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備案號:48489-2016DB36DB36/T885—2015南方水稻黑條矮縮病毒RT-PCR檢測技術(shù)規(guī)范RuleofRT-PCRDetectiononSouthernRiceBlack-streakedDwarfVirus2015-12-21發(fā)布2016-03-15實施江西省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I 1 1 1 2 2 2 2 2 3 4 51指一小段單鏈DNA或RNA,作為DNA復(fù)制的起始點,在核酸合成反應(yīng)時,作為每個多核苷酸鏈退火溫度annealingtem瓊脂糖凝膠電泳agarosegelel2取擴增樣品5μL,加入1μL6倍上樣緩沖液(6×loadingbuffer),混勻,點樣于1.0%的瓊脂糖凝膠(含0.05μL/mlEB或Goldview)上樣孔中,用0.5×TBE緩沖液在5V/cm~8V/cm電壓條件下電泳3南方水稻黑條矮縮病于2001年在我國廣東省陽江市查及室內(nèi)傳毒實驗表明,白背飛虱(Sogatellafurc及電泳圖譜、病毒基因組S9及S10序列,認為該病毒應(yīng)為呼腸孤病毒科(Reoviridae)斐濟病毒屬(Fijivirus)第2組的一個新種,并4B.1取疑似病株組織100mg,置于研缽中,加液氮研磨至粉末狀。或取單頭白背飛虱,置于2mLB.3如樣品中含有較多雜質(zhì),2℃~8℃,12,000r/m離心5min~10min,用移液器吸取上清,轉(zhuǎn)B.8棄上清,于沉淀中加入75%乙醇(4℃冰箱預(yù)冷)1mL,4℃,7,500r/m離心5

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