4.3.3 液相色譜分析法

4.3.3液相色譜分析法采用液相色譜儀（法）(LiquidChromatography,LC)的一類食品分析技術(shù)。

色譜分離技術(shù)框圖

4.3.3.1高效液相色譜分析采用高效液相色譜儀（法）(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)的一種食品分析技術(shù)。WATERS-600HPLCWATERS-e2695HPLCAgilent1100HPLC高效液相色譜分離模式水溶劑

高效液相色譜法（HPLC）是20世紀(jì)60年代末，70年代初發(fā)展起來的一種新型分離分析技術(shù)，隨著不斷改進(jìn)與發(fā)展，目前已成為應(yīng)用極為廣泛的化學(xué)分離分析的重要手段。它是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上，引入了氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用了高壓泵、高效鍵合固定相和高靈敏度檢測器，因而具備速度快、效率高、操作自動化的特點(diǎn)。為了更好地了解高效液相色譜法優(yōu)越性，現(xiàn)從兩方面進(jìn)行比較：

高效液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法比較高效液相色譜法比起經(jīng)典液相色譜法的最大優(yōu)點(diǎn)在于高速、高效、高靈敏度、高自動化。高速是指在分析速度上比經(jīng)典液相色譜法快數(shù)百倍。由于經(jīng)典色譜是重力加料，流出速度慢；而高效液相色譜配備了高壓輸液設(shè)備，流速最高可達(dá)10mL/min。分離苯的羥基化合物，7個(gè)組分只需1min就完成。對氨基酸分離，用經(jīng)典色譜法，柱長約170cm，柱徑0.9cm，流動相速度為30cm3·h-1，需用20h才能分離出20種氨基酸；而用高效液相色譜法，只需1h之內(nèi)即可完成。如用25cm×4.6mm的Lichrosorb－ODS(5

m)的柱，采用梯度洗脫，可在不到0.5h內(nèi)分離出尿中104個(gè)組分。流動相驅(qū)動力來源不同氣相色譜法流動相的驅(qū)動力來源于高壓鋼瓶，高效液相色譜法流動相的驅(qū)動力來源于高壓泵。分離過程不同氣相色譜法的分離是根據(jù)混合組分在固定液中分配系數(shù)的不同，即分離效果主要取決于固定相對樣品中各組分的選擇性。惰性氣體流動相（N2，H2，He2）其作用主要是運(yùn)載樣品各組分進(jìn)入并通過色譜柱，然后進(jìn)入檢測器。通常它對組分分離影響很小。氣相色譜主要是通過更換固定相、改變柱溫來改善分離效果。與氣相色譜法不同，高效液相色譜法流動相對樣品中的組分具有一定的溶解能力，除運(yùn)載樣品中各組分通過色譜柱進(jìn)入檢測器外，還參與色譜分離過程；在液相色譜中除通過改變固定相來改善分離效果外，通常用改變流動相來改善分離。因?yàn)榱鲃酉嘟M成可以靈活多變，使用不同比例的流動相可得到完全不同的分離。高效液相色譜法與氣相色譜法比較柱箱溫度范圍不同

氣相色譜一般都在較高溫度（＞150℃）下進(jìn)行，液相色譜的柱溫受流動相沸點(diǎn)的限制，通常在室溫或高于室溫（

70℃）的條件下測定，分離后還能保持待測物質(zhì)分子原有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不被破壞。利用制備液相色譜儀，收集分離各組分的餾分、蒸餾后可以獲得克級被分離物質(zhì)或其代謝物純品。色譜柱長不同液體的粘度比氣體的粘度通常大2～3個(gè)數(shù)量級，所以液相色譜的柱長通常不超過25cm，而氣相色譜可采用長柱，填充柱長度為0.5～3m，石英毛細(xì)管柱長可達(dá)30~60m。速率理論方程參數(shù)項(xiàng)不同液體是不可壓縮，而氣體可壓縮，氣相色譜中與載氣體積有關(guān)的參數(shù)都必須進(jìn)行校正，才能用液相色譜法中。如范第姆特VanDeemter方程H=A+B/u+Cu,分子擴(kuò)散項(xiàng)B/u則可忽略不計(jì)，簡化為理論塔板高H=A+Cu。洗脫模式不同被測物質(zhì)在液體中的擴(kuò)散系數(shù)比在氣體中小4～5個(gè)數(shù)量級，所以在高效液相色譜中，必須特別注意柱外效應(yīng)對分離的不良影響，即溫度對分離的影響。溫度低一些能提高分離度，但需要更多一些分析時(shí)間；溫度高些能降低分離度，但加快了分析速度，因此在實(shí)際分析過程中要綜合考慮以上兩個(gè)因素。液固色譜和液液色譜中，溫度恒定是極為重要的，因?yàn)闇囟鹊母淖?，會產(chǎn)生不均勻吸附和不均勻分配，因此液相色譜法不采用程序升溫洗脫模式而采用梯度洗脫模式。進(jìn)樣量不同痕量分析時(shí)液相色譜法通常進(jìn)樣幾十微升，最多100

L。氣相色譜法除頂空分析外，液體樣品填充柱通常進(jìn)樣幾微升，F(xiàn)PD最多10

L；毛細(xì)管柱進(jìn)樣量1~2

L。分析對象范圍有所不同

氣相色譜法分析對象只限于分析氣體和沸點(diǎn)較低的化合物，它們僅占有機(jī)物總數(shù)的20％。對于占有機(jī)物總數(shù)近80％的那些高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、摩爾質(zhì)量大的物質(zhì)，目前主要采用高效液相色譜法進(jìn)行分離和分析。采用直接的分析方法，如不對分析對象進(jìn)行衍生處理，氣相色譜法只適合分析分子量小于600，熱穩(wěn)定性好，極性小的化合物。高效液相色譜法已經(jīng)適合分析除氣體樣品以外的幾乎所有的化合物。

總之，高效液相色譜法是吸取了氣相色譜與經(jīng)典液相色譜優(yōu)點(diǎn)，并用現(xiàn)代化手段加以改進(jìn)，因此得到迅猛的發(fā)展。目前高效液相色譜法已被廣泛應(yīng)用于食品分析，例如蛋白質(zhì)、肽、核酸、氨基酸、多糖類、脂肪酸類、維生素類、有機(jī)酸類、食品添加劑類等物質(zhì)的分離和分析，還有農(nóng)藥、獸藥殘留分析。高效液相色譜法的分析成本較高（流動相、色譜柱等），分析時(shí)間周期較長，普及率最高的紫外檢測器需要待測物分子結(jié)構(gòu)中具有生色團(tuán)，這些是它的主要不足。HPLC分離的機(jī)理固定相(StationaryPhase)流動相(MobilePhase)進(jìn)樣(Injection)洗脫(Elution)相互作用(Interaction)反相和正相分配色譜法的區(qū)別反相正相固定相極性極性小或中等具體：C18等極性大或中等具體：氨基等流動相極性極性大或中等具體：水、甲醇等極性小或中等具體：己烷等樣品洗脫次序極性強(qiáng)先出來非極性先出來增加流動相極性的效果增加洗脫時(shí)間降低洗脫時(shí)間高效液相色譜儀高效液相色譜儀流程1-貯液器2–攪拌、超聲脫氣器3–梯度洗脫裝置4–高壓輸液泵5–流動相流量顯示6–柱前壓力表7–輸液泵泵頭8–過濾器9–阻尼器10–六通進(jìn)樣閥11–色譜柱12–檢測器13–記錄儀(或數(shù)據(jù)處理裝置)14–回收廢液罐高效液相色譜儀流程示意圖高效液相色譜儀一般可分為5大系統(tǒng)：高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)控制及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。此外還配有輔助裝置：如梯度洗脫，也叫梯度淋洗，自動進(jìn)樣及數(shù)據(jù)處理等。其工作過程如下：首先高壓泵將貯液器中流動相溶劑經(jīng)過進(jìn)樣器送入色譜柱，然后從檢測器的出口流出。當(dāng)注入欲分離的樣品時(shí)，流經(jīng)進(jìn)樣器的流動相將樣品同時(shí)帶入色譜柱進(jìn)行分離，然后依先后順序進(jìn)入檢測器，記錄儀將檢測器送出的信號記錄下來，由此得到液相色譜圖。由于高效液相色譜所用固定相顆粒極細(xì)，因此對流動相阻力很大，為使流動相較快流動，必須配備有高壓輸液系統(tǒng)。它是高效液相色譜儀最重要的部件，一般由儲液罐、高壓輸液泵、過濾器、壓力脈動阻力器等組成，其中高壓輸液泵是核心部件。對于一個(gè)好的高壓輸液泵應(yīng)符合密封性好，輸出流量恒定，壓力平穩(wěn)，可調(diào)范圍寬，便于迅速更換溶劑及耐腐蝕等要求。常用的輸液泵分為恒流泵和恒壓泵兩種。恒流泵特點(diǎn)是在一定操作條件下，輸出流量保持恒定而與色譜柱引起阻力變化無關(guān)；恒壓泵是指能保持輸出壓力恒定，但其流量則隨色譜系統(tǒng)阻力而變化，故保留時(shí)間的重現(xiàn)性差，它們各有優(yōu)缺點(diǎn)。目前恒流泵正逐漸取代恒壓泵。恒流泵又稱機(jī)械泵，它又分機(jī)械注射泵和機(jī)械往復(fù)泵兩種，應(yīng)用最多的是機(jī)械往復(fù)泵?！罡邏狠斠合到y(tǒng)：高效液相色譜高壓輸液系統(tǒng)老式高效液相色譜儀采用新款高效液相色譜儀采用貯液器耐腐蝕，玻璃、聚醚醚酮（PEEK）材料。0.5~2L，入罐前過濾。濾膜流動相：流動相是影響分離的一個(gè)重要調(diào)節(jié)因素。一種理想的液相色譜流動相溶劑應(yīng)具有低粘度，檢測器兼容性好，樣品容易回收和低毒等特性。正相高效液相色譜法流動相常以己烷做基礎(chǔ)溶劑。當(dāng)洗脫極性較強(qiáng)的組分時(shí)，通常用二氯甲烷、四氫呋喃來調(diào)節(jié)極性。反相高效液相色譜法采用的流動相多為甲醇、乙腈配合水。一般情況下甲醇–水體系能夠滿足多數(shù)樣品的分離要求。流動相選擇注意事項(xiàng)：純度：采用“HPLC”級溶劑避免使用會引起柱效損失或保留特性變化的溶劑對試樣有適宜的溶解度溶劑粘度要小與檢測器相匹配2星期1天1星期1小時(shí)新鮮配制5101520250t/min保存于聚乙烯瓶中的超純水測試條件水樣:40mltraceenrichment@2.0ml/min色譜柱:C18

反相柱(Waters)梯度:線性100%水－100%乙腈波長:254nm1天1星期新鮮配制5101520250t/min保存于棕色玻璃瓶中的超純水測試條件水樣:40mltraceenrichment@2.0ml/min色譜柱:C18

反相柱(Waters)梯度:線性100%水－100%乙腈波長:254nm水水是反相高效液相色譜法最重要的溶劑，它也是最難純化和保持其特性的流動相之一。水的純度至關(guān)重要，特別是在痕量分析，檢測器處于高靈敏度狀態(tài)時(shí)。長時(shí)間使用純度滿足不了要求的水，有時(shí)會出鬼峰。水的純化可以采用蒸餾、離子交換等方法。水中有機(jī)物可以用高錳酸鉀或通過一根C18柱去除。水中容易滋生微生物，一定要用新鮮的，最好每天換水，更換時(shí)間最長也不要超過7d。電蒸餾水或去離子水必須至少在全玻璃系統(tǒng)下重蒸餾一次才能上機(jī)使用?？梢圆捎孟铝谐绦驒z驗(yàn)水的純度：首先泵100mL水通過C18柱，然后跑一個(gè)線性梯度洗脫，流速1mL/min，10min流動相甲醇從0升到100%，保持15min，通過一個(gè)在線紫外檢測器測定。如果在0.08AUFS檔位基線漂移小于10%，幾乎不出峰，即使出峰其峰高也小于滿刻度值3~5%。18.2MΩ。在使用電化學(xué)或其他高靈敏度檢測器時(shí)，二次蒸餾設(shè)備需要采用全石英玻璃系統(tǒng)。水GB/T6682-2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ISO3696：1987，MOD）

一級水：可用于HPLC。二級水石英設(shè)備蒸餾后過濾（0.22

m

）制得；二級水：可用于AAS。多次蒸餾或離子交換法制得；三級水：可用于化學(xué)容量分析；沖洗玻璃器皿。蒸餾或離子交換法制得。電熱法制備三級水純玻璃裝置蒸餾制備二級水超純水制備技術(shù)（聯(lián)合使用）

1反滲透（RO膜），蠕動泵加壓，離子被截留；

2電去離子（EDI），電場吸引離子去除；

3過離子交換樹脂柱，電荷吸引去除。超純水制備儀純水制備儀乙腈這是反相高效液相色譜常用的溶劑，實(shí)驗(yàn)室常用的只能滿足紫外檢測器的需要。這樣的試劑很難符合熒光和電化學(xué)檢測器的要求。甲醇反相高效液相色譜常用的溶劑之一，其雜質(zhì)主要是水。市面上能夠買到紫外光譜純的商品，但它的主要問題也是有些特性滿足不了熒光和電化學(xué)檢測分析。氯代烴類溶劑在正相高效液相色譜中常用的二氯甲烷等氯代烴類溶劑中，添加穩(wěn)定劑甲醇或乙醇。乙醇能夠提高流動相的極性，縮短正相高效液相色譜分析中各組分的保留時(shí)間。各批次之間濃度的變化也許會影響重復(fù)性。國內(nèi)市場上可能不容易買到不含穩(wěn)定劑的氯代烴類溶劑，但是可以用氧化鋁柱吸附的辦法或者用水萃取脫掉。不含穩(wěn)定劑的氯代烴類溶劑可以緩慢的分解，特別是與其他溶劑共存時(shí)。分解的鹽酸會腐蝕不銹鋼部件，損害色譜柱。以戊烯為穩(wěn)定劑的氯代烴類溶劑可避免上述產(chǎn)生的問題。乙腈或甲醇，%9075502510水，%1025507590乙腈水混后溫度（℃）7.87.29.412.614.4甲醇水混后溫度（℃）19.422.424.221.617.8室溫（℃）15.4改性劑、離子對試劑、離子對探針試劑的概念改性劑----加入流動相中能改變分離性能的少量試劑或溶劑。如乙酸、磷酸和磷酸二氫鉀等。離子對試劑----加入流動相中能與待測離子生成離子對化合物的反離子試劑。如脂肪胺等。離子對探針----加入流動相中能與待測離子生成具有紫外吸收性能的離子對化合物的反離子試劑。如苯胍、二苯胍等。本實(shí)驗(yàn)室的發(fā)現(xiàn)。表5-10常用流動相改性劑的性質(zhì)化合物熔點(diǎn)/℃沸點(diǎn)/℃pKapH值緩沖范圍揮發(fā)性通常使用濃度三氟乙酸-15.472.40.30有0.02-0.1%甲酸100.73.75有0.1-1.0%乙酸116.04.75有0.1-1.0%碳酸6.37有氨水-33.49.25有甲胺-6.310.66有乙胺16.610.81有三乙胺89.311.019.7~11.7有0.1-1.0%甲酸銨116分解3.0~5.0有1~10mmol/L乙酸銨112分解3.8~5.8有1~10mmol/L碳酸氫銨106（升華）10.3（HCO32-）；9.2（NH4+）8.2~11.3有磷酸鹽1※2.151.15~3.15無紫外透光性好磷酸鹽2※※7.26.20~8.20無常用流動相改性劑的性質(zhì)測定陰離子測定陽離子疏水性脂肪胺系列：羧酸系列：

增加乙胺五氟丙酸丙胺七氟丁酸丁胺九氟戊酸戊胺十五氟辛酸己胺十三氟庚酸季胺系列：磺酸系列：

增加四甲基氫氧化銨丁烷磺酸四乙基氫氧化銨戊烷磺酸四丙基氫氧化銨己烷磺酸四丁基氫氧化銨庚烷磺酸常用的離子對試劑離子對探針試劑二苯胍的化學(xué)結(jié)構(gòu)式離子對試劑正丁胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)式采用生色團(tuán)離子對試劑（離子對探針）通常稱為間接光度色譜法；對于不具有紫外吸收的離子，實(shí)現(xiàn)了采用普及率高的紫外檢測器測定；離子對探針篩選難度大，方法優(yōu)化工作量大。目前理想通用的離子對探針試劑有二苯胍、苯胍。反相色譜溶劑強(qiáng)度圖四氫呋喃

水乙腈

水甲醇

水洗脫能力增強(qiáng)流動相前處理：過濾：0.45

m或更小孔徑濾膜

目的：除去溶劑中的微小顆粒，避免堵塞色譜柱，尤其是使用無機(jī)鹽配制的緩沖液。脫氣：目的：除去流動相中溶解或因混合（甲醇和水）而產(chǎn)生的氣泡方法：◎超聲波振蕩+抽真空：5min+5min

◎吹氦氣法（鼓泡法）：氦氣在流動相中的溶解度比空氣低，可以將溶解的氣體驅(qū)逐出去。脫氣效果好，但成本高。在0.5MPa的壓力下，先以100ml/min，鼓泡15min，然后以20ml/min保持著?！?/p>

在線脫氣器:膜過濾器。溶解在流動相中的氣體可以從膜中被真空脫出，而液體不會從膜中出來。脫氣效果最好。氣泡對測定的影響：

●柱流量不準(zhǔn)

●檢測器基線波動

●氧會使熒光猝滅脫氣注意點(diǎn)：

●每天脫氣(無在線脫氣器時(shí)）

●混合溶劑脫氣時(shí)間不能過長1–高壓輸液泵2–貯液器3–膜過濾器4–塑料膜管線（體積12mL，氣體可滲透出來）5–傳感器6–控制電路7–電磁閥8–真空泵9–脫氣后流動相至過濾器10–脫氣單元

高效液相色譜儀在線脫氣結(jié)構(gòu)示意圖高壓輸液泵要求：◎泵體耐化學(xué)腐蝕。使用優(yōu)質(zhì)耐酸不銹鋼（Cr18Ni2Mo2）◎能在高壓下連續(xù)工作。40~50MPa?！蜉敵隽髁糠秶鷮??！蜉敵隽髁糠€(wěn)定，重復(fù)性高。WATERS600高壓輸液系統(tǒng)WATERSe2695高壓輸液系統(tǒng)H-Class超高壓輸液系統(tǒng)主動閥MPa(兆帕)(N/m2)PSI(磅/英寸2)(b/in2)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓（atm）毫米汞柱(托Torr)(0℃,mmHg)巴(bar)公斤力/厘米2(kgf/cm2)1145.0389.8697500.621010.197常用壓力單位換算表控制方式：

恒流控制:恒流泵有注射型泵和往復(fù)泵，后者廣泛采用。優(yōu)點(diǎn)：組分保留時(shí)間重現(xiàn)性好。

缺點(diǎn)：壓力有脈動；柱塞直接與流動相接觸；長期運(yùn)載，單向閥易堵塞。

恒壓控制：恒壓泵。恒流泵泵封外徑1cm單向閥結(jié)構(gòu)球座吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭拋光面寶石球流動相單向閥原理柱塞桿泵封或稱密封墊單向閥單向閥柱塞指示桿梯度洗脫裝置所謂的梯度洗脫，就是將兩種或兩種以上的不同極性的溶劑進(jìn)行混合，作為流動相使用。在進(jìn)樣過程中，連續(xù)不斷地按預(yù)先擬定的程序改變流動相的比例（極性）。由于流動相極性發(fā)生變化，使得選擇性得以改善，從而提高了分離能力，縮短了分離時(shí)間。常用的梯度洗脫有低壓洗脫、高壓洗脫。高壓梯度裝置是用高壓泵分別將兩種或三種不同極性的溶劑輸入混合器，充分混合后進(jìn)入色譜柱。多元低壓梯度洗脫只需要一個(gè)高壓泵，而多元高壓梯度洗脫就需要多個(gè)高壓泵。典型的高壓梯度洗脫程序低壓梯度和高壓梯度洗脫裝置示意圖低壓梯度洗脫高壓梯度洗脫主流技術(shù)☆☆進(jìn)樣系統(tǒng)：

高效液相色譜柱比氣相色譜柱短得多（約5～30cm），所以柱外展寬（又稱柱外效應(yīng)）較突出。柱外展寬是指色譜柱外的因素所引起的峰展寬，主要包括進(jìn)樣系統(tǒng)、連接管道及檢測器中存在死體積。柱外展寬可分柱前和柱后展寬。進(jìn)樣系統(tǒng)是引起柱前展寬的主要因素，因此高效液相色譜法中對進(jìn)樣技術(shù)要求較嚴(yán)。

WATERS600手動進(jìn)樣器進(jìn)樣器自動進(jìn)樣器手動進(jìn)樣器定量管（10

L，20

L，50

L，100

L）原理：（六通閥）注入方式：

1）全量注入

2）部分注入（定量重現(xiàn)性差）

裝填狀態(tài)進(jìn)樣狀態(tài)手動進(jìn)樣器的原理圖裝填狀態(tài)進(jìn)樣狀態(tài)Rheodyne（羅丹尼）7125i

六通進(jìn)樣閥羅丹尼閥自動進(jìn)樣系統(tǒng)H-Class自動進(jìn)樣系統(tǒng)e2695自動進(jìn)樣系統(tǒng)☆☆☆分離系統(tǒng)：色譜柱是液相色譜的心臟部件，它包括柱管與固定相兩部分。柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他金屬。玻璃管耐壓有限，故金屬管用得較多。一般色譜柱長5～30cm，內(nèi)徑為4～5mm，凝膠色譜柱內(nèi)徑3～12mm，制備柱內(nèi)徑較大，可達(dá)25mm以上。一般在分離前備有一個(gè)前置柱，前置柱內(nèi)填充物和分離柱完全一樣，這樣可使淋洗溶劑由于經(jīng)過前置柱為其中的固定相飽和，使它在流過分離柱時(shí)不再洗脫其中固定相，保證分離性能不受影響。柱子裝填得好壞對柱效影響很大。對于細(xì)粒度的填料（＜20μm）一般采用勻漿填充法裝柱，先將填料調(diào)成勻漿，然后在高壓泵作用下，快速將其壓入裝有洗脫液的色譜柱內(nèi)，經(jīng)沖洗后，即可備用。柱箱分析結(jié)果重現(xiàn)性好提高柱效降低柱壓保證檢測穩(wěn)定性

柱溫控制的優(yōu)點(diǎn)：WATERS600柱箱WATERSe2695柱箱H-ClassUPLC-柱箱色譜柱化學(xué)鍵合固定相硅烷化鍵合（Si-O-Si-R型）,適用于反相色譜柱酯化鍵合（Si-O-R型），適用于正相色譜柱硅膠結(jié)構(gòu)示意圖硅膠甲基雜化顆粒示意圖（一代）亞乙基橋雜化（BEH）顆粒示意圖（二代）在硅膠聚合物中嵌入亞乙基橋鍵液相色譜填料顆粒度變化的趨勢可換芯式保護(hù)柱保護(hù)柱柱芯柱套各種高效液相色譜柱高效液相色譜柱包裝盒1–柱管2–壓帽3,6–卡套4–篩板5–接口7–螺絲8–輸液管柱結(jié)構(gòu)示意圖管路內(nèi)徑對色譜峰拓展的影響切割PEEK管線的工具一些商品牌號的液相色譜柱

類型填料規(guī)格（柱長/內(nèi)徑，mm）反相柱HypersilODS-2(C18),5

m250×4.6HypersilC18–BDS,3

m150×4.6InertsilCN-3,5

m250×4.6KromasilC18,5

m250×4.6BetasilC18,5

m150×4.6XTerraMSC18,2.5

m150×3.0Shim–packVP-ODS,5

m150×4.6ZorbaxExtendC18,5

m150×4.6SunFireC18,5

m250×4.6SymmetryShieldRP8,5

m150×3.9XTerraRP18,5

m150×3.9AtlantisT3,5

m250×4.6XBridgeBEHC8,3.5

m250×4.6XSelect

CSHC18,3.5

m100×3.0XSelectHSSFluoro-PhenylXP,2.5μm75×4.6類型填料規(guī)格（內(nèi)徑/柱長，mm）正相柱HypersilCN(CPS-1),5

m4.6×250HypersilNH2(APS-1),5

m4.6×250ZorbaxNH2,5

m4.6×250ZorbaxRx-SIL,5

m4.6×250SpherisorbAmino(NH2),3

m4.6×100SpherisorbCyano(CN),5μm4.0×250μBondapakAmino(NH2),10μm3.9×300AtlantisSilicaHILIC,5μm3×100Nova-PakSilica,4μm3.9×150XBridgeBEHHILIC,3.5μm4.6×100各種固定相鍵合示意圖C18柱填料C18柱填料C18柱填料C8柱填料各種固定相鍵合示意圖苯基柱填料氰基柱填料氨基柱填料ODS柱與C18柱的區(qū)別一般認(rèn)為C18是連接了十八烷基碳鏈的反相固定相的總稱。除了硅膠基質(zhì)外，還可以包括其他基質(zhì)的填料，比如高聚物小球?yàn)榛|(zhì)，氧化鋁為基質(zhì)，氧化鋯為基質(zhì)等鍵合C18鏈形成的反相固定相。而ODS是以硅膠為基質(zhì)鍵合的C18填料。由于大部分的C18柱是硅膠基質(zhì)，因此，在很多場合內(nèi)二者混為一談。RP柱，BDS柱，MS柱

RP柱：內(nèi)嵌了酰胺極性基團(tuán)的在100％的水相條件下對極性化合物有極高保留的C18柱。適用于分離超高極性化合物。在100％水做流動相時(shí)可保持穩(wěn)定。BDS柱：BaseDeactivedSilica，堿鈍化硅膠柱。特別適合于強(qiáng)極性含氮的堿性化合物分離。MS柱：超低流失，適用于液質(zhì)分析用。XP柱，CHS柱，HSS柱，HILIC柱

XP柱：通常是指粒徑為2.5

m一類色譜柱，可兼容于HPLC和UPLC系統(tǒng)的操作。

CHS柱：是指表面帶正電荷的雜化顆粒技術(shù)制造的色譜柱。據(jù)資料介紹，只使用0.1%甲酸水溶液，不用離子對試劑就可以進(jìn)行離子對色譜分析。

HSS柱：是指高強(qiáng)度，耐高壓的一類硅膠柱。HILIC柱：親水作用色譜柱。是一種采用極性固定相、以高濃度極性有機(jī)溶劑和低濃度水溶液為流動相的色譜分離模式，能提高質(zhì)譜檢測的靈敏度。水是強(qiáng)洗脫劑，加大乙腈比例可使極性組分保留值加大，適于分析極性化合物或極性代謝物。1）柱壓低于15MPa2）柱溫在40℃左右，最高使用溫度為50℃3）緩沖液pH使用范圍為2～7色譜柱使用注意事項(xiàng)：*硅膠在pH為3～4時(shí)穩(wěn)定性最好*堿濃度越低，流動相含水量越低，硅膠越穩(wěn)定。4）沖洗與保存柱床損壞、部分阻塞及處理☆☆☆☆檢測系統(tǒng)：

在液相色譜中，有兩種基本類型的檢測器。一類是溶質(zhì)性檢測器，它僅對被分離組分的物理或化學(xué)特性有響應(yīng)，屬于這類檢測器的有紫外、熒光、電化學(xué)檢測器等。另一類是總體檢測器，它對試樣和洗脫液總的物理或化學(xué)性質(zhì)有響應(yīng)，屬于這類檢測器的有示差折光，電導(dǎo)檢測器等。檢測器的種類

◎紫外檢測器（包括二極管陣列檢測器）◎熒光檢測器◎示差折光率檢測器◎電導(dǎo)檢測器◎蒸發(fā)光散射檢測器規(guī)

格UVFLDEChELSD類型專用專用通用通用梯度洗脫能能不能能線性范圍104105105106最小檢出量(g)10-1110-1410-810-9對流速敏感性無無有無對溫度敏感性低低2%，℃低信號單位吸光度，A熒光度電導(dǎo)率

s/cm光散射液相色譜檢測器性能一覽表

△紫外可見光檢測器

（Ultraviolet-visibleDetector，UV）原理：基于被分析組分對特定波長紫外光的選擇性吸收定量基礎(chǔ)：比耳定律，A＝KCL優(yōu)點(diǎn)：1）對溫度和流速不敏感

2）可用于梯度洗脫光源：氘燈與鎢燈組合缺點(diǎn)：僅適用于測定有紫外吸收的物質(zhì)WATERS2998紫外檢測器紫外檢測器的溶劑影響不同種類溶劑有其截止波長溶劑的質(zhì)量好壞對其截止波長有影響為何溶劑質(zhì)量不好?含紫外吸收的雜質(zhì)溶解在其中的氧氣緩沖液溶質(zhì)的紫外吸收注意定期清洗亦稱PDA(Photo-DiodeArray),21世紀(jì)標(biāo)準(zhǔn)紫外檢測器（實(shí)質(zhì)是色譜與光譜的聯(lián)用，有一定的定性價(jià)值）253nm0.435色譜定性依據(jù)：保留時(shí)間常規(guī)紫外檢測器

峰純度二極管陣列檢測器二極管陣列檢測器(diode-arraydetector,DAD)1）采集三維譜圖2）峰純度檢驗(yàn)3）光譜庫檢索4）可以發(fā)現(xiàn)單波長檢測時(shí)未測到的峰二極管陣列檢測器的優(yōu)點(diǎn)：光電二極管陣列檢測器示意圖靈敏度及分辨率的同時(shí)提高分辨率：1.2nm噪音：±1.510-5AU氙燈氘燈轉(zhuǎn)動譜圖牽引點(diǎn)莠去津三維譜圖食品添加劑除草劑莠去津二維色譜圖及紫外吸收光譜圖A/AU

△△示差折光檢測器(differential

refractometerditector，DRD)原理：連續(xù)測定流通池中溶液折射率來測定試樣各組分濃度。優(yōu)點(diǎn)：通用型檢測器缺點(diǎn)：1）對溫度變化敏感

2）不能進(jìn)行梯度洗脫蔗糖CAS57-50-1示差折光檢測示意圖工作原理許多化合物有光致發(fā)光現(xiàn)象，熒光屬于其中的一種?；衔锸艿饺肷涔獾恼丈浜?，吸收輻射能，發(fā)出比吸收波長長的特征輻射，當(dāng)入射光停止照射時(shí)，特征輻射也很快消失，這種輻射光線就是熒光（＜10-8s）。熒光產(chǎn)生的實(shí)質(zhì)是原子中電子由最低振動能級下降到基態(tài)中的某些不同能級的能量釋放。被化合物吸收的光稱為激發(fā)光，產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光。熒光的波長總要比分子吸收的紫外光波長長，這種光一般是可見光。對于稀溶液，熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)溶液濃度、摩爾吸光系數(shù)、吸收池厚度、入射光強(qiáng)度、熒光量子效率及熒光收集效率等成正相關(guān)，在相對條件下，物質(zhì)的熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)溶液濃度成正比，這是熒光檢測器的定量依據(jù)?！鳌鳌鳠晒鈾z測器(fluorescencedetector，F(xiàn)LD)結(jié)構(gòu)一臺熒光檢測器包括以下基本部件：激發(fā)光源；選擇激發(fā)波長用的單色器；流通池；選擇發(fā)射波長用的單色器及用于檢測發(fā)光強(qiáng)度的光電檢測器。由氙燈光源發(fā)出的光，經(jīng)激發(fā)光單色器后，得到所需要的激發(fā)光波長。激發(fā)光通過樣品流通池，一部分光線被熒光物質(zhì)吸收。熒光物質(zhì)激發(fā)后，向四面八方發(fā)射熒光。為消除入射光與散射光的影響，一般要取與激發(fā)光成直角的方向測量熒光。近年來，還出現(xiàn)一種激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其主要區(qū)別是光源采用了激光器。熒光檢測器示意圖黃曲毒素B1CAS1162-65-8熒光檢測器示意圖代謝產(chǎn)生氙燈或激光工作原理電化學(xué)檢測器是根據(jù)電化學(xué)原理和物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行檢測的。在液相色譜中對那些沒有紫外吸收或不能發(fā)出熒光但具有電活性的化合物，可采用電化學(xué)檢測法。電化學(xué)檢測器在痕量分析上主要有安培檢測器和電導(dǎo)檢測器。前者是以測量電解電流的大小為基礎(chǔ)，后者則以測量液體的電阻變化為根據(jù)。△△△△電化學(xué)檢測器(EChD)安培檢測器(amperometricdetector，AMD)電化學(xué)檢測器中應(yīng)用最廣泛的一種檢測器。它要求在電解池中發(fā)生電解反應(yīng)，即在外加電壓的作用下，利用待測物質(zhì)在電極表面上發(fā)生氧化還原反應(yīng)引起電流的變化而進(jìn)行測定的一種方法。它的工作電極是安培檢測器的心臟，通常用玻璃碳材料制成，參比電極一般為Ag/AgCl電極，輔助電極為不銹鋼或金、白金材料。三電極安培檢測器示意圖電導(dǎo)檢測器

(conductivedetector，CD)

CD與安培檢測器不同，電導(dǎo)檢測池內(nèi)沒有電化學(xué)反應(yīng)發(fā)生，樣品的濃度是通過測量溶液中離子的電導(dǎo)變化獲得的。電導(dǎo)檢測器主要是用于離子分析。該檢測器在實(shí)際使用中對水、淋洗液有較嚴(yán)格的要求，離子分析時(shí)一般整個(gè)流路系統(tǒng)都用PEEK材料，避免不銹鋼材料對淋洗液產(chǎn)生影響或淋洗液對不銹鋼材料的腐蝕。電導(dǎo)池在使用前后發(fā)現(xiàn)有污染時(shí)，可用1:1硝酸溶液處理數(shù)分鐘，以消除污染。在分析過程中，要注意溫度對電導(dǎo)率的影響，一般每升高1℃，電導(dǎo)率會增加(2~2.5)%。電導(dǎo)檢測器原理示意圖△△△△△蒸發(fā)光散射檢測器evaporative

light-scatterdetector，ELSD1985年世界上第一臺蒸發(fā)光散射檢測器問世，它標(biāo)志著高效液相色譜儀通用型質(zhì)量檢測器的誕生。工作原理當(dāng)一束光線通過一間充滿煙霧的房間就會發(fā)生光散射現(xiàn)象。在一定的角度測得的光散射強(qiáng)度與煙霧粒子大小和數(shù)量成正比，這就是ELSD定量分析的原理。原理上講它可以檢測揮發(fā)性低于流動相的所有化合物。經(jīng)色譜柱分離的組分隨流動相進(jìn)入霧化器中，利用高速氣流噴成一薄霧，霧化為微小液滴的流動相進(jìn)入加熱的蒸發(fā)器(漂移管)蒸發(fā)，不揮發(fā)的目標(biāo)化合物微?；筮M(jìn)入光路發(fā)生光散射，散射光被光電倍增管捕獲檢測。

ELSD檢測器結(jié)構(gòu)示意圖霧化部分蒸發(fā)部分檢測部分☆☆☆☆☆

計(jì)算機(jī)控制及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)高效液相色譜數(shù)據(jù)處理單元：島津CLASSWATERSEmpowerPro中文版色譜工作站液相色譜分析條件的選擇高效液相色譜法操作條件的選擇應(yīng)遵循色譜理論，主要包括兩個(gè)方面的問題，即色譜柱效率和溶劑效率。柱效率是指溶質(zhì)通過色譜柱之后峰的寬度增加了多少，它與溶質(zhì)在兩相中的擴(kuò)散及傳質(zhì)情況有關(guān)，這就是所謂的色譜動力學(xué)過程；溶劑效率是與兩個(gè)物質(zhì)和固定相、流動相的分子間作用力不同有關(guān)，這就是所謂的熱力學(xué)過程。要提高柱效率，就得改善色譜柱性能和操作條件；要提高溶劑效率，就得提高固定相的選擇性。乙腈甲醇四氫呋喃（穩(wěn)定劑2,6-二叔丁基對甲酚出峰）水（黏度大，樣品易水解）二甲基甲酰胺（堿性較強(qiáng)）樣品溶劑的選擇溶解度穩(wěn)定性黑色-C18

柱

紅色-CN基柱色譜柱的選擇青島某企業(yè)送檢樣，樣品名稱：間二苯酚。麥芽糖般柔軟，不溶于水、甲醇、乙腈。CAS108-46-3結(jié)構(gòu)式：用途：防腐劑。醫(yī)藥、染料合成中間體。HPLC-DADC18，250mm×3.9mm，5

m甲醇:水=60:400.8mL/minGC-FIDAC-10，60m×0.25mm×1

m流動相種類的選擇甲醇∶水=80∶20乙腈∶水=80∶20乙腈∶水=65∶35CAS21282-97-3流動相比例的選擇（水的比例太大）HPLC-DADC18柱面積歸一：98.15%HPLC-DADCN柱面積歸一：93.45%HPLC-DADCN面積歸一：79.20%提取波長：217nmHPLC-DADCN面積歸一：93.45%提取波長：200nm固定液碳鏈長短對分離的影響采用反相鍵合相C1、C8、C18對以下6種化合物進(jìn)行分離?？梢钥闯?，隨著碳鏈增加，保留時(shí)間明顯增加，分離度明顯提高。(色譜條件：IBM柱200×4.5mm；流動相：

Ψ（CH3OH∶H2O）=50∶50；流速：1.0mL/min；檢測波長：254nm。)1-尿嘧啶2-苯酚3-乙酰苯4-硝基苯5-苯甲酸甲酯6-甲苯反相液相色譜固定液碳鏈長度對分離的影響對異構(gòu)體的分離氯氰菊酯有8種同分異構(gòu)體，如果采用一根柱子無法將其全部異構(gòu)體分開。若再與一根手性柱串聯(lián)使用，就可以分開全部異構(gòu)體，見圖4.2.29。(色譜條件：左圖Chirex3019(Phenomenex)柱，250×4.0mm；右圖Chirex3019柱+Chirex3020(Phenomenex)柱；流動相：Ψ（己烷∶二氯甲烷∶乙醇）=500∶10∶0.05，流速：1.0mL/min；檢測波長：230nm。)氯氰菊酯8種同分異構(gòu)體的分離1-對氨基苯磺酸

2-磺胺甲基嘧啶

3-磺胺異惡唑

4-磺胺嘧啶pH值對反相色譜法分離的影響4種磺胺藥物在pH1.25~10范圍內(nèi)的分離。在pH1.25~3.0時(shí)磺胺異惡唑不穩(wěn)定，沒有流出。pH5.0~7.0流出就發(fā)生了。pH9.0有很好的分離，pH10.0分離很差。(色譜條件：ODS柱150×4.6mm，5

m；流動相：Ψ（20mMKH2PO4∶CH3CN）=95∶5，流速：1.0mL/min；檢測波長：270nm。)pH值對分離的影響流速變化對保留時(shí)間的影響上圖：0.4ml/min中圖：

0.8ml/min下圖：

1.2ml/min流動相比例變化對保留時(shí)間的影響填料細(xì)度對分析時(shí)間的影響在相同的流速下，不同的柱長，填料粒徑減小，保留時(shí)間縮短。壓力隨粒徑變細(xì)顯著地增高。(色譜條件：C18填料，色譜柱a，300×4.6mm×10m,640psi；色譜柱b，150×4.6mm×5m,1770psi；色譜柱c，75×4.6mm×3m,2540psi；流動相：Ψ（CH3OH∶H2O）=60∶40，

流速：1.0mL/min)1-苯酚2-乙酰苯3-硝基苯4-苯甲酸甲酯5-苯甲醚6-苯7-甲苯

色譜柱填料細(xì)度對分離時(shí)間的影響高效液相色譜儀工作環(huán)境的要求

HPLC的日常操作條件：溫度：10～30℃；相對濕度<80％；最好是恒溫、恒濕，遠(yuǎn)離高電磁干擾、高振動設(shè)備，有良好的通風(fēng)設(shè)施。4.3.3.2超高效液相色譜法基于小顆粒技術(shù)（1.7

m）超高分離度超高靈敏度超高速M(fèi)S理想的接口方法轉(zhuǎn)換簡單采用超高效液相色譜儀（法）（UltraPerformance

LiquidChromatography，UPLC）的一種食品分析技術(shù)。Waters公司于2004年3月正式推出商品化儀器ACQUITYUPLC。UPLC（續(xù)）超高壓（＞15000psi,約103MPa）系統(tǒng)。

HPLC壓力﹤30MPa儀器系統(tǒng)體積小要求高速檢測器進(jìn)樣濃度不宜太高，樣品最好要超高速離心目前造價(jià)昂貴eCore分析柱保護(hù)柱HPLC與UPLC對同一樣品產(chǎn)生不同分離效果的比較UPLCHPLCt/min壓力：5.4MPa壓力：33MPa4.3.3.3離

子

色

譜

分析采用離子交換色譜儀（法）(IonChromatography,IC)的一種食品分析技術(shù)。

屬于液相色譜分析，是利用色譜技術(shù)測定離子型物質(zhì)的方法。離子色譜是陰離子和短碳鏈有機(jī)酸分析的首選方法，已成為常規(guī)的分析化學(xué)手段之一。離子色譜基本不用有機(jī)溶劑。只使用低濃度鹽或酸的水溶液，相對安全、環(huán)保。離子色譜法基本原理及概述

離子型物質(zhì):在水溶液中電離，具有

+或–電荷的元素或基團(tuán)。陰離子：Ｃｌ－，ＮＯ2－，ＳＯ４２－，ＣｒＯ４２－陽離子：Ｎａ＋，ＮＨ４＋，Ｃａ２＋，Ｆｅ３＋

1975由H.

Small等人（Dowchemical)

發(fā)表第一篇IC論文提出用于測定氯離子和硫酸根的方法。HamishSmall發(fā)明了離子色譜抑制器2003年，HamishSmall與牟世芬研究員離子色譜的特點(diǎn)

操作相對簡單容易，樣品分析重現(xiàn)性好經(jīng)過稀釋、過濾后可以測定多種樣品

多價(jià)態(tài)可氧化元素（NO2-&NO3-,SO32-&SO42-etc.）,

不同價(jià)態(tài)離子（Fe3+&Fe2+,

Cr3+&Cr6+

etc.）

可單獨(dú)測定某種離子，也可同時(shí)測定多種離子防止色譜柱和抑制器被污染離子色譜儀的類型抑制型（有第二支柱）非抑制型（淋洗液濃度低，柱短，可測定硅酸鹽、碳酸根等）無需更換系統(tǒng)，陰陽離子交錯(cuò)或同時(shí)分析離子色譜儀的基本流程圖淋洗液

泵色譜柱檢測器泵液分離檢測

記錄與數(shù)據(jù)處理F-NO3-SO42-Cl-NO2-Br-HPO42-六通閥抑制器（第二柱）檢測池進(jìn)樣保護(hù)柱定量管六通閥進(jìn)樣器自身再生式抑制器分析柱保護(hù)柱電導(dǎo)檢測器電動六通閥馬達(dá)液相色譜分離的類型離子排斥：離解常數(shù)和疏水性離子對(RP)：對離子對試劑的親和力

離子對化合物的疏水性離子抑制

：在特定pH下的疏水性反相液相：疏水性離子交換：

離子價(jià)態(tài)和離子半徑

ＳＯ３－ＳＯ３－ＳＯ３－ＳＯ３－Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３Ｎ＋Ｒ３陰離子交換樹脂(乳膠型）５μm＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋

ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＣＯＯ－ＨＰＯ３－ＨＰＯ３－ＨＰＯ３－ＨＰＯ３－ＨＰＯ３－ＨＰＯ３－ＨＰＯ３－陽離子交換樹脂(接枝型)檢測方式電導(dǎo)

檢測具有電導(dǎo)性化合物的通用型檢測器離子色譜最常用的檢測器電化學(xué)(安培法)

在特定的條件下可對某些化合物直接進(jìn)行氧化還原反應(yīng)紫外－可見光度法紫外直接吸收或可見光光度法測定選擇性強(qiáng)

可進(jìn)行柱后衍生抑制器安裝在電導(dǎo)池之前

提高待測離子的電導(dǎo)率，改善信噪比：

提高靈敏度Na+,

Cl-

H+,

Cl-

降低背景電導(dǎo)(淋洗液):

減少噪音Na+,

HCO3-

H2CO3Na+,

OH-

H2O抑制器的作用廢液BackGround：Na2CO3/NaHCO3

(700μS)NaF,NaCl,NaNO3Na2HPO4,Na2SO4～～RetentiontimeConductivityNaFNaClNaNO3Na2HPO4Na2SO4BackGround：Na2CO3/NaHCO3

(700μS)～～RetentiontimeConductivityHFHClHNO3H3PO4H2SO4RetentiontimeBackGround：H2CO3(15μS)ConductivityCSRS陽離子抑制器ASRS陰離子抑制器Y+Na+

抑制器的工作原理(陰離子)X-:

樣品中的陰離子Y+:

樣品中的陽離子H2OH2OOH-Na+Y+H2ONa+Y+

X-

Na+CO32-(樣品,淋洗液)H+H++CO32-H++X-

至檢測器H2CO3H+X-H+

+O2H2OH2

+OH-H2ONa+OH-,H2H2O,O2廢液廢液電極（－）電極（＋）純水或來自檢測器的流體

H+H+H+H+陽離子交換膜陽離子交換膜H2OH2OH+

+O2H2OH2

+OH-H2O廢液/氣體廢液H2OSO42-Y+

X-H+MSA-(樣品e,淋洗液）OH-OH-MSA-SO42-X-OH-MSA-SO42-X-H+MSA-,O2H2O,H2H++OH-Y++OH-

H+

抑制器的工作原理(陽離子)

至檢測器H2OY+OH-X-:

樣品中的陰離子Y+:

樣品中的陽離子電極（＋）電極（－）陰離子交換膜陰離子交換膜純水或來自檢測器的液體

鉑網(wǎng)電極—電解水產(chǎn)生氫離子和氫氧根離子國內(nèi)暫時(shí)還無法生產(chǎn)網(wǎng)離子交換膜許多國家、國際組織將離子色譜法作為標(biāo)準(zhǔn)方法中國：GB飲用天然礦泉水水檢測方法；美國：USEPA（USEnv.ProtectAgency）；

ASTM（AmericaSocietyforTestingandMaterials）；

ISO

（InternationalOrganizationforStandardization）。

應(yīng)用領(lǐng)域電力冷卻水

/HPW

鍋爐蒸汽中的雜質(zhì)食品

/飲料

酒/飲料/糖果

飲料中有機(jī)酸造紙./紙漿

紙漿液?處理水

紙和液體中的離子農(nóng)業(yè)肥料

/土壤/植物

/等

土壤中離子醫(yī)學(xué)血液

/尿

尿中草酸化妝品化妝品

/清潔劑/洗發(fā)液

化妝品液體中的陰離子制藥化學(xué)

/液體

化學(xué)品中的重金屬領(lǐng)域環(huán)境./污染

雨水/河水/大氣/污水

雨水中離子城市用水自來水

/水源

自來水中消毒副產(chǎn)物樣品應(yīng)用化學(xué)品設(shè)備提取物

/聚合物

環(huán)氧類粘合劑中的陰離子電子/半導(dǎo)體

高純水?晶片沖洗水

高純水中的離子型雜質(zhì)金屬/鋼材

表面處理液?鍍槽?冷卻水

電鍍槽中的抗壞血酸

離子色譜法的應(yīng)用分離陰離子Column：IonPac

AG12A/AS12A

Eluent

：

2.7mMNa2CO3

0.3mMNaHCO3

Flowrate：1.2mL/minDetection：Conductivity(ASRSRecyclemode)

0246810121416Retentiontime(min)08mSF-NO3-SO42-Cl-NO2-Br-H2PO4-水的系統(tǒng)峰☆分離無機(jī)鹽（離子）Column:IonPacCS12A,

CG12AEluent:20mM

MethanesulfonicacidFlowrate:1.0mL/minDetection:Conductivity

（CSRSRecycle

mode)分離陽離子02468101214Retentiontime(min)01234Na+NH4+K+Mg2+Ca2+μS水的系統(tǒng)峰☆離子色譜分析時(shí)產(chǎn)生的系統(tǒng)峰（亦稱負(fù)峰、倒峰）

抑制型離子色譜