免疫增殖病及檢驗（免疫學(xué)檢驗課件）

免疫增殖病及檢驗免疫增殖?。╥mmunoproliferativedisease）是免疫系統(tǒng)(免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞)異常增生（包括良性或惡性）而引起的疾病。免疫增殖病的重要臨床表現(xiàn)包括免疫球蛋白數(shù)量和功能的異常，因此通過異常免疫球蛋白的檢測，可以為該類疾病的診斷提供重要依據(jù)，檢測異常免疫球蛋白已經(jīng)成為臨床免疫檢驗的重要檢測內(nèi)容。前言第一節(jié)概述一、免疫增殖病的概念免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞異常增生（包括良性或惡性）所致的一組疾病。二、免疫增殖病的分類增殖細(xì)胞疾病T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血?。?0％）淋巴母細(xì)胞瘤部分非霍奇金淋巴瘤Sezary綜合征蕈樣霉菌病B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病原發(fā)性巨球蛋白血癥多發(fā)性骨髓瘤重鏈病和輕鏈病Burkitt淋巴瘤其他多數(shù)淋巴細(xì)胞瘤傳染性單核細(xì)胞增多癥增殖細(xì)胞疾病裸細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血?。?0％）部分非霍奇金淋巴瘤組織-單核細(xì)胞急性單核細(xì)胞白血病急性組織細(xì)胞增多癥其他（分類不統(tǒng)一）毛細(xì)胞白血病其他霍奇金病三、免疫球蛋白病的概念由于B細(xì)胞或漿細(xì)胞異常增殖所引起的免疫球蛋白的異常增加，從而導(dǎo)致機(jī)體病理損傷的免疫增殖病。

分類單克隆免疫球蛋白病（單一克隆、惡性）多克隆免疫球蛋白?。ㄈ?、良性或繼發(fā)）第二節(jié)單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征

突出特點：患者血清存在異常增多的單克隆免疫球蛋白

M蛋白（monoclonalprotein）：單克隆免疫球蛋白理化性質(zhì)十分均一，但是多無免疫活性，可以是IgG、IgM、IgA、IgE或IgD，也可以是κ或λ輕鏈中的任何一型。

本周蛋白（Bence-Joneprotein）：M蛋白的輕鏈分子量較小，容易從尿中排出，最早由Bence-Jones測知。一、多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤（multiplemyeloma）是漿細(xì)胞異常增生的惡性腫瘤，也稱漿細(xì)胞瘤，因其引起骨破壞而得名。患者常伴有貧血、腎功損害和免疫功能障礙。近年發(fā)病有增高趨勢，男性多發(fā)，男女比約為2:1，平均發(fā)病年齡是46.5歲。臨床表現(xiàn)：骨痛

腎功能損害

貧血感染高黏血癥表現(xiàn)

患者骨破壞所致頭顱腫物及眼球突出臨床免疫學(xué)特點：

血清中有大量單克隆M蛋白或尿中有大量本周蛋白骨髓發(fā)現(xiàn)大量漿細(xì)胞或組織活檢證實有漿細(xì)胞瘤原發(fā)性的溶骨性損害或廣泛骨質(zhì)疏松正常的免疫球蛋白含量明顯降低類型發(fā)生率（%）本周蛋白尿陽性（%）臨床特點IgG50～6050～70典型癥狀I(lǐng)gA20～2550～70高黏綜合征較多見IgD1～290骨髓外病變多見，溶骨病變多見，44%淀粉樣變IgE0.01少見

非分泌型1～5無溶骨病變較少，神經(jīng)系統(tǒng)損害較多見

不同類型的多發(fā)性骨髓瘤特點

二、原發(fā)性巨球蛋白血癥原發(fā)性巨球蛋白血癥（macroglobulinemia）是以分泌IgM的漿細(xì)胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾病，好發(fā)于老年男性。主要表現(xiàn)骨髓外浸潤，以淋巴結(jié)、肝和脾腫大等為主要體征并伴有血黏滯過高綜合征。實驗室檢查：

血清中患者血清IgM水平往往超過300mg/dl血清分離不出或呈膠凍狀，電泳時血清有時難以泳動，集中于原點是該病的電泳特征骨髓象可見淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和介乎兩者之間的漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞明顯增多有些IgM分子具有冷球蛋白的特征有約40％的病人可出現(xiàn)本周蛋白尿三、良性單克隆丙種球蛋白病良性單克隆丙種球蛋白?。╞enignmonoclonalgammopathy）是指血清中出現(xiàn)高水平免疫球蛋白，但并無漿細(xì)胞惡性增殖的疾病。一般無臨床癥狀，往往因其它疾病就診時發(fā)現(xiàn)血中有M蛋白，但其并不呈進(jìn)行性增加，在少部分正常老年人群中也可出現(xiàn)上述情況。

三、惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別診斷惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別

四、冷球蛋白血癥冷球蛋白血癥：當(dāng)血中含有冷球蛋白時稱為冷球蛋白血癥

冷球蛋白（cryoglobulin）：指溫度低于30℃時易自發(fā)形成沉淀，加溫后又可溶解的免疫球蛋白

特點：

多見于某些原發(fā)性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度、紅細(xì)胞凝集、血栓形成等病理表現(xiàn)。常見癥狀有雷諾現(xiàn)象（即寒冷性肢端紫紺）、皮膚紫癜、壞死、潰瘍、寒冷性蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛、腎損害、神經(jīng)系統(tǒng)病變（如感覺麻木、運動障礙等）以及肝、脾等器官損害。五、重鏈病

重鏈病是突變的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的重鏈異常增多，導(dǎo)致血清重鏈過剩，致使血清和或尿中出現(xiàn)無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所引起的疾病。六、輕鏈病

輕鏈病是由于漿細(xì)胞發(fā)生突變和異常增殖，產(chǎn)生大量的輕鏈，血漿中輕鏈含量異常增加，過多的輕鏈在血清和尿中出現(xiàn)而引起的疾病。第三節(jié)單克隆丙種球蛋白病的檢測方法一、血清蛋白區(qū)帶電泳二、免疫球蛋白定量檢測三、免疫球蛋白的分類鑒定四、本周蛋白檢測五、冷球蛋白檢測一、血清蛋白區(qū)帶電泳血清區(qū)帶電泳是測定M蛋白的一種定性實驗，常采用醋酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。

M蛋白在電泳時出現(xiàn)于

～

區(qū)代中，不同類型的M蛋白的電泳后所處位置不同。血清蛋白電泳圖譜二、免疫球蛋白定量檢測免疫球蛋白定量測定較常用的方法有單向擴(kuò)散法與免疫比濁法，前者較為簡便，后者更為準(zhǔn)確迅速。

惡性單克隆丙種球蛋白病常呈現(xiàn)某一類丙種球蛋白的顯著增高。在良性丙種球蛋白病的血清標(biāo)本中，M蛋白的升高幅度一般不象惡性丙種球蛋白病那么高

單克隆免疫球蛋白病的預(yù)后判斷指標(biāo)三、免疫球蛋白的分類鑒定1、免疫電泳2、免疫選擇電泳3、免疫固定電泳1、免疫電泳：

免疫電泳是將瓊脂糖電泳和免疫雙向擴(kuò)散相結(jié)合的一項技術(shù)。血清標(biāo)本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶，繼而用特定的抗血清進(jìn)行免疫擴(kuò)散，陽性樣本的M蛋白將在適當(dāng)?shù)牟课恍纬僧惓３恋砘。鶕?jù)抗血清的種類、電泳位置及沉淀弧的形狀可以對M蛋白作出判定。正常及某些患者免疫電泳圖譜

上孔中為血清，下孔中為尿液，槽中為抗血清，箭頭所指為骨髓瘤蛋白a：抗正常人血清；b：抗IgG血清；c：抗IgA血清；d：抗IgM血清e：抗κ血清；f：抗λ血清A：IgA/λ型骨髓瘤；B：IgG/κ型骨髓瘤；C：IgG重鏈病2、免疫選擇電泳：

制備含抗κ或λ血清的薄層瓊脂板，打孔并加入待測標(biāo)本進(jìn)行火箭電泳，待形成相應(yīng)的火箭樣沉淀峰后，于孔的兩側(cè)各挖一槽，加入抗某類免疫球蛋白血清或另一型抗輕鏈血清，溫育擴(kuò)散后，根據(jù)沉淀弧形成的情況，進(jìn)行分析鑒定。免疫選擇電泳圖譜示意圖

瓊脂中含抗κ及抗λ抗血清，示例孔中為血清標(biāo)本，槽中為抗IgA重鏈抗血清A：正常人；B：α重鏈病；C：IgA骨髓瘤3、免疫固定電泳：

免疫固定電泳是血清區(qū)帶電泳與免疫沉淀反應(yīng)相結(jié)合的定性實驗。與免疫電泳比較免疫固定電泳具有更高的靈敏性，M蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界限明確的區(qū)帶，而多克隆增殖或正常血清

球蛋白區(qū)帶則比較彌散。IgG/λ型多發(fā)性骨髓瘤的免疫固定電泳圖譜四、本周蛋白檢測3.直接定量分析尿液透析濃縮50倍后進(jìn)行2.免疫固定電泳1.本周蛋白定性檢查(篩查)溶解(+)90℃沉淀標(biāo)本50℃~60℃五、冷球蛋白檢測冷球蛋白是血清中的一種特殊蛋白質(zhì)，在4℃時自發(fā)沉淀，加溫至37℃時又可溶解，故常利用這種可逆性冷沉淀的特性對其進(jìn)行測定。異常免疫球蛋白檢測的應(yīng)用原則

凡檢出無法解釋的免疫球蛋白異常增高，都應(yīng)建議做進(jìn)一步的檢查。初篩實驗：區(qū)帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測或尿本-周蛋白定性。確證實驗：免疫電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白亞型定量和血清及尿中輕鏈等檢測。免疫增殖性疾病是指由于淋巴細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化所導(dǎo)致的一組疾病。免疫球蛋白的