衣原體檢測的方法及優(yōu)缺點

第第頁衣原體檢測的方法及優(yōu)缺點衣原體屬于原核生物，嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生，是一種比細菌小比病毒大的微生物，能通過細胞濾器，有特殊的兩相發(fā)育周期。它沒有合成高能化合物ATP、GTP的本領(lǐng)，必需由宿主細胞供應(yīng)，因而必需依靠寄生才略生存。衣原體的致病機理是抑制被感染細胞的代謝，溶解破壞細胞并導(dǎo)致溶解酶釋放，代謝產(chǎn)物的細胞毒作用引起變—態(tài)反應(yīng)和自身免疫。衣原體感染可引起子宮感染、早產(chǎn)、流產(chǎn)、尿道感染、肺炎、支氣管炎、胃腸炎、腦脊髓炎、結(jié)膜炎和關(guān)節(jié)炎等多種疾病。衣原體檢測的方法重要有以下幾種：1.PCR檢測法：利用PCR技術(shù)擴增衣原體的DNA，再通過凝膠電泳或熒光定量PCR等方法檢測擴增產(chǎn)物，從而確定樣品中是否存在衣原體。優(yōu)點：（1）高度敏感，能夠檢測到極低濃度的衣原體DNA；（2）快速、簡便，一般只需幾小時即可得到結(jié)果；（3）能夠檢測多種衣原體亞型。缺點：（1）存在假陽性和假陰性結(jié)果的可能性；（2）對樣品的處理和提取DNA質(zhì)量要求較高；（3）需要特殊的試驗室設(shè)備和技術(shù)。2.培養(yǎng)法：將樣品接種到含有適合營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上，利用衣原體的生長特性進行培養(yǎng)，察看培養(yǎng)基上是否顯現(xiàn)衣原體的生長。優(yōu)點：（1）能夠檢測到活的衣原體；（2）能夠進行藥敏試驗，確定衣原體對不同抗生素的敏感性；（3）能夠分別和鑒定不同的衣原體亞型。缺點：（1）需要較長的培養(yǎng)時間，一般需要7—14天；（2）對樣品的處理和培養(yǎng)條件要求較高；（3）存在培養(yǎng)失敗和假陰性結(jié)果的可能性。3.免疫學(xué)檢測法：利用特異性抗衣原體抗體與衣原體抗原結(jié)合的原理，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）或熒光抗體法等方法檢測樣品中的衣原體抗原或抗體。優(yōu)點：（1）能夠檢測到衣原體的蛋白質(zhì)或抗原；（2）快速、簡便，一般只需幾小時即可得到結(jié)果；（3）能夠進行半定量或定量分析。缺點：（1）對樣品的處理和抗原提取要求較高；（2）存在假陽性和假陰性結(jié)果的可能性；（3）不能區(qū)分不同的衣原體亞型。4.原位雜交法：利用特異性探針與衣原體DNA結(jié)合的原理，通過熒光或放射性標(biāo)記的探針檢測樣品中的衣原體。優(yōu)點：（1）可以直接察看到細胞內(nèi)的病原體，可以確定其存在和數(shù)量；（2）可以在組織切片中進行檢測，可以確定病原體的位置和分布情況；（3）可以同時檢測多種病原體，可以提高檢測的靈敏度和特異性；（4）操作簡單，不需要特殊的設(shè)備和技術(shù)。缺點：（1）不能確定病原體的種類和亞型，需要進一步的分子生物學(xué)檢測；（2）可能會顯現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果，需要結(jié)合臨床表現(xiàn)和其他檢測結(jié)果綜合分析；（3）檢測結(jié)果受到樣本質(zhì)量和處理方法的影響，需要注意樣本手記和處理的標(biāo)準(zhǔn)化；（4）不能確定病原體的活性和毒力，需要結(jié)合其他檢測方法進行綜合分析。5.細胞學(xué)檢測法：通過顯微鏡察看樣品中的細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)，檢測是否存在衣原體感染的細胞。衣原體的細胞學(xué)檢測法是通過顯微鏡察看細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)來檢測衣原體的存在。優(yōu)點：（1）操作簡單，不需要多而雜的設(shè)備和技術(shù)；（2）可以直接察看到細胞內(nèi)的衣原體，可以確定其存在和數(shù)量；（3）可以在組織切片中進行檢測，可以確定衣原體的位置和分布情況；（4）可以同時檢測多種病原體，可以提高檢測的靈敏度和特異性。缺點：（1）檢測結(jié)果受到樣本質(zhì)量和處理方法的影響，可能存在假陰性或假陽性結(jié)果；（2）檢測結(jié)果需要經(jīng)過專業(yè)人員的推斷