醫(yī)院培訓(xùn)課件：《標(biāo)本的采集與運(yùn)送》

標(biāo)本的采集與運(yùn)送

本章重點(diǎn)：掌握標(biāo)本采集的原則掌握血標(biāo)本、咽拭子標(biāo)本、痰標(biāo)本、尿標(biāo)本、糞標(biāo)本的采集方法

標(biāo)本的定義：是指采取患者少許的血液、排泄物（糞、尿）、分泌物（痰、鼻分泌物）、嘔吐物、體液（胸腔積液、腹腔積液）和脫落細(xì)胞（食道、陰道）等樣品，經(jīng)過物理、化學(xué)和生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和方法對其進(jìn)行檢驗(yàn)，作為判斷患者有無異常存在的依據(jù)。標(biāo)本采集的意義明確診斷觀察病情指導(dǎo)制定治療措施基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑6.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康?/p>

“遵照醫(yī)囑、充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對、正確采集、及時(shí)送檢?！比绾翁岣呒?xì)菌陽性檢出率？標(biāo)本采集時(shí)機(jī)標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運(yùn)送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本（退檢制度）高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境常見不合格標(biāo)本主要有以下問題：

標(biāo)本采集時(shí)間錯(cuò)誤容器錯(cuò)誤標(biāo)本量不足標(biāo)本采集延誤標(biāo)本未及時(shí)正確運(yùn)送以及暫存條件錯(cuò)誤。。。。。。。

血培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)送血培養(yǎng)概念:采集患者的血液或無菌體液標(biāo)本,送至微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)檢測.檢測原本無菌的血液及體液中是否有細(xì)菌存在.如有細(xì)菌,則極有可能為致病的細(xì)菌.進(jìn)一步進(jìn)行鑒定/藥敏試驗(yàn).目前血培養(yǎng)的問題：采血時(shí)機(jī)不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng)，不同時(shí)做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時(shí)正在使用抗生素治療“只有在發(fā)熱時(shí)，才需要進(jìn)行血培養(yǎng)。”————關(guān)于血培養(yǎng)指征想采就采？答案：血培養(yǎng)的指征當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時(shí)，應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有：不明原因的發(fā)燒(＞38℃)或體溫過低(＜36℃)白細(xì)胞增多（＞10,000/ul），粒細(xì)胞減少（＜1,000ul）休克，寒顫，僵直嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎，心內(nèi)膜炎，肺炎，腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染，…)心率異常加快低血壓或高血壓呼吸頻率加快“何時(shí)采血進(jìn)行血培養(yǎng)，無特殊時(shí)間要求?！薄P(guān)于采血時(shí)機(jī)？03060時(shí)間(分鐘)體溫血培養(yǎng)采血時(shí)機(jī)細(xì)菌濃度答案：采集血培養(yǎng)樣本的最佳時(shí)間盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時(shí)采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)

“為減輕患者痛苦，只從一個(gè)穿刺部位采一份血液標(biāo)本即可。”———關(guān)于采血套數(shù)及部位？基本概念成人“一套”血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè)，也叫“一份”注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應(yīng)從另一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。兒童一般只做需氧培養(yǎng)，但仍需從多個(gè)部位采集多次。特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)。

“每瓶采集多少血液無特殊要求?！薄P(guān)于采血量？采血量(ml)與檢出率的關(guān)系

Overall血培養(yǎng)物每增加一毫升，真性菌血癥成年人微生物的檢出率增加3％但并非越多越好，超過一定數(shù)量的采血量會(huì)稀釋培養(yǎng)瓶內(nèi)的肉湯，使肉湯無法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補(bǔ)體、抗體、抗生素）。所以血液與肉湯的最佳比例為1：4－1：10答案：關(guān)于采集血液量采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素成人一份標(biāo)本2個(gè)培養(yǎng)瓶（需氧＋厭氧），每瓶8－10ml，共20ml；要求至少采兩份標(biāo)本，即40ml。兒童一般只需采集需氧瓶，在保證采集血量＜1％總血量下，一般為1－3ml采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90％以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染

先采生化、凝血標(biāo)本，再采血培養(yǎng)標(biāo)本?！薄P(guān)于各種血液標(biāo)本的采集順序？血培養(yǎng)對無菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標(biāo)本要高。所以要最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本。污染率的指標(biāo)是<3%

（100份標(biāo)本里只能有不到3個(gè)標(biāo)本出現(xiàn)污染。）答案：采各種血液標(biāo)本的先后順序“消毒的重點(diǎn)是足夠量的消毒劑?！薄P(guān)于皮膚及培養(yǎng)瓶消毒？皮膚消毒程序：推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消毒劑。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用時(shí)間與碘町一樣（但不能用于少于2個(gè)月嬰兒皮膚消毒）培養(yǎng)瓶的消毒程序：去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。自然待干。將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)。5.

顛倒混勻標(biāo)本與肉湯，以避免血液凝集。“培養(yǎng)瓶未使用時(shí)，需要冷藏或冷凍?！薄P(guān)于培養(yǎng)瓶的儲(chǔ)存溫度？不需冷藏，更不能冷凍。保存在15－25℃的室溫即可，溫度過低會(huì)導(dǎo)致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。答案：關(guān)于未用培養(yǎng)瓶的儲(chǔ)存溫度“加入標(biāo)本后的培養(yǎng)瓶夜班未能及時(shí)送到檢驗(yàn)科，可以冷藏或放入35℃的溫箱?！薄P(guān)于夜班血培養(yǎng)的送檢？培養(yǎng)瓶夜班未能及時(shí)送到檢驗(yàn)科，存在室溫即可，不能冷藏也不能放入35

℃的溫箱。過夜不會(huì)對檢測造成影響，但仍需盡快送檢。冷藏可能導(dǎo)致對溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。溫箱會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌進(jìn)入生長對數(shù)期，從而錯(cuò)過檢測的最佳時(shí)期。答案：關(guān)于夜班血培養(yǎng)的送檢“患者靜脈中插有導(dǎo)管，可直接從導(dǎo)管采血。”———關(guān)于采血部位？

不可以，常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置中采集，檢出污染或定植菌的可能性較大。除非懷疑導(dǎo)管相關(guān)性血流感染，請參照導(dǎo)管相關(guān)性血流感染的采血方法。答案：關(guān)于從靜脈留置裝置直接采血血培養(yǎng)標(biāo)本的拒收瓶子上帖的標(biāo)簽錯(cuò)誤或未帖標(biāo)簽。血培養(yǎng)瓶打破的、損壞的或滲漏。血液凝固。上呼吸道標(biāo)本

咽拭子標(biāo)本采集

目標(biāo)：從咽部和扁桃體取分泌物作細(xì)菌培養(yǎng)或病毒分離，協(xié)助診斷。上呼吸道感染：絕大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位；導(dǎo)致咽痛、鼻涕、常常會(huì)發(fā)熱。感染喉部、中耳、鼻竇炎、結(jié)膜炎或角膜炎。可能與嚴(yán)重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和傳染性單核細(xì)胞增多癥并存。操作步驟及要點(diǎn)操作前準(zhǔn)備核對點(diǎn)燃酒精燈，指導(dǎo)患者張口發(fā)“啊”音，用長棉簽蘸以敏捷、輕柔的動(dòng)作擦拭兩側(cè)腭弓、咽扁桃體上的分泌物，取畢，將試管口及棉塞在酒精燈火焰上消毒后插入棉簽，塞緊。將棉簽插入試管中送檢

咽拭子標(biāo)本采集注意事項(xiàng)作真菌培養(yǎng)時(shí)，須在口腔潰瘍面采集分泌物避免交叉感染注意棉簽不要觸及其它部位，防止污染標(biāo)本，影響其他結(jié)果避免在進(jìn)食2小時(shí)內(nèi)采集標(biāo)本，以防嘔吐痰培養(yǎng)標(biāo)本采集與運(yùn)送病原體種類繁多而復(fù)雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲咳痰途經(jīng)口咽部唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml。研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。不可避免地受到污染分類目的痰常規(guī)標(biāo)本痰液一般形狀，涂片查細(xì)胞、細(xì)菌、蟲卵等痰培養(yǎng)標(biāo)本痰中的致病菌24小時(shí)痰標(biāo)本24小時(shí)痰液的量和性狀三種痰標(biāo)本的區(qū)別分類用物痰常規(guī)標(biāo)本普通容器，痰盒痰培養(yǎng)標(biāo)本無菌集痰器，漱口液24小時(shí)痰標(biāo)本500ml的廣口玻璃瓶，內(nèi)盛少量清水分類采集方法痰常規(guī)標(biāo)本幻燈片10能自理的患者；無法咳痰或不合作者痰培養(yǎng)標(biāo)本步驟基本同上。不同的是先用漱口液漱口，再用清水漱口；無菌容器，無菌操作。24小時(shí)痰標(biāo)本從晨7時(shí)~次晨7時(shí)第一口痰結(jié)束。全部痰液留在容器中送檢?？忍禈?biāo)本的采集標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！

能自理的患者：

—晨起后用清水漱口

—以清晨第一口痰為宜

—深吸氣后用力咳出氣管深處的痰液

—不可混入漱口液、唾液、鼻涕等無法咳痰或不合作者：

—用吸痰法收集（集痰器）關(guān)于咳痰標(biāo)本在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1～2h內(nèi)必須立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室處理咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭議的標(biāo)本取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口深咳，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo)無痰可用3％～5％NaCl5ml霧吸約5min導(dǎo)痰也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等法取痰

痰標(biāo)本采集注意事項(xiàng)1、如查癌細(xì)胞，應(yīng)立即送檢或用95%乙醇或用10%甲醛固定后送檢2、不可將唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中3、收集痰液宜在清晨，因此時(shí)痰量較多，痰內(nèi)細(xì)菌也較多，提高陽性率。痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存盡快（<2h）送至實(shí)驗(yàn)室。如不能及時(shí)送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于4℃，但放置時(shí)間不可超過24h。厭氧培養(yǎng)標(biāo)本的最佳運(yùn)送時(shí)間取決于標(biāo)本量。被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。尿標(biāo)本采集與運(yùn)送你知道嗎？尿液通常是無菌的或一過性有少量微生物，但是尿道內(nèi)或尿道周圍皮膚的菌群會(huì)污染尿液標(biāo)本，從而可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的培養(yǎng)結(jié)果。診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療48-72小時(shí)后再采集第二份標(biāo)本。對于癥狀不明顯的病人，需采集2-3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時(shí)，應(yīng)連續(xù)3天采集晨尿。多次收集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng)。室溫都有利于病原菌和污染菌會(huì)生長繁殖，因此若30min內(nèi)不能及時(shí)培養(yǎng)尿液則必須冷藏，但也不能超過24小時(shí)。

尿標(biāo)本的分類尿常規(guī)標(biāo)本尿培養(yǎng)標(biāo)本12h或24h尿標(biāo)本尿常規(guī)標(biāo)本查尿液的性狀，有無管型和細(xì)胞，并作尿蛋白和尿糖的定性檢測用物準(zhǔn)備：一次性尿杯尿培養(yǎng)標(biāo)本清潔中段尿?qū)驅(qū)Ч苣蚪?jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳不能立即送檢者，可暫存4℃冰箱，但保存不超過8h清潔中段尿液盡量取早晨第一次尿液棄去開始流出的尿液，以沖刷尿道口的細(xì)菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿詳細(xì)告知病人以下操作步驟女性病人收集標(biāo)本前用清洗液沖洗干凈，從前向后仔細(xì)擦洗尿道區(qū)域分開陰唇，開始排尿排出幾毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人回縮包皮并清洗龜頭排出幾毫升后，不停止尿流，采集中段尿中段尿留取法：1、導(dǎo)尿術(shù)2、按導(dǎo)尿術(shù)清潔外陰、尿道口→囑患者排去前段尿→用試管留取5-10ml中段尿液導(dǎo)尿管尿液集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng)；導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng)，因?yàn)楹茈y避免沒有尿道菌群污染。留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本常通過專門的采樣端口采集，不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒；必要時(shí)，可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過30分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液；注入無菌杯或試管中恥骨上穿刺吸取尿液常用于患兒、泌尿道厭氧菌感染或脊柱損傷病人等?？杀苊饽虻阑驎?huì)陰細(xì)菌的污染，但對膀胱內(nèi)少量尿液的小兒難以實(shí)施。方法：消毒自臍以下至尿道之間區(qū)域的皮膚，局麻穿刺點(diǎn)部位；在恥骨聯(lián)合與臍連線上，高于恥骨聯(lián)合2cm處進(jìn)針刺入膀胱；取20ml尿液；置于無菌容器中并送往實(shí)驗(yàn)室?？捎糜趨捬蹙鷻z測12h或24h尿標(biāo)本尿生化或尿濃縮查結(jié)核桿菌

7pm(am)排空膀胱→翌日7am

請病人先把尿液排到便盆或便壺內(nèi)，再置于3000-5000ml帶蓋的清潔容器內(nèi)。用物：容器（3000~5000ml）防腐劑常用防腐劑：

甲醛：—防腐和固定，用于作尿愛迪計(jì)數(shù)（12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)）等—每30ml尿液加40%甲醛液1滴

濃鹽酸：

—作用：保持尿液在酸性環(huán)境中，防止尿中激素被氧化。常用于內(nèi)分泌系統(tǒng)的檢驗(yàn)，如17-酮類固醇、17-羥類固醇—24小時(shí)尿中加5-10ml

甲苯：—保持尿液的化學(xué)成分不變，常用作尿蛋白、尿糖的定量測定?！梅ǎ好?00ml尿液中加入0.5%~1%甲苯2ml，使之形成一薄膜，覆蓋于尿液的表面，防止細(xì)菌感染。如果測定尿中的鈉、鉀、氯、肌酐、肌酸等需加10ml。尿標(biāo)本采集注意事項(xiàng)女患者月經(jīng)期不宜留取尿標(biāo)本會(huì)陰部分泌物過多時(shí)，應(yīng)先清潔再?zèng)_洗，再收集。做早孕檢查試驗(yàn)應(yīng)留晨尿留取尿培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)，無菌操作留取12h或24h尿標(biāo)本，集尿瓶應(yīng)放在陰涼處，根據(jù)檢驗(yàn)要求加防腐劑。

糞便標(biāo)本采集與運(yùn)送意義、目的：1、了解消化道炎癥、梗阻、出血、寄生蟲感染等2、了解消化道狀況，粗略判斷胰腺的外分泌功能3、糞便隱血可作為消化道惡性腫瘤的診斷篩查試驗(yàn)4、檢查糞便中有無細(xì)菌感染，防止腸道感染種類目的容器常規(guī)標(biāo)本查一般形狀便盒細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本查致病菌培養(yǎng)瓶隱血標(biāo)本查肉眼不能察見的微量血液便盒寄生蟲或蟲卵標(biāo)本查寄生蟲便盒大便培養(yǎng)種類操作要點(diǎn)常規(guī)標(biāo)本排空膀胱。異常糞便挑取有膿血、粘液的部分；外觀無異常的糞便應(yīng)從中央取材，5g蠶豆大小細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本用無菌棉簽取中央部分或膿血、粘液部分2-5g致培養(yǎng)瓶內(nèi)，塞緊瓶蓋。隱血標(biāo)本（OB）檢查前3天禁食肉類、肝、血、含大量綠葉素的食物或含鐵劑藥物，三天后留取標(biāo)本送檢。寄生蟲或蟲卵標(biāo)本蟲卵：不同部位的異常糞便5-10g蟯蟲：用透明膠帶粘肛門周圍阿米巴：便器加熱致人體體溫采集糞便標(biāo)本的注意事項(xiàng)：1、采集培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)，如患者無便意，用長無菌棉簽蘸生理鹽水，由肛門插入6-7cm，順一個(gè)方向輕輕旋轉(zhuǎn)后取出，將棉簽插入培養(yǎng)試管內(nèi)，蓋緊送檢。2、病人服用驅(qū)蟲藥或做血吸蟲孵化實(shí)驗(yàn)，應(yīng)留取全部糞便送檢。3、患者如有腹瀉，水樣便應(yīng)盛于便盆內(nèi)送檢

動(dòng)脈血標(biāo)本采集與運(yùn)送動(dòng)脈采血法——血?dú)夥治?/p>

血?dú)夥治鍪轻t(yī)學(xué)上常用于判斷機(jī)體是否存在酸堿平衡失調(diào)以及缺氧和缺氧程度等。

酸堿度(pH)，二氧化碳分壓(PCO2)，二氧化碳總量(TCO2)，氧分壓（PO2），氧飽和度(SatO2)，實(shí)際碳酸氫根（AB），剩余堿（BE），陰離子隙（AG），

肝素抗凝動(dòng)脈血2ml，抽血后要求嚴(yán)加密封，不能