蛋白質(zhì)的化學(xué)-蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)(生物化學(xué)課件)

等電點延遲符號一、蛋白質(zhì)的兩性電離及等電點

蛋白質(zhì)分子中具有可解離基團(tuán)，分別可以使其帶上正、負(fù)電荷，因此蛋白質(zhì)也具有兩性，在電場中也可以電泳。蛋白質(zhì)的等電點(pI)：在某一pH溶液中，蛋白質(zhì)所帶的正電荷和負(fù)電荷相等，成為兼性離子，凈電荷為零，此溶液的pH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點考點電泳:帶電顆粒在電場力的作用下向著與其電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。

蛋白質(zhì)電泳的方向主要決定于它所帶電荷的性質(zhì)；而泳動速度則取決于所帶電荷的量及分子顆粒大小。

實踐中常利用電泳來分析、分離蛋白質(zhì)混合物或作為蛋白質(zhì)純度鑒定的手段。蛋白質(zhì)分子電泳A：染色后顯示的蛋白質(zhì)區(qū)帶B：光密度掃描定量分析沉淀延遲符號（一）蛋白質(zhì)的沉淀

蛋白質(zhì)顆粒表面的水化膜和電荷使其膠體溶液保持穩(wěn)定，當(dāng)這兩個因素遭到破壞后，蛋白質(zhì)溶液就發(fā)生凝聚而沉淀析出，這種作用稱為蛋白質(zhì)的沉淀作用。+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點的蛋白質(zhì)++++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用溶液中蛋白質(zhì)的聚沉能沉淀各類生物堿的化學(xué)試劑叫做生物堿試劑。如：單寧酸、苦味酸、鉬酸、鎢酸、三氯乙酸能沉淀各類生物堿方法條件鹽析pH=pI水溶性有機(jī)溶劑法pH=pI重金屬鹽法

pH>pI

生物堿試劑法

pH<pI1.分離制備有活性的天然蛋白制品2.從制品中除去雜蛋白，或者制備失去活性的蛋白質(zhì)制品蛋白質(zhì)沉淀的實踐應(yīng)用（二）蛋白質(zhì)的凝固作用蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅固的凝塊，此凝塊不易再溶于強酸和強堿中。變性、沉淀、凝固之間的關(guān)系變性后的蛋白質(zhì)易于沉淀，沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性，但凝固的蛋白質(zhì)一定變性。變性延遲符號蛋白質(zhì)的變性、顯色和紫外反應(yīng)

天然蛋白質(zhì)分子由于受各種物理、化學(xué)因素的影響，空間結(jié)構(gòu)被破壞，理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)改變，但一級結(jié)構(gòu)不破壞，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。物理因素：高溫、高壓、劇烈振蕩、各種射線化學(xué)因素：強酸、強堿、重金屬鹽、有機(jī)溶劑及生物堿試劑等一、

蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)變性的因素考點考點1.理化性質(zhì)發(fā)生了變化，易發(fā)生凝集、沉淀2.生化性質(zhì)發(fā)生了變化，更容易被蛋白酶水解3.生物活性喪失，這是蛋白質(zhì)變性的最重要標(biāo)志之一變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)變性的本質(zhì)

破壞非共價鍵和二硫鍵（次級鍵），不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)?？键c考點

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)變性程度較輕時，如果去除變性因素，有的蛋白質(zhì)仍能恢復(fù)或部分恢復(fù)其原來的構(gòu)象及功能，這種變化稱為復(fù)性變性的可逆性

許多蛋白質(zhì)變性時被破壞嚴(yán)重，不能恢復(fù)，稱為不可逆性變性

天然狀態(tài)，有催化活性

尿素、β-巰基乙醇

去除尿素、β-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性核糖核酸酶

應(yīng)用舉例臨床醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用來消毒及滅菌。此外,防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)制劑（如疫苗等）的必要條件。

2019年口腔執(zhí)業(yè)助理醫(yī)師《生物化學(xué)》考試大綱單元細(xì)目要點一、蛋白質(zhì)的化學(xué)1.蛋白質(zhì)的分子組成（1）元素組成（2）基本單位2.蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)（1）肽鍵與肽鏈（2）一級結(jié)構(gòu)（3）二級結(jié)構(gòu)——α螺旋（4）三級和四級結(jié)構(gòu)的概念3.蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)（1）等電點（2）沉淀（3）變性點滴積累

1.蛋白質(zhì)兩性解離、膠體性質(zhì)、沉淀、變性、紫外吸收及顏色反應(yīng)均與蛋白質(zhì)的化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。

2.蛋白質(zhì)兩性解離狀態(tài)主要取決于蛋白質(zhì)分子中酸性和堿性基團(tuán)數(shù)量及酸、堿基團(tuán)解離度的大??；同時亦受蛋白質(zhì)溶液pH的影響。pI只是蛋白質(zhì)解離的一種特例狀態(tài)而以。

3.實踐中常運用蛋白質(zhì)的pI和其所處溶液的pH來判斷蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)及荷電多少?？筛鶕?jù)pI－pH的差來推論蛋白質(zhì)電荷性質(zhì)，其差值為正蛋白質(zhì)帶正電荷，反之亦然；差值越大，荷電數(shù)量則越多。4.蛋白質(zhì)的變性僅導(dǎo)致蛋白質(zhì)特