第八章 遺傳重組-課件

第八章遺傳重組Recombination遺傳物質(zhì)發(fā)生變異主要有兩方面原因：突變和重組重組———染色體序列發(fā)生重排和新的組合，是遺傳的靈魂！第八章遺傳重組-2遺傳重組遺傳重組：造成基因型變化的基因交流過(guò)程。發(fā)生：減數(shù)分裂性細(xì)胞內(nèi)，體細(xì)胞地點(diǎn)：核基因間，葉綠體基因間，線粒體基因間，重組子間；前提條件：不同基因型的遺傳物質(zhì)彼此能夠轉(zhuǎn)移。作用：保證了遺傳多樣性,為選擇奠定了物質(zhì)基礎(chǔ),是生物得以進(jìn)化發(fā)展，與突變一起是變異的來(lái)源第八章遺傳重組-2遺傳重組主要類(lèi)型：(依據(jù)對(duì)DNA序列和所需蛋白質(zhì)因子的要求)

同源重組位點(diǎn)專(zhuān)一性重組異常重組其共同點(diǎn)是雙股DNA間的物質(zhì)交換，但發(fā)生的情況不同。第八章遺傳重組-2第一節(jié)遺傳重組的類(lèi)型

遺傳重組或稱(chēng)基因重組是遺傳的基本現(xiàn)象。無(wú)論高等真核生物，還是細(xì)菌、病毒都存在遺傳重組現(xiàn)象；遺傳重組不僅發(fā)生于代與代之間，即在減數(shù)分裂中發(fā)生基因重組，一個(gè)個(gè)體的基因組也可以發(fā)生重排，即在體細(xì)胞中也會(huì)發(fā)生重組，這能產(chǎn)生基因表達(dá)的改變，在一個(gè)個(gè)體的細(xì)胞之間產(chǎn)生遺傳基因的多樣性；另外，重組不只是在核基因之間發(fā)生，在葉綠體基因間、線粒體基因間也可發(fā)生重組；重組也見(jiàn)于噬菌體的整合過(guò)程和轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座等的過(guò)程中。由此可見(jiàn)，只要有DNA就會(huì)發(fā)生重組，這表明重組對(duì)物種的生存是十分重要的。第八章遺傳重組-2一、同源重組/普遍性重組

1.同源重組：依賴(lài)大范圍的DNA同源序列的聯(lián)會(huì)，重組過(guò)程中，兩個(gè)染色體或DNA分子交換對(duì)等的部分。例：同源染色體非姐妹單體交換；細(xì)菌的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、結(jié)合；噬菌體的重組…需要重組的蛋白質(zhì)參與；（例如.大腸桿菌：RecA蛋白、RecBC蛋白）蛋白質(zhì)因子對(duì)DNA堿基序列的特異性要求不高；（存在重組熱點(diǎn)和序列長(zhǎng)度的影響）真核生物染色質(zhì)的狀態(tài)影響重組的頻率。第八章遺傳重組-21.進(jìn)行同源重組的條件（1）在交換區(qū)有相同或相似的序列同源染色體相同的區(qū)域的DNA序列一般相似。同源區(qū)越長(zhǎng)越有利于重組，大腸桿菌活體重組要求20－40bp相同；大腸桿菌與噬菌體或質(zhì)粒重組同源區(qū)要求≥13bp;等p197第八章遺傳重組-2（3）重組酶使參與重組的DNA發(fā)生斷裂、重接、修復(fù)、重組體釋放。（2）堿基配對(duì)參與重組的DNA互相配對(duì)，形成異源雙鏈。第八章遺傳重組-23.功能：

A：維持種群的遺傳多樣性；

B：有助于DNA的損傷修復(fù)；

C：使真核生物產(chǎn)生第一次減數(shù)分裂中染色體正確分離到子細(xì)胞至關(guān)重要的瞬間物理連接。第八章遺傳重組-2

二、位點(diǎn)專(zhuān)一性重組/保守性重組

原核生物中最為典型

特點(diǎn)：供體與受體的特定位點(diǎn)的短同源序列之間。

DNA精確切割連接

DNA不失去、不合成、不交換對(duì)等部分（有時(shí)是一個(gè)DNA分子整合到另一個(gè)DNA分子中，又稱(chēng)整合式重組），需要位點(diǎn)專(zhuān)一性的蛋白質(zhì)因子參與。第八章遺傳重組-2例如：λ噬菌體DNA通過(guò)其attP位點(diǎn)和大腸桿菌DNA的attB位點(diǎn)之間專(zhuān)一性重組而實(shí)現(xiàn)整合過(guò)程。條件：一段15bp的同源序列和位點(diǎn)專(zhuān)一性的蛋白質(zhì)因子（不能催化其他任何兩條不論是同源的還是非同源序列間的重組，從而保證了λ噬菌體整合方式的專(zhuān)一性和高度保守性，因此又稱(chēng)保守性重組。）而且這一重組不需要RecA蛋白質(zhì)的參與。第八章遺傳重組-2三、異常重組

完全不依賴(lài)于序列間的同源性而使一段DNA序列插入另一段中，但在形成重組分子時(shí)往往依賴(lài)DNA復(fù)制而完成重組過(guò)程，因此又稱(chēng)復(fù)制性重組。P198

特殊例子：轉(zhuǎn)座第八章遺傳重組-2第二節(jié)同源重組的分子機(jī)制一、斷裂重接模型（breakagejoiningmodel）C．D．Darlington1936年提出。在同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)，由于染色體的纏繞而產(chǎn)生張力，兩個(gè)相對(duì)染色單體在同一位置斷裂，然后彼此和另一染色單體重新連接起來(lái)從而形成重組并消除這種張力。第八章遺傳重組-2一異源DNA分子的斷裂與重接在細(xì)胞水平下，同源染色體配對(duì)、兩條非同源染色體之間發(fā)生斷裂、重組、交換。同源重組是參與重組DNA分子的斷裂與鏈接第八章遺傳重組-2二、異源DNA分子的斷裂與重接

1.證據(jù)：

1961，M.MeselsonandJ.J.Wergle兩個(gè)雙標(biāo)記λ噬菌體感染大腸桿菌。(c.mi)λ噬菌體1

13C和14N“重”鏈

(+.+)λ噬菌體2

12C和14N“輕”鏈同時(shí)感染大腸桿菌子代噬菌體CsCl密度梯度離心重鏈重鏈和輕鏈輕鏈第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-22、幾個(gè)概念：

重組核心：兩個(gè)DNA分子的連接

連接分子/接合分子：

重組接點(diǎn)/重組結(jié)合點(diǎn)：

雜種DNA/異源雙鏈DNA：

分支遷移：重組接點(diǎn)沿雙鏈移動(dòng)

交互重組：一條親本雙螺旋分子和另外一條親本雙螺旋分子共價(jià)連接，中間有一端異源雙鏈區(qū)，這種重組稱(chēng)為交互重組。

第八章遺傳重組-2三、同源重組的Hollidaymodel1964年美國(guó)學(xué)者RobinHolliday提出了著名的Holliday重組模型。前提：參與重組的DNA靠近（同源染色體聯(lián)會(huì)）1、同源重組的Hollidaymodel第八章遺傳重組-2①參與重組的兩條DNA單鏈被切斷②切開(kāi)的3’端與另一條鏈的5’端交叉相連接第八章遺傳重組-2③交叉點(diǎn)移動(dòng)，形成異源雙鏈區(qū)④斷裂在交叉點(diǎn)處四條單鏈DNA都斷裂。第八章遺傳重組-2⑤重接以?xún)煞N不同的連接方式重接。原地重接交換重接第八章遺傳重組-2⑥結(jié)果參與交換的單鏈DNA中部都有異源區(qū)段（heteroduplex）（B’/b’）。兩側(cè)的標(biāo)記基因C/c有一半交換（c/c’；C/C’）第八章遺傳重組-22該模型對(duì)重組過(guò)程的解釋如下：A、同源的非姐妹染色單體聯(lián)會(huì)；B：同源非姐妹染色單體DNA中兩個(gè)方向相同的單鏈，在DNA內(nèi)切酶的作用下，在相同位置同時(shí)切開(kāi)；C：切開(kāi)的單鏈交換重接;D：形成交聯(lián)橋結(jié)構(gòu)；第八章遺傳重組-2E：交聯(lián)橋沿配對(duì)DNA分子“移動(dòng)”。兩個(gè)親本DNA分子間造成一大段異源雙鏈DNA（Holliday結(jié)構(gòu)）F：E和F相同；G：繞交聯(lián)橋旋轉(zhuǎn)1800；J：形成Holliday異構(gòu)體；I、通過(guò)兩種方式之一切斷DNA單鏈，若左右切，則形成非重組體，若上下切則形成重組體。由上可知：無(wú)論Holliday結(jié)構(gòu)斷裂是否導(dǎo)致旁側(cè)遺傳標(biāo)記的重組，他們都含有一個(gè)異源雙鏈DNA區(qū)。第八章遺傳重組-2HOLLIDAY模型第八章遺傳重組-2

第八章遺傳重組-23環(huán)狀DNA分子的重組兩個(gè)環(huán)狀DNA分子配對(duì)、斷裂、重接形成“8”字型結(jié)構(gòu)中間物，根據(jù)切割的位置不同，可分別形成兩個(gè)親本環(huán)、大的單體環(huán)或者是滾環(huán)結(jié)構(gòu)。也可以形成“χ”結(jié)構(gòu)。第八章遺傳重組-22第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-23、修改的Hollidaymodel①前三步相同，②第四步的時(shí)候先形成一個(gè)十字架結(jié)構(gòu)（isomericHollidaystructure）第八章遺傳重組-2③十字架的分離（斷裂-重接）有兩種方式④結(jié)果仍然產(chǎn)生一半的重組第八章遺傳重組-2十字架的剪切只需兩條鏈斷開(kāi)第八章遺傳重組-2Holliday十字架連接體的電鏡照片第八章遺傳重組-24、雙鏈斷裂起始重組模型Double-StrandBreaksinDNAInitiateRecombinationSzostak等1983年提出，重組是由一系列的內(nèi)切酶和外切酶發(fā)動(dòng)的。內(nèi)切酶與外切酶共同在一對(duì)DNA單鏈上制造一個(gè)缺口。利用另一條同源染色體DNA鏈為模板進(jìn)行復(fù)制修復(fù)。第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2三、基因轉(zhuǎn)變及其分子機(jī)理

重組是一個(gè)非常正確的交互過(guò)程，在減數(shù)分裂的產(chǎn)物中大多數(shù)是交互的正常分離，但從大量的分析知道，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則情況，從而產(chǎn)生少量的異常分離（abnormalsegregations）。對(duì)于任何重組模型不僅必須說(shuō)明正常的重組過(guò)程，還必須考慮到這些不規(guī)則現(xiàn)象，因此我們?cè)谟懻撝亟M的分子基礎(chǔ)以前，先說(shuō)明一下重組模型應(yīng)當(dāng)兼顧到的基因轉(zhuǎn)變現(xiàn)象。第八章遺傳重組-2（一）異常分離與基因轉(zhuǎn)變

在一個(gè)雜合體中，如果一染色體把基因A交給它的同源染色體，則它的同源染色體必定把基因a交回給它，所以在真菌中，一個(gè)座位上的兩等位基因分離時(shí)，應(yīng)該呈現(xiàn)2：2或1：1：1：1或1：2：1的分離(表8-1)，這就說(shuō)明重組通?？偸墙换サ??？墒荓indegren在面包酵母（Saccharomycescerevisiae）中發(fā)現(xiàn)，有的子囊含有（3A+1a）或（1A＋3a）的子囊孢子。以后在脈孢霉、釀酒酵母、子囊菌Ascobolusimmersus及果蠅中也發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象。8第八章遺傳重組-2Mitchell對(duì)子囊菌中出現(xiàn)的異常分離的現(xiàn)象進(jìn)行了詳細(xì)的分析。在Mitchell的雜交試驗(yàn)中，所用的基因是關(guān)于吡哆醇（pyridoxine,維生素B6）的合成。帶有這個(gè)基因的突變株需要在培養(yǎng)基上添加吡哆醇后才能生長(zhǎng)，且對(duì)酸度（pH）敏感，改變酸度后，就無(wú)需添加了，這突變基因稱(chēng)作pdxp。在其非常鄰近的位點(diǎn)上的另一突變基因pdx，也是吡哆醇需要型突變，但對(duì)酸度不敏感。第八章遺傳重組-2Mitchell把兩個(gè)脈孢霉(N.crassa)的吡哆醇突變株雜交，＋pdxp′pdx＋，取得子一代子囊后，對(duì)585個(gè)子囊中的孢子依次解剖出來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)和鑒定。他發(fā)現(xiàn)4個(gè)子囊中，有野生型的孢子對(duì)(++)，好象這兩個(gè)位點(diǎn)間有了重組；可是跟預(yù)期相反，重組后應(yīng)該同時(shí)出現(xiàn)的雙突變型(pdxpdxp)孢子對(duì)卻沒(méi)有發(fā)現(xiàn)(表9-2)。分析方法是靈敏的，如果有雙突變型的話(huà)，是能夠檢出的，并且也不可能是突變，因?yàn)樗鼈兂霈F(xiàn)的頻率比這些位點(diǎn)的正常突變率高很多。55第八章遺傳重組-2在正常情況下，由于重組，在出現(xiàn)完全野生型孢子對(duì)(++)的同時(shí)，也應(yīng)出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的重組產(chǎn)物-雙突變型孢子對(duì)(pdxpdxp)。然而如圖9-1B發(fā)生的情況，好象pdxp轉(zhuǎn)變成了pdxp＋(或+)，這些不尋常的情況，好象是由于一個(gè)基因轉(zhuǎn)變?yōu)樗牡任换?，所以將這種情況稱(chēng)為基因轉(zhuǎn)變（geneconversion）。圖9-1中以表示pdxp基因發(fā)生了基因轉(zhuǎn)變。第八章遺傳重組-2在糞生糞殼菌（Sordariafimicola）中也發(fā)現(xiàn)有基因轉(zhuǎn)變現(xiàn)象。Olive等對(duì)g座位進(jìn)行了廣泛的研究，g-的子囊孢子為灰色，而g+的子囊孢子為黑色。g+′g-雜交，在所分析的200,000個(gè)子囊中，絕大部分屬于正常的4g+:4g-類(lèi)型，但也發(fā)現(xiàn)有0.06%是5:3分離，0.05%是6：2分離，還有0.008%是3：1：1：3或異常的4：4分離。第八章遺傳重組-2AAAAaaaa糞生糞殼菌(Olive):GA×gaGA非重組孢子對(duì)GagaGAgAga非重組孢子對(duì)重組孢子對(duì)，一個(gè)孢子基因轉(zhuǎn)變重組孢子對(duì)，一個(gè)孢子基因轉(zhuǎn)變第八章遺傳重組-2

在異常的4：4子囊中，雖然也是有4個(gè)g+和4個(gè)g-，但排列方式特殊，一個(gè)孢子對(duì)中的兩個(gè)孢子有著不同的基因型，而在正常情況下，它們應(yīng)有相同的基因型，因?yàn)槊恳绘咦訉?duì)都是一次有絲分裂的產(chǎn)物。此外，在糞生糞殼菌中，雖然g/+這對(duì)等位基因表現(xiàn)不尋常的分離，但是鄰近的基因A/a都呈現(xiàn)正常的分離(圖9-3)。從糞生糞殼菌的基因轉(zhuǎn)變資料可以看出，它有個(gè)重要的特點(diǎn)：即在有基因轉(zhuǎn)變的子囊中，基因轉(zhuǎn)變和遺傳重組都發(fā)生在同樣兩個(gè)單體的子囊比例竟高達(dá)90%（圖9-3），換句話(huà)說(shuō)，基因轉(zhuǎn)變跟遺傳重組是有關(guān)的，這也是基因轉(zhuǎn)變與基因突變的差異。第八章遺傳重組-2雖然g/+這對(duì)等位基因表現(xiàn)不尋常的分離，但是鄰近的基因A/a都呈現(xiàn)正常的分離

在發(fā)生基因轉(zhuǎn)變產(chǎn)生異常4:4分離(3:1:1:3)和5:3分離的糞生糞殼菌中，與g+/g-基因鄰近的A/a基因(用灰底表示A，白底表示a)呈2:2正常分離第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2（二）基因轉(zhuǎn)變的類(lèi)型染色單體轉(zhuǎn)變：2：6或6：2分離比

減數(shù)分裂4個(gè)產(chǎn)物中，一個(gè)出現(xiàn)基因轉(zhuǎn)變半染色單體轉(zhuǎn)變：5：3；3：1：1：3

減數(shù)分裂四個(gè)產(chǎn)物中，一個(gè)或2個(gè)的一半出現(xiàn)基因轉(zhuǎn)變

減數(shù)分裂后分離：等位基因的分離發(fā)生在減數(shù)分裂后的有絲分裂中第八章遺傳重組-2（三）基因轉(zhuǎn)變的分子機(jī)制

基因轉(zhuǎn)變的實(shí)質(zhì)：重組過(guò)程中留下的局部異源雙鏈區(qū)，在細(xì)胞內(nèi)的修復(fù)系統(tǒng)識(shí)別下不同的酶切/不酶切產(chǎn)生的結(jié)果。不同的切除會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果。一對(duì)同源染色體有4個(gè)染色單體，每一染色單體是一條DNA雙鏈，所以一對(duì)同源染色體有4條DNA雙鏈。在晚偶線期和早粗線期染色體配對(duì)時(shí)，同源非姊妹染色單體的DNA分子配合在一起；核酸內(nèi)切酶識(shí)別DNA分子上的相應(yīng)斷裂點(diǎn)（breakagepoint），在斷裂點(diǎn)的地方把磷酸二酯鍵切斷，使兩個(gè)非姊妹DNA分子各有一條鏈斷裂；兩斷鏈從斷裂點(diǎn)脫開(kāi)，螺旋局部放松，單鏈交換準(zhǔn)備重接；在連接酶的作用下，斷裂以交替方式跟另一斷裂點(diǎn)相互聯(lián)結(jié)，形成一個(gè)交聯(lián)橋（cross-bridge），這結(jié)構(gòu)又稱(chēng)Holliday中間體（Hollidayintermediate）;第八章遺傳重組-2這交聯(lián)橋不是靜態(tài)的，可以靠拉鏈?zhǔn)交顒?dòng)沿著配對(duì)DNA分子向左右移動(dòng)，其中互補(bǔ)堿基間形成的氫鍵從一條親本鏈改為另一條親本鏈，于是移動(dòng)后在兩個(gè)親本DNA分子間留下較大片段的異源雙鏈DNA，這種結(jié)構(gòu)又稱(chēng)為Holliday結(jié)構(gòu)；隨后這交聯(lián)橋的兩臂環(huán)繞另外兩臂旋轉(zhuǎn)成為十字形，并在交聯(lián)部分?jǐn)嚅_(kāi)，消除交聯(lián)體，恢復(fù)為兩個(gè)線性DNA分子，即形成Holliday結(jié)構(gòu)的異構(gòu)體(圖9-4H)；斷開(kāi)方向或沿東西軸進(jìn)行，或沿南北方向進(jìn)行(圖9-4I)；如沿東西方向切斷，即上連、下連，則產(chǎn)生的兩個(gè)異源雙鏈的兩側(cè)基因?yàn)锳B和ab，仍保持親代類(lèi)型，如沿南北方向切割，即左連、右連，則兩側(cè)基因?yàn)锳b和aB，產(chǎn)生兩個(gè)重組類(lèi)型，但不論是那種情況，即Holliday結(jié)構(gòu)斷裂是否導(dǎo)致旁側(cè)遺傳標(biāo)記的重組，它們都含有一個(gè)異源雙鏈DNA區(qū)，有關(guān)的兩核苷酸區(qū)段分別來(lái)自不同的親本，從而由原來(lái)的G-C、A-T配對(duì)變?yōu)镚-A、C-T非配對(duì)。第八章遺傳重組-2從Holliday模型已清楚地表明在對(duì)稱(chēng)的異源雙鏈區(qū)存在著不配對(duì)堿基(如G-A、C-T)，這種異源DNA是不穩(wěn)定的，細(xì)胞內(nèi)的修復(fù)系統(tǒng)能夠識(shí)別不配對(duì)堿基，并以其中一條鏈為模板進(jìn)行切除修復(fù)。在上面的糞生糞殼菌雜交中，假設(shè)用于g+′g-雜交的兩親本僅有一對(duì)堿基之差，如：不相稱(chēng)堿基對(duì)第八章遺傳重組-2不配對(duì)的核苷酸在DNA分子中造成歪斜，不配對(duì)的一小段首先由核酸外切酶(exonuc1ease)切除，留下單鏈的缺口；然后在DNA聚合酶的作用下，以一條鏈為模板合成具有互補(bǔ)堿基的區(qū)段，填補(bǔ)缺口，再由連接酶的作用，把新合成的短鏈以共價(jià)鍵聯(lián)接上去，成為連續(xù)的核苷酸鏈，完成修復(fù)過(guò)程，從而完成修復(fù)過(guò)程。在修復(fù)時(shí)，由于切除的不配對(duì)堿基區(qū)段的不同，可以有下列兩種方式圖(9-5)：如對(duì)不相稱(chēng)的堿基對(duì)G-A的修復(fù)，由于切去的區(qū)段的不同，或者在染色單體中形成一個(gè)野生型基因（+），或者在染色單體中形成一個(gè)突變型基因（g）。第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2根據(jù)切除修復(fù)原理，基因轉(zhuǎn)變的幾種類(lèi)型產(chǎn)生的分子機(jī)制可以歸納如下（圖8-8）。1．兩個(gè)雜種分子均未校正（圖8-8A）復(fù)制后出現(xiàn)異常的4＋∶4g（或3∶1∶1∶3）的分離。2．一個(gè)雜種分子校正為+，或校正為g時(shí)，則發(fā)生另一種類(lèi)型的半染色單體轉(zhuǎn)變，前者修復(fù)后出現(xiàn)5∶3的分離，后者子囊孢子的異常分離比為3∶5（圖8-8B）。第八章遺傳重組-23．兩個(gè)雜種分子都被校正到+（或g）時(shí)（圖8-8C），修復(fù)后出現(xiàn)6＋∶2g（或2＋∶6g）的異常分離。這便是出現(xiàn)染色單體轉(zhuǎn)變的起因。4．當(dāng)兩個(gè)雜種分子都按原來(lái)兩個(gè)親本的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行修復(fù)時(shí)，則減數(shù)分裂4個(gè)產(chǎn)物恢復(fù)成G-C、G-C、A-T、A-T的正常配對(duì)狀態(tài)，子囊孢子分離正常，呈現(xiàn)4＋∶4g的結(jié)果，如圖8-8D所示。第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2四、Meselson-Radding模型Holliday模型中為對(duì)稱(chēng)的雜合雙鏈，而實(shí)際情況有不均等分離現(xiàn)象，1975年Meselson-Radding

提出模型解釋這種不對(duì)稱(chēng)重組現(xiàn)象：

1.單鏈切斷

2.鏈置換

3.單鏈入侵

4.泡切除

5.鏈同化（碎鏈吸收）

6.異構(gòu)化——Holliday7.分支遷移第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2五、負(fù)干涉負(fù)干涉：兩個(gè)鄰近基因，尤其一個(gè)基因不同突變點(diǎn)間，雙交換的頻率比預(yù)期高，并發(fā)系數(shù)C>1，即一個(gè)區(qū)域的交換引起鄰近區(qū)域交換的增加。局部負(fù)干涉：負(fù)干涉的形成原因是存在并不伴隨兩側(cè)遺傳標(biāo)記重組的基因轉(zhuǎn)變。第八章遺傳重組-2第三節(jié)細(xì)菌的同源重組一、細(xì)菌同源重組的特點(diǎn)細(xì)菌的接合、轉(zhuǎn)化以及轉(zhuǎn)導(dǎo)重組都是同源重組，而且這種重組是發(fā)生在一個(gè)完整的環(huán)狀雙螺旋DNA分子與一個(gè)雙鏈或單鏈DNA分子片段之間的。且重組需要3種基因所編碼的RecA和RecBC蛋白質(zhì)。

第八章遺傳重組-2RecA蛋白：多功能蛋白

1.NTP酶活性：存在單鏈DNA時(shí)，RecA具水解ATP/dATP活性，促進(jìn)聯(lián)會(huì)。

2.單鏈DNA結(jié)合活性：RecA蛋白與單鏈DNA形成絲狀復(fù)合物，使其免受核酸酶攻擊。

3.DNA解旋活性：DNA為單鏈或寡聚核苷酸。RecA蛋白在雙鏈DNA的單鏈切口處解開(kāi)雙螺旋

4.部分單鏈DNA區(qū)，RecA蛋白促進(jìn)DNA分子間聯(lián)會(huì)。RecA蛋白異源雙鏈區(qū)第八章遺傳重組-2RecBC：溶解酶(Resolvase)活性,斷裂Holliday結(jié)構(gòu)的交聯(lián)橋完成重組。第八章遺傳重組-2二、細(xì)菌轉(zhuǎn)化重組機(jī)制實(shí)質(zhì)：?jiǎn)捂淒NA片段與完整DNA之間的重組，如下情況：①切除外源DNA——無(wú)重組②切除受體DNA——發(fā)生重組③無(wú)修復(fù)作用——子代細(xì)胞出現(xiàn)兩種基因型（受體基因型和重組體基因型）*通常采用有利于重組體基因型生長(zhǎng)的選擇條件第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2高效率標(biāo)記（high-efficiencymaker)：在轉(zhuǎn)化中，有些遺傳標(biāo)記或是很少發(fā)生校正作用，或是校正切除幾乎總是在受體DNA上，因此轉(zhuǎn)化頻率較高，這類(lèi)遺傳標(biāo)記稱(chēng)為~。低效率標(biāo)記（low-efficiencymaker）：轉(zhuǎn)化中一些標(biāo)記的校正切除總是傾向于發(fā)生在供體單鏈上，因而出現(xiàn)很低的轉(zhuǎn)化頻率，這類(lèi)標(biāo)記稱(chēng)為~。第八章遺傳重組-2三、細(xì)菌的接合與轉(zhuǎn)導(dǎo)中的重組機(jī)制接合重組（Hfr與F-之間進(jìn)行）部分DNA進(jìn)入細(xì)胞，且只有其中的部分參與重組，需要RecA和RecBC參與，機(jī)制與轉(zhuǎn)化重組相似轉(zhuǎn)導(dǎo)重組（phage-DNA與細(xì)菌之間）雙鏈DNA與完整雙鏈DNA之間的重組，供體DNA以雙鏈進(jìn)入受體細(xì)胞，并且以雙鏈形式整合進(jìn)入染色體，需要RecA和RceBC參與。第八章遺傳重組-2四、原核生物重組的酶學(xué)基礎(chǔ)（1）RecBCD酶系統(tǒng)與重組起始RecBCD復(fù)合體是recB、C、D基因編碼的。具有螺旋酶（helicase）和外切酶（exonuclease）的活性（5′→3′及3′→5′），特異性識(shí)別雙鏈斷裂部位（double-strandbreak）。①RecBCD復(fù)合物第八章遺傳重組-2③RecBCD引起的雙鏈降解CHI位點(diǎn)在E.coliDNA中大約每5-10kb中就有一個(gè)。②CHI位點(diǎn)在λ噬菌體

DNA上發(fā)現(xiàn)的引起高頻重組的位點(diǎn)。5’-GCTGGTGG-3’3’-CGTCCACC-5’i）識(shí)別雙鏈斷裂ii）移動(dòng)到CHI位點(diǎn)，并解旋DNA雙鏈。iii）利用外切酶活性降解DNA雙鏈。第八章遺傳重組-2iii）到達(dá)CHI位點(diǎn)時(shí)3’5’外切酶活性被抑制，但5’3’外切酶活性加強(qiáng)。iv）結(jié)果形成了一個(gè)3’突出端，提供RecA識(shí)別重組。第八章遺傳重組-2（2）RecA與單鏈入侵、同源配對(duì)、Holliday結(jié)構(gòu)形成①RecAi）能與任何單鏈DNA（single-strandDNA，ssDNA）結(jié)合。iii）能啟動(dòng)單鏈DNA與之同源的雙鏈DNA鏈配對(duì)。引發(fā)單鏈取代（singlestranduptake），形成一個(gè)Holliday結(jié)構(gòu)。ii）有ATP酶活性。第八章遺傳重組-2Hollidaystructure第八章遺傳重組-2（3）Ruv與交叉點(diǎn)的移動(dòng)、Holliday結(jié)構(gòu)的分離①Ruv蛋白特異性地識(shí)別Hollidaystructure。ii）RuvB有helicase和ATPase活性，發(fā)動(dòng)交叉點(diǎn)遷移。iii）RuvC內(nèi)切酶活性，切割Holliday結(jié)構(gòu)的分枝點(diǎn)i）RuvA第八章遺傳重組-2RuvAB結(jié)合Holliday結(jié)構(gòu)的電鏡模型兩個(gè)RuvB六聚體（hexamer）以相反的方向纏繞在DNA外邊，“擰”動(dòng)DNA雙螺旋。第八章遺傳重組-2②Ruv作用過(guò)程i）RuvA和RuvB結(jié)合到Holliday結(jié)構(gòu)上。ii）導(dǎo)致分枝點(diǎn)以10-20bp/s遷移。第八章遺傳重組-2iii）兩個(gè)分子的RuvC分別結(jié)合到RuvA的相反方向上第八章遺傳重組-2v）重新連接上，形成重組分子（或非重組分子）iv）RuvC切斷DNA，（有兩種切割方式。）重組分子第八章遺傳重組-2第四節(jié)位點(diǎn)專(zhuān)一性重組一、λ噬菌體的整合和切除

λ噬菌體：attPPOP、

大腸桿菌：attB/attλBOB、

1.整和：BOB、+POP、BOP、+POB、

2.切除：BOP、+POB、BOB+POPIntIHFInt,XisIHF第八章遺傳重組-2

通過(guò)attP和attB間的相互重組，環(huán)狀的噬菌體DNA轉(zhuǎn)換為整合的原噬菌體，原噬菌體通過(guò)attL和attR間的相互重組而切除第八章遺傳重組-2由重組酶（recombinase）催化，發(fā)生在特殊序列對(duì)之間。一、

DNA在E.coliDNA特殊位點(diǎn)的整合1.附著位點(diǎn)（attachmentsite,att）位于細(xì)菌DNA上的att序列稱(chēng)為attB；（1）attBBOB’第八章遺傳重組-2（2）attP位于λ上的att序列稱(chēng)為attP。POP’（3）核心序列（coresequence）O是attB與attP共有的15bp相同序列。（4）交錯(cuò)剪切序列核心區(qū)中的7bp：GCTTTTTTATACTAACGAAAAAATATGATTTTTATACAAATATG是Int（整合酶）的結(jié)合位點(diǎn)。第八章遺傳重組-22.整合過(guò)程BOB’POP’BOB’P’λOPλDNA細(xì)菌DNAInt：integrase（噬菌體基因產(chǎn)物）；IHF：integrationhostfactor（細(xì)菌基因產(chǎn)物）Int、IHF第八章遺傳重組-23.核心區(qū)重組細(xì)節(jié)GCTTTTTTATACTAACGAAAAAATATGATTBB’GCTTTTTTATACTAACGAAAAAATATGATTP’P切斷后重接細(xì)菌DNAλDNA第八章遺傳重組-2CGAAAAAATATGCGAAAAAATATGTTTATACTAAGCTTTGCTTTATTTTTATACTAAATTP’BB’P第八章遺傳重組-2CGAAAAAATATGCGAAAAAATATGTTTATACTAAGCTTTGCTTTATTTTTATACTAAATTP’BB’PλDNA細(xì)菌DNA動(dòng)畫(huà)演示:位點(diǎn)特異性重組第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2第五節(jié)異常重組－原核生物中的轉(zhuǎn)座子Transposonsaregeneticunitsthatcanmoveorbe“transposed”withinthegenome.Themovementofgeneticunitsfromoneplaceinthegenometoanotheroftendisruptsgeneticfunctionandresultsinphenotypicvariation。Assuch，theimpactofthetranspositionofgeneticunitsoftenfitintoabroaddefinitionofmutation.第八章遺傳重組-2轉(zhuǎn)座的發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)座元件首先是由美國(guó)遺傳學(xué)家BarbaraMcClintock于1951年在玉米的遺傳學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)的。獲1983年Nobel生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。她稱(chēng)之為控制元件（controllingelement）。并提出了轉(zhuǎn)座（transposition）的概念。第八章遺傳重組-2DNAtransposableelement第八章遺傳重組-2Mendel的獨(dú)立分配與自由組合遺傳規(guī)律、Morgan的連鎖互換規(guī)律、Watson-CrickDNA雙螺旋、McClintock的轉(zhuǎn)座，都是遺傳學(xué)上的最重大的發(fā)現(xiàn)。但只有McClintock是孤身一人，在沒(méi)有任何前人的經(jīng)驗(yàn)借鑒和同仁的理解與接受的情況下作出的。用傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法獲得了分子遺傳學(xué)的劃時(shí)代發(fā)現(xiàn)（比DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)還早兩年！）。第八章遺傳重組-2一、原核生物轉(zhuǎn)座子的發(fā)現(xiàn)1.JamesShapiro的觀察1967年，Shapiro在半乳糖操縱子研究中發(fā)現(xiàn)一種奇怪的突變。PgalTgalEgalK半乳糖差向異構(gòu)酶半乳糖尿苷酰轉(zhuǎn)移酶半乳糖激酶（1）半乳糖操縱子第八章遺傳重組-2（2）半乳糖代謝UDP-GalUDP-GluGal-1-PGalKTE中間產(chǎn)物Gal-1-P有毒，不能積累！突變株galT-

不能生長(zhǎng)，但如果galK突變（galK-），或galT-恢復(fù)突變，就能成活。意外發(fā)現(xiàn)：（3）半乳糖突變galE-

galT-

雙突變也能生長(zhǎng)！第八章遺傳重組-2（4）分析結(jié)果此突變可以恢復(fù)，說(shuō)明不是缺失或移碼突變；誘變劑處理不能提高恢復(fù)突變率，說(shuō)明也不是點(diǎn)突變。E的突變導(dǎo)致了下游位點(diǎn)的K的活性大幅度降低了，細(xì)胞中不積累Gal-1-P。其他還有什么樣的突變能引起這種極性突變呢？（5）分析原因極性突變體是指那些影響位于突變位點(diǎn)下游的一個(gè)或多個(gè)正?；虻谋磉_(dá)的突變體第八章遺傳重組-2（6）推測(cè)及證實(shí)鑒于F因子和λ的整合作用的發(fā)現(xiàn)，Shapiro推測(cè)，也許也是部分DNA片段的插入（突變）和撤離（恢復(fù)）造成的。Shapiro小組和PeterStarlinger小組分別進(jìn)行了密度梯度離心和分子雜交實(shí)驗(yàn)，證實(shí)突變的DNA中確實(shí)有插入片段。突變gal野生型galIS1稱(chēng)之為IS1（insertionsequence1）在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中l(wèi)噬菌體可以將宿主菌的DNA整合到它自己的基因組中，將含有g(shù)al+和galm(極性突變體)的l噬菌體分別分離出來(lái)，同時(shí)加入到離心管中進(jìn)行CsCl密度梯度離心，結(jié)果出現(xiàn)了兩條帶，ldgalm的密度大于ldgal+的密度，表明ldgalm有可能具有小片斷DNA的插人。第八章遺傳重組-2（7）IS2Xn：中心區(qū)域兩側(cè)的IR序列并非完全相同，配對(duì)時(shí)會(huì)有莖環(huán)。第八章遺傳重組-2含有IS2的半乳糖操縱子與野生型DNA雜交第八章遺傳重組-2IS是最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座因子，它僅含有編碼其轉(zhuǎn)座所需的酶-轉(zhuǎn)座酶(transposase)的基因，本身沒(méi)有任何表型效應(yīng)。目前已知的IS至少有10余種，如IS1、IS2、IS3等(表9-3)。雖然它們的大小不同，目前已知IS的長(zhǎng)度在700-5700bp之間，但有某些共同的結(jié)構(gòu)特征，如每種IS兩端的核苷酸序列完全相同或相近，但方向相反，稱(chēng)為反向重復(fù)序列(invertedrepeatsequence,IR)，這種末端反向重復(fù)序列有幾個(gè)到幾十個(gè)核苷酸對(duì)，典型的為15-25bp。由于這種反向重復(fù)序列的存在，因此IS(或帶有IS的質(zhì)粒)經(jīng)變性和復(fù)性后，可以觀察到莖環(huán)結(jié)構(gòu)的存在。第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2IS的轉(zhuǎn)座過(guò)程是這樣的：首先由轉(zhuǎn)座酶交錯(cuò)切開(kāi)宿主DNA上的靶位點(diǎn)，靶位點(diǎn)一般是隨機(jī)的，然后插入IS，即IS與宿主的單鏈末端相連，余下的缺口由DNA聚合酶和連接酶加以填補(bǔ)，結(jié)果使插入的IS兩端形成短(2-13bp)的正向重復(fù)序列(directrepeatsequence,DR)。第八章遺傳重組-2（2）IS的轉(zhuǎn)座過(guò)程①編碼序列轉(zhuǎn)錄合成轉(zhuǎn)座酶（transposase)。②轉(zhuǎn)座酶結(jié)合到轉(zhuǎn)座子的兩個(gè)IR位點(diǎn)，將IS從原有位點(diǎn)以平端（bluntend）的形式精確地切下（不包括DR）。第八章遺傳重組-2③轉(zhuǎn)座酶同時(shí)在要插入的靶序列上制造一個(gè)交錯(cuò)切口，帶有5’單鏈尾。第八章遺傳重組-2④轉(zhuǎn)座酶又把切下來(lái)的平頭轉(zhuǎn)座子與靶位點(diǎn)的兩個(gè)5’單鏈尾連接。⑤細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制酶把兩側(cè)的缺口補(bǔ)上，形成正向重復(fù)（DR）ATGCATGCATACGTACGT插入序列第八章遺傳重組-2轉(zhuǎn)座酶的表達(dá)水平一般很低，所以轉(zhuǎn)座事件的發(fā)生頻率很低（10-3~10-4/代）。ATGCATG

GCATGCATACGTACCGTACGT插入序列第八章遺傳重組-22.Tn轉(zhuǎn)座子（transposonelements）（1）Tn的結(jié)構(gòu)又稱(chēng)為Bacterialtransposons、復(fù)合轉(zhuǎn)座子。兩側(cè)各一個(gè)IS，中間一個(gè)抗生素抗性基因（antibiotic-resistancegene）。①主體結(jié)構(gòu)②正向重復(fù)（DR），來(lái)源與IS的DR相同。第八章遺傳重組-2（2）Tn的轉(zhuǎn)座過(guò)程IRIRIRIR抗生素抗性轉(zhuǎn)座酶轉(zhuǎn)座酶ISISIS抗生素抗性基因兩側(cè)的IR一般突變，致使轉(zhuǎn)座酶不能識(shí)別。轉(zhuǎn)座酶只能識(shí)別最末端的IR，并切下整個(gè)Tn。插入靶序列和連接的過(guò)程與IS元件一樣。第八章遺傳重組-2（3）Tn的類(lèi)型IS50KanrBlerStrrIS50Tn5：5700bpTn9：2638bp1500bpIS1CamrIS1768bpIS10TetrIS101400bpTn10：9300bpTnAIR轉(zhuǎn)座酶抗生素抗性IR38bp第八章遺傳重組-2第六節(jié)異常重組－真核生物轉(zhuǎn)座子一、真核生物轉(zhuǎn)座子的發(fā)現(xiàn)1.MarcusRhoades的觀察1938年，Rhoades分析一種自花授粉的墨西哥玉米的色斑遺傳，發(fā)現(xiàn)了意外的花斑點(diǎn)突變。有色、白色、花斑色第八章遺傳重組-2（1）雜交表明，有色和白色是兩對(duì)基因的自由組合。有色：A1___白色：a1a1dtdt花斑色：a1a1Dt_如何解釋花斑色表型與其基因型的關(guān)系？花斑色：a1a1Dt_白色：a1a1dtdt（2）測(cè)交：有色：A1___花斑色白色？第八章遺傳重組-2測(cè)交出現(xiàn)完全有色的后代，說(shuō)明發(fā)生了恢復(fù)突變（a1

A1）。說(shuō)明花斑色玉米粒中的的每一個(gè)色斑實(shí)際上是恢復(fù)突變的表型效應(yīng)。（高頻率恢復(fù)突變?。┑@種突變似乎與Dt的存在密切相關(guān)。因?yàn)閍1a1Dt_是花斑色，而a1a1dtdt只能是白色。即：Dt存在時(shí)，a1不穩(wěn)定（很容易突變）；Dt

缺乏時(shí)（dt），a1

就穩(wěn)定。第八章遺傳重組-22.McClintock的偉大發(fā)現(xiàn)BarbaraMcClintock在1940-1950年分析了玉米胚乳（endosperm）的色素遺傳。紫色、花斑色、白色第八章遺傳重組-2花斑色是由于突變?cè)斐傻?，而且這種突變不是常規(guī)突變，是與一種“控制因子”（controllingelement)的存在引起的。（2）解釋如果有C基因，胚乳合成色素，呈紫色；如果C突變（c），胚乳無(wú)色素，呈白色。在c胚乳的發(fā)育過(guò)程中，部分細(xì)胞發(fā)生恢復(fù)突變（C），形成色斑。突變發(fā)生的越早，色斑就越大。（1）雜交結(jié)論第八章遺傳重組-2玉米色斑，大小不一第八章遺傳重組-2（3）對(duì)突變的解釋?zhuān)篈c-Ds系統(tǒng)為什么總是恢復(fù)突變、而且高頻率？McClintock認(rèn)為C突變?yōu)閏是由于一個(gè)“可移動(dòng)的控制因子”（transposablecontrollingelement）的插入引起的，她稱(chēng)之為Ds（dissociator）。①解離因子Ds第八章遺傳重組-2另外還有一個(gè)控制因子Ac（activator），它能激活：②激活因子AcDs插入C基因（引起突變），或從C基因中轉(zhuǎn)出（恢復(fù)突變）。W:white（C基因）第八章遺傳重組-2在插入位點(diǎn)上造成8bp的正向重復(fù)（DR），并導(dǎo)致染色體斷裂。Ac引起Ds插入色素基因第八章遺傳重組-2Ac也可以引起Ds解離色素基因突變恢復(fù)突變第八章遺傳重組-2動(dòng)畫(huà)演示Ac-Ds引起的玉米色素突變第八章遺傳重組-2（4）Ac-Ds的基因結(jié)構(gòu)第一個(gè)Ac因子長(zhǎng)4563bp，與細(xì)菌的轉(zhuǎn)座子非常相似。①Ac——可自主轉(zhuǎn)座的元件i）兩端各11bp的IR（invertedrepeat）。5’-CAGGGATGAAA-3’3’-GTCCCTACTTT-5’ii）中間有5個(gè)外顯子（exion）第八章遺傳重組-2兩個(gè)開(kāi)放閱讀框（openreadingframe，ORF），和3個(gè)非編碼區(qū)（noncodingregion，Nc）。編碼轉(zhuǎn)座酶。轉(zhuǎn)座酶識(shí)別兩頭的IR序列。第八章遺傳重組-2②Ds家族——各種各樣的Ac缺失突變第一個(gè)Ds因子（Ds-a）幾乎就是Ac的大ORF缺失一段194bp后的結(jié)果。這就是Ds依賴(lài)Ac的原因。位于玉米第9號(hào)染色體的短臂，在色素基因（C）的附近。喪失了轉(zhuǎn)座能力第八章遺傳重組-2各種Ds與Ac的關(guān)系第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2二、果蠅中的轉(zhuǎn)座子1.Copia1975年，DavidHogness和同事們?cè)诠墸―rosophilamelanogaster）中發(fā)現(xiàn)一類(lèi)基因，能轉(zhuǎn)錄出大量的（copious）RNA。在基因組中達(dá)到30份拷貝。他們因此稱(chēng)之為copia。有30個(gè)果蠅轉(zhuǎn)座子家族，占果蠅基因組的5%。（占中度重復(fù)序列的一半以上）。第八章遺傳重組-2果蠅染色體中的copia分布分散在基因組中第八章遺傳重組-2（1）copia的結(jié)構(gòu)5000-8000bp長(zhǎng)；①DTR兩端各有276bp的正向末端重復(fù)（directterminalrepeat,DTR)第八章遺傳重組-2②ITR在每個(gè)DTR內(nèi)部各有一個(gè)17bp的反向末端重復(fù)（invertedterminalrepeat，ITR）DTR序列在其他生物的轉(zhuǎn)座子中也發(fā)現(xiàn)過(guò)，但并不普遍。ITR短序列是普遍存在的。③與逆轉(zhuǎn)錄病毒的同源性序列分析表明它與retroviralDNA同源。可能是個(gè)逆轉(zhuǎn)座子。第八章遺傳重組-217.6和Ty912是酵母的轉(zhuǎn)座子第八章遺傳重組-22.P因子（Pelement）果蠅雜交不育（hybriddysgenesis）：P型果蠅（paternalcontributing）與M型（maternalcontributing）雜交：P♂×M♀F1不育P♀×M♂F1可育F2（1）雜交實(shí)驗(yàn)第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2（2）細(xì)胞學(xué)檢查P型雄果蠅的染色體上具有大量插入，插入序列稱(chēng)為Pelement。M型雌果蠅的染色體上沒(méi)有Pelement。（3）Pelement的結(jié)構(gòu)（所有的實(shí)驗(yàn)室果蠅幾乎都是M型的）ORF0ORF1ORF2I1I2I3ORF3IRIR①4個(gè)開(kāi)放閱讀框（ORF）②3個(gè)內(nèi)含子（I）③兩端各一個(gè)反向重復(fù)（IR）第八章遺傳重組-2（4）Pelement的作用過(guò)程只在生殖細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)座。在體細(xì)胞中雖然也轉(zhuǎn)錄，但轉(zhuǎn)錄出的產(chǎn)物沒(méi)有轉(zhuǎn)座酶活性?、俳M織特異性原因：轉(zhuǎn)錄后的剪切不同。i）體細(xì)胞中只有前兩個(gè)內(nèi)含子被剪切。有一種蛋白結(jié)合在第三個(gè)內(nèi)含子（內(nèi)有終止密碼）上，抑制第三個(gè)內(nèi)含子剪切。第八章遺傳重組-2翻譯產(chǎn)物是ORF0-ORF1-ORF2=66kDa蛋白質(zhì)。這個(gè)66kDa蛋白的功能恰好是個(gè)抑制轉(zhuǎn)座的抑制物。（在P型雌果蠅的卵細(xì)胞質(zhì)中大量存在，而且穩(wěn)定；M型雌果蠅中沒(méi)有）。ORF0ORF1ORF2I1I2I3ORF3IRIRORF0ORF1ORF2I3ORF3ORF0ORF1ORF2轉(zhuǎn)錄、剪切翻譯mRNA66kDa蛋白第八章遺傳重組-2ii）在生殖細(xì)胞中ORF0ORF1ORF2I1I2I3ORF3IRIRORF0ORF1ORF2ORF3ORF0ORF1ORF2轉(zhuǎn)錄、剪切翻譯mRNAORF3轉(zhuǎn)座酶沒(méi)有蛋白質(zhì)抑制第三個(gè)內(nèi)含子的剪切。87kDa轉(zhuǎn)座酶：使P因子轉(zhuǎn)座。導(dǎo)致不育。第八章遺傳重組-2②轉(zhuǎn)座離開(kāi)原位，直接插入到其他位點(diǎn)。P♂×M♀F1不育P♀×M♂（P♂）F1可育F2卵細(xì)胞質(zhì)有P，有66kD有P卵細(xì)胞質(zhì)無(wú)P，無(wú)66kD轉(zhuǎn)座不轉(zhuǎn)座（66kD抑制P）無(wú)P、有P30多年前在野外捕到的黑腹果蠅都是M型，最近10年捕到的都是P型。第八章遺傳重組-2第八章遺傳重組-2三、反轉(zhuǎn)座子（retrotransposons）以RNA為中介，反轉(zhuǎn)錄成DNA后進(jìn)行轉(zhuǎn)座的可移動(dòng)元件。1.反轉(zhuǎn)座子的類(lèi)型可分為兩類(lèi)：（1）病毒型反轉(zhuǎn)座子（viralretrotransposons）（2）非病毒型轉(zhuǎn)座子（nonviralretrotransposons）所有的真核生物都有反轉(zhuǎn)座子。第八章遺傳重組-22.病