第二章 實(shí)驗(yàn)動物的分類課件

第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4基本內(nèi)容1．實(shí)驗(yàn)動物遺傳監(jiān)測的方法2．實(shí)驗(yàn)動物按微生物的分類及監(jiān)測。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4目的和要求1．掌握常用的遺傳檢測的主要方法。2．掌握實(shí)驗(yàn)動物按微生物的分類及監(jiān)測第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4重點(diǎn)和難點(diǎn)遺傳檢測的主要方法實(shí)驗(yàn)動物按微生物的分類實(shí)驗(yàn)動物的微生物監(jiān)測第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的遺傳監(jiān)測（P86）第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4實(shí)驗(yàn)動物的品系已經(jīng)達(dá)數(shù)千之多，在培育、保種和繁殖生產(chǎn)中，都有嚴(yán)格的要求，但由于影響遺傳變異的因素很多，在動物的培育、保種和繁殖生產(chǎn)過程中，仍然存在著發(fā)生遺傳變異或遺傳污染的可能。因此，必須對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行遺傳監(jiān)測，以保證實(shí)驗(yàn)動物的遺傳質(zhì)量。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4一遺傳監(jiān)測的目的為了保證各品系動物應(yīng)具有的遺傳特性，檢查是否發(fā)生遺傳突變、是否混入其他血緣動物以及是否發(fā)生錯誤交配而造成遺傳污染等，以確保被監(jiān)測對象符合該品系的要求。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4二遺傳特征的選擇原則遺傳監(jiān)測作為一項(xiàng)常規(guī)工作需要定期不斷進(jìn)行，所以有必要挑選一些遺傳特征，在節(jié)約人力和物力的情況下完成遺傳監(jiān)測；被挑選的遺傳特征應(yīng)均勻的分布于各條染色體，能概括整個動物基因組的情況，又要簡單易行。故遵循以下4E原則：第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4準(zhǔn)確（Exact）：要求所選擇的特征不受環(huán)境因素影響，重復(fù)性好，結(jié)果易于判別。有效（Efficient）：被選擇的特征要具有代表性，能有效地反應(yīng)出遺傳上的變化。簡便（Easy）：被選擇的特征應(yīng)該不需要較高的技術(shù)水平和復(fù)雜的操作步驟。經(jīng)濟(jì)（Economical）：監(jiān)測方法的儀器設(shè)備和化學(xué)試劑不宜過于昂貴。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4三遺傳檢測的主要方法（一）形態(tài)學(xué)的方法（二）免疫學(xué)方法（三）生化基因標(biāo)記法（四）遺傳方法第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4四遺傳監(jiān)測的實(shí)施（一）近交系1建立遺傳概貌遺傳概貌是指用各種方法和技術(shù)對各種品系的遺傳特性進(jìn)行檢測后的數(shù)據(jù)匯總。被檢測的遺傳特征多為質(zhì)量遺傳特征，一般分布在不同的染色體上。因此，遺傳概貌也可以說是品系基因標(biāo)記表型的匯總。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-42選擇差異性標(biāo)記經(jīng)常進(jìn)行檢查的基因標(biāo)記是根據(jù)現(xiàn)有品系的種類從遺傳概貌中選出的差異性標(biāo)記。這些差異性標(biāo)記盡可能分布在不同的染色體上，使其全面反應(yīng)動物遺傳組成的變化?！恫溉轭悓?shí)驗(yàn)動物遺傳標(biāo)準(zhǔn)》和《醫(yī)用實(shí)驗(yàn)動物監(jiān)測手冊》和《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物標(biāo)準(zhǔn)》中推薦小鼠13個生化標(biāo)記，大鼠7個生化標(biāo)記。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-43監(jiān)測周期及抽樣數(shù)目基礎(chǔ)群：每代都要檢測，凡在子代留有種鼠的雙親動物都要進(jìn)行檢測。生產(chǎn)群：每年進(jìn)行1～2次。雄性種鼠在100只以下，隨機(jī)抽取6只，大于100只，至少6只，雌雄各半。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-44檢測結(jié)果的判斷及處理方法遺傳監(jiān)測數(shù)據(jù)分析時，如被監(jiān)測品系的各個位點(diǎn)與遺傳概貌完全一致時，則可作出肯定的結(jié)論。當(dāng)有一個或多個位點(diǎn)不相符合時，則需要對這些變異作出分析，找出原因，及時處理。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4雜合型可能發(fā)生變異的原因近期發(fā)生遺傳變異近期發(fā)生遺傳污染一個新的亞系的發(fā)生早期發(fā)生遺傳污染早期發(fā)生遺傳變異純合型不相符的類型多于一個位點(diǎn)一個位點(diǎn)多于一個位點(diǎn)一個位點(diǎn)第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（二）遠(yuǎn)交系遠(yuǎn)交系的遺傳監(jiān)測的難度較大。（1）遺傳組成不如近交系動物穩(wěn)定，容易發(fā)生變化，不易于建立標(biāo)準(zhǔn)的遺傳概貌；（2）遺傳結(jié)構(gòu)常以基因頻率或數(shù)量遺傳參數(shù)來表示，這些以統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)的數(shù)值有一定的誤差范圍，對于遺傳組成上發(fā)生的細(xì)小變化難以判斷。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4從以下幾個方面進(jìn)行遺傳監(jiān)測：（1）形態(tài)學(xué)觀察毛色、體重、體型、下頜骨位點(diǎn)的測量、脂肪比等（2）繁殖性能離乳率、產(chǎn)仔率、仔鼠發(fā)育和胎間隔等。（3）血液學(xué)常數(shù)白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白數(shù)等。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（4）一些質(zhì)量遺傳性狀如生化位點(diǎn)標(biāo)記和免疫遺傳學(xué)標(biāo)記等。以上數(shù)據(jù)可看作遺傳概貌，每次監(jiān)測的個體不能少于50只才具有統(tǒng)計(jì)意義。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4第五節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的微生物學(xué)分類（P216）一分類通過微生物的監(jiān)測手段，按對微生物控制的凈化程度，把實(shí)驗(yàn)動物分為下例四類：普通動物（Conventionalanimals）清潔動物（Cleananimals）無特定病原體動物（Specificpathogen-freeanimals）無菌動物（Germfreeanimals）第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-41無菌動物（Germfreeanimals，GF）（1）定義機(jī)體內(nèi)、外不帶有任何現(xiàn)有方法可檢測出微生物和寄生蟲的動物。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（2）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和飼養(yǎng)條件無菌動物的所謂“無”不是絕對的，不過是根據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)知識和檢查方法在一定時期內(nèi)不能檢出已知的微生物和寄生蟲而已。飼養(yǎng)在隔離器內(nèi)，所用物品和飼料、飲水等都必須經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌，隔離器內(nèi)的空氣必須經(jīng)過超高效過濾器過濾。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4無菌動物的飼料、飲水必須符合下列要求：沒有活的微生物和寄生蟲或蟲卵，因此必須經(jīng)過充分的滅菌；必須補(bǔ)充因高壓滅菌而破壞的營養(yǎng)成分；無菌動物沒有腸道正常菌叢，飼料中還需補(bǔ)充這些細(xì)菌合成的營養(yǎng)成分；飼料的組成、形態(tài)和氣味等應(yīng)盡可能適合動物的習(xí)性和嗜好。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（3）應(yīng)用由于缺乏微生物的刺激，脾臟和淋巴結(jié)發(fā)育不良，是研究微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)研究中研究宿主和寄生蟲相互關(guān)系的絕好的實(shí)驗(yàn)動物；由于壽命長，因此用于老年學(xué)研究的動物模型；既無抗原，又無特異性抗體，處于一種免疫“原始狀態(tài)”，故適用于各種免疫學(xué)功能的研究。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-42無特定病原體動物(Speceficpathogenfreeanimals，SPF）（1）定義機(jī)體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在的動物，或在清潔動物的基礎(chǔ)上，不帶對實(shí)驗(yàn)有干擾的微生物,簡稱SPF動物。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（2）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和飼養(yǎng)條件來自無菌動物或悉生動物，亦可通過剖腹取胎（子宮切開術(shù)）后在屏障系統(tǒng)中由SPF乳母哺育得到。飼養(yǎng)在萬級凈化以上的屏障設(shè)施或隔離系統(tǒng)內(nèi)，設(shè)施內(nèi)的環(huán)境指標(biāo)按實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境與設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行嚴(yán)格的人工控制，所用物品需經(jīng)過消毒或滅菌，人員需經(jīng)過淋浴或風(fēng)淋后進(jìn)入，飼養(yǎng)的動物定期采樣檢測。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（3）應(yīng)用SPF動物由于排除了特定病原體（包括隱性感染或條件致病的病原體）的干擾，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。因此，被廣泛用于腫瘤免疫學(xué)、藥物學(xué)、毒理學(xué)、血清和疫苗制備，以及生物學(xué)鑒定等領(lǐng)域。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-43清潔動物(Cleananimals，CL)（1）定義機(jī)體內(nèi)外不攜帶人畜共患和主要傳染性疾病的病原體和體外寄生蟲的動物。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（2）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和飼養(yǎng)條件清潔級動物是按照我國國情而設(shè)立的等級動物，種群均應(yīng)來自SPF或無菌剖腹產(chǎn)動物。飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)設(shè)施中。墊料、飼料、用具均通過高壓消毒；飲用水須消毒或滅菌處理，如用城市飲用水須酸水（PH2.5~2.8），鼠籠上帶過濾帽，工作人員經(jīng)淋浴或穿干凈工作服、戴上口罩后經(jīng)風(fēng)淋入內(nèi)。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（3）應(yīng)用由于清潔級動物排除的微生物和寄生蟲遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于普通級動物，因此在實(shí)驗(yàn)中受動物疾病的干擾較少，實(shí)驗(yàn)中某些刺激引起的隱性感染機(jī)會也微乎其微；同時對實(shí)驗(yàn)的敏感性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性也較好。因此，清潔級動物目前在我國被廣泛用于科學(xué)研究、安全性評價(jià)和生物制品的生產(chǎn)等領(lǐng)域。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-44普通動物（Conventionalanimals）（1）定義無人畜共患病病原體和體外寄生蟲的動物。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（2）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和飼養(yǎng)條件是實(shí)驗(yàn)動物中微生物質(zhì)量控制上要求最低的動物。一般飼養(yǎng)在開放的衛(wèi)生環(huán)境里，墊料和飼料須經(jīng)過一定的清潔衛(wèi)生處理；飲水符合城市飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；外來動物須經(jīng)過嚴(yán)格的隔離檢疫；動物設(shè)施應(yīng)有防野鼠、昆蟲等設(shè)備；籠具和籠舍經(jīng)常性的保持清潔和衛(wèi)生等。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（3）應(yīng)用由于普通級動物易感染烈性傳染病，或者在采用普通級動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時，某些刺激因素可能誘發(fā)隱性感染動物發(fā)生顯性感染，并出現(xiàn)有關(guān)組織器官的結(jié)構(gòu)、生理、生化與免疫學(xué)改變，從而不同程度的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，這種動物一般用于教學(xué)和科研預(yù)實(shí)驗(yàn)用。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4根據(jù)新修訂的國家實(shí)驗(yàn)動物微生物、寄生蟲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，我國將實(shí)驗(yàn)大、小鼠分為三類即清潔級、無特定病原體級、無菌級（包括悉生動物）。其它品種實(shí)驗(yàn)動物仍然分為普通級、清潔級、無特定病原體級、無菌級（包括悉生動物）四級。即從2002年5月1日起取消了普通級大、小鼠標(biāo)準(zhǔn)。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4二實(shí)驗(yàn)動物的微生物和寄生蟲質(zhì)量監(jiān)測（一）監(jiān)測意義實(shí)施微生物和寄生蟲監(jiān)測是保證實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)化的必要手段。通過監(jiān)測可掌握動物群中病毒、細(xì)菌、寄生蟲的流行情況，及時診斷感染性疾病，發(fā)現(xiàn)并控制其傳播，以保證實(shí)驗(yàn)動物的健康。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（二）監(jiān)測內(nèi)容不同種類、不同級別實(shí)驗(yàn)動物的微生物和寄生蟲監(jiān)測內(nèi)容不同。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（三）檢驗(yàn)方法目前使用國際推薦的方法和詳細(xì)檢驗(yàn)程序。病原菌以分離培養(yǎng)鑒定為主；病毒以檢測抗體為主；寄生蟲以鏡檢為主。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4動物編號外觀檢查麻醉皮膚取樣取血無菌解剖檢測檢測報(bào)告（四）檢驗(yàn)程序健康、無異常真菌檢查分離血清，檢查病毒抗體或其他病原的抗體氣管分泌物、腸內(nèi)容物、臟器分離細(xì)菌第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-4（五）檢測規(guī)程1檢測頻率（1）普通動物：每3個月至少檢測動物1次。（2）清潔動物：每3個月至少檢測動物1次。（3）無特定病原體動物：每3個月至少檢測動物1次。（4）無菌動物：每年檢測動物1次。每2～4周檢查1次動物的生活環(huán)境標(biāo)本和糞便標(biāo)本。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-42取樣要求（1）個體的選擇：選擇成年動物用于檢測。（2）取樣方位：每一個生產(chǎn)繁殖單元的不同方位取樣，應(yīng)從四角和中央取樣?！瘛瘛瘛瘛竦诙聦?shí)驗(yàn)動物的分類-4（3）取樣數(shù)量：依據(jù)群體大小決定。群體<100，取樣不少于5只；

100～500，不少于10只；

>500，不少于20只。第二章實(shí)驗(yàn)動物的分類-43送檢送檢容器應(yīng)按動物級別編號、標(biāo)志，包括品種品系、級別、數(shù)量和檢測項(xiàng)目。4檢測項(xiàng)目的分類（1）必須檢測項(xiàng)目：進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)時必需檢測的項(xiàng)目。（2）必要時檢測項(xiàng)目：