化妝品中CI59040等24種原料的檢測方法

化妝品中CI59040等24種原料的檢測方法DeterminationofCI59040andother23kindsofcomponentsincosmetics本方法規(guī)定了染發(fā)類化妝品中禁用著色劑的檢驗方法。（一）CI59040等11種原料CI59040andother10kindsofcomponents1范圍本方法適用于膏霜乳類、氣霧劑類、噴霧劑類化妝品中CI59040等11種原料含量的測定。本方法所指的11種原料包括CI59040（溶劑綠7）、CI10020（酸性綠1）、CI45430（食品紅14）、CI14700（食品紅1）、CI45350（酸性黃73）、CI14270（酸性橙6）、CI45380（酸性紅87）、CI16185（食品紅9）、CI42053（食品綠3）、CI42045（酸性藍1）、CI42051（食品藍5）。2方法提要樣品提取后，經高效液相色譜儀分離，二極管陣列檢測器檢測，根據保留時間和紫外光譜定性，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。本方法中各原料的檢出限、定量下限及取樣量為0.2g，定容至10mL時的檢出濃度、最低定量濃度見表1。表111種原料的檢出限、檢出濃度、定量下限和最低定量濃度序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名檢出限（ng）檢出濃度（μg/g）定量下限（ng）最低定量濃度（μg/g）1CI59040溶劑綠70.90153.0502CI10020酸性綠10.90153.0503CI45430食品紅140.90153.0504CI14700食品紅10.457.51.5255CI45350酸性黃730.457.51.5256CI14270酸性橙60.457.51.5257CI45380酸性紅870.457.51.5258CI16185食品紅90.457.51.5259CI42053食品綠30.457.51.52510CI42045酸性藍10.457.51.52511CI42051食品藍50.457.51.5253試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1甲醇。3.2乙腈，色譜純。3.3乙酸銨，色譜純。3.4乙酸，色譜純。3.5甲酸。3.6氨水。3.70.02mol/L乙酸銨溶液：稱取乙酸銨（3.3）1.54g，用水稀釋至1000mL，混勻，經0.45μm微孔濾膜過濾，濾液備用。3.8各原料標準儲備溶液：按“表2”稱取CI59040等11種原料的標準品適量于10mL棕色容量瓶中，分別用表中所示的溶劑溶解并定容，配成各原料標準儲備溶液，其濃度如“表2”所示。各原料標準儲備溶液于0℃～6℃避光保存，保存期為3個月。表2標準儲備溶液和混合標準溶液的配制序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名稱樣量（mg）定容溶劑標準儲備溶液濃度（μg/mL）移取體積（mL）混合標準溶液濃度（μg/mL）1CI59040溶劑綠710水10001.01002CI10020酸性綠110水10001.01003CI45430食品紅1410水10001.01004CI14700食品紅110水10000.5505CI45350[1]酸性黃7310水10000.5506CI14270[1]酸性橙610水10000.5507CI45380酸性紅8710水10000.5508CI16185食品紅910水10000.5509CI42053食品綠310水10000.55010CI42045酸性藍110水10000.55011CI42051食品藍510水10000.550注：[1]必要時，加入定容溶劑前預先加入少量甲醇（3.1）使溶解，再用定容溶劑定容。4儀器和設備4.1高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器。4.2液相色譜-串聯四級桿質譜聯用儀。4.3天平。4.4精密pH計。4.5超聲波清洗器。4.6渦旋振蕩器。4.7離心機。5分析步驟5.1混合標準系列溶液的制備按“表2”所示移取體積準確移取各原料標準儲備溶液（3.8）于10mL容量瓶中，用0.02mol/L乙酸銨溶液（3.7）稀釋至刻度，配成混合標準溶液。取混合標準溶液適量，用0.02mol/L乙酸銨溶液（3.7）稀釋得混合標準系列溶液，各原料標準系列溶液濃度見表3。表3CI59040等11種原料標準系列溶液濃度序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名混合標準系列溶液濃度（μg/mL）混標1混標2混標3混標4混標5混標61CI59040溶劑綠7251020501002CI10020酸性綠1251020501003CI45430食品紅14251020501004CI14700食品紅112.551025505CI45350酸性黃7312.551025506CI14270酸性橙612.551025507CI45380酸性紅8712.551025508CI16185食品紅912.551025509CI42053食品綠312.5510255010CI42045酸性藍112.5510255011CI42051食品藍512.55102550注：實驗室可根據實際情況調整合適的標準系列溶液濃度范圍。5.2樣品處理稱取樣品0.2g（精確到0.0001g）于10mL具塞比色管中，加0.02mol/L乙酸銨溶液（3.7）適量，渦旋分散，超聲提取10min，必要時可用甲酸（3.5）或氨水（3.6）調節(jié)pH值，使pH值范圍在5.5～7.0之間，用0.02mol/L乙酸銨溶液（3.7）定容至刻度。如為渾濁溶液，可取適量離心（5000rpm）5min，取上清液經0.45μm親水微孔聚四氟乙烯（PTFE）濾膜過濾，濾液作為待測溶液，并于6小時內完成檢測。注：噴霧劑類化妝品不測CI14270。5.3色譜條件色譜柱：C18柱（5μm，4.6×250mm），或等效色譜柱；流動相：溶液A：乙腈（3.2）；溶液B：0.02mol/L乙酸銨溶液（3.7）；梯度洗脫程序見表4。表4梯度洗脫程序Time（min）A（%）B（%）02985298710901120803250503490103529845298流速：0.8mL/min；柱溫：35℃；進樣量：5μL；檢測波長：250nm（CI59040、CI10020、CI16185、CI14270）；500nm（CI14700、CI45350、CI45380、CI45430）；620nm（CI42053、CI42045、CI42051）。5.4測定在“5.3”色譜條件下，取混合標準系列溶液（5.1）分別進樣，進行色譜分析，以標準系列溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。取“5.2”項下的待測溶液進樣，根據保留時間和紫外光圖譜定性，測得峰面積，根據標準曲線得到待測溶液中各測定原料的濃度。按“6”計算樣品中各原料的含量。6分析結果的表述6.1計算式中：ω——化妝品中CI59040等11種原料的質量分數，μg/g；ρ——從標準曲線得到待測原料的濃度，μg/mL；V——樣品定容體積，mL；m——樣品取樣量，g。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。6.2回收率和精密度CI59040等11種原料的回收率在85.2%～108.1%之間，相對標準偏差在0.4%～3.8%之間。7圖譜圖1混合標準溶液在250nm下的色譜圖1：CI59040；2：CI10020；3：CI16185；4：CI14270圖2混合標準溶液在500nm下的色譜圖5：CI14700；6：CI45350；7：CI45380；8：CI45430圖3混合標準溶液在620nm下的色譜圖9：CI42053；10：CI42051；11：CI42045（二）CI58000等13種原料CI58000andother12kindsofcomponents1范圍本方法適用于膏霜乳類、氣霧劑類、噴霧劑類化妝品中CI58000等13種原料含量的測定。本方法所指的13種原料包括CI58000（顏料紅83）、CI15880（顏料紅63）、CI45190（酸性紫9）、CI15800（顏料紅64）、CI11920（食品橙3）、CI12010（溶劑紅3）、CI45370（酸性橙11）、CI12085（顏料紅4）、CI44045（堿性藍26）、CI42510（堿性紫14）、CI47000（溶劑黃33）、CI60725（溶劑紫13）、CI61565（溶劑綠3）。2方法提要樣品提取后，經高效液相色譜儀分離，二極管陣列檢測器檢測，根據保留時間和紫外光譜定性，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。本方法中各原料的檢出限、定量下限及取樣量為0.2g，定容至10mL時的檢出濃度、最低定量濃度見表1。表113種原料的檢出限、檢出濃度、定量下限和最低定量濃度序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名檢出限（ng）檢出濃度（μg/g）定量下限（ng）最低定量濃度（μg/g）1CI58000顏料紅830.457.51.5252CI15880顏料紅630.457.51.5253CI45190酸性紫90.457.51.5254CI15800顏料紅640.457.51.5255CI11920食品橙30.457.51.5256CI12010溶劑紅30.457.51.5257CI45370酸性橙110.183.00.60108CI12085顏料紅40.183.00.60109CI44045堿性藍260.183.00.601010CI42510堿性紫140.183.00.601011CI47000溶劑黃330.183.00.601012CI60725溶劑紫130.183.00.601013CI61565溶劑綠30.183.00.60103試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1甲醇。3.2四氫呋喃。3.3甲酸。3.4二甲基亞砜。3.5乙腈，色譜純。3.6乙酸銨，色譜純。3.7乙酸，色譜純。3.8甲醇四氫呋喃混合溶劑：分別量取甲醇（3.1）120mL和四氫呋喃（3.2）80mL，混勻。3.9甲醇四氫呋喃混合溶劑（含0.2%甲酸）：精密吸取甲酸（3.3）0.2mL，加甲醇四氫呋喃混合溶劑（3.8）稀釋并定容至100mL，混勻。3.100.02mol/L乙酸銨溶液：稱取乙酸銨（3.6）1.54g，用水稀釋至1000mL，混勻，經0.45μm微孔濾膜過濾，濾液備用。3.11各原料標準儲備溶液：按“表2”稱取CI58000等13種原料的標準品適量于25mL棕色容量瓶中，分別用表中所示的溶劑溶解并定容，配成各原料標準儲備溶液，其濃度如“表2”所示。各原料標準儲備溶液于0℃～6℃下避光保存，保存期為3個月。表2標準儲備溶液和混合標準溶液的配制序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名稱樣量（mg）定容溶劑[1]標準儲備溶液濃度（μg/mL）移取體積（mL）混合標準溶液濃度（μg/mL）1CI58000顏料紅8312.53.25002.5502CI15880顏料紅6312.53.45002.5503CI45190酸性紫912.53.15002.5504CI15800顏料紅6412.53.45002.5505CI11920食品橙312.53.15002.5506CI12010溶劑紅312.53.25002.5507CI45370酸性橙11253.110000.5208CI12085顏料紅4253.210000.5209CI44045堿性藍26253.110000.52010CI42510堿性紫14253.110000.52011CI47000溶劑黃33253.210000.52012CI60725溶劑紫13253.210000.52013CI61565溶劑綠3253.210000.520注：[1]定容溶劑的代號見“3試劑與材料”。4儀器和設備4.1高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器。4.2液相色譜-串聯四級桿質譜聯用儀。4.3天平。4.4精密pH計。4.5超聲波清洗器。4.6渦旋振蕩器。4.7離心機。5分析步驟5.1混合標準系列溶液的制備按“表2”所示移取體積準確移取各原料標準儲備溶液（3.11）于25mL容量瓶中，用甲醇四氫呋喃混合溶劑（3.8）稀釋至刻度，配成混合標準溶液。取混合標準溶液適量，用甲醇四氫呋喃混合溶劑（3.8）稀釋得混合標準系列溶液，各原料標準系列溶液濃度見表3。表3CI58000等13種原料標準系列溶液濃度序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名混合標準系列溶液濃度（μg/mL）混標1混標2混標3混標4混標5混標61CI58000顏料紅8312.551025502CI15880顏料紅6312.551025503CI45190酸性紫912.551025504CI15800顏料紅6412.551025505CI11920食品橙312.551025506CI12010溶劑紅312.551025507CI45370酸性橙110.412410208CI12085顏料紅40.412410209CI44045堿性藍260.4124102010CI42510堿性紫140.4124102011CI47000溶劑黃330.4124102012CI60725溶劑紫130.4124102013CI61565溶劑綠30.41241020注：實驗室可根據實際情況調整合適的標準系列溶液濃度范圍。5.2樣品處理5.2.1膏霜乳類、噴霧劑類樣品稱取樣品0.2g（精確到0.0001g）于10mL具塞比色管中，加甲醇四氫呋喃混合溶劑（含0.2%甲酸）（3.9）適量，渦旋分散，超聲提取10min，用甲醇四氫呋喃混合溶劑（含0.2%甲酸）（3.9）定容至刻度，混勻，經0.45μm疏水微孔聚四氟乙烯（PTFE）濾膜過濾，濾液作為待測溶液，并于6小時內完成檢測。5.2.2氣霧劑類樣品稱取樣品0.2g（精確到0.0001g）于10mL具塞比色管中，加甲醇四氫呋喃混合溶劑（3.8）適量，渦旋分散，超聲提取10min，用甲醇四氫呋喃混合溶劑（3.8）定容至刻度，混勻，經0.45μm疏水微孔聚四氟乙烯（PTFE）濾膜過濾，濾液作為待測溶液，并于6小時內完成檢測。5.3色譜條件色譜柱：C18柱（5μm，4.6×250mm），或等效色譜柱；流動相：溶液A：乙腈（3.5）；溶液B：0.02mol/L乙酸銨溶液（3.10）；梯度洗脫程序見表4。表4梯度洗脫程序Time（min）A（%）B（%）0208074060184555281000381000392080492080流速：0.8mL/min；柱溫：35℃；進樣量：5μL；檢測波長：250nm（CI58000；CI11920；CI47000；CI12010；CI60725；CI61565）；500nm（CI45370；CI42510；CI15880；CI15800；CI45190；CI12085）；620nm（CI44045）。5.4測定在“5.3”色譜條件下，取混合標準系列溶液（5.1）分別進樣，進行色譜分析，以標準系列溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。取“5.2”項下的待測溶液進樣，根據保留時間和紫外光圖譜定性，測得峰面積，根據標準曲線得到待測溶液中各測定原料的濃度。按“6”計算樣品中各原料的含量。6分析結果的表述6.1計算式中:ω——化妝品中CI58000等13種原料的質量分數，μg/g；ρ——從標準曲線得到待測原料的濃度，μg/mL；V——樣品定容體積，mL；m——樣品取樣量，g。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。6.2回收率和精密度CI58000等13種原料的回收率在84.9%～111.1%之間，相對標準偏差在0.5%～6.3%之間。7圖譜圖1混合標準溶液在250nm下的色譜圖1：CI58000；2：CI11920；3：CI47000；4：CI12010；5：CI60725；6：CI61565圖2混合標準溶液在500nm下的色譜圖7：CI45370；8：CI42510；9：CI15880；10：CI15800；11：CI45190；12：CI12085圖3混合標準溶液在620nm下的色譜圖13：CI44045附錄ACI59040等24種原料陽性結果的確證如檢出陽性原料，需采用液相色譜-質譜法確證結果。A.1樣品前處理過程見方法“（一）5.2樣品處理”和“（二）5.2樣品處理”。A.2參考色譜條件色譜柱：C18柱（2.7μm，3.0×100mm），或等效色譜柱；流動相：溶液A：0.01mol/L乙酸銨溶液（用乙酸調pH值至5.5）；溶液B：0.02%乙酸乙腈溶液；梯度洗脫程序見表A.1；表A.1流動相梯度洗脫程序Time(min)A(%)B(%)095510595165951795522955流速：0.3mL/min；柱溫：35℃；進樣量：2μL。A.3參考質譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI）；監(jiān)測模式：正、負離子多反應監(jiān)測模式（MRM）；監(jiān)測離子對及相關電壓參數設定見表A.2；離子源加熱溫度：550℃；離子噴霧電壓：5.5kV（正源）、-4.5kV（負源）；氣簾氣：35psi；霧化氣：50psi；輔助加熱氣：50psi。表A.224種原料的監(jiān)測離子對及相關電壓參數設定表序號名稱電離模式母離子(m/z)子離子(m/z)碰撞能(CE)1CI45350+333.1202.080287.3552CI44045+470.3454.360349.2543CI42510+302.2209.044195.0464CI47000+274.1105.038228.0465CI60725+330.1238.037311.8346CI61565+419.2328.053402.3487CI59040-228.4187.8-2079.8-458CI10020-252.0207.0-30234.8-249CI45430-834.8662.6-52536.9-5510CI14700-217.0199.0-19170.2-2211CI14270-293.0170.9-33156.0-3612CI45380-646.4520.9-42443.0-4213CI16185-268.0206.0-30228.0-2014CI42053-381.1170.0-37341.1-2515CI42045-543.2419.0-59462.8-4516CI42051-559.2435.1-59479.1-4017CI58000-239.0210.0-43166.9-3918CI15880-421.0186.9-27143.0-4519CI45190-589.1545.1-46184.9-5020CI15800-291.1247.0-22219.0-2821CI11920-213.1121.0-2292.0-3722CI12010-291.1262.0-25232.9-3923CI45370-488.9443.9-31363.0-4024CI12085-326.0155.9-27171.7-40注：當采用不同質譜儀器時，儀器參數可能存在差異，測定前應將質譜參數優(yōu)化到最佳A.4定性用液相色譜-三重四極桿串聯質譜儀進行定性。如樣品檢出的特征離子峰的保留時間與濃度相近的標準溶液中對應原料一致，且樣品所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與標準溶液的監(jiān)測離子對的相對豐度比的偏差不超過表A.3規(guī)定范圍，則可判斷樣品中存在對應的待測原料。表A.3結果確證時離子對相對豐度比的最大允許偏差相對離子豐度（k）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%圖A.1標準溶液LC-MS色譜圖（正離子模式）1：CI42510；2：CI45350；3：CI47000；4：CI44045；5：CI60725；6：CI61565圖A.2標準溶液LC-MS色譜圖（負離子模式）7：CI59040；8：CI10020；9：CI16185；10：CI14270；11：CI42053；12：CI14700；13：CI45380；14：CI42045；15：CI42051；16：CI45430；17：CI45370；18：CI15880；19：CI45190；20：CI58000；21：CI15800；22：CI11920；23：CI12010；24：CI15800附錄B表B.1CI59040等24種原料信息序號著色劑索引號著色劑索引通用中文名分子式CAS相對分子質量1CI59040溶劑綠7C16H7Na3O10S36358-69-6524.392CI10020酸性綠1C30H15FeN3Na3O15S319381-50-1878.463CI45430食品紅14C20H6I4Na2O516423-68-0879.864CI14700食品紅1C18H14N2Na2O7S24548-53-2480.425CI45350酸性黃73C20H10Na2O5518-47-8376.276CI14270酸性橙6C12H9N2NaO5S547-57-9316.277CI45380酸性紅87C20H6Br4Na2O517372-87-1691.858CI16185食品紅9C20H11N2Na3O10S3915-67-3604.479CI42053食品綠3C37H34N2Na2O10S32353-45-9808.8510CI42045酸性藍1C27H31N2NaO6S2129-17-9566.6611CI42051食品藍5C54H62CaN4O14S43536-49-01159.4312CI58000顏料紅83C14H8O472-48-0240.2113CI15880顏料紅63C21H12CaN2O6S6417-83-0460.4714CI45190酸性紫9C34H25N2NaO6S6252-76-2612.6315CI15800顏料紅64C34H22CaN4O66371-76-2622.6416CI11920食品橙3C12H10N2O22051-85-6214.2217CI12010溶劑紅3C18H16N2O26535-42-8292.3318CI45370酸性橙11C20H8Br2Na2O54372-2-5534.0619CI12085顏料紅4C16H10ClN3O32814-77-9327.7220CI44045堿性藍26C33H32ClN32580-56-5506.0821CI42510堿性紫14C20H20ClN3632-99-5337.