DB22T 3495-2023 露地辣椒疫病診斷與防治技術規(guī)程

222023-09-28發(fā)布DB22/T3495—2023IDB22/T3495—20231露地辣椒疫病診斷與防治技術規(guī)程GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用聚合酶鏈式反應polymerasechainreacti4辣椒疫病診斷與防治技術程序的構成辣椒疫病診斷與防治程序主要包括以下幾個階段，流程見圖2癥害診斷(見第5章)癥害診斷(見第5章)圖1辣椒疫病診斷與防治程序流程5病害診斷5.1癥狀診斷木質部變淡褐色，引起整株萎蔫死亡，典型癥狀參見圖A.1;萎，典型癥狀參見圖A.2;3b)游動孢囊梗3根～5根成束由葉背氣孔伸出，具3個～4個分枝，其頂端膨大形成游動孢臺上浸于75%酒精中表面消毒30s,再用3%次氯酸鈉消毒2min～3min,用無菌水漂洗3次；5.2.2.1.2取4小塊病葉置于馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基中，在25℃光暗交替培養(yǎng)2d~號為LJ10)為辣椒疫霉菌(P.capsiciLeonian),其ITS序列長度DB22/T3495—20234根據(jù)栽培習性及氣候條件，選擇抗病品種，優(yōu)先選擇兼抗兩種以上辣椒病害的品種。kg，N:P:K=1:0.5:1.2，適量增施中量元素及微量元素。蹲苗結束后，澆一次透水，視辣椒生長情況，播種前，首先是用55℃~60℃溫水浸種20min，再用清水浸種10h～12h，28℃條件下催3次。主要農(nóng)藥種類、作用方式、使用時期及施藥量5678DB22/T3495—20239C.1.1將滅菌的研砵，研杵及藥匙備用，配置好的CTC.1.2先加入少量滅菌的石英砂于適量擴繁的病菌菌絲體中迅速研磨后分裝于離心管中，再加入事先搖勻一次，并開蓋放氣，防止因為氣體受熱膨脹而使蓋子C.1.4移取上清液至新離心管中，加入2倍體積的無水乙醇，輕輕轉動離心管，使DNA沉淀，待白C.1.5棄上清液，吸取適量75%的酒精于離心管中，輕輕搖勻，離心5mC.2.2.3在凝膠成像系統(tǒng)進行電泳結果觀察，判斷是否為預擴增長度的條帶，無非特異性條帶，且濃DB22/T3495—20231CGGTTTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTACCACACCTAAAA61AACCGTATCAACCCTTTTAGTTGGGGGTCTTGTACCCTATCATGGCGAATGTTTGGACTT121CGGTCCGGGCGAGTAGCTTTTTGTTTTAAACCCATTTCACAATTC181GACGAAAGTCTCTGCTTTTAACTAGATAGCAACTTTCAGCAGTGGATGT241CATCGATGAAGAACGCTGCGAACTGC301ATCGAAATTTTGAACGCATATTGCACTTCCGGGTTAGTCCTGGGAGTATGCCT361TGTCCGTACATCAAACTTGGCTTTCTTCCTTCCGTGTAGTCGGTGGAGGATGT421GTGAAGTGTCTTGCGTGTTGTCCTTCGGGTCGACTGCGAGTCCTTTTAAATGTACTG481TGTACTTCTCTTTGCTCGAAAAGCGTGGTGTTGCTGGTTGTGGAGGCTGCCTGCGTGG541AGTCGGCGACCGGTTTGTCTGCTGCGGCGTTTAAAGGAGGAGTGTTCGAT601GTTGGCTTCGGCTGAACAGGCGCTTATTGAATGCTTTTCCTGCTGTGGCGTG661GTGAACCGTAGCTGTGTTTGGCTTGGCTTTTGAATCGGCTTTGCTGTTGCG721GGCGGCTTCGGCTGTCGAGGGTCGATCCATTTTGGGAATTTTGTGT781ATCTCAATTGGACCTGATATCAGGCAAGATTACCCGCTATAPhytophthoraramorumP2057(MW300318)PhytophthoraramorumP1496(MW300317)PhytophthoraramorumP2058(MW300319)Phytophthorasojae11-2(MF09364Phytophthorasojae11-1(MF09364Phytophthorasojae06-2(MF09364[Phytophthoraparsiana7B4-1(MF0341001PhytophthoraparsianaH1-1(MF034089)95」PhytophthoragonapodyidesS1-5(MF03PhytophthoragonapodyidesZ1-30(MF034091)98PhytophthoraborealisAKWA57.2-0708(JQ626598)PhytophthoraborealisAKWA58.8-0708(JQ626599)PhytophthoraborealisAKWA43.2-0708(JQ626597)PhytophthorapalmivoraM2(MN831454)PhytophthorapalmivoraM3(PhytophthorapalmivoraM1(MN831455)Phytophthorainfestan—Phytophthorainfestans06-PhytophthoracapsiciJS8(MH842162)PhytophthoracapsiciJS7(MH842100PhytophthoracapsiciJS6(MH842160)—FusariumsolaniMRC-2565(MH582圖C.2基于ITS序列利用Mega7.0構建的系統(tǒng)發(fā)育樹DB22