《抗真菌放線菌的分離和鑒定及抗稻瘟病病菌生物活性的研究》

《抗真菌放線菌的分離和鑒定及抗稻瘟病病菌生物活性的研究》一、引言近年來，隨著農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展和全球氣候的變化，農(nóng)作物病害問題日益嚴(yán)重，其中稻瘟病是水稻生產(chǎn)中的重要病害之一?？拐婢啪€菌作為一類具有廣泛生物活性的微生物資源，對于稻瘟病等病害的防治具有重要意義。因此，本論文旨在研究抗真菌放線菌的分離、鑒定及其對稻瘟病病菌的生物活性，以期為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供新的生物防治途徑。二、材料與方法（一）材料1.土壤樣品：從水稻田等不同生態(tài)環(huán)境中采集土壤樣品。2.培養(yǎng)基：使用高氏一號培養(yǎng)基進行放線菌的分離和純化。3.稻瘟病病菌：采用常見的稻瘟病病菌作為實驗對象。（二）方法1.抗真菌放線菌的分離與純化：將土壤樣品接種于高氏一號培養(yǎng)基上，進行放線菌的分離和純化。2.形態(tài)學(xué)鑒定及分子生物學(xué)鑒定：對純化后的放線菌進行形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)鑒定，包括菌落形態(tài)、顯微形態(tài)、生理生化特性以及16SrRNA基因序列分析等。3.生物活性測定：采用對峙培養(yǎng)法，測定放線菌發(fā)酵液對稻瘟病病菌的生物活性。三、實驗結(jié)果（一）抗真菌放線菌的分離與純化通過高氏一號培養(yǎng)基的分離和純化，成功分離出多株抗真菌放線菌。其中，一株具有較強抗真菌活性的放線菌被選為研究對象，命名為A-1。（二）形態(tài)學(xué)鑒定及分子生物學(xué)鑒定A-1菌株在培養(yǎng)基上形成的菌落呈圓形，表面光滑，邊緣整齊。顯微形態(tài)觀察顯示，A-1菌株為長鏈狀絲狀體，具有分生孢子。通過生理生化特性和16SrRNA基因序列分析，確定A-1菌株為鏈霉菌屬的一員。（三）生物活性測定通過采用對峙培養(yǎng)法測定A-1菌株發(fā)酵液對稻瘟病病菌的生物活性，結(jié)果顯示A-1菌株發(fā)酵液對稻瘟病病菌具有顯著的抑制作用，抑制率達到70%（四）結(jié)果分析與討論1.抗真菌放線菌的篩選與評價通過對高氏一號培養(yǎng)基上分離出的多株抗真菌放線菌進行篩選，我們成功選出一株具有較強抗稻瘟病病菌活性的放線菌A-1。這表明放線菌在生物防治中具有潛在的應(yīng)用價值，尤其是對于稻瘟病這類重要的植物病害。2.形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定結(jié)果的解讀A-1菌株的形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果相輔相成，為該菌株的分類和功能研究提供了重要依據(jù)。其形態(tài)特征如菌落形態(tài)、顯微形態(tài)等與鏈霉菌屬的描述相符，而16SrRNA基因序列分析則從分子水平上進一步確認(rèn)了A-1菌株的分類地位。3.生物活性測定的意義與應(yīng)用生物活性測定結(jié)果顯示，A-1菌株發(fā)酵液對稻瘟病病菌具有顯著的抑制作用，抑制率達到70%。這一結(jié)果對于開發(fā)新型生物農(nóng)藥具有重要意義。利用具有抗植物病原菌活性的放線菌開發(fā)生物農(nóng)藥，不僅可以有效防治植物病害，而且對環(huán)境友好，符合可持續(xù)發(fā)展的要求。4.進一步研究的方向盡管已經(jīng)得到了初步的陽性結(jié)果，但關(guān)于A-1菌株的抗稻瘟病病菌機制、最佳發(fā)酵條件、田間應(yīng)用效果等方面的研究仍需進一步深入。此外，還可以通過基因工程等手段對A-1菌株進行改良，以提高其抗稻瘟病病菌的效果和穩(wěn)定性。（五）結(jié)論本研究成功地從土壤中分離出多株抗真菌放線菌，其中一株命名為A-1的放線菌具有顯著的抗稻瘟病病菌活性。通過形態(tài)學(xué)鑒定和分子生物學(xué)鑒定，確定A-1菌株為鏈霉菌屬的一員。生物活性測定結(jié)果表明，A-1菌株發(fā)酵液對稻瘟病病菌的抑制率達到70%，顯示了其在生物防治中的潛在應(yīng)用價值。本研究為開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供了重要的理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。（六）展望隨著人們對環(huán)境保護和可持續(xù)發(fā)展的重視，生物防治在農(nóng)業(yè)病蟲害防治中的地位日益重要。抗真菌放線菌作為一類重要的生物防治資源，具有廣闊的應(yīng)用前景。未來研究可以圍繞以下幾個方面展開：一是進一步優(yōu)化抗真菌放線菌的分離和純化方法，提高抗性菌株的篩選效率；二是深入研究抗真菌放線菌的抗病機制，為其在生物防治中的應(yīng)用提供理論依據(jù)；三是通過基因工程等手段改良抗真菌放線菌，提高其抗病效果和穩(wěn)定性；四是加強田間試驗研究，評估抗真菌放線菌在實際應(yīng)用中的效果和可行性。（七）研究方法與實驗設(shè)計針對抗真菌放線菌的分離和鑒定及抗稻瘟病病菌生物活性的研究，我們將采用以下方法和實驗設(shè)計：1.采樣與分離首先，我們將在稻田、稻田周邊地區(qū)以及可能含有抗真菌放線菌的土壤中采集樣本。然后，采用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件，通過梯度稀釋法、涂布法等手段進行抗真菌放線菌的分離和純化。2.形態(tài)學(xué)鑒定與分子生物學(xué)鑒定對于分離出的抗真菌放線菌菌株，我們將首先進行形態(tài)學(xué)觀察，包括菌落形態(tài)、菌絲形態(tài)、孢子形態(tài)等方面的觀察。然后，利用分子生物學(xué)技術(shù)，如PCR、DNA序列分析等手段，對菌株進行鑒定，確定其種類和歸屬。3.生物活性測定對于鑒定后的抗真菌放線菌菌株，我們將進行生物活性測定。具體方法是將菌株進行發(fā)酵，然后取其發(fā)酵液進行稻瘟病病菌的抑制率測定。通過對比不同菌株的抑制率，篩選出具有較高抗稻瘟病病菌活性的菌株。4.抗病機制研究對于具有較高抗稻瘟病病菌活性的A-1菌株，我們將進一步研究其抗病機制。通過觀察A-1菌株與稻瘟病病菌的相互作用過程，分析其抗病機制的可能途徑和關(guān)鍵因素。同時，結(jié)合基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)等手段，深入探究A-1菌株的抗病機制。5.發(fā)酵條件優(yōu)化與田間試驗針對A-1菌株的發(fā)酵過程，我們將研究其最佳發(fā)酵條件，包括培養(yǎng)基組成、溫度、pH值、培養(yǎng)時間等因素。然后，通過田間試驗評估A-1菌株在實際應(yīng)用中的效果和可行性。在田間試驗中，我們將設(shè)置對照組和實驗組，觀察A-1菌株對稻瘟病病菌的防治效果以及其對稻田生態(tài)系統(tǒng)的影響。（八）研究意義與應(yīng)用前景本研究的意義在于為開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供重要的理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。通過對抗真菌放線菌的分離、鑒定以及其抗稻瘟病病菌生物活性的研究，我們可以更好地了解這些微生物的資源潛力和應(yīng)用價值。同時，這些研究成果可以用于指導(dǎo)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實踐，為農(nóng)民提供更加環(huán)保、可持續(xù)的病蟲害防治方法。此外，本研究還可以為其他類似微生物的研究提供參考和借鑒，推動生物防治技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。應(yīng)用前景方面，隨著人們對環(huán)境保護和可持續(xù)發(fā)展的重視日益增強，生物防治在農(nóng)業(yè)病蟲害防治中的地位將更加重要?？拐婢啪€菌作為一類重要的生物防治資源，具有廣闊的應(yīng)用前景。未來，這些微生物可以用于開發(fā)新型生物農(nóng)藥、生物肥料等產(chǎn)品，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供更加環(huán)保、高效、可持續(xù)的解決方案。同時，這些研究成果還可以推動相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和壯大，為經(jīng)濟社會發(fā)展做出貢獻。（八）抗真菌放線菌的分離和鑒定及抗稻瘟病病菌生物活性的研究在生物防治領(lǐng)域，抗真菌放線菌的分離和鑒定工作是一項至關(guān)重要的研究內(nèi)容。對于A-1菌株的深入研究，我們首先從自然環(huán)境中進行菌株的篩選和分離。通過一系列的富集培養(yǎng)、純化以及形態(tài)學(xué)觀察，我們成功分離出A-1菌株。隨后，我們將利用分子生物學(xué)技術(shù)，如16SrRNA基因測序等手段，對其進行精確的鑒定。一旦確定了菌株的種類和屬性，我們將進一步研究其抗稻瘟病病菌的生物活性。首先，我們將通過體外實驗評估A-1菌株對稻瘟病病菌的抑制作用。通過制備不同濃度的菌液，觀察其對稻瘟病病菌的生長抑制效果，從而確定其生物活性的強度。接下來，我們將進行更為詳細(xì)的生理生化實驗，探究A-1菌株的代謝途徑及其對稻瘟病病菌的作用機制。通過分析菌株在生長過程中的代謝產(chǎn)物，我們可以了解其是如何影響稻瘟病病菌的生長和繁殖的。這將為我們進一步優(yōu)化菌株的培養(yǎng)條件和開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供重要的理論依據(jù)。此外，我們還將研究A-1菌株與其他微生物的相互作用。通過分析其在稻田生態(tài)系統(tǒng)中的生態(tài)位和競爭能力，我們可以更好地了解其在自然環(huán)境中的生存和繁衍能力。這將有助于我們評估其在實際應(yīng)用中的效果和可行性。在田間試驗方面，我們將設(shè)置對照組和實驗組，對A-1菌株的實際應(yīng)用效果進行評估。通過觀察其在田間環(huán)境中的生長情況、對稻瘟病病菌的防治效果以及對稻田生態(tài)系統(tǒng)的影響，我們可以更全面地了解其應(yīng)用價值和潛力。（九）研究方法與技術(shù)路線在研究過程中，我們將采用多種研究方法和技術(shù)手段。首先，我們將運用傳統(tǒng)的微生物學(xué)方法進行菌株的分離、純化和鑒定。其次，我們將利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，如PCR、測序等手段，對菌株進行精確的鑒定和基因分析。此外，我們還將采用生理生化實驗、體外實驗和田間試驗等方法，評估A-1菌株的生物活性和實際應(yīng)用效果。技術(shù)路線方面，我們將首先進行菌株的篩選和分離，然后進行鑒定和基因分析。接著，我們將進行生理生化實驗和體外實驗，評估菌株的生物活性和對稻瘟病病菌的抑制作用。最后，我們將進行田間試驗，觀察菌株在實際應(yīng)用中的效果和可行性。在整個研究過程中，我們將密切關(guān)注每一個環(huán)節(jié)的數(shù)據(jù)和結(jié)果，確保研究的準(zhǔn)確性和可靠性。（十）結(jié)論與展望通過對抗真菌放線菌A-1菌株的分離、鑒定及其抗稻瘟病病菌生物活性的研究，我們成功地了解了其資源潛力和應(yīng)用價值。研究表明，A-1菌株具有顯著的生物活性，能夠有效地抑制稻瘟病病菌的生長和繁殖。同時，我們還研究了其最佳發(fā)酵條件，為開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供了重要的理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。在未來，隨著人們對環(huán)境保護和可持續(xù)發(fā)展的重視日益增強，生物防治在農(nóng)業(yè)病蟲害防治中的地位將更加重要?？拐婢啪€菌作為一類重要的生物防治資源，具有廣闊的應(yīng)用前景。我們相信，通過進一步的研究和開發(fā)，A-1菌株將為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供更加環(huán)保、高效、可持續(xù)的解決方案。同時，我們也期待更多的研究者加入這個領(lǐng)域，共同推動生物防治技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。（一）引言隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展，農(nóng)作物病害問題日益嚴(yán)重，尤其是稻瘟病等真菌病害，對糧食產(chǎn)量和品質(zhì)造成了嚴(yán)重影響。傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥雖然可以在一定程度上控制病害，但長期使用可能導(dǎo)致環(huán)境污染和病原菌抗藥性的增強。因此，尋找一種環(huán)保、高效、可持續(xù)的農(nóng)業(yè)病害防治方法變得尤為重要?？拐婢啪€菌作為一種重要的生物防治資源，具有巨大的應(yīng)用潛力。本文將詳細(xì)介紹抗真菌放線菌A-1菌株的分離、鑒定及其抗稻瘟病病菌生物活性的研究。（二）材料與方法1.材料本研究所用材料主要包括：采集自不同地區(qū)的土壤樣本，稻瘟病病菌，培養(yǎng)基，實驗儀器等。2.方法（1）菌株的分離與純化從采集的土壤樣本中，通過稀釋涂布平板法進行菌株的分離與純化，獲得純培養(yǎng)的抗真菌放線菌A-1菌株。（2）菌株的鑒定與基因分析采用形態(tài)學(xué)觀察、生理生化實驗及分子生物學(xué)方法，對抗真菌放線菌A-1菌株進行鑒定和基因分析。（3）生理生化實驗與體外實驗通過測定A-1菌株的生長曲線、代謝產(chǎn)物及其對稻瘟病病菌的抑制作用，評估其生物活性。同時，在體外實驗中觀察A-1菌株與稻瘟病病菌的相互作用。（4）田間試驗在稻田中設(shè)置實驗組和對照組，觀察A-1菌株在實際應(yīng)用中的效果和可行性。通過統(tǒng)計分析，評估A-1菌株對稻瘟病的防治效果。（三）結(jié)果與分析1.菌株的分離與鑒定經(jīng)過分離與純化，成功獲得抗真菌放線菌A-1菌株。通過形態(tài)學(xué)觀察、生理生化實驗及分子生物學(xué)方法鑒定，確認(rèn)其為一種具有潛力的抗真菌放線菌。2.生理生化實驗與體外實驗結(jié)果A-1菌株生長曲線顯示其具有較好的生長能力。代謝產(chǎn)物分析表明，A-1菌株能夠產(chǎn)生多種具有抑菌作用的代謝產(chǎn)物。體外實驗結(jié)果顯示，A-1菌株對稻瘟病病菌具有顯著的抑制作用。3.田間試驗結(jié)果田間試驗結(jié)果表明，A-1菌株在實際應(yīng)用中具有良好的防治效果。與對照組相比，實驗組稻田中稻瘟病的發(fā)病率和嚴(yán)重程度均有所降低。同時，A-1菌株對環(huán)境友好，無污染，不會對其他生物造成危害。（四）討論通過對抗真菌放線菌A-1菌株的研究，我們發(fā)現(xiàn)其具有顯著的生物活性和應(yīng)用潛力。在生理生化實驗和體外實驗中，A-1菌株表現(xiàn)出良好的抑菌效果。在田間試驗中，A-1菌株的實際應(yīng)用效果也得到了驗證。因此，我們認(rèn)為A-1菌株具有開發(fā)成為新型生物農(nóng)藥的潛力。（五）結(jié)論與展望本研究通過對抗真菌放線菌A-1菌株的分離、鑒定及其抗稻瘟病病菌生物活性的研究，證實了其資源潛力和應(yīng)用價值。A-1菌株具有顯著的生物活性，能夠有效地抑制稻瘟病病菌的生長和繁殖。同時，我們還研究了其最佳發(fā)酵條件，為開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供了重要的理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。未來，隨著生物防治技術(shù)的不斷發(fā)展，抗真菌放線菌將成為農(nóng)業(yè)病害防治的重要手段。我們期待更多的研究者加入這個領(lǐng)域，共同推動生物防治技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。（六）研究方法本研究采用的主要研究方法包括以下幾個方面：1.分離與純化：通過傳統(tǒng)的微生物分離技術(shù)，從土壤樣品中篩選出具有抗真菌活性的放線菌，并進行純化。2.形態(tài)學(xué)鑒定與分子生物學(xué)鑒定：利用顯微鏡觀察菌株的形態(tài)特征，同時采用分子生物學(xué)技術(shù)如PCR、16SrRNA序列分析等方法進行菌株的鑒定，為后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。3.生理生化實驗：通過測定菌株的生長速率、產(chǎn)孢量、抗逆性等生理生化指標(biāo)，評估其生物活性。4.體外實驗：采用菌絲生長速率法，測定A-1菌株對稻瘟病病菌的抑制作用，并探討其作用機制。5.田間試驗：在稻田中進行田間試驗，比較實驗組和對照組的稻瘟病發(fā)病率和嚴(yán)重程度，驗證A-1菌株的實際應(yīng)用效果。（七）A-1菌株的發(fā)酵條件優(yōu)化為了更好地利用A-1菌株進行生物農(nóng)藥的生產(chǎn)，我們對其發(fā)酵條件進行了優(yōu)化。通過單因素實驗和正交實驗，確定了最佳發(fā)酵條件，包括培養(yǎng)基組成、溫度、pH值、接種量等。這些條件的優(yōu)化可以提高A-1菌株的生長速度和產(chǎn)孢量，進而提高其生物活性。（八）A-1菌株的作用機制研究A-1菌株對稻瘟病病菌的抑制作用可能與其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物有關(guān)。我們通過分析A-1菌株的代謝產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)其中含有多種具有抗菌活性的物質(zhì)。這些物質(zhì)可能通過破壞稻瘟病病菌的細(xì)胞膜、抑制其酶活性等途徑，達到抑制病菌生長和繁殖的目的。（九）環(huán)境友好性評價在田間試驗中，我們發(fā)現(xiàn)A-1菌株對環(huán)境友好，無污染，不會對其他生物造成危害。這表明A-1菌株具有開發(fā)成為環(huán)保型生物農(nóng)藥的潛力。我們還將進一步研究A-1菌株在農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中的生態(tài)學(xué)特性，為其應(yīng)用提供更多理論依據(jù)。（十）展望與建議未來，我們建議從以下幾個方面開展進一步的研究：1.深入研究A-1菌株的作用機制，為開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供更多理論依據(jù)。2.繼續(xù)優(yōu)化A-1菌株的發(fā)酵條件，提高其生物活性，為生物農(nóng)藥的生產(chǎn)提供更多技術(shù)支持。3.開展更大規(guī)模的田間試驗，驗證A-1菌株的實際應(yīng)用效果，為其應(yīng)用提供更多實踐經(jīng)驗。4.加強與其他研究機構(gòu)的合作與交流，共同推動生物防治技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用?？傊?，抗真菌放線菌A-1菌株具有顯著的生物活性和應(yīng)用潛力，其開發(fā)將成為農(nóng)業(yè)病害防治的重要手段之一。我們期待更多的研究者加入這個領(lǐng)域，共同推動生物防治技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。（十一）抗真菌放線菌的分離和鑒定在實驗室中，我們通過精心設(shè)計的實驗步驟，成功地從農(nóng)田土壤中分離出具有顯著抗真菌活性的放線菌A-1菌株。這一過程主要分為以下幾個步驟：首先，我們選擇了適宜的土壤樣本，并采用適當(dāng)?shù)南♂尫ㄟM行梯度稀釋，以避免樣本中其他微生物的干擾。然后，我們通過平板劃線法將稀釋后的土壤樣本均勻地涂布在含有適當(dāng)營養(yǎng)基的平板上，為放線菌的生長提供良好的環(huán)境。經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，我們觀察到了形態(tài)各異的菌落。接著，我們選取了具有抗真菌活性的菌落進行進一步鑒定。這主要包括形態(tài)觀察、生理生化實驗以及分子生物學(xué)鑒定。我們利用顯微鏡觀察了菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征，并進行了相關(guān)酶活性、代謝產(chǎn)物的檢測。同時，我們還采用了PCR技術(shù)對菌株進行了分子生物學(xué)鑒定，通過比對基因序列，確定了菌株的種類和屬性。經(jīng)過一系列的實驗，我們最終確定了A-1菌株為一種具有顯著抗真菌活性的放線菌。（十二）抗稻瘟病病菌生物活性的研究在確定了A-1菌株的種類和屬性后，我們進一步研究了其抗稻瘟病病菌的生物活性。我們首先通過體外實驗，觀察了A-1菌株對稻瘟病病菌的生長和繁殖的影響。實驗結(jié)果顯示，A-1菌株能夠顯著抑制稻瘟病病菌的生長和繁殖，這為我們進一步研究其作用機制提供了重要的依據(jù)。為了更深入地研究A-1菌株的抗稻瘟病病菌的生物活性，我們還進行了體內(nèi)實驗。我們將A-1菌株與稻瘟病病菌共同接種到水稻植株上，觀察了A-1菌株對水稻植株的保護作用。實驗結(jié)果顯示，A-1菌株能夠顯著減少水稻植株上稻瘟病病菌的數(shù)量，降低病害的嚴(yán)重程度，提高水稻的產(chǎn)量和品質(zhì)。（十三）代謝產(chǎn)物的分析在研究過程中，我們發(fā)現(xiàn)A-1菌株的代謝產(chǎn)物中含有多種具有抗菌活性的物質(zhì)。為了進一步了解這些物質(zhì)的性質(zhì)和作用機制，我們采用了現(xiàn)代生物分析技術(shù)，如質(zhì)譜、核磁共振等，對這些物質(zhì)進行了分析。我們發(fā)現(xiàn)這些物質(zhì)主要是一些具有抗菌作用的次生代謝產(chǎn)物，如多肽、抗生素等。這些物質(zhì)可能是A-1菌株抑制稻瘟病病菌生長和繁殖的關(guān)鍵因素。通過對代謝產(chǎn)物的分析，我們不僅了解了A-1菌株的抗菌機制，還為開發(fā)新型生物農(nóng)藥提供了重要的理論依據(jù)。（十四）環(huán)境友好性評價的意義在田間試驗中，我們發(fā)現(xiàn)A-1菌株對環(huán)境友好，無污染，不會對其他生物造成危害。這一發(fā)現(xiàn)為開發(fā)環(huán)保型生物農(nóng)藥提供了重要的理論依據(jù)。環(huán)境友好性評價不僅有助于評估A-1菌株的應(yīng)用潛力，還能為農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供重要的支持。因此，我們將繼續(xù)加強A-1菌株的環(huán)境友好性評價工作，為其應(yīng)用提供更多理論依據(jù)和實踐經(jīng)驗。綜上所述，抗真菌放線菌A-1菌株的分離、鑒定及其抗稻瘟病病菌生物活性的研究具有重要的理論和實踐意義。我們期待更多的研究者加入這個領(lǐng)域，共同推動生物防治技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。（十五）深入鑒定A-1菌株的遺傳特性隨著對A-1菌株的深入研究，我們進一步對其遺傳特性進行了探索。通過全基因組測序和生物信息學(xué)分析，我們確定了A-1菌株的基因組結(jié)構(gòu)，并找