2024-2025學年高中生物專題五DNA和蛋白質技術課題3血紅蛋白的提取與分離課堂達標含解析新人教版選修1

PAGE2-課題3血紅蛋白的提取與分別一、選擇題1．凝膠色譜法是依據(jù)______分別蛋白質的有效方法。(B)A．分子的大小 B．相對分子質量的大小C．帶電荷的多少 D．溶解度[解析]由凝膠色譜法分別蛋白質的原理可知，凝膠色譜法是依據(jù)相對分子質量的大小分別蛋白質的有效方法。2．SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是(C)A．增大蛋白質的相對分子質量B．可變更蛋白質的形態(tài)C．掩蓋不同種蛋白質間的電荷差別D．削減蛋白質的相對分子質量[解析]SDS的作用是使蛋白質完全變性，SDS所帶負電荷量大大超過蛋白質分子原有的電荷量，因而掩蓋不同種類蛋白質間電荷差別。3．下列對在凝膠色譜柱上加入樣品和洗脫的操作的敘述，不正確的是(C)A．加樣前要使柱內凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊B．讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動，貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面C．打開下端出口，待樣品完全進入凝膠層后干脆連接緩沖液洗脫瓶起先洗脫D．待紅色的蛋白質接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每5mL收集一管，連續(xù)收集[解析]待樣品完全進入凝膠層后，關閉下端出口，當心加入緩沖液到適當高度，之后再連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口，進行洗脫。4．在蛋白質的提取和分別中，關于對樣品處理過程中，分析無誤的是(D)A．洗滌紅細胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽B．洗滌時離心速度過低，時間過短，白細胞等會沉淀，達不到分別的效果C．洗滌過程選用0.1%的生理鹽水D．透析的目的是去除樣品中相對分子質量較小的雜質[解析]洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白，A錯誤；洗滌時要低速短時離心，以防止白細胞沉淀，B錯誤；洗滌紅細胞選用0.9%的生理鹽水，C錯誤；透析的目的是去除樣品中相對分子質量較小的雜質，D正確。故選D。5．蛋白質的分別與提純技術是蛋白質探討的重要技術，下列有關敘述不正確的是(A)A．依據(jù)蛋白質分子不能透過半透膜的特性，可將樣品中各種不同蛋白質分別B．依據(jù)蛋白質所帶電荷性質的差異及分子大小，可通過電泳分別蛋白質C．依據(jù)蛋白質相對分子質量的大小，可通過凝膠色譜法分別蛋白質D．依據(jù)蛋白質的分子大小、密度不同，可通過離心沉降法分別蛋白質[解析]蛋白質分子不能透過半透膜，據(jù)此可利用半透膜除去樣品中相對分子質量小的雜質，而不是分別樣品中的蛋白質；依據(jù)蛋白質的帶電荷性質，可通過電泳分別蛋白質；依據(jù)蛋白質的相對分子質量的大小，可通過凝膠色譜法分別蛋白質；依據(jù)蛋白質的分子大小、密度不同，可用離心沉降法分別蛋白質。二、非選擇題6．血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分，負責血液中O2或CO2的運輸。請依據(jù)血紅蛋白的提取和分別流程圖回答問題。(1)將試驗流程補充完整：A為__血紅蛋白的釋放__，B為__樣品的加入和洗脫__。凝膠色譜法是依據(jù)__相對分子質量的大小__來分別蛋白質的有效方法。(2)洗滌紅細胞的目的是去除__雜蛋白(或血漿蛋白)__，洗滌次數(shù)過少，無法完全除去；離心速度過高和時間過長會使__白細胞__一同沉淀，達不到分別的效果。洗滌干凈的標記是__離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色__。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是__蒸餾水和甲苯__。(3)在洗脫過程中加入物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是__加速樣品在凝膠柱中的流淌__。假如紅色區(qū)帶__勻稱一樣地移動__，說明色譜柱制作勝利。[解析](1)樣品處理及粗分別過程為：紅細胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分別血紅蛋白溶液→透析，凝膠色譜操作過程為：凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫，所以A表示血紅蛋白的釋放，B表示樣品的加入和洗脫，凝膠色譜法的原理是分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流淌快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內部，路程長，流淌慢。(2)洗滌紅細胞的目的是去除雜質蛋白，以利于后續(xù)步驟的分別純化，洗滌次數(shù)少，無法除去血漿蛋白，此外，離心速度過高和時間過長，會使白細胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度，重復洗滌三次，直至上清液中沒有黃色，表明紅細胞已洗滌干凈；由于甲苯是表面活性劑的一種，可將細胞膜溶解，從而使細胞裂開，蒸餾水能使紅細胞漲破。(3)磷酸緩沖液(pH為7.0)能夠模擬生物體內的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內的一樣，洗脫時利用緩沖液，可以加快樣品在凝膠柱中的流淌；