血型與輸血檢驗(yàn)-交叉配血（臨床檢驗(yàn)課件）

交叉配血交叉配血試驗(yàn)

交叉配血（crossmatching）試驗(yàn)是輸血前必須做的紅細(xì)胞系統(tǒng)的配合性試驗(yàn)，以確保受者或供者血液沒有可測的不相配合的抗原和抗體成分?？煞譃橹鱾?cè)配血和次側(cè)配血。主側(cè)：

受血者血漿

供血者血血漿次側(cè)：

供血者RBC受血者RBC

交叉配血試驗(yàn)

一、交叉配血試驗(yàn)的方法二、交叉配血試驗(yàn)方法評價(jià)與臨床意義三、血型鑒定與交叉配血的異常及其克服辦法交叉配血試驗(yàn)鹽水配血法凝聚胺技術(shù)抗人球蛋白配血法酶介質(zhì)配血法交叉配血試驗(yàn)鹽水配血法天然抗體IgM因其分子鏈較長，分子量大，在鹽水介質(zhì)中，可以克服紅細(xì)胞表面電荷的排斥力，與含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞結(jié)合并出現(xiàn)肉眼可見的凝集。鹽水配血法原理交叉配血試驗(yàn)

鹽水法是目前最常用的配血方法，可以發(fā)現(xiàn)臨床最重要的ABO血型不配合性。當(dāng)受血者和供血者的細(xì)胞和血清經(jīng)混合并離心后，如果有ABO血型不配合問題，就會(huì)很快顯示出來，所以常稱為“立即離心”（immediatespin）配血試驗(yàn)。報(bào)告方式格式Ⅰ：受血者×××（血型）供血者×××（血型）。血清+供血者紅細(xì)胞：有/無凝集有/無溶血。血清+受血者紅細(xì)胞：有/無凝集有/無溶血。

交叉配血試驗(yàn)

試驗(yàn)反應(yīng)情況結(jié)果

PS+DCPC+DSPS+PC

陽性對照陰性對照鹽水介質(zhì)酶介質(zhì)抗球蛋白介質(zhì)簽名：年月日

格式Ⅱ：

受血者血型

供血者血型

報(bào)告方式交叉配血試驗(yàn)聚凝胺配血法原理與Rh血型鑒定聚凝胺法原理相同。

聚凝胺配血法的結(jié)果如果加入解聚液后觀察到凝集散開，則為聚凝胺引起的非特異性凝集，為配血相容。如果加入解聚液后觀察到凝集不散開，則為抗原抗體的特異性凝集，為配血不相容。交叉配血試驗(yàn)交叉配血試驗(yàn)

微柱凝膠法凝膠具有分子篩效應(yīng)和親和效應(yīng)，在微柱凝膠介質(zhì)中紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合，利用凝膠的空間位阻經(jīng)低速離心，凝集的紅細(xì)胞懸浮在凝膠的上層，而未和抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則沉于凝膠的底部（管底尖部）。微柱凝膠試驗(yàn)原理凝膠微柱：試管上端、柱體過濾介質(zhì)：顆粒直徑26～103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細(xì)胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）微柱凝膠試驗(yàn)原理

將紅細(xì)胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng)，離心后觀察凝集的紅細(xì)胞，被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央，證明發(fā)生凝集反應(yīng)，判斷凝集反應(yīng)陽性游離的紅細(xì)胞，被擠過裝有過濾介質(zhì)的小柱，而到達(dá)小柱的底部，證明未發(fā)生凝集判斷凝集反應(yīng)陰性

凝膠卡式檢測法

是微柱凝膠技術(shù)與上述所有技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物1986年由法國人Dr.YvesLappierre發(fā)明。1994年獲得美國FDA認(rèn)證，目前在許多發(fā)達(dá)國家已經(jīng)作為常規(guī)技術(shù)應(yīng)用于臨床微柱凝膠試驗(yàn)結(jié)果判讀模式交叉配血試驗(yàn)方法評價(jià)鹽水配血法優(yōu)點(diǎn)：反應(yīng)迅速，如有不配合問題，立即顯示出來，使用方便。缺點(diǎn)：只能檢出完全抗體若要檢測不完全抗體需采用其他配血法。酶介質(zhì)配血法優(yōu)點(diǎn)：易檢出Rh血型抗體，操作簡便，試劑易購得，敏感性尚高。缺點(diǎn)：操作較鹽水配血法繁雜。交叉配血試驗(yàn)方法評價(jià)聚凝胺配血法優(yōu)點(diǎn)：除了Kell系統(tǒng)部分抗體如抗K、抗Kpa、抗Kpb需用抗人球蛋白法才能檢出外，其他IgM、IgG兩種性質(zhì)的抗體均可以檢出，且無非特異性反應(yīng)。微柱凝膠配血法優(yōu)點(diǎn)：微柱凝膠卡式法操作簡便，結(jié)果判定準(zhǔn)確，易于掌握，具有很大的臨床應(yīng)用價(jià)值。微柱凝膠卡可做血型鑒定、交叉配血及特殊介質(zhì)配血試驗(yàn)。缺點(diǎn)：其試劑價(jià)格昂貴交叉配血試驗(yàn)的臨床意義1.進(jìn)一步驗(yàn)證受血者和供血者血型鑒定是否正確，發(fā)現(xiàn)ABO系統(tǒng)的不規(guī)則抗體，以避免血型鑒定錯(cuò)誤而導(dǎo)致的輸血后的嚴(yán)重溶血反應(yīng)。2.發(fā)現(xiàn)其他的血型抗體受、供血者如果ABO血型相同，但其他血型不同時(shí)，在交叉配血時(shí)也可出現(xiàn)凝集，為避免異型血輸入后的溶血反應(yīng)，在目前許多實(shí)驗(yàn)室都不能進(jìn)行稀有血型鑒定的情況下，全靠交叉配血發(fā)現(xiàn)這些血型的不同及免疫抗體的存在。

交叉配血試驗(yàn)的臨床意義3.當(dāng)受血者一次輸血超過1600～2000m1，或在48小時(shí)內(nèi)輸入5L或更多血時(shí),稱為大量輸血,這時(shí)就需要多個(gè)供血者的血液,在配血時(shí)不但受血者和供血者之間要交叉配血,多個(gè)供血者之間也應(yīng)互相交叉配血,為保證受血者的安全，要求主側(cè)、次側(cè)及獻(xiàn)血員之間交叉配血均不凝集時(shí)，方可輸血。4.在急診配血時(shí),對急需情況可采用試管法配血，在15min內(nèi)發(fā)血。對特急情況應(yīng)立即發(fā)給O型濃縮紅細(xì)胞或低凝集價(jià)的O型全血。然后盡快復(fù)查血型和配血，如表現(xiàn)有配血禁忌，應(yīng)立即通知負(fù)責(zé)醫(yī)師及時(shí)處理。

血型鑒定與交叉配血的異常假陰性1.標(biāo)準(zhǔn)血清不符合要求2.被檢紅細(xì)胞抗原性減弱3.紅細(xì)胞懸液濃度配置不當(dāng)4.將溶血反應(yīng)誤認(rèn)為不凝集5.血型物質(zhì)的中和作用

假陽性

1.紅細(xì)胞呈緡錢狀排列

2.冷凝集

3.全凝集與多凝集

4.類B抗原

5.自身免疫性溫性抗體責(zé)任性錯(cuò)誤

交叉配血鹽水介質(zhì)法實(shí)驗(yàn)原理目的實(shí)驗(yàn)試劑操作步驟目

錄CONTENTS實(shí)驗(yàn)原理目的交叉配血試驗(yàn)是指受血者血清加供血者紅細(xì)胞懸液;供血者血清加受血者紅細(xì)胞懸液，同時(shí)進(jìn)行凝集試驗(yàn)。前者稱主試驗(yàn)，后者稱副試驗(yàn)。目的驗(yàn)證供者與受者ABO血型鑒定是否正確，防范引起溶血性輸血反應(yīng)。此外，也可檢出ABO血型系統(tǒng)的不規(guī)則凝集素以及發(fā)現(xiàn)ABO系統(tǒng)以外的其他血型抗體。

試驗(yàn)器材、試劑小試管、尖嘴滴管、離心機(jī)、試管架、顯微鏡等試驗(yàn)器材試劑生理鹽水操作步驟（一）01取受血者和供血者血液各2ml，注入一清潔干燥試管內(nèi)，按常規(guī)方法分離血清。同時(shí)留數(shù)滴滴加于含少量生理鹽水的小試管內(nèi)，制成5％的紅細(xì)胞生理鹽水懸液。02另取清潔試管2支，標(biāo)明主測和次測。主測：受血者血清1滴加供血者紅細(xì)胞懸液1滴。次測：供血者血清1滴加受血者紅細(xì)胞懸液1滴。操作步驟（二）03分別混勻，低速離心約2分鐘，輕輕搖勻，觀察結(jié)果。04結(jié)果判定：同型配血，主測、次測均不凝集，表示無配血禁忌，可以輸血；異型配血時(shí)，主測無凝集，次測凝集，無溶血，可以輸給少量。輸異型血時(shí)，如次測不凝集，不可以輸血，應(yīng)重新復(fù)查血型或追查其原因交叉配血試驗(yàn)主側(cè)配血用患者血清與供者紅細(xì)胞