血型與輸血檢驗-交叉配血（臨床檢驗課件）

交叉配血交叉配血試驗

交叉配血（crossmatching）試驗是輸血前必須做的紅細胞系統(tǒng)的配合性試驗，以確保受者或供者血液沒有可測的不相配合的抗原和抗體成分?？煞譃橹鱾扰溲痛蝹扰溲?。主側：

受血者血漿

供血者血血漿次側：

供血者RBC受血者RBC

交叉配血試驗

一、交叉配血試驗的方法二、交叉配血試驗方法評價與臨床意義三、血型鑒定與交叉配血的異常及其克服辦法交叉配血試驗鹽水配血法凝聚胺技術抗人球蛋白配血法酶介質配血法交叉配血試驗鹽水配血法天然抗體IgM因其分子鏈較長，分子量大，在鹽水介質中，可以克服紅細胞表面電荷的排斥力，與含有相應抗原的紅細胞結合并出現(xiàn)肉眼可見的凝集。鹽水配血法原理交叉配血試驗

鹽水法是目前最常用的配血方法，可以發(fā)現(xiàn)臨床最重要的ABO血型不配合性。當受血者和供血者的細胞和血清經(jīng)混合并離心后，如果有ABO血型不配合問題，就會很快顯示出來，所以常稱為“立即離心”（immediatespin）配血試驗。報告方式格式Ⅰ：受血者×××（血型）供血者×××（血型）。血清+供血者紅細胞：有/無凝集有/無溶血。血清+受血者紅細胞：有/無凝集有/無溶血。

交叉配血試驗

試驗反應情況結果

PS+DCPC+DSPS+PC

陽性對照陰性對照鹽水介質酶介質抗球蛋白介質簽名：年月日

格式Ⅱ：

受血者血型

供血者血型

報告方式交叉配血試驗聚凝胺配血法原理與Rh血型鑒定聚凝胺法原理相同。

聚凝胺配血法的結果如果加入解聚液后觀察到凝集散開，則為聚凝胺引起的非特異性凝集，為配血相容。如果加入解聚液后觀察到凝集不散開，則為抗原抗體的特異性凝集，為配血不相容。交叉配血試驗交叉配血試驗

微柱凝膠法凝膠具有分子篩效應和親和效應，在微柱凝膠介質中紅細胞抗原與相應的抗體結合，利用凝膠的空間位阻經(jīng)低速離心，凝集的紅細胞懸浮在凝膠的上層，而未和抗體結合的紅細胞則沉于凝膠的底部（管底尖部）。微柱凝膠試驗原理凝膠微柱：試管上端、柱體過濾介質：顆粒直徑26～103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）微柱凝膠試驗原理

將紅細胞和抗血清加在凝膠上部反應，離心后觀察凝集的紅細胞，被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央，證明發(fā)生凝集反應，判斷凝集反應陽性游離的紅細胞，被擠過裝有過濾介質的小柱，而到達小柱的底部，證明未發(fā)生凝集判斷凝集反應陰性

凝膠卡式檢測法

是微柱凝膠技術與上述所有技術相結合的產物1986年由法國人Dr.YvesLappierre發(fā)明。1994年獲得美國FDA認證，目前在許多發(fā)達國家已經(jīng)作為常規(guī)技術應用于臨床微柱凝膠試驗結果判讀模式交叉配血試驗方法評價鹽水配血法優(yōu)點：反應迅速，如有不配合問題，立即顯示出來，使用方便。缺點：只能檢出完全抗體若要檢測不完全抗體需采用其他配血法。酶介質配血法優(yōu)點：易檢出Rh血型抗體，操作簡便，試劑易購得，敏感性尚高。缺點：操作較鹽水配血法繁雜。交叉配血試驗方法評價聚凝胺配血法優(yōu)點：除了Kell系統(tǒng)部分抗體如抗K、抗Kpa、抗Kpb需用抗人球蛋白法才能檢出外，其他IgM、IgG兩種性質的抗體均可以檢出，且無非特異性反應。微柱凝膠配血法優(yōu)點：微柱凝膠卡式法操作簡便，結果判定準確，易于掌握，具有很大的臨床應用價值。微柱凝膠卡可做血型鑒定、交叉配血及特殊介質配血試驗。缺點：其試劑價格昂貴交叉配血試驗的臨床意義1.進一步驗證受血者和供血者血型鑒定是否正確，發(fā)現(xiàn)ABO系統(tǒng)的不規(guī)則抗體，以避免血型鑒定錯誤而導致的輸血后的嚴重溶血反應。2.發(fā)現(xiàn)其他的血型抗體受、供血者如果ABO血型相同，但其他血型不同時，在交叉配血時也可出現(xiàn)凝集，為避免異型血輸入后的溶血反應，在目前許多實驗室都不能進行稀有血型鑒定的情況下，全靠交叉配血發(fā)現(xiàn)這些血型的不同及免疫抗體的存在。

交叉配血試驗的臨床意義3.當受血者一次輸血超過1600～2000m1，或在48小時內輸入5L或更多血時,稱為大量輸血,這時就需要多個供血者的血液,在配血時不但受血者和供血者之間要交叉配血,多個供血者之間也應互相交叉配血,為保證受血者的安全，要求主側、次側及獻血員之間交叉配血均不凝集時，方可輸血。4.在急診配血時,對急需情況可采用試管法配血，在15min內發(fā)血。對特急情況應立即發(fā)給O型濃縮紅細胞或低凝集價的O型全血。然后盡快復查血型和配血，如表現(xiàn)有配血禁忌，應立即通知負責醫(yī)師及時處理。

血型鑒定與交叉配血的異常假陰性1.標準血清不符合要求2.被檢紅細胞抗原性減弱3.紅細胞懸液濃度配置不當4.將溶血反應誤認為不凝集5.血型物質的中和作用

假陽性

1.紅細胞呈緡錢狀排列

2.冷凝集

3.全凝集與多凝集

4.類B抗原

5.自身免疫性溫性抗體責任性錯誤

交叉配血鹽水介質法實驗原理目的實驗試劑操作步驟目

錄CONTENTS實驗原理目的交叉配血試驗是指受血者血清加供血者紅細胞懸液;供血者血清加受血者紅細胞懸液，同時進行凝集試驗。前者稱主試驗，后者稱副試驗。目的驗證供者與受者ABO血型鑒定是否正確，防范引起溶血性輸血反應。此外，也可檢出ABO血型系統(tǒng)的不規(guī)則凝集素以及發(fā)現(xiàn)ABO系統(tǒng)以外的其他血型抗體。

試驗器材、試劑小試管、尖嘴滴管、離心機、試管架、顯微鏡等試驗器材試劑生理鹽水操作步驟（一）01取受血者和供血者血液各2ml，注入一清潔干燥試管內，按常規(guī)方法分離血清。同時留數(shù)滴滴加于含少量生理鹽水的小試管內，制成5％的紅細胞生理鹽水懸液。02另取清潔試管2支，標明主測和次測。主測：受血者血清1滴加供血者紅細胞懸液1滴。次測：供血者血清1滴加受血者紅細胞懸液1滴。操作步驟（二）03分別混勻，低速離心約2分鐘，輕輕搖勻，觀察結果。04結果判定：同型配血，主測、次測均不凝集，表示無配血禁忌，可以輸血；異型配血時，主測無凝集，次測凝集，無溶血，可以輸給少量。輸異型血時，如次測不凝集，不可以輸血，應重新復查血型或追查其原因交叉配血試驗主側配血用患者血清與供者紅細胞