DB2305-T 036-2024大豆灰斑病田間接種及抗性評價(jià)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB16

DB2305雙 鴨 山 市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB2305/T036—2024大豆灰斑病田間接種及抗性評價(jià)技術(shù)規(guī)程2024-08-302024-08-302024–09-30雙鴨山市市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB2305/T036—2024前??言本文件按照GB/T1.1—20201草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由雙鴨山市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件起草單位：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院佳木斯分院、寶清縣小城子鎮(zhèn)鄉(xiāng)村振興發(fā)展服務(wù)中心、蕪湖IIDB2305/T036DB2305/T036—2024DB2305/T036—2024DB2305/T036—2024大豆灰斑病田間接種及抗性評價(jià)技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了在人工接種條件下，大豆灰斑病抗性田間鑒定和評價(jià)的技術(shù)要求。本文件適用于大豆品種對灰斑病抗性的田間鑒定和評價(jià)。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，（包括所有的修改單適用于本文件。GB4404.2糧食作物種子第2部分：豆類術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.13.1大豆灰斑病由大豆尾孢菌引起的葉部癥狀為主的大豆病害，又稱蛙眼病。田間癥狀見附錄A。3.2抗病性力。3.3鑒定圃種植大豆品種進(jìn)行田間接種的試驗(yàn)區(qū)。3.4接種體用于接種以引起病害的病原物或病原物的一部分。13.5人工接種在人工條件下，將接種體置于植物體適當(dāng)部位并使之發(fā)病的過程。3.6接種懸浮液用于接種的含有定量接種體的液體。3.7抗性評價(jià)根據(jù)采用的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)判定寄主植物對特定病害反應(yīng)程度和抵抗水平的定性描述。品種種植將供試品種在鑒定圃內(nèi)按編號(hào)順序排列，每隔19份鑒定材料播種1行感病對照品種，每個(gè)品種播一小區(qū)，小區(qū)面積2.8m2，人工單粒點(diǎn)播，株距5cm，行距0.65m。種子符合GB4404.2標(biāo)準(zhǔn)。病原物接種體制備5.1病原菌的來源5.1病原菌的來源選擇經(jīng)權(quán)威部門純化和鑒定的大豆尾孢菌病株。5.2培養(yǎng)基的配制5.2.1馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）200g1000mL25min20g，再煮沸后加入葡萄糖20g，加水定容至1000mL，121℃下濕熱滅菌25min。5.2.2高粱粒培養(yǎng)基挑選大小均勻、飽滿的高粱粒，清洗后文火煮40min～60min，用手碾搓，高粱粒軟而不爛（一捏及癟0.5～1500mL30030min。2病原菌的活化將保存?zhèn)溆玫拇蠖刮叉呔鷱?℃冰箱內(nèi)取出，在超級工作臺(tái)內(nèi)，挑起菌絲接種于滅菌的PDA平板，25℃7d～10d，待菌絲長滿培養(yǎng)皿后，即完成病原菌的活化。病原菌繁殖在超凈工作臺(tái)中，將活化后的病原菌菌塊置于裝有高粱粒培養(yǎng)基的三角瓶內(nèi)，25℃培養(yǎng)30d。待菌絲長滿高粱粒后，停止培養(yǎng)。將高粱粒從三角瓶中倒出，洗1～2次，洗去菌絲，將高粱粒放置晾干，于陰干處保存?zhèn)溆谩＝臃N6.1孢子誘發(fā)2d5d3%蔗糖，孢子懸浮液濃度為顯微鏡1010視野下5～8個(gè)孢子。田間人工接種田間人工接種3次接種，間隔時(shí)間約為3～5d。誘發(fā)條件遇干旱天氣時(shí)，鑒定圃內(nèi)鋪設(shè)微噴管進(jìn)行水分補(bǔ)充，以利于大豆灰斑病發(fā)生。7調(diào)查與評價(jià)病級標(biāo)準(zhǔn)01%1%～級：6%～21%～51%以上。調(diào)查方法30d～40d，調(diào)查發(fā)病情況。每個(gè)品種調(diào)查20株。記錄發(fā)病級別，計(jì)算病情指數(shù)。計(jì)算公式如下：3病情指數(shù) 病級該病發(fā)病株數(shù) 100供試總株數(shù)最高級代表值

（1）抗性評價(jià)計(jì)算病情指數(shù)后，按病情指數(shù)范圍確定抗性。具體抗性情況見表1。表1大豆灰斑病品種抗性評價(jià)表抗性病情指數(shù)范圍免疫0高抗≤20%抗病21%～40%中抗41%～60%感病61%～80%高感≧81%有效性評價(jià)7.5調(diào)查記載表格大豆灰斑病鑒定結(jié)果記載表格，見表2。表2大豆灰斑病鑒定結(jié)果記載表7.5調(diào)查記載表格大豆灰斑病鑒定結(jié)果記載表格，見表2。表2大豆灰斑病鑒定結(jié)果記載表4編號(hào)品種名稱來源病情分級病情指數(shù)平均病指抗性評價(jià)12345播種日期接種日期接種生育期接種病原菌分離物編號(hào)株系類型調(diào)查日期附錄A(規(guī)范性附錄)大豆灰斑病田間癥狀大豆灰斑病可危害大豆葉、莖、莢和籽粒，以葉片和籽粒受害最