高三生物一輪復(fù)習(xí)課件第十二單元 動(dòng)物細(xì)胞工程_第1頁
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文檔簡介

第2節(jié)

動(dòng)物細(xì)胞工程

第1課時(shí)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)第十二單元細(xì)胞工程目錄任務(wù)二繪制概念圖,構(gòu)建本節(jié)內(nèi)容框架任務(wù)三簡述干細(xì)胞的應(yīng)用任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及過程導(dǎo)入M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物(物種A)的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示。2021年湖南高考真題改編如何培養(yǎng)成纖維細(xì)胞?使用說明:在此課題中通過2021年湖南高考真題將《動(dòng)物細(xì)胞工程》這節(jié)內(nèi)容串聯(lián)?;A(chǔ)知識(shí)通過問題串的形式引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行回顧,而相關(guān)技術(shù)的流程,借助題目背景與課本知識(shí)讓學(xué)生繪制流程圖,形成對(duì)動(dòng)物細(xì)胞工程相關(guān)技術(shù)的完整認(rèn)識(shí)。任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及過程活動(dòng)1、閱讀教材43-44頁,完成下列問題動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。1.如何保證充足的營養(yǎng)?2.如何確保無菌、無毒的環(huán)境?3.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)對(duì)溫度、pH等有何種要求?4.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞需要何種氣體環(huán)境?使用說明:通過問題串的方式引導(dǎo)學(xué)生回顧已學(xué)的“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件”的相關(guān)知識(shí)。所設(shè)置的問題來源于課本上的基礎(chǔ)知識(shí),學(xué)生可通過閱讀教材提煉知識(shí)回答這些問題,同時(shí)在學(xué)案中有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行填空,所以未在PPT上呈現(xiàn)答案。任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及過程活動(dòng)2、歸納總結(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及過程活動(dòng)3、閱讀教材44頁,思考如何進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),并完成以下問題1.為什么要將動(dòng)物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)?2.如何將動(dòng)物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?3.當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間之后,會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞分裂受阻的現(xiàn)象,可能由什么原因引起的?4.可通過什么手段避免細(xì)胞分裂受阻?5.什么是原代培養(yǎng)、什么是傳代培養(yǎng)?6.如何進(jìn)行傳代培養(yǎng)?使用說明:通過問題串的方式引導(dǎo)學(xué)生回顧已學(xué)的“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件”的相關(guān)知識(shí)。所設(shè)置的問題來源于課本上的基礎(chǔ)知識(shí),學(xué)生可通過閱讀教材提煉知識(shí)回答這些問題,同時(shí)在學(xué)案中有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行填空,所以未在PPT上呈現(xiàn)答案。任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及過程活動(dòng)4、參考教材45頁的圖2-12,用流程圖構(gòu)建培養(yǎng)動(dòng)物(物種A)的成纖維細(xì)胞的過程思考:物種A中的幼齡動(dòng)物的細(xì)胞與老齡動(dòng)物的細(xì)胞比較,分化程度低的細(xì)胞與分化程度高的細(xì)胞比較,哪些細(xì)胞更易于培養(yǎng)?為什么?

提示:細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān),幼齡動(dòng)物的細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,老齡動(dòng)物的細(xì)胞則相反。所以,一般來說,幼齡動(dòng)物的細(xì)胞比老齡動(dòng)物的細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣,分化程度越低的細(xì)胞,增殖能力越強(qiáng),所以更容易培養(yǎng)。取動(dòng)物成纖維細(xì)胞所在組織分散成單個(gè)細(xì)胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)培養(yǎng)液原代培養(yǎng)使用說明:過渡方式——有沒有既能分裂又能分化的細(xì)胞呢?任務(wù)二簡述干細(xì)胞的應(yīng)用活動(dòng)1、閱讀教材46頁關(guān)于干細(xì)胞的介紹,完成下面表格的填寫種類胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源_________骨髓、臍帶血等體細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞等)特點(diǎn)能分化成任何一種細(xì)胞、組織或器官,甚至成為_______分化成________________________________能誘導(dǎo)分化成類似

的細(xì)胞應(yīng)用分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元和造血干細(xì)胞等造血干細(xì)胞用于治療白血病,神經(jīng)干細(xì)胞用于治療帕金森病、阿爾茨海默病等治療鐮狀細(xì)胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等早期胚胎個(gè)體特定的細(xì)胞或組織胚胎干細(xì)胞任務(wù)二簡述干細(xì)胞的應(yīng)用活動(dòng)2、分析下列材料,解釋干細(xì)胞發(fā)揮的作用阿爾茨海默病(AD)是一種起病隱匿的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,是老年癡呆的主要類型。AD其中一個(gè)病理改變是神經(jīng)細(xì)胞外以β-淀粉樣蛋白(Aβ)為主沉積形成老年斑(Sp)間充質(zhì)干細(xì)胞可以在骨髓和臍帶血中分離,在特定的條件下分化成神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞等。研究人員將磷脂酰膽堿特異性磷脂酶C的特異性抑制劑D609誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞,并將誘導(dǎo)后的細(xì)胞植入AD小鼠模型中,觀察到移植后的小鼠β-淀粉樣蛋白沉積減少和記憶力增強(qiáng)。干細(xì)胞的作用?用于治療神經(jīng)系統(tǒng)退行性和神經(jīng)組織損傷疾病若某病人未保留臍帶血,也無法從骨髓當(dāng)中獲得間充質(zhì)干細(xì)胞,可以通過怎樣的方式獲取間充質(zhì)干細(xì)胞呢?使用說明:該資料的參考文獻(xiàn)在備注中,可適當(dāng)進(jìn)行刪減或補(bǔ)充任務(wù)二簡述干細(xì)胞的應(yīng)用活動(dòng)3、閱讀教材46頁以及圖2-14,構(gòu)建獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的流程圖取該病人的體細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞)iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)入相關(guān)轉(zhuǎn)化因子細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化所需細(xì)胞(例如神經(jīng)細(xì)胞)轉(zhuǎn)入相關(guān)物質(zhì)細(xì)胞發(fā)生分化討論:不違背倫理道德的前提下,應(yīng)用iPS細(xì)胞進(jìn)行醫(yī)學(xué)治療的優(yōu)點(diǎn)?提示:①獲取胚胎干細(xì)胞需從胚胎中獲取,涉及倫理問題;iPS的誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎。②iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)任務(wù)三構(gòu)建概念圖動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。

:無菌、無毒的環(huán)境、適宜的氣體環(huán)境、適宜的溫度、pH和滲透壓

取組織制成細(xì)胞懸液→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)

干細(xì)胞的培養(yǎng)及應(yīng)用(如iPS的制備)概念:培養(yǎng)條件培養(yǎng)過程:應(yīng)用:1.源于選擇性必修3P44“?”:進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用胰蛋白酶分散細(xì)胞,這說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶行嗎?提示:用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。

胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時(shí),胃蛋白酶就會(huì)失去活性。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性,所以用胃蛋白酶不行。教材拾遺1.(2024·浙江·高考真題)某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時(shí),需分裝培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)操作過程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離 B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度 D.整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行B課堂訓(xùn)練解析:A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離,A正確;B.②加培養(yǎng)液,多次加培養(yǎng)液先洗去殘留的消化酶,然后終止消化液的消化作用,并對(duì)細(xì)胞加以稀釋,B錯(cuò)誤;C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度,因?yàn)槿裘芏冗^大細(xì)胞直接仍存在接觸抑制,C正確;D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌無毒環(huán)境,因此整個(gè)過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行,D正確。故選B。2.(2023·遼寧·高考真題)大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞,可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B.用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C.當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的增殖D.培養(yǎng)基pH不會(huì)影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量D課堂訓(xùn)練解析:A.懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞,可以保證足夠的氣體交換,通過振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi),可有效避免接觸抑制,A正確;B.由于細(xì)胞的生長是比較復(fù)雜的過程,血清中含有一些必須的因子,用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清,B正確;C.病毒借助于細(xì)胞進(jìn)行繁殖,利用了活細(xì)胞的物質(zhì)、能量、酶等,當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)細(xì)胞的生命活動(dòng)受到影響,會(huì)影響細(xì)胞的增殖,C正確;D.細(xì)胞的正常生命活動(dòng)需要適宜的pH,培養(yǎng)基pH會(huì)影響細(xì)胞代謝,進(jìn)而影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量,D錯(cuò)誤。故選D。第2節(jié)

動(dòng)物細(xì)胞工程

第2課時(shí)

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體第十二單元細(xì)胞工程遵義市高中生物學(xué)2025屆一輪復(fù)習(xí)課例目錄任務(wù)二分析探討單克隆抗體的應(yīng)用任務(wù)三概述單克隆抗體的制備過程任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞融合的過程繪制概念圖,構(gòu)建本節(jié)內(nèi)容框架任務(wù)四導(dǎo)入獲得的這批克隆動(dòng)物易感染某種病原體X,為了能夠高效治療此類疾病,可通過注射抗病原體X的抗體。為了快速獲得大量抗X抗體,研究人員制備針對(duì)該病原體X的單克隆抗體。如何獲得既能大量增殖,又能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞呢?2021年湖南高考真題改編1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理?2.動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法?3.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義?4.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的常見應(yīng)用?任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞融合的過程活動(dòng)1、閱讀教材48頁,完成關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的相關(guān)問題動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù):使兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。使用說明:通過問題串的方式引導(dǎo)學(xué)生回顧已學(xué)的“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件”的相關(guān)知識(shí)。所設(shè)置的問題來源于課本上的基礎(chǔ)知識(shí),學(xué)生可通過閱讀教材提煉知識(shí)回答這些問題,同時(shí)在學(xué)案中有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行填空,所以未在PPT上呈現(xiàn)答案。任務(wù)一闡明動(dòng)物細(xì)胞融合的過程活動(dòng)2、現(xiàn)有克隆動(dòng)物A的骨髓瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)材料,構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞融合的流程圖(只考慮兩兩細(xì)胞融合)實(shí)際操作中如何①獲得分泌特定抗X抗體的B淋巴細(xì)胞?

②如何篩選特定的雜交瘤細(xì)胞?取克隆動(dòng)物A的骨髓瘤細(xì)胞取克隆動(dòng)物A的B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞

融合細(xì)胞B淋巴細(xì)胞+B淋巴細(xì)胞

融合細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞+B淋巴細(xì)胞

融合細(xì)胞誘導(dǎo)融合使用說明:以“導(dǎo)入”中使用的題目背景為例,引導(dǎo)學(xué)生使用圖文結(jié)合的方式強(qiáng)化動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的操作過程。任務(wù)二概述單克隆抗體的制備過程活動(dòng)1、閱讀教材49頁,思考并完成以下問題1.如何獲得分泌特定抗體的B淋巴細(xì)胞?2.如何將篩選特定的雜交瘤細(xì)胞?3.如何進(jìn)行第一次篩選,其目的是?4.如何進(jìn)行第二次篩選,其目的是?5.如何獲得大量特定的雜交瘤細(xì)胞?使用說明:通過問題串的方式引導(dǎo)學(xué)生回顧已學(xué)的“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件”的相關(guān)知識(shí)。所設(shè)置的問題來源于課本上的基礎(chǔ)知識(shí),學(xué)生可通過閱讀教材提煉知識(shí)回答這些問題,同時(shí)在學(xué)案中有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行填空,所以未在PPT上呈現(xiàn)答案。B淋巴細(xì)胞及同型融合細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞及同型融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞任務(wù)二概述單克隆抗體的制備過程活動(dòng)2、分析下列資料,闡明第一次篩選中使用特定培養(yǎng)基的原理:1.細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。2.人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但不能分裂增殖。

3.鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑,沒有S途徑,但能不斷分裂增殖。篩選出雜交瘤細(xì)胞方法?不能無限增殖,死亡不能無限增殖,死亡能無限增殖,生長培養(yǎng)基中加入氨基蝶呤任務(wù)二概述單克隆抗體的制備過程活動(dòng)3、分析下列資料,闡明第二次篩選的原理:將經(jīng)過第一次篩選之后的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)并稀釋之后,將培養(yǎng)液滴入96孔板的每個(gè)孔中,每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。出現(xiàn)什么結(jié)果表明獲得了能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤細(xì)胞任務(wù)二概述單克隆抗體的制備過程活動(dòng)4、參照教材49頁的圖2-16,用文字加箭頭構(gòu)建抗X單克隆抗體的制備過程B淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1多種雜交瘤細(xì)胞符合要求的雜交瘤細(xì)胞抗原-抗體雜交法

篩選2克隆化體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體使用說明:以“導(dǎo)入”中使用的題目背景為例,引導(dǎo)學(xué)生使用圖文結(jié)合的方式強(qiáng)化制備單克隆抗體技術(shù)的操作過程。任務(wù)三分析探討單克隆抗體的應(yīng)用活動(dòng)1、結(jié)合教材50頁的“思考·討論”,分析下列資料探討單克隆抗體的應(yīng)用資料1.赤羽病病毒(AKV)是一種經(jīng)過節(jié)肢動(dòng)物傳播的病毒,引起了牲畜不明原因的流產(chǎn)、早產(chǎn)、死產(chǎn)以及先天性關(guān)節(jié)彎曲、積水性無腦畸形等,2021年曾在我國東北出現(xiàn)赤羽病大面積流行,對(duì)畜牧業(yè)造成嚴(yán)重影響。N蛋白是赤羽病病毒的其中一種結(jié)構(gòu)蛋白,通過制備針對(duì)N蛋白的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)診斷,有利于及早進(jìn)行治療。單克隆抗體作為診斷試劑使用說明:選擇該資料的原因是常在練習(xí)題中見到該情境,查閱文獻(xiàn)獲得詳細(xì)信息,幫助學(xué)生理解。該資料的參考文獻(xiàn)在備注中,也可以使用課本P50的資料1任務(wù)三分析探討單克隆抗體的應(yīng)用活動(dòng)1、結(jié)合教材50頁的“思考·討論”,分析下列資料探討單克隆抗體的應(yīng)用資料2.抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞,分析下圖說明其機(jī)制。細(xì)胞凋亡①ADC被細(xì)胞吞噬②⑤ADC抗體藥物接頭單克隆抗體運(yùn)載藥物,治療疾病使用說明:在學(xué)案上有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行回答,可通過引導(dǎo)學(xué)生分析圖,獲得ADC的治療機(jī)制。任務(wù)四構(gòu)建概念圖動(dòng)物細(xì)胞融合概念原理誘導(dǎo)方法應(yīng)用1.

源于選擇性必修3P48“相關(guān)信息”:

滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力,但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。教材拾遺與生物學(xué)有關(guān)的職業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)工程師1.(2020·北京·高考真題)人體感染新冠病毒后,機(jī)體會(huì)產(chǎn)生多種特異性抗體。我國科學(xué)家從康復(fù)者的漿細(xì)胞中克隆出針對(duì)病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列,構(gòu)建表達(dá)載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達(dá),可制備出全人源單克隆抗體。以下表述錯(cuò)誤的是(

)A.該單抗可直接用于新冠病毒的核酸檢測(cè)B.在該單抗制備過程中利用了基因工程技術(shù)C.該單抗可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合D.可用抗原-抗體反應(yīng)檢測(cè)抗體基因表達(dá)產(chǎn)物A課堂訓(xùn)練解析:A.單抗檢測(cè)病毒是否存在的原理是抗原―抗體雜交,檢測(cè)病毒蛋白;直接檢測(cè)新冠病毒核酸是分子雜交,檢測(cè)是否含有病毒的核酸,所以抗體不能直接檢測(cè)核酸,A錯(cuò)誤;B.題意顯示,我國科學(xué)家從康復(fù)者的漿細(xì)胞中克隆出針對(duì)病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列,構(gòu)建表達(dá)載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達(dá),制備出全人源單克隆抗體。據(jù)此可推測(cè),在該單抗制備過程中利用了基因工程技術(shù),B正確;C.針對(duì)新冠病毒表面抗原制備出的單抗,可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合,C正確;D.抗體基因表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)的方法是采用抗原―抗體雜交反應(yīng),若呈陽性,則說明已翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì),D正確。2.(2023·北京·高考真題)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,有關(guān)制備過程的敘述不正確的是()A.需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D.篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞D課堂訓(xùn)練解析:A.單克隆抗體制備過程中需要對(duì)骨髓瘤細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng),即需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),A正確;B.該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,故應(yīng)用PTH刺激小鼠,使其產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞,B正確;C.抗原與抗體的結(jié)合具有特異性,可利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞,C正確;D.由于一種B細(xì)胞經(jīng)分化形成漿細(xì)胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體,故篩選出的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞無法分泌多種抗體,D錯(cuò)誤。第2節(jié)

動(dòng)物細(xì)胞工程

第3課時(shí)

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物第十二單元細(xì)胞工程遵義市高中生物學(xué)2025屆一輪復(fù)習(xí)課例目錄任務(wù)二概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題任務(wù)三闡明動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程任務(wù)一闡明動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理繪制概念圖,構(gòu)建本節(jié)內(nèi)容框架任務(wù)四導(dǎo)入2021年湖南高考真題改編M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所示。什么是核移植技術(shù)?任務(wù)一闡明動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理活動(dòng)1、閱讀教材52-53,思考并回答下列問題動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù):是指將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。1.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的理論基礎(chǔ)(原理)是什么?2.克隆動(dòng)物屬于有性生殖還是無性繁殖?3.為什么體細(xì)胞核移植較胚胎細(xì)胞核移植更困難?4.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?使用說明:通過問題串的方式引導(dǎo)學(xué)生回顧已學(xué)的“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件”的相關(guān)知識(shí)。所設(shè)置的問題來源于課本上的基礎(chǔ)知識(shí),學(xué)生可通過閱讀教材提煉知識(shí)回答這些問題,同時(shí)在學(xué)案中有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行填空,所以未在PPT上呈現(xiàn)答案。任務(wù)一闡明動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理活動(dòng)2、閱讀資料,思考為什么選取去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞?資料:體細(xì)胞克隆的供體細(xì)胞是高度分化的體細(xì)胞,具有高度特異的DNA修飾和組蛋白修飾,以此來維持體細(xì)胞的細(xì)胞特性。由于克隆胚胎的發(fā)育依賴于體細(xì)胞的細(xì)胞核,所以當(dāng)供體細(xì)胞核被放置到成熟的去核卵母細(xì)胞中時(shí),供體細(xì)胞核必須經(jīng)過重編程,抹去分化狀態(tài)的細(xì)胞記憶,激活對(duì)早期胚胎發(fā)育具有重要作用的基因,如多能性基因、抑制與分化相關(guān)的基因,從而使得體細(xì)胞獲得發(fā)育的全能性。而激活因子在MⅡ期的卵母細(xì)胞中含量較高。任務(wù)二闡明動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程活動(dòng)1、參照教材53頁的圖2-18,構(gòu)建獲取克隆動(dòng)物A的過程采集動(dòng)物A卵母細(xì)胞,在體外培養(yǎng)到MⅡ期從供體身上取成纖維細(xì)胞顯微操作

去核對(duì)體細(xì)胞

進(jìn)行培養(yǎng)去核的卵母細(xì)胞供體細(xì)胞電融合法將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞重構(gòu)胚用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚,使其完成

細(xì)胞分裂和發(fā)育早期胚胎將胚胎移入受體(代孕)母體內(nèi)生出與供體A動(dòng)物遺傳物質(zhì)基本相同的克隆動(dòng)物A早期胚胎培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)任務(wù)二闡明動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程活動(dòng)2、閱讀教材53頁,并結(jié)合構(gòu)建的獲取克隆動(dòng)物A的流程圖,思考并完成以下問題1.如何將供體細(xì)胞細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中?這種方式的優(yōu)點(diǎn)是?2.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?3.根據(jù)克隆動(dòng)物A的產(chǎn)生過程,其有幾個(gè)親本?探究克隆動(dòng)物A的性狀表現(xiàn)與這幾個(gè)親本的關(guān)系并分析原因。使用說明:通過問題串的方式引導(dǎo)學(xué)生回顧已學(xué)的“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件”的相關(guān)知識(shí)。所設(shè)置的問題來源于課本上的基礎(chǔ)知識(shí),學(xué)生可通過閱讀教材提煉知識(shí)回答這些問題,同時(shí)在學(xué)案中有相關(guān)位置讓學(xué)生進(jìn)行填空,所以未在PPT上呈現(xiàn)答案。體細(xì)胞核移植任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題活動(dòng)1、分析下列資料概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景資料1.應(yīng)用:畜牧生產(chǎn)——加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題活動(dòng)1、分析下列資料概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景應(yīng)用:醫(yī)藥衛(wèi)生——①通過建立轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞系,再利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)許多珍貴的醫(yī)用蛋白;資料2.任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題活動(dòng)1、分析下列資料概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景資料3.2013年,Tachibana等獲得了第一例人的核移植胚胎干細(xì)胞。隨后,更多的實(shí)驗(yàn)室相繼報(bào)道獲得了健康成年人、糖尿病及老年性黃斑變性病人體細(xì)胞來源的核移植胚胎干細(xì)胞。眾所周知,核移植胚胎干細(xì)胞在人類中的研究能為組織和器官功能失調(diào)或受損的患者提供干細(xì)胞新來源。這種干細(xì)胞可以更新和替換損壞了的細(xì)胞或組織,可為上百萬的患者減緩病情。應(yīng)用:醫(yī)藥衛(wèi)生——②治療人類疾病,避免免疫排斥反應(yīng)任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題活動(dòng)1、分析下列資料概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景資料4.豬被認(rèn)為是重要的哺乳動(dòng)物模型,其在解剖、生理、器官大小、器官發(fā)育、營養(yǎng)代謝、基因表達(dá)、疾病發(fā)展過程等多方面與人類,是人類理想的疾病動(dòng)物模型。2000年,第一批體細(xì)胞克隆豬的出生,預(yù)示著克隆技術(shù)可以用來生產(chǎn)與現(xiàn)存優(yōu)質(zhì)育種豬供體細(xì)胞基因相同的后代。應(yīng)用:科研領(lǐng)域——①研究克隆動(dòng)物可以使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程;②克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)物,可以通過它們之間的對(duì)比來分析致病基因③克隆特定疾病模型的動(dòng)物,還能為研究該疾病的致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題活動(dòng)1、分析下列資料概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景資料5.我國科學(xué)家于2022年6月成功克隆北極狼應(yīng)用:保護(hù)瀕危物種,有望增加瀕危物種的存活數(shù)量任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存在的問題活動(dòng)2、分析下列資料探討體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題資料1.經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)克隆胚胎體內(nèi)發(fā)育至出生效率低,例如豬的出生率大約在0.5%~1%左右。在克隆胚胎中,由滋養(yǎng)層細(xì)胞分化形成的胎盤經(jīng)常存在異常狀態(tài),胎盤異常幾乎是所有克隆哺乳動(dòng)物的一個(gè)共有特征,例如胎盤增生、胎盤血管缺陷、臍帶畸形等。此外,克隆動(dòng)物的健康狀況也存在一定的異常,包括肥胖、免疫及呼吸缺陷和早期死亡等。由于體細(xì)胞核移植技術(shù)受到卵母細(xì)胞、供體細(xì)胞的質(zhì)量以及代孕母體等個(gè)體差異的影響,因此很難從統(tǒng)計(jì)學(xué)的數(shù)據(jù)分析上確定影響因素。任務(wù)三概述體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景以及存

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