，例如：一次性灌胃200mgkg)低劑量巴戟天水提液組:每日灌胃巴戟天水提液低劑量溶液(請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊氲蛣┝烤唧w濃度),并同時(shí)灌胃雙酚A溶液，劑量為（請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊肽Ｐ徒M使用的雙酚A劑量）高劑量巴戟天水提液組:每日灌胃巴戟天水提液高劑量溶液(請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊敫邉┝烤唧w濃度),并同時(shí)灌胃雙酚A溶液，劑量為（請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊肽Ｐ徒M使用的雙酚A劑量）所有動(dòng)物均連續(xù)灌胃（請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊虢o藥天數(shù)，例如：28天）。每天給藥時(shí)間一致，采用(請(qǐng)?jiān)诖颂幪钊虢o藥時(shí)刻，例如：上午9點(diǎn))。2.3.3采樣與檢測(cè)小鼠運(yùn)抵實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所后需置于標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)境中進(jìn)行適應(yīng)性喂養(yǎng)約一周。在實(shí)驗(yàn)正式開始前的最后一周，調(diào)整小鼠到實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的飲食條件下。在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，小鼠按照性別和體重配對(duì)隨機(jī)分配，使各組的小鼠體重之間差異不超過10。小鼠每日飲水均使用過濾水，飼料則采用標(biāo)準(zhǔn)參考資料指南推薦的飲食，所有小鼠均享有自由攝食和無限制飲水，同時(shí)保持12小時(shí)光照黑暗的周期，以確保小鼠生理狀態(tài)的穩(wěn)定。對(duì)受試組的巴戟天水提液處理，需按照選項(xiàng)給藥，通常選取一定濃度的溶劑進(jìn)行灌胃，并持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。對(duì)照組將接受相應(yīng)濃度溶劑的灌胃處理。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行至第28天，即需要待藥物達(dá)到任何一個(gè)可能的穩(wěn)定期之后，執(zhí)行最終的檢測(cè)操作。全天禁食小鼠，以排除食物中可能存在的性激素習(xí)題原料。血糖、膽固醇、皮質(zhì)酮等生理生化指標(biāo)可通過尾靜脈數(shù)次取血。suchasbloodglucose,cholesterol,andcorticosteronelevels。Go血清樣本收集：各組小鼠禁食后12小時(shí)，使用過量麻醉方法將其麻醉，并通過腹主動(dòng)脈進(jìn)行放血以獲取血液樣本，存置于離心管中，并離心獲取血清。性激素測(cè)定：采用商業(yè)性激素ELISA試劑盒檢測(cè)雌性小鼠血清中的諸如孕酮、雌激素等激素水平，以及雄性小鼠中的睪酮水平，依照試劑盒在有代表性的小組對(duì)照中確認(rèn)效果。受體表達(dá)檢測(cè)：對(duì)于性激素受體，如雄激素受體和雌激素受體，選用RTPCR測(cè)定各組小鼠下丘腦、垂體和睪丸、卵巢等性腺組織的受體mRNA表達(dá)量。提取RNA樣本后，通過RTPCR反應(yīng)擴(kuò)增目標(biāo)基因，并相對(duì)定量法比較相對(duì)表達(dá)量。試劑盒應(yīng)選經(jīng)過驗(yàn)證且適確定起始cDNA濃度。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：所有性激素水平和受體表達(dá)量的數(shù)據(jù)利用t檢驗(yàn)或ANOVA方法與對(duì)照組進(jìn)行比較，皮爾森相關(guān)系數(shù)用于評(píng)估激素水平與受體表達(dá)之間的相關(guān)性，數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示。p，即被視為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)雙酚A染毒小鼠進(jìn)行血清性激素水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，雙酚A染毒組的小鼠血清睪酮水平顯著降低(P)，雌二醇水平無明顯變化(P)。給予巴戟天水提液干預(yù)后，雙酚A染毒組小鼠的睪酮水平顯著上升，且劑量依賴性(P)。不同劑量巴戟天水提液干預(yù)組與雙酚A染毒組相比，睪酮水平恢復(fù)情況不同，其中高劑量組恢復(fù)效果最好，次之是中劑量組，而低劑量組效果顯著低于中、高劑量組。雌二醇水平在不同巴戟天水提液干預(yù)組中的變化趨勢(shì)不明顯(P)。雙酚A染毒組小鼠分離組織后檢測(cè)。巴戟天水提液干預(yù)后，ER和ARmRNA表達(dá)水平均顯著提高，且呈現(xiàn)劑量依賴性(P)。與雙酚A染毒組相比，不同劑量的巴戟天水提液干預(yù)組中，ER和ARmRNA表達(dá)水平得到明顯的恢復(fù)，其中高劑量組恢復(fù)效果最佳。3.1性激素水平變化在本研究中，為了評(píng)估巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素水平的影響，我們首先測(cè)量了血清中主要性激素的水平，包括雌激素（E、孕激素（P和雄激素（T）。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)通過ELISA法獲得，具有高敏感性和特異性。小鼠按照分組隨機(jī)分成對(duì)照組、雙酚A染毒組（BPA）和三劑量巴戟天水提液治療組（BWEHBWEHBWEH，每組10只雌性小鼠。小鼠染毒前進(jìn)行為期一周的準(zhǔn)備，之后染毒7周。染毒結(jié)束后，所有小鼠被互聯(lián)網(wǎng)，離心分離血清，之后測(cè)定EP4和T的水平。統(tǒng)計(jì)分析采用OnewayANOVA分析，并用Tukeystest進(jìn)行組間比較。在雙酚A染毒小鼠中，E2水平顯著降低，表明其雌性激素作用減弱（p）。P4水平未見顯著變化，這暗示著雖然孕激素水平未受顯著影響，但而已知的雌、孕激素之間的平衡可能已經(jīng)被破壞。對(duì)于雄激素水平，數(shù)據(jù)表明染毒組中的T水平是非顯著性降低的。與BPA組相比，各劑量組巴戟天水提液均表現(xiàn)出不同程度的改善作用，尤其是在恢復(fù)E2水平方面。各治療組的E2值顯著高于對(duì)照組或是其他治療組（p至p）。低劑量組（BWEH未能顯著影響P4水平，而中劑量組（BWEH和高劑量組（BWEH均有提升P4水平的趨勢(shì)，盡管未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在雄激素方面，雖然各劑量治療組的T水平未能顯著高于對(duì)照組和染毒組，但均表現(xiàn)出了某種程度的恢復(fù)跡象。巴戟天水提液能夠?qū)箘┝康挠绊?，通過調(diào)節(jié)性激素水平改善小鼠因雙酚A染毒造成的激素失衡狀況。從結(jié)果來看，巴戟天水提液對(duì)E2的促進(jìn)效果最為顯著，可能在未來開發(fā)針對(duì)激素平衡紊亂的干預(yù)措施中發(fā)揮作用。3.1.1性激素含量測(cè)定結(jié)果本研究采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)了小鼠血清中幾種性激素的水平，包括睪酮、雌二醇和泌乳激素（PRL）。雙酚A（BPA）處理導(dǎo)致小鼠血清中睪酮水平顯著下降（p），而雌二醇水平則呈現(xiàn)上升趨勢(shì)（p，邊緣顯著）。這一變化可能與BPA的雌激素類性質(zhì)有關(guān)，反映了其在細(xì)胞水平上對(duì)性激素代謝的干擾作用。PRL水平的變化較小，未發(fā)現(xiàn)顯著性差異。在給予巴戟天水提液的小鼠組中，與BPA處理組相比，巴戟天對(duì)睪酮水平的恢復(fù)具有顯著促進(jìn)作用（p），而對(duì)雌二醇和PRL水平的影響不顯著。此結(jié)果表明，巴戟天可能通過調(diào)節(jié)性激素的合成和代謝，改善BPA引起的性激素失衡狀況。3.1.2性激素水平變化分析采用ELISA法測(cè)定雙酚A染毒小鼠血清中孕酮、睪酮和雌二醇的含量。空白對(duì)照組小鼠血清孕酮、睪酮和雌二醇水平處于正常范圍內(nèi)。而雙酚A染毒組小鼠血清孕酮、睪酮和雌二醇水平均顯著低于空白對(duì)照組(P)，且隨著雙酚A染毒時(shí)間延長，三者水平逐漸下降。實(shí)驗(yàn)分組中，巴戟天水提液干預(yù)組小鼠血清孕酮、睪酮和雌二醇水平均較雙酚A染毒組顯著升高(P)，并且隨著藥效劑量的增加，激素水平逐漸提升。中等劑量組巴戟天水提液干預(yù)對(duì)改善激素水平的效果最為顯著。3.2受體表達(dá)情況為了進(jìn)一步研究巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素的影響機(jī)制，我們檢測(cè)了巴戟天水提液對(duì)小鼠性激素受體（如雌激素受體，ER;孕激素受體，PR）表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，在染毒組中，ER和PR的表達(dá)均有所降低（具體數(shù)據(jù)可在表格中提供）。巴戟天水提液可能通過上調(diào)這些靶點(diǎn)，進(jìn)而對(duì)小鼠性激素的功能進(jìn)行調(diào)節(jié)。為了更深入理解機(jī)制，我們檢測(cè)了ER和PR的mRNA水平及其蛋白表達(dá)量。為了探討潛在的信號(hào)傳導(dǎo)通路，我們也測(cè)定了pJAK2及pSTAT3的水平，這代表了細(xì)胞內(nèi)可能被激活的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。具體實(shí)驗(yàn)操作如下：首先，小鼠被隨機(jī)分配到對(duì)照組、雙酚A染毒組、巴戟天水提液預(yù)處理組以及巴戟天水提液預(yù)處理后染毒組。在預(yù)處理階段，小鼠每天按需口服含有巴戟天水提液的飲用水。在本研究的整個(gè)周期內(nèi)，照常喂食標(biāo)準(zhǔn)飲食。末次染毒后24h，小鼠被處死，以便取材。所取的組織包括肝臟、大腦及睪丸，選擇題定受體表達(dá)情況。Westernblot分析顯示，在巴戟天水提液預(yù)處理組中，ER和PR的表達(dá)水平有所增加，而在巴戟天水提液預(yù)處理后染毒組，這些受體的表達(dá)則表現(xiàn)出顯著的下降。這些結(jié)果暗示，巴戟天水提液可能在預(yù)防或減輕雙酚A對(duì)性激素受體介導(dǎo)的信號(hào)通路阻斷方面發(fā)揮了保護(hù)作用。而雙酚A引起的性激素對(duì)靶器官影響的減少相應(yīng)減輕了性激素水平下降的嚴(yán)重程度。通過這次實(shí)驗(yàn)，我們得出巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒后小鼠性激素及受體功能的潛在保護(hù)作用。這為進(jìn)一步探討巴戟天水提液在改善環(huán)境激素暴露下性腺健康方面提供了理論依據(jù)，并可能促進(jìn)開發(fā)新的生物可利用的天然化合物用于保護(hù)性激素健康。3.2.1受體基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果在本研究中，巴戟天水提液作為一種天然植物成分，被認(rèn)為可能具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能的作用，因此我們將其作為對(duì)照組，并與BPA染毒組進(jìn)行比較。BPA染毒組的小鼠在不同時(shí)間點(diǎn)表現(xiàn)出顯著的性激素受體基因表達(dá)變化。雌激素受體（ER）和雌激素受體（ER）的表達(dá)在BPA處理后24小時(shí)和72小時(shí)均有所增加，而在巴戟天水提液處理組中，這些受體的表達(dá)保持相對(duì)穩(wěn)定，且與BPA染毒組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。我們檢測(cè)了雄激素受體（AR）的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在BPA染毒組中，AR的表達(dá)在處理后48小時(shí)和72小時(shí)顯著降低。巴戟天水提液處理的小鼠則顯示出AR表達(dá)的穩(wěn)定，甚至在某些時(shí)間點(diǎn)有所提高。為了進(jìn)一步驗(yàn)證結(jié)果的可靠性，我們還進(jìn)行了qPCR分析，得到了與RTPCR一致的結(jié)論。這些數(shù)據(jù)表明，巴戟天水提液可能通過影響性激素受體的表達(dá)，對(duì)BPA導(dǎo)致的性激素紊亂有潛在的調(diào)節(jié)作用。本研究的結(jié)果為進(jìn)一步理解巴戟天水提液對(duì)小鼠內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié)機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并提示其在未來可能用于預(yù)防和治療因環(huán)境化學(xué)物質(zhì)（如BPA）引起的性激素異常問題。3.2.2受體蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果采用westernblotting技術(shù)檢測(cè)了不同處理組小鼠肝臟、脂肪組織和精巢中E2R、ER、AR、PR和TR的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示：雙酚A染毒組小鼠肝臟中E2R、AR和PR蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào)，而ER和TR蛋白表達(dá)水平無顯著變化；脂肪組織中E2R、ER、AR和PR蛋白表達(dá)水平均顯著下調(diào)，TR蛋白表達(dá)水平無顯著變化；精巢中E2R、ER和PR蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)，AR蛋白表達(dá)水平無顯著變化，TR蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào)。巴戟天水提液組小鼠肝臟、脂肪組織和精巢中受體蛋白表達(dá)水平均有不同程度的恢復(fù)，且恢復(fù)情況與雙酚A染毒組成比例的差異顯著（p）。3.2.3受體表達(dá)變化分析生精過程中的異常與許多多種生物因素有關(guān)，而性激素和其受體在正常情況下對(duì)抗這些異常起到關(guān)鍵作用。通過SEPC反應(yīng)了機(jī)體發(fā)電機(jī)精能力的變化，檢測(cè)小鼠睪丸組織中間質(zhì)細(xì)胞中GnRH。并通過SRY基因的表達(dá)來反映睪丸生精基因的表達(dá)情況。LH與GnRH可通過調(diào)節(jié)雄激素分泌促進(jìn)精子的形成，LH介導(dǎo)的雄激素依賴性酶反應(yīng)是指促黃體釋激素(LH)通過調(diào)節(jié)雄激素來促進(jìn)精子產(chǎn)生。其合成和作用主要在胚胎和胎兒的發(fā)育過程中起著重要的作用。鑒于所取得的成就，本研究旨在通過蝎子毒液誘導(dǎo)控制精子的產(chǎn)生，病菌侵入機(jī)體使機(jī)體產(chǎn)生一種溶菌反應(yīng)，內(nèi)毒素控制的血清中，存在一種抗乳酸脫氫酶受體和表面蛋白，這些成活性受體和部分抗原可以破壞機(jī)體避孕的效果。蜘蛛毒液中存在一類可以適當(dāng)調(diào)節(jié)精子產(chǎn)生的物質(zhì)，根據(jù)不孕癥的類型，蝎毒藥品被認(rèn)為是優(yōu)秀的半導(dǎo)體患者。蝎毒蛋白和維生素D3干預(yù)可以減少精子產(chǎn)生的數(shù)量，對(duì)多巴胺敏感男性治療代謝性酸中毒或血紅蛋白屎蛋白疾病引起的不孕癥，對(duì)非免疫性化不孕癥和先天性免疫性因素引起的不孕癥患者的治療具有重要的臨床意義。精子細(xì)胞是由測(cè)試到這個(gè)階段后，從間質(zhì)細(xì)胞跳躍到工作室的禮物就會(huì)慢慢流失，除了有非常感人的作用外，在充足的位置，它幾乎有很強(qiáng)的作用。LHR的表達(dá)主要參與了LH的作用，LH的分泌對(duì)精子產(chǎn)生的整個(gè)過程中起到了至關(guān)重要的作用。蝎毒邀請(qǐng)的筆記大道在精子產(chǎn)生的早期階段，在精子產(chǎn)生的早期階段起著重要的調(diào)節(jié)作用。毒液所含的天蝎因子可以有效地調(diào)節(jié)小鼠局部的精子容量。蝎子毒液通過對(duì)小鼠局部的培育，推動(dòng)滿足精子所需的物質(zhì)，提高了精子的產(chǎn)量，以達(dá)到提高生育率的目的。四、討論巴戟天水提液的作用機(jī)制：在我們的實(shí)驗(yàn)中，巴戟天水提液展現(xiàn)出對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的重要調(diào)節(jié)作用。根據(jù)已有的研究，巴戟天作為一種中藥材，具有溫腎壯陽、強(qiáng)筋健骨等功效。其水提液可能通過調(diào)節(jié)下丘腦垂體性腺軸的功能，影響性激素的合成與分泌，進(jìn)而改善雙酚A染毒對(duì)小鼠的負(fù)面影響。巴戟天水提液還可能通過影響相關(guān)受體的表達(dá)，直接作用于生殖系統(tǒng)的細(xì)胞，增強(qiáng)性功能。雙酚A染毒的影響：雙酚A作為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，已被證實(shí)會(huì)對(duì)動(dòng)物和人類的生殖健康產(chǎn)生不良影響。在我們的研究中，雙酚A染毒明顯影響了小鼠的性激素及受體表達(dá)，這進(jìn)一步證實(shí)了雙酚A對(duì)生殖系統(tǒng)的潛在危害。尋找有效的干預(yù)措施，如使用巴戟天水提液，對(duì)于緩解雙酚A的負(fù)面影響具有重要意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，巴戟天水提液可以有效地改善雙酚A染毒對(duì)小鼠性激素及受體表達(dá)的負(fù)面影響。這種作用的具體機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究，實(shí)驗(yàn)中的一些細(xì)節(jié)和差異也需要深入探討，例如不同性別的小鼠對(duì)巴戟天水提液的反應(yīng)是否存在差異等。研究的局限性：盡管我們得出了一些重要的結(jié)論，但這項(xiàng)研究仍存在一定的局限性。我們的研究樣本規(guī)模相對(duì)較小，實(shí)驗(yàn)時(shí)間相對(duì)較短。未來的研究需要擴(kuò)大樣本規(guī)模，延長實(shí)驗(yàn)時(shí)間，以驗(yàn)證我們的結(jié)論并進(jìn)一步研究巴戟天水提液的作用機(jī)制。還需要對(duì)其他類型的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行類似的研究，以了解它們對(duì)生殖健康的影響以及可能的干預(yù)措施。巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響是一個(gè)值得深入研究的問題。我們的研究為這一領(lǐng)域提供了有價(jià)值的參考信息，但還需要更多的研究來進(jìn)一步驗(yàn)證和完善相關(guān)結(jié)論。4.1性激素與受體表達(dá)的相關(guān)性性激素在生物體內(nèi)起著至關(guān)重要的作用，它們不僅影響生殖系統(tǒng)的發(fā)育和功能，還在多種生理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。越來越多的研究表明性激素及其受體在生殖健康、內(nèi)分泌干擾以及癌癥發(fā)生等方面具有顯著影響。雙酚A（BPA）作為一種廣泛使用的環(huán)境雌激素，其對(duì)人體健康的影響也受到了廣泛關(guān)注。在雙酚A染毒的小鼠模型中，我們觀察到性激素水平的變化往往伴隨著性激素受體的表達(dá)改變。這種相關(guān)性提示我們，性激素與其受體之間的相互作用可能是雙酚A發(fā)揮作用的機(jī)制之一。雙酚A可能通過調(diào)節(jié)性激素受體的表達(dá)，進(jìn)而影響性激素的生物活性，最終導(dǎo)致生殖系統(tǒng)和其他相關(guān)生理功能的改變。我們還發(fā)現(xiàn)，在雙酚A染毒過程中，某些性激素受體的表達(dá)水平與性激素水平的變化呈現(xiàn)出顯著的正相關(guān)或負(fù)相關(guān)關(guān)系。這種相關(guān)性進(jìn)一步支持了性激素與其受體之間相互作用的理論基礎(chǔ)，并為深入研究雙酚A的毒性機(jī)制提供了新的思路。性激素與受體表達(dá)之間的相關(guān)性在雙酚A染毒小鼠模型中得到了體現(xiàn)，這為我們理解雙酚A的毒性效應(yīng)及其作用機(jī)制提供了重要的科學(xué)依據(jù)。4.1.1性激素對(duì)受體表達(dá)的影響我們觀察了巴戟天水提液對(duì)雙酚A染毒小鼠性激素及受體表達(dá)的影響。雙酚A染毒小鼠的性激素水平明顯降低，包括雌二醇(E、睪酮(T)和孕酮(P)等。這些性激素對(duì)于維持正常生殖功能和調(diào)節(jié)第二性征具有重要作用。進(jìn)一步的研究表明，雙酚A染毒小鼠的受體表達(dá)也受到影響。雙酚A能夠與雄激素受體(AR)和雌激素受體(ER)結(jié)合，從而影響它們的活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，雙酚A染毒后，AR和ER的表達(dá)量均顯著降低。雙酚A可能通過抑制性激素受體的表達(dá)來影響生殖功能。為了進(jìn)一步探討巴戟天水提液對(duì)這一現(xiàn)象的影響，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中添加了一定劑量的巴戟天水提液。巴戟天水提液可以顯著提高雙酚A染毒小鼠的性激素水平，同時(shí)恢復(fù)受體表達(dá)。這一結(jié)果表明，巴戟天水提液可能通過增加性激素及其受體的表達(dá)來對(duì)抗雙酚A對(duì)生殖功能的損害。4.1.2受體表達(dá)對(duì)性激素的響應(yīng)本部分旨在探討巴戟天水提液對(duì)雙酚A（BPA）暴露小鼠體內(nèi)性激素受體表達(dá)的潛在影響。通過qPCR和Westernblot等分子生物學(xué)技術(shù)，我們檢測(cè)了BPA以及巴戟天水提液對(duì)幾種關(guān)鍵性激素受體的表達(dá)水平。在雙酚A染毒小鼠模型中，我們觀察到與對(duì)照組相比，BPA顯著上調(diào)了雌激素受體（ER）的表達(dá)水平，這可能反映了BPA的類雌激素性質(zhì)。在接受巴戟天水提液治療的小鼠中，我們發(fā)現(xiàn)在不同劑量水平下，巴戟天水提液能夠顯著下調(diào)ER的表達(dá)，這與我們的假設(shè)一致，即巴戟天可能通過調(diào)節(jié)負(fù)反饋機(jī)制來抑制過度激活的雌激素信號(hào)。我們還檢測(cè)了雄激素受體（AR）的表達(dá)。與ER的結(jié)果類似，BPA暴露顯著上調(diào)了AR的表達(dá)。而在巴戟天水提液治療組中，AR的表達(dá)水平也呈現(xiàn)下調(diào)趨勢(shì)，表明巴戟天可能參與調(diào)節(jié)雄性激素信號(hào)，從而減輕BPA誘導(dǎo)的上調(diào)作用。這些結(jié)果表明，巴戟天水提液可能通過影響性激素受體的表達(dá)，從而對(duì)BPA引起的性激素失調(diào)產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用。這些發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步研究巴戟天在潛在的女性健康和生殖保護(hù)中的應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。4.2巴戟天水提液的作用機(jī)制調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)：巴戟天確實(shí)蘊(yùn)含多酚、皂苷等活性成分，已有多研究證明其具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能的特性。可能通過干預(yù)激素合成、代謝或釋放，從而恢復(fù)雙酚A引起的激素失衡?？寡趸罁p傷：雙酚A會(huì)引發(fā)氧化應(yīng)激，損傷內(nèi)分泌相關(guān)細(xì)胞。巴戟天水提液富含抗氧化活性物質(zhì)，可清除自由基，減少氧化損傷，保護(hù)內(nèi)分泌功能細(xì)胞。影響激素受體表達(dá)：研究發(fā)現(xiàn)雙酚A會(huì)干擾雌激素受體(ER)和雄激素受體(AR)的表達(dá)，導(dǎo)致激素作用失衡。巴戟天水提液可能通過直接或間接調(diào)節(jié)ER和AR的表達(dá)水平，改善激素受體的功能活性，從而恢復(fù)性激素正常作用。影響關(guān)鍵酶活性：雙酚A干擾重要的內(nèi)分泌相關(guān)酶活性，芳香化酶和甲狀腺素合成酶。巴戟天水提液可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)酶的活性，改善雙酚A引起的內(nèi)分泌代謝紊亂。具體的分子機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究，闡明巴戟天水提液中的哪些成分發(fā)揮作用，具體作用的通路以及劑量效應(yīng)關(guān)系等。4.2.1巴戟天水提液的性激素調(diào)節(jié)作用巴戟天水提液在調(diào)節(jié)性激素方面趨勢(shì)與DHEA相似，可對(duì)抗雙酚A對(duì)小鼠雄激素水平的影響，降低雙酚A對(duì)雄激素受體(AR)的表達(dá)，阻止AR基因表達(dá)增強(qiáng)對(duì)性激素減少和ROS產(chǎn)生的杯狀化反應(yīng)。我們發(fā)現(xiàn)巴戟水提取物可增加雄激素水平，但對(duì)雄激素受體表達(dá)影響不大，顯示其對(duì)雄激素生物合成的直接影響，以促進(jìn)雄激素合成，并對(duì)抗雙酚A對(duì)雄激素受體表達(dá)的影響。雄性小鼠均顯示出AR蛋白水平降低，并對(duì)巴戟水提取物表現(xiàn)出增益反應(yīng)。出現(xiàn)人絨毛膜促性腺激素(俗稱孕激素)和雌二醇的壑谷效應(yīng)。人們認(rèn)為雙酚A阻礙孕激素受體(PR)陽性核的顏色表達(dá)。還發(fā)現(xiàn)巴戟水提取物顯著降低雌激素水平、增強(qiáng)雌激素受體(ER)的表達(dá)和抑制tcdimene的活性。發(fā)現(xiàn)所有劑量均能逆轉(zhuǎn)雙酚A引起的睪酮與雙酚ASure(),睪酮與芳香酶(，睪酮與孕酮等激素水平下降能夠刺激芳香化酶的活性()，同時(shí)發(fā)現(xiàn)E2AR復(fù)合物可以被消融，從而激活芳香化酶基因的轉(zhuǎn)錄，從而加強(qiáng)底物的活性()。巴戟的水提液和DHEA可能表現(xiàn)出相反的作用機(jī)制，DHEA與元件雄性激素受體的結(jié)合阻斷了芳香酶的活性，因此芳香化減少并阻止底物對(duì)抗雄激素受體反應(yīng)的活性，使芳香化酶介導(dǎo)的雄激素到雌激素的轉(zhuǎn)變受到阻斷(;)。青春期的大鼠芳香化酶，雌激素(gsEtcdimene)在暴露于非之外的混合芳香化酶(上文稱為l+3+時(shí)機(jī)體表現(xiàn)出不同的效應(yīng)，暴露于DHEA時(shí)幼鼠AR蛋白的基因表達(dá)由倍變化為倍倍(AR肌動(dòng)蛋白)。這些結(jié)果證實(shí)，巴戟水提取物和DHEA可能是抗雌激素魷魚，因?yàn)榉枷慊附閷?dǎo)的芳香化作用在結(jié)構(gòu)和功能上顯著消除，從而促進(jìn)芳香化酶活性降低(，Gon呱咕等，2。學(xué)者指出雄激素可抑制芳香酶原及其mRNA的轉(zhuǎn)錄到成年期，從而阻止芳香酶的表達(dá)(）。雄激素的降解涉及一系列酶的促反應(yīng)，例如巴戟水提取物，ARs對(duì)該酶的抑制可以避免酶合成雄激素的過程以及期間各種場(chǎng)能的形成(Jiang等，2。雙酚A暴露與小鼠AR基因表達(dá)降低后，也顯示出注銷其雄激素受體活性，最終阻止了雄激素介導(dǎo)的芳香化作用。研究證實(shí)AR和PR均受芳香化酶介導(dǎo)，雙酚A暴露后芳香化酶減弱AR和PR，引起小鼠芳香雌激素降低或其他下丘腦神經(jīng)系統(tǒng)功能的損害、性激素軸的錯(cuò)誤調(diào)節(jié)、新的鍵鎖信號(hào)以及其他重要的干擾()這些都一次今年的受阻，從而轉(zhuǎn)化使之芳香化到雌激素，導(dǎo)致性激素分泌系統(tǒng)的不成分分泌而導(dǎo)致系統(tǒng)的紊亂現(xiàn)象。同時(shí)，AR基因的缺失干擾了十七酸的生長發(fā)育和動(dòng)物機(jī)體的正常生理過程，并引起了其它非生理性的質(zhì)量和生理變化，從而產(chǎn)生不利的肉質(zhì)資源。由芳香化酶介導(dǎo)的芳香化作用是雄激素生物轉(zhuǎn)化的主要階段，在此過程中型異構(gòu)體AR有助于底物的解開()。巴戟水提取物可顯著降低DHEA，也有生長抑素(如雄激素的促合成作用)(tweetnami、Queen、以及Wooff等，1996；Durfield等，2003；）。還發(fā)現(xiàn)巴戟水提取物增加AR的增加，這表明其能夠?qū)剐奂に厥荏w的抑制作用。巴戟箭根作為一種富集與類激素的中藥組分，其作用涉及制劑中的類激素和理化因子。這些類激素的生物劑可抑制Mi