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一、選擇題1.下列哪項(xiàng)符合生物藥物的藥理學(xué)特性?(C)A.藥理活性低B.治療針對(duì)性弱C.毒副作用小、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高D.無(wú)生理副作用2.關(guān)于人體來(lái)源藥物特點(diǎn)的敘述,下列錯(cuò)誤的是(D)A.安全性好B.效價(jià)高,療效可靠C.穩(wěn)定性好D.資源豐富3.生物藥物在生產(chǎn)制備中具有一些特殊的性質(zhì),下列哪項(xiàng)屬于這一特性(C)A.穩(wěn)定性高B.原料中的有效物質(zhì)含量高C.易腐敗D.注射用藥,簡(jiǎn)單方便1.當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時(shí),蛋白質(zhì)溶解度(C)A.增大B.減小C.先增大,后減小D.先減小,后增大2.生物藥物原料的保存可采取有機(jī)溶劑脫水法,常用的有機(jī)溶劑是(D)A.甲醛B.酒精C.苯酚D.丙酮3.酶和細(xì)胞的固定化載體需符合一定條件,下列哪項(xiàng)是正確的?(B)A.對(duì)酶堿無(wú)耐受性B.不引起酶變性C.對(duì)酶無(wú)耐受性D.結(jié)構(gòu)結(jié)實(shí),無(wú)疏松孔3.固定化酶屬于(B)A.天然酶B.修飾酶C.天然酶或修飾酶D.細(xì)胞產(chǎn)生的酶4.固定化酶的最大特點(diǎn)是:(A)A.既有生物催化劑功能,又有固相催化劑特性B.有生物催化劑功能,無(wú)固相催化劑特性C.無(wú)生物催化劑功能,只有固相催化劑特性D.既無(wú)生物催化劑功能,又無(wú)固相催化劑特性5.下面哪一種藥物屬于多糖類生物藥物(C)A、洛伐他汀B、干擾素C、肝素D、細(xì)胞色素C6.能用于防治血栓的酶類藥物有(D)A、SODB、胰島素C、L-天冬酰胺酶D、尿激酶7.下列哪項(xiàng)是采用固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)?(D)A.反應(yīng)后,底物與產(chǎn)物易于分開,易于純化B.反應(yīng)條件易于控制,可實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化反應(yīng)的不連續(xù)性C.酶的利用效率高,單位酶催化底物量減少,用酶量減少D.比水溶性酶更適合于多酶反應(yīng)1.目前分離的1000多種抗生素,約2/3產(chǎn)自(B)A、真菌B、放線菌C、細(xì)菌D、病毒2.屬于生物次級(jí)代謝產(chǎn)物的藥物是(B)

A.維生素B.抗生素C.核苷酸D.氨基酸3.下面不屬于抗生素的一般生產(chǎn)方法的為(D)A.生物合成法B.化學(xué)合成法C.生物化學(xué)合成法D.物理合成法4.在菌種保藏方法中,保藏期為1~6個(gè)月的是(A)A.斜面保藏法B.石蠟油封藏法C.砂土管保藏法D.冷凍干燥保藏法5.在菌種保藏方法中,適合于菌種長(zhǎng)期保存的方法為(D)A.斜面保藏法B.石蠟油封藏法C.砂土管保藏法D.冷凍干燥保藏法。6.提高菌株生產(chǎn)能力的最有效育種途徑是(C)

A.自然分離B.突變育種C.定向分子育種D.原生質(zhì)體融合育種7.以下可用于菌種純化的方法有(B)A.高溫滅菌B.平板劃線C.富集培養(yǎng)D.誘變處理8.能夠?qū)崿F(xiàn)微生物菌種定向改造的方法是(D)A.紫外誘變B.自然選育C.制備原生質(zhì)體D.基因工程9.能夠用沙土管保存的菌種是(C)A.大腸桿菌B.酵母菌C.青霉菌D.乳酸桿菌10.關(guān)于細(xì)菌的耐藥性正確的描述是(B)

A.細(xì)菌與藥物一次接觸后,對(duì)藥物的敏感性下降

B.細(xì)菌與藥物多次接觸后,對(duì)藥物的敏感性下降甚至消失

C.是藥物不良反應(yīng)的一種表現(xiàn)

D.是藥物對(duì)細(xì)菌缺乏選擇性11.Whichiswrongaboutthemechanismofactionofantibacterials(D)

A.

Inhibitionofbacterialcell-wallsynthesis

B.

Inhibitionofbacterialproteinsynthesis

C.Inhibitionofbacterialfolicacidsynthesis

D.Inhibitionofbacterialgrowth12.下面抗生素的產(chǎn)生菌不是真菌的是(D)A.頭孢菌素B.青霉素C.

灰黃霉素D.氯霉素13.下面屬于真菌的是(A)A.頭孢霉B.地衣芽孢桿菌C.

灰色鏈霉菌D.星形偌卡菌1.真核基因的獲得可采用下列哪種方法?(D)A.直接從生物體中提取后再化學(xué)合成B.直接從生物體提取C.直接從生物體中提取后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增D.逆轉(zhuǎn)錄法2.基因工程藥物生產(chǎn)的上游階段包括(B)A.工程菌(細(xì)胞)的大規(guī)模培養(yǎng)B.分離目的基因,構(gòu)建工程菌(細(xì)胞)C.產(chǎn)品的分離純化D.構(gòu)建工程菌(細(xì)胞)及其大規(guī)模培養(yǎng)3.大腸桿菌表達(dá)真核基因時(shí),其對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)物(D)A.能進(jìn)行翻譯后修飾,故對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)物能糖基化B.能進(jìn)行翻譯后修飾,故對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)物不能糖基化C.不能進(jìn)行翻譯后修飾,故對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)物能糖基化D.不能進(jìn)行翻譯后修飾,故對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)物不能糖基化4.目前生產(chǎn)上用于表達(dá)外源基因的動(dòng)物細(xì)胞,均為(A)A.傳代細(xì)胞系B.原代細(xì)胞C.二倍體細(xì)胞系D.雜交瘤細(xì)胞5.基因工程大腸桿菌與宿主菌生長(zhǎng)培養(yǎng)基的本質(zhì)區(qū)別在于,前者必需添加(

A

A.抗生素B.氨基酸C.前體D.激素6.基因工程的單元操作順序是(A)A.酶切,連接,轉(zhuǎn)化,篩選,驗(yàn)證B.酶切,轉(zhuǎn)化,連接,篩選,驗(yàn)證C.連接,轉(zhuǎn)化,篩選,驗(yàn)證,酶切D.驗(yàn)證,酶切,連接,篩選,轉(zhuǎn)化7.促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素(EPO)基因能在大腸桿菌中表達(dá),但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素,這是因?yàn)椋―)

A.人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素對(duì)大腸桿菌有毒性作用

B.人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定C.大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素特異性結(jié)合并使其滅活D.大腸桿菌不能使人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素糖基化 8.為了減輕工程菌的代謝負(fù)荷,提高外源基因的表達(dá)水平,可以采取的措施有(A)A.將宿主細(xì)胞生長(zhǎng)和外源基因的表達(dá)分成兩個(gè)階段。B.在宿主細(xì)胞快速生長(zhǎng)的同時(shí)誘導(dǎo)基因表達(dá)。C.當(dāng)宿主細(xì)胞快速生長(zhǎng)時(shí)促進(jìn)重組質(zhì)粒的復(fù)制。D.當(dāng)宿主細(xì)胞快速生長(zhǎng)時(shí)誘導(dǎo)重組質(zhì)粒的復(fù)制9.基因工程藥物生產(chǎn)的下游階段包括(A)A.工程菌(細(xì)胞)的大規(guī)模培養(yǎng)一直到產(chǎn)品的分離純化、質(zhì)量控制等B.分離目的基因C.構(gòu)建工程菌(細(xì)胞)D.構(gòu)建工程菌(細(xì)胞)及其大規(guī)模培養(yǎng)10.人工化學(xué)合成基因時(shí),對(duì)基因的長(zhǎng)度的要求是(B)A.沒有長(zhǎng)度限制B.有長(zhǎng)度限制,一般寡核苷酸片段長(zhǎng)度為50~60bpC.有長(zhǎng)度限制,一般寡核苷酸片段長(zhǎng)度為150bp左右D.有長(zhǎng)度限制,一般寡核苷酸片段長(zhǎng)度為200bp左右11.真核細(xì)胞表達(dá)真核基因合成藥物時(shí)(A)A.能對(duì)表達(dá)的藥物蛋白進(jìn)行糖基化B.不能對(duì)表達(dá)的藥物蛋白進(jìn)行糖基化C.有時(shí)能對(duì)表達(dá)的藥物蛋白進(jìn)行糖基化D.在特定情況下,可以對(duì)表達(dá)的藥物蛋白進(jìn)行糖基化12.真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)時(shí),表達(dá)載體具備的條件為(B)A.載體不需要具有獨(dú)立復(fù)制能力B.應(yīng)具有很強(qiáng)的啟動(dòng)子,能為大腸桿菌的RNA聚合酶識(shí)別C.不應(yīng)具有很強(qiáng)的終止子D.所產(chǎn)生的RNA不必具有翻譯的起始信號(hào)13.利用動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)外源基因制備藥物蛋白時(shí),動(dòng)物細(xì)胞分泌的基因產(chǎn)物是(A)A.經(jīng)過(guò)糖基化,接近或類似于天然蛋白形成B.經(jīng)過(guò)糖基化,與天然蛋白形式不一致C.不經(jīng)過(guò)糖基化,接近或類似于天然蛋白形式D.不經(jīng)過(guò)糖基化,與天然蛋白形式不一致14.為了提高基因工程菌培養(yǎng)過(guò)程中質(zhì)粒的穩(wěn)定性,工程菌的培養(yǎng)一般采用的培養(yǎng)法為(C)A.第一階段先誘導(dǎo)外源基因表達(dá),第二階段使菌體生長(zhǎng)至一定密度B.第一階段先誘導(dǎo)外源基因表達(dá),第二階段使菌體停止生長(zhǎng)C.第一階段使菌體生產(chǎn)至一定密度,第二階段再誘導(dǎo)外源基因表達(dá)D.第一階段使菌體生長(zhǎng)至一定密度,第二階段再抑制外源基因表達(dá)15.基因工程菌發(fā)酵可通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值,使得細(xì)菌獲得良好的生長(zhǎng)期,其最佳的pH范圍為(C)A.5.0~6.0B.7.0~8.0C.6.8~7.4D.6.0~6.516.基因工程菌發(fā)酵可通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值,使得細(xì)菌獲得良好的外源蛋白表達(dá)量,其最佳的pH范圍為(D)A.5.0~6.0B.7.0~5.0C.6.8~7.4D.6.0~6.517.純度分析是基因工程藥物質(zhì)量檢測(cè)的關(guān)鍵項(xiàng)目,它包括:(C)A.目的蛋白質(zhì)活性測(cè)定B.目的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測(cè)定C.目的蛋白質(zhì)含量測(cè)定及雜質(zhì)限量分析D.雜質(zhì)種類分析18.以下能用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的藥物為(B)A.維生素B.生長(zhǎng)素C.肝素D.鏈霉素19.用大腸桿菌作宿主表達(dá)重組DNA藥物,缺點(diǎn)是(C)A.蛋白質(zhì)表達(dá)量低B.生長(zhǎng)慢C.產(chǎn)物無(wú)糖基修飾D.難以獲得工程菌20.下面表達(dá)系統(tǒng)為原核表達(dá)系統(tǒng)的是(A)A.大腸桿菌B.畢赤酵母C.昆蟲細(xì)胞D.動(dòng)物細(xì)胞21.超聲波法破碎細(xì)胞的主要原理是(B)A.研磨作用B.空穴的形成C.脫水D.機(jī)械碰撞22.如果用大腸桿菌作為宿主細(xì)胞,蛋白表達(dá)部位為周質(zhì),下面哪種細(xì)胞破碎的方法最佳?(C)A.勻漿法B.超聲波法C.滲透壓休克法D.凍融法23.利用動(dòng)物細(xì)胞作為宿主生產(chǎn)藥品的優(yōu)點(diǎn)是(A)A.產(chǎn)物是分泌型,收集純化方便B.成本低C.培養(yǎng)要求低D.與細(xì)菌一樣,所獲產(chǎn)品無(wú)需糖基化24.核酸類藥物的提取方法是(A)A.先提取核酸和蛋白質(zhì)復(fù)合物,再解離核酸與蛋白質(zhì),然后分離RNA和DNAB.直接分離RNA和DNAC.先提取蛋白質(zhì),再分離RNA和DNAD.先提取核酸和脂類物質(zhì)的復(fù)合物,再解離核酸與脂類,然后分離RNA和DNA12.枯草芽孢桿菌表達(dá)真核基因時(shí),其蛋白表達(dá)形式是:(B)A.以包含體形式表達(dá)B.直接分泌到胞外C.以細(xì)胞周質(zhì)形式表達(dá)D.以胞內(nèi)可溶性形式表達(dá)1.下列哪項(xiàng)不屬于新型疫苗(B)A.亞單位疫苗B.多聯(lián)苗C.合成肽疫苗D.抗獨(dú)特型抗體2.關(guān)于滅活疫苗的敘述,下列錯(cuò)誤的是(D)A.選用免疫原性強(qiáng)的病原體用理化方法滅活而成

B.較活疫苗易保存C.副作用大

D.需多次小劑量注射

3.被銹鐵釘深刺造成外傷時(shí),應(yīng)給予注射

(C)A.丙球蛋白

B.破傷風(fēng)類毒素

C.破傷風(fēng)抗毒素

D.破傷風(fēng)減毒活疫苗4.預(yù)防脊髓灰質(zhì)炎進(jìn)行人工自動(dòng)免疫的對(duì)象是(C)A.青壯年

B.野外工作者

C.5歲以內(nèi)的嬰幼兒

D.未患過(guò)該病者5.要達(dá)到預(yù)防乃至最終消滅脊髓灰質(zhì)炎的目的,最重要的措施是(D)A.徹底治愈脊髓灰質(zhì)炎患者,包括后遺癥的患者B.及時(shí)、全部隔離脊髓灰質(zhì)炎患者C.開展體育鍛煉,增強(qiáng)人們體質(zhì)D.適齡兒童全部服脊髓灰質(zhì)炎疫苗6.關(guān)于合成肽疫苗的優(yōu)點(diǎn)描述正確的是(A)A.制備容易,可大量生產(chǎn),易保存,副作用少B.免疫原性強(qiáng),使用時(shí)不需要加佐劑C.不同肽免疫活性沒有差異D.可激發(fā)B細(xì)胞和T細(xì)胞表位1.制備單抗時(shí),脾臟細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞融合后,脾-脾融合細(xì)胞的死亡是由于(C)A.HAT培養(yǎng)基的作用B.HT培養(yǎng)基的作用C.自然死亡D.SP2/0細(xì)胞的抑制作用2.下列哪種抗體是人源化的單克隆抗體(A)A.人鼠嵌合抗體B.單鏈抗體C.單域抗體D.FV3.人鼠嵌合抗體的構(gòu)建思路是(A)A.將鼠源單克隆抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)基因分離出來(lái),分別與人Ig的重鏈和輕鏈恒定區(qū)基因連接B.將鼠源單克隆抗體的重鏈和輕鏈恒定區(qū)基因分離出來(lái),分別與人Ig的重鏈和輕鏈可變區(qū)基因連接C.將鼠源單克隆抗體的重鏈可變區(qū)基因分離出來(lái),只與人Ig的重鏈恒定區(qū)基因連接D.將鼠源單克隆抗體的輕鏈可變區(qū)基因分離出來(lái),只與人Ig的輕鏈恒定區(qū)基因連接4.目前絕大多數(shù)獲得的單克隆抗體是:(A)A.鼠源的B.人源的C.猴源的D.兔源的5.構(gòu)建改形抗體的主要目的是:(B)A.降低鼠源抗體分子的分子量B.降低鼠源抗體對(duì)人體的免疫原性C.增加鼠源抗體分子的分子量D.增加鼠源抗體對(duì)人體的免疫原性6.免疫毒素是指:(B)A.毒素與抗原交聯(lián)物B.毒素與抗體交聯(lián)物C.毒素與酶交聯(lián)物D.毒素與糖類交聯(lián)物7.制備單抗時(shí),細(xì)胞融合采用的融合試劑為(D)A.水B.氯化鈉C.鹽酸D.PEG二、填空題1.生物藥物按化學(xué)本質(zhì)和化學(xué)特性分為氨基酸及其衍生物類藥物、多肽和蛋白質(zhì)類藥物、酶和輔酶類藥物、核酸及其降解物和衍生物類藥物、糖類藥物、脂類藥物、細(xì)胞生長(zhǎng)因子類、生物制品類。2.我國(guó)藥物的三大藥源指的是化學(xué)藥物、生物藥物、中藥。3.現(xiàn)代生物藥物已形成四大類型,包括重組DNA藥物(基因工程藥物)、基因藥物、天然生化藥物、合成與半合成的生物藥物。4.寫出下列英文縮寫的中文名稱:IFN干擾素;IL-2白介素-2;TNF腫瘤壞死因子;EPO促紅細(xì)胞生成素;OTC非處方藥;HeLa人宮頸癌上皮細(xì)胞系。1.酶制劑的提取可分為三個(gè)基本步驟:即提取、純化、結(jié)晶(或制劑)。2.固定化細(xì)胞既有細(xì)胞特性和生物催化的功能,也具有固相催化劑的特點(diǎn)。3.酶和細(xì)胞的固定化方法一般可分為載體結(jié)合法、包埋法及交聯(lián)法。4.酶和細(xì)胞的固定化方法中有載體結(jié)合法,該法可分為物理吸附法、離子結(jié)合法和共價(jià)結(jié)合法等3種。5.制定固定化酶技術(shù)的包埋法,可分為凝膠包埋法和微囊化包埋法。6.糖類藥物以粘多糖為主。7.在酶工程中,酶的化學(xué)修飾的主要目的在于提高酶的穩(wěn)定性。8.紅細(xì)胞生成素屬于細(xì)胞生長(zhǎng)因子類藥物。9.生物藥物診斷的特點(diǎn)是:速度快,靈敏度高,特異性強(qiáng)。10.脂類藥物的分離純化方法主要有沉淀法、吸附層析法,離子交換層析法等三類。11.氨基酸的分離純化方法主要有沉淀法、吸附法,離子交換法等三類。12.氨基酸的生產(chǎn)方法有蛋白水解法、化學(xué)合成法、發(fā)酵法、酶法。13.酶的結(jié)晶方法是緩慢改變酶蛋白的溶解度,使其略處于過(guò)飽和狀態(tài)。1.微生物制藥是指微生物來(lái)源的藥物,包括抗生素;具有其他藥理作用的微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物;微生物次級(jí)代謝為先導(dǎo)化合物、通過(guò)生物或化學(xué)方法制得的衍生物。2.1928年英國(guó)細(xì)菌學(xué)家Fleming第一個(gè)發(fā)現(xiàn)青霉素,1940年青霉素治療成功,其開創(chuàng)了抗生素治療的新紀(jì)元。3.放線菌生產(chǎn)的抗生素主要有:氨基糖苷類、四環(huán)類、放線菌素類、大環(huán)內(nèi)酯類、多烯大環(huán)內(nèi)酯類等。4.藥物的產(chǎn)生菌是微生物藥物的來(lái)源,其主要包括放線菌、真菌和細(xì)菌。5.抗生素作用機(jī)理一般包括抑制細(xì)胞壁的合成、影響胞漿膜的通透性、抑制蛋白質(zhì)合成、抑制核酸代謝、抗葉酸代謝等。6.微生物發(fā)酵的一般工藝包括菌種的選擇、孢子制備、種子培養(yǎng)、發(fā)酵、提取和精制、成品檢驗(yàn)等。7.傳統(tǒng)菌種選育的途徑有自然變異(自發(fā)突變)、人工變異。8.常用的菌種保藏方法有斜面保藏法、石蠟油封藏法、砂土管保藏法、冷凍干燥保藏、甘油懸液低溫冷凍保藏法、液氮保藏法等。9.冷凍干燥是在低溫、低壓條件下,利用水的升華性能而進(jìn)行的一種干燥方法。10.微生物菌種的分離和純化可以用的方法有平板劃線法和稀釋后涂布平板法。11.微生物菌種的自然選育是指利用微生物在一定條件下產(chǎn)生自發(fā)突變的原理,通過(guò)分離、篩選排除衰變型菌落,選擇維持原有生產(chǎn)水平的菌株。12.誘變時(shí)選擇出發(fā)菌株時(shí)應(yīng)考慮出發(fā)菌株的穩(wěn)定性、選用具備某種優(yōu)良特性、對(duì)誘變劑敏感、菌種的生理狀態(tài)及生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)間等問(wèn)題。13.目前常用的誘變劑可分為物理誘變因子、化學(xué)誘變劑和生物誘變因子三大類。1.供體,受體和載體是重組DNA技術(shù)的三大基本元件。2.大腸桿菌表達(dá)基因工程產(chǎn)物的形式有:細(xì)胞內(nèi)不溶性表達(dá)(包涵體)、胞內(nèi)可溶性表達(dá)、細(xì)胞周質(zhì)表達(dá)、細(xì)胞外表達(dá)等。3.基因工程菌在傳代過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)質(zhì)粒不穩(wěn)定的現(xiàn)象,質(zhì)粒不穩(wěn)定分為分裂不穩(wěn)定和結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定。4.基因工程菌的質(zhì)粒不穩(wěn)定常見的是分裂不穩(wěn)定,它主要與兩個(gè)因素有關(guān):一是含質(zhì)粒菌產(chǎn)生不含質(zhì)粒子代菌的頻率;二是兩種菌的比生長(zhǎng)速率差異的大小。5.質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定是指工程菌分裂時(shí)出現(xiàn)一定比例不含質(zhì)粒子代菌的現(xiàn)象。6.提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法是工程菌的培養(yǎng)一般采用兩階段培養(yǎng)法,第一階段先使菌體生長(zhǎng)至一定密度,第二階段誘導(dǎo)外源基因的表達(dá)。7.基因工程藥物分離純化過(guò)程中,非蛋白質(zhì)類雜質(zhì)的去除有DNA、熱原質(zhì)和病毒三種。8.克隆真核基因常用的方法是逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。9.基因工程菌培養(yǎng)常用的方式有:補(bǔ)料分批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、透析培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)。10.基因工程菌培養(yǎng)常用的方式有:補(bǔ)料分批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、透析培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)。11.基因工程菌培養(yǎng)常用的方式有:補(bǔ)料分批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、透析培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)。12.1982年,第一個(gè)基因工程藥物重組胰島素批準(zhǔn)上市。13.第一代基因工程藥物是針對(duì)因缺乏天然內(nèi)源性蛋白所引起的疾病,以蛋白質(zhì)激素類為代表;第二代基因工程藥物以激發(fā)其天然活性作為治療疾病的藥理基礎(chǔ),以細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子為代表。14.DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的常見方法有融合法、化學(xué)法、物理法、病毒法。1.疫苗開發(fā)的要求為安全、有效、使用方便。2.Jenner和Pasteur,著名的免疫學(xué)家,被公認(rèn)為免疫接種和主動(dòng)免疫的先驅(qū)。3.采用基因工程身產(chǎn)的第一個(gè)傳染病疫苗是乙型肝類疫苗。4.基因工程疫苗是利用DNA重組技術(shù)制備的疫苗,其主要包括:基因工程亞單位疫苗、基因工程載體疫苗、基因缺失活疫苗、核酸疫苗等5.制備滅活苗的常規(guī)方法有甲醛滅活法和熱滅活法。1.嵌合抗體是指用人源抗體恒定區(qū)替換鼠源抗體恒定區(qū),保留抗體可變區(qū);人源化抗體是指抗體可變區(qū)中僅CDR(決定簇互補(bǔ)區(qū))為鼠源,其FR(骨架區(qū))及恒定區(qū)均來(lái)自人源。三、名詞解釋1.藥物——用于預(yù)防、治療或診斷疾病或調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能、促進(jìn)機(jī)體康復(fù)保健的物質(zhì),有4大類:預(yù)防藥、治療藥、診斷藥和康復(fù)保健藥。2.藥品——直接用于臨床的藥物產(chǎn)品,是特殊商品。藥品應(yīng)規(guī)定有適應(yīng)癥、用法與用量和療程,說(shuō)明毒副反應(yīng)。還要有使用有效期,過(guò)期藥品不準(zhǔn)使用。3.生物藥物(biopharmaceutics)——是以生物體、生物組織或其成份為原料(包括組織、細(xì)胞、細(xì)胞器、細(xì)胞成分、代謝、排泄物)綜合應(yīng)用生物學(xué)、物理化學(xué)與現(xiàn)代藥學(xué)的原理與方法加工制成的藥物。4.基因藥物(genemedicine)——是以基因物質(zhì)(RNA或DNA及其衍生物)作為治療的物質(zhì)基礎(chǔ),包括基因治療用的重組目的DNA片段、重組疫苗、反義藥物和核酶等。5.生物制藥——是利用生物體或生物過(guò)程在人為設(shè)定的條件下生產(chǎn)各種生物藥物的技術(shù)。1.生化藥物(Biochemicalmedicine)——具體運(yùn)用生物化學(xué)研究方法,從生物體中經(jīng)提取、分離、純化等手段獲得的天然存在的生化活性物質(zhì)或?qū)⑸鲜鲞@些物質(zhì)加以結(jié)構(gòu)改造或人工合成創(chuàng)造出的自然界沒有的新活性物質(zhì)。2.固定化細(xì)胞——被限制或定位于特定空間位置的細(xì)胞稱為固定化細(xì)胞。3.細(xì)胞固定化——將細(xì)胞限制或定位于特定空間位置的方法。4.固定化酶(immobilizedenzyme)——是指借助于物理和化學(xué)的方法把酶束縛在一定空間內(nèi)并具有催化活性的酶制劑,酶經(jīng)固定化以后穩(wěn)定性有所提高,而且可以反復(fù)使用,并能實(shí)現(xiàn)反應(yīng)連續(xù)化、自動(dòng)化,簡(jiǎn)化產(chǎn)品的純化工藝。1.微生物菌種選種——是根據(jù)微生物的自發(fā)突變特性,用各種篩選方法從自然界中或生產(chǎn)中選擇符合要求或產(chǎn)量較高的新菌種。2.微生物菌種育種——是用人工的方法引起菌種變異或形成新的雜種,再經(jīng)過(guò)篩選,得到符合要求的優(yōu)良變種。3.廣義抗生素——①由微生物產(chǎn)生的抗菌及抗其他病原微生物的物質(zhì);②與微生物產(chǎn)物相同的化學(xué)合成物。即首先發(fā)現(xiàn)于微生物代謝物中,如氯霉素;③以微生物產(chǎn)物為原料,經(jīng)化學(xué)反應(yīng)所得的衍生物或鹽類;④由以上三種來(lái)源的驅(qū)蟲物質(zhì)。4.雜合抗生素——利用基因工程技術(shù),將某種特殊的酶基因整合到另外一種抗生素產(chǎn)生菌中,產(chǎn)生新的抗菌活性化合物。5.前體——某些化合物被加入培養(yǎng)基后,能夠直接在生物合成過(guò)程中結(jié)合到產(chǎn)物分子中去,而自身的結(jié)構(gòu)并未發(fā)生太大變化,卻能提高產(chǎn)物的產(chǎn)量,這類小分子物質(zhì)稱為前體。6.細(xì)菌耐藥性——指微生物對(duì)藥物所具有的相對(duì)抗性。1.基因工程藥物——先確定對(duì)某種疾病有預(yù)防和治療作用的蛋白質(zhì),然后將控制該蛋白質(zhì)合成過(guò)程的基因取出來(lái),經(jīng)過(guò)一系列基因操作,最后將該基因放入可以大量生產(chǎn)的受體細(xì)胞中去,通過(guò)在受體細(xì)胞不斷繁殖,大規(guī)模生產(chǎn)具有預(yù)防和治療這些疾病的蛋白質(zhì),即基因工程疫苗或藥物。2.融合蛋白——融合蛋白的氨基端是原核序列,羧基端是真核序列,這樣的蛋白質(zhì)是由一條短的原核多肽和真核蛋白結(jié)合在一起的,故稱融合蛋白。3.熱原質(zhì)——許多革蘭氏陰性細(xì)菌及某些革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌如枯草桿菌能產(chǎn)生一種多糖,注入人體或動(dòng)物體內(nèi),可引起發(fā)熱反應(yīng),故稱為熱原質(zhì)。4.基因表達(dá)——是指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過(guò)程。5.質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定——是指工程菌分裂時(shí)出現(xiàn)一定比例不含質(zhì)粒子代菌的現(xiàn)象。6.質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定——是指外源基因從質(zhì)粒上丟失或堿基重排、缺失,所致工程菌性能的改變。7.干擾素——干擾素誘生劑刺激宿主細(xì)胞產(chǎn)生的干擾病毒復(fù)制、阻斷病毒感染的物質(zhì)。分3種其中IFN-α、β以抗病毒、抗腫瘤作用為主,也稱I型干擾素。IFN-γ以免疫調(diào)節(jié)作用為主,也稱為II型干擾素。1.生物制品——利用微生物、寄生蟲、生物組織或其代謝產(chǎn)物制成的用于預(yù)防、診斷或治療傳染病、寄生蟲病或其他疾病的制劑。種類:疫苗、類毒素、診斷液、免疫血清等。2.疫苗的現(xiàn)代定義——是病原微生物的蛋白、多肽、多糖或核酸,以單一成分或含有效成分的復(fù)雜顆粒形式,或通過(guò)活的減毒致病原或載體,進(jìn)入機(jī)體后能產(chǎn)生滅活、破壞或抑制致病原的特異性的免疫應(yīng)答。3.免疫佐劑——指一類能夠增強(qiáng)抗原免疫原性或改變免疫應(yīng)答性質(zhì)的物質(zhì)。4.多價(jià)苗——同種病原微生物多種血清型毒株制成的疫苗。5.多聯(lián)苗——不同種病原微生物聯(lián)合制成的疫苗。6.滅活疫苗——選擇毒力強(qiáng)、免疫原性好的毒株大量培養(yǎng),用物理或化學(xué)方法使之滅活。7.生物安全——指防止把引起疾病或人獸共患病的病原體引進(jìn)動(dòng)物群體的一切飼養(yǎng)管理措施。因此生物安全是預(yù)防問(wèn)題的系統(tǒng),而不是解決問(wèn)題的系統(tǒng)。8.多肽疫苗——根據(jù)可誘導(dǎo)保護(hù)性免疫應(yīng)答的有效免疫原氨基酸序列,人工合成的多肽抗原。9.診斷液——用于診斷傳染病或寄生蟲病的生物制品。1.基因工程抗體——根據(jù)研究者的意圖,采用基因工程方法,在基因水平,對(duì)免疫球蛋白基因進(jìn)行切割、拼接或修飾后導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行表達(dá),產(chǎn)生新型抗體。2.生物導(dǎo)彈——將各種毒素、放射性同位素、化療藥物與識(shí)別腫瘤特異抗原或腫瘤相關(guān)抗原的抗體偶聯(lián)后,能夠特異殺傷腫瘤細(xì)胞的一類藥物。3.單克隆抗體——一個(gè)B細(xì)胞針對(duì)一個(gè)抗原決定簇所產(chǎn)生的一種特異性抗體,稱為單克隆抗體。4.免疫毒素——抗體與生物毒素交聯(lián)制備的偶聯(lián)物。四、簡(jiǎn)答題1.生物藥物有哪些作用特點(diǎn)?藥理學(xué)特性:1)藥理活性高。2)治療的針對(duì)性強(qiáng),治療的生理、生化機(jī)制合理,療效可靠。3)毒副作用較少,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。4)可能具免疫原性或產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。理化特性:1)含量低、雜質(zhì)多、工藝復(fù)雜、收率低、技術(shù)要求高。2)組成結(jié)構(gòu)復(fù)雜,具嚴(yán)格空間結(jié)構(gòu),才有生物活性。3)對(duì)多種物理、化學(xué)、生物學(xué)因素不穩(wěn)定。4)活性高,有效劑量小,對(duì)制品的有效性,安全性要嚴(yán)格要求(包括標(biāo)準(zhǔn)品的制訂)1.生化藥物的特點(diǎn)?生化藥物的主要資源有哪些?生化藥物的特點(diǎn):1)一般生物學(xué)特性:①組成結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,分子量較大,分子活性受到多種因素影響。②來(lái)源于生物體或其基因表達(dá)產(chǎn)物及其修飾物,活性高、針對(duì)性強(qiáng)比化學(xué)藥物更合理和更有效,毒性較低,安全性較高,副作用較小。③可以創(chuàng)制療效更高,作用更專一,更易為機(jī)體接受,副作用與不良反應(yīng)更小的新藥。2)特殊生物學(xué)特性:①種屬特異性。②免疫原性。③非預(yù)期的多向性活性。3)化學(xué)特性:①含量低,雜質(zhì)多,工藝復(fù)雜,收率低,技術(shù)要求高。②結(jié)構(gòu)復(fù)雜,生物活性受空間結(jié)構(gòu)嚴(yán)格限制,穩(wěn)定性差。劑量小,活性高。對(duì)制品的均一性,有效性,安全性,穩(wěn)定性,生物活性要求嚴(yán)格。生化藥物的主要資源:1)植物;2)動(dòng)物:動(dòng)物臟器,血液分泌物及其代謝物;3)微生物:①利用微生物作為工具,②微生物的代謝物,③微生物菌體;4)海洋生物:①海藻類,②海洋動(dòng)物類,③海洋微生物。2.氨基酸有哪些生產(chǎn)方法?各有什么主要特點(diǎn)?1)蛋白水解法:是以毛發(fā),血粉及廢蠶絲等蛋白質(zhì)為原料,通過(guò)酸、堿或酶水解成多種混合物,經(jīng)分離純化獲得各種藥用氨基酸的方法。目前用水解法生產(chǎn)的氨基酸主要有L-胱氨酸和L-半胱氨酸。2)化學(xué)合成法:以石油化工產(chǎn)品為原料時(shí),價(jià)格低廉,成本低,適合工業(yè)化生產(chǎn)。3)發(fā)酵法:微生物利用碳源、氮源及鹽類幾乎可合成所有氨基酸。缺點(diǎn)是產(chǎn)物濃度低,設(shè)備投資大,工藝管理要求嚴(yán)格,生產(chǎn)周期長(zhǎng)成本高。4)酶法:反應(yīng)大多在在水溶液中進(jìn)行,條件溫和,選擇性高,底物濃度高,轉(zhuǎn)化率高,副產(chǎn)物少,生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單,分離精致容易。3.簡(jiǎn)述氨基酸輸液的組方原理和原則,常用的氨基酸輸液有哪幾種類型?1)原理與原則:一種優(yōu)良的氨基酸輸液注入身體后,各種氨基酸能得到最有效的利用,其組成平衡,使臨床癥狀改善,體重增加,而無(wú)代謝并發(fā)癥,血漿游離氨基酸譜無(wú)顯著變化。2)類型:氨基酸營(yíng)養(yǎng)輸液;代血漿用輸液;止血用氨基酸輸液;嬰幼兒用氨基酸輸液;治療用氨基酸輸液。4.熟悉并理解以胰臟為原料采用“酸醇提取法”生產(chǎn)胰島素的工藝。4、填寫胰島素生產(chǎn)工藝流程中的空格(字母A—N表示)。A乙醇、草酸B2.5~3.0C堿化D8.0~8.4E堿化液F酸化G3.6~3.8H去脂IPh2.0~2.5J鹽析K除酸性蛋白(水、丙酮、氨水)L6.0M除堿性蛋白N6.05.熟悉從生物材料中提取酶的主要過(guò)程和分離純化過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題?1)主要過(guò)程:原料選擇→生物材料的預(yù)處理☆→提取→濃縮☆→純化→純化→結(jié)晶☆;2)注意的問(wèn)題:1.防止酶蛋白變性;2.防止復(fù)因子丟失;3.防止酶被蛋白水解酶降解6.重組DNA技術(shù)制造人胰島素有兩種途徑?1)AB鏈合成法:以人工合成的人胰島素A鏈和B鏈基因分別表達(dá)A鏈和B鏈,然后再組合起來(lái)。2)反轉(zhuǎn)錄酶法:通過(guò)胰島素原的cDNA合成,表達(dá)產(chǎn)物是胰島素原,經(jīng)工具酶切開,除去C-肽得人胰島素。熟悉理解CuZn-SOD和Mn-SOD的生產(chǎn)工藝及測(cè)定方法。(1)以牛血紅細(xì)胞提取Cu、Zn-SOD的工藝(2)以牛肝為原料提取Mn-SOD的工藝1.什么為廣義抗生素1)由微生物產(chǎn)生的抗菌及抗其他病原微生物的物質(zhì);2)與微生物產(chǎn)物相同的化學(xué)合成物。即首先發(fā)現(xiàn)于微生物代謝物中,如氯霉素;3)以微生物產(chǎn)物為原料,經(jīng)化學(xué)反應(yīng)所得的衍生物或鹽類;4)由以上三種來(lái)源的驅(qū)蟲物質(zhì)。2.試寫出微生物藥物的一般分離純化過(guò)程。培養(yǎng)發(fā)酵—發(fā)酵液預(yù)處理---固液分離---(胞內(nèi)產(chǎn)物)細(xì)胞破碎---固液分離---初步純化(包內(nèi)產(chǎn)物直接此步)---精制3.怎樣保存微生物菌種?何謂菌種退化?如何檢查菌種退化?1)菌種保藏方法有:斜面低溫保藏,液體石蠟封藏,冷凍干燥保藏,液氮超低溫保藏,甘油冷凍保藏,砂土管保藏等2)菌種退化指的是隨著時(shí)間的推移菌種的一個(gè)或多個(gè)特性(如生長(zhǎng)力、產(chǎn)孢子能力和特殊產(chǎn)物產(chǎn)量)逐步減退或消失,最終導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的死亡的現(xiàn)象3)檢查方法有單位容積發(fā)酵液中活性物質(zhì)的含量檢測(cè),瓊脂平板上單菌落的形態(tài)檢查,不同培養(yǎng)時(shí)期菌體細(xì)胞形態(tài)和主要遺傳特征檢查,發(fā)酵過(guò)程中pH變化監(jiān)測(cè),發(fā)酵液氣味色澤的檢查4.防止菌種退化的措施1)控制傳代次數(shù);(1)2)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基;培養(yǎng)溫度等;(1)3)利用不易衰退的細(xì)胞傳代:霉菌、放線菌:無(wú)性孢子或有性孢子;(1)4)采用有效的菌種保藏方法。(1)5.熟悉幾大類抗生素制備工藝的一般流程,掌握其工藝要點(diǎn)。1)、青霉素制備工藝:工藝要點(diǎn):1)發(fā)酵液預(yù)處理和過(guò)濾放罐后,首先要冷卻目前采用鼓式過(guò)濾及板框過(guò)濾,加助濾劑。酸化時(shí)pH應(yīng)控制得高些(pH4~5),再加些絮凝劑如十五烷基溴化吡啶(PPB)等,過(guò)濾。2)影響青霉素提取的主要因素青霉素提取效果除了已選定適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶媒,破乳化劑和離心分離設(shè)備外,還與下列主要因素有關(guān):pH值:一般從濾液萃取到醋酸丁酯時(shí),pH選擇2.0~2.5,而從丁酯反萃取到水相時(shí),pH選擇6.8~7.2之間。溫度:要求提取在低溫(10℃以下)條件下進(jìn)行較為有利。在設(shè)備上要考慮用冷鹽水進(jìn)行冷卻,以降低溫度,特別是酸化崗位,溫度要求更低些。時(shí)間:酸化時(shí)速度應(yīng)快些。堿化時(shí)速度可放慢些,因青霉素在中性下半衰期要長(zhǎng)些,破壞要緩和些,故以能分離得清為原則。萃取方式和濃縮比:萃取劑和萃取方式選擇目前生產(chǎn)上采用二級(jí)逆流萃取方式。濃縮比的選擇也很重要,因?yàn)槎□サ挠昧颗c收率和質(zhì)量都有關(guān)系。丁酯用量為濾液體積的25~30%時(shí),色素相對(duì)含量低,濃縮比為1.5~2.5倍。2)、鏈霉素制備工藝:影響工藝的因素.發(fā)酵液的過(guò)濾處理2、樹脂的吸附、洗脫3、活性炭脫色、低溫濃縮1.?dāng)⑹龌蚬こ趟幬锏囊话阒苽溥^(guò)程。1)目的基因的克隆;(1)2)將目的基因和載體連接,構(gòu)建DNA重組體;(1)3)將DNA重組體轉(zhuǎn)入宿主菌構(gòu)建工程菌;(1)4)工程菌的發(fā)酵/生產(chǎn);(1)5)外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化;(1)6)產(chǎn)品的檢驗(yàn)等。(1)2.影響目的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素1)外源基因的拷貝數(shù);(1)2)外源基因的表達(dá)效率;(1)3)表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性;(1)4)細(xì)胞的代謝負(fù)荷;(1)5)工程菌的培養(yǎng)條件。(1)3.影響基因工程藥物生產(chǎn)的主要因素分析1)培養(yǎng)基的影響;(1)2)接種量的影響;(1)3)溫度的影響;(1)4)溶解氧的影響;(1)5)誘導(dǎo)時(shí)機(jī)的影響;(1)6)pH的影響(1)4.簡(jiǎn)述基因工程藥物的質(zhì)量控制(5分)1)原材料的質(zhì)量控制;(1)2)培養(yǎng)過(guò)程的質(zhì)量控制;(1)3)純化工藝過(guò)程的質(zhì)量控制;(1)4)目標(biāo)產(chǎn)品的質(zhì)量控制;(1)5)產(chǎn)品的保存。(1)5.表達(dá)載體的一般要求是什么?1)能獨(dú)立復(fù)制2)有靈活的多克隆位點(diǎn)和方便的篩選標(biāo)記3)具有有效運(yùn)載外源基因的能力,能攜帶大小不同的外源基因4)容易控制,在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定性高,安全可靠1.舉例說(shuō)明什么是滅活疫苗及其優(yōu)缺點(diǎn)1)選擇毒力強(qiáng)、免疫原性好的毒株大量培養(yǎng),用物理或化學(xué)方法使之滅活。(1)2)研制:0.4%甲醛滅活,保留免疫原性+佐劑:乙腦病毒、流感病毒、狂犬病毒、傷寒、百日咳、霍亂、鉤端螺旋體;(1)3)優(yōu)點(diǎn):1、研制時(shí)間較短,安全,可常溫保存;2、生產(chǎn)簡(jiǎn)單、易保存運(yùn)輸;(1)4)缺點(diǎn):1、用量較大,成本高,注射不方便;2、免疫原性較差,只產(chǎn)生體液免疫,無(wú)局部抗體,不激活CTL,效果比弱毒疫苗差;3、甲醛滅活的麻疹病毒可加重疾病,機(jī)制不詳。(2)3.簡(jiǎn)述天花免疫預(yù)防成功的原因1)一種天花病毒血清型;(0.5)2)沒有動(dòng)物感染源和病毒儲(chǔ)存的場(chǎng)所;(0.5)3)亞臨床癥狀極少;(0.5)4)終生免疫;(0.5)5)明顯癥狀出現(xiàn)前沒有傳染性;(0.5)6)疫苗效果顯著;(0.5)7)政府承擔(dān)主要的義務(wù)。(1)3.舉例說(shuō)明什么是減毒活疫苗及其優(yōu)缺點(diǎn)1)自然或人工選擇法獲得低毒或無(wú)毒的變異株,如卡介苗、脊灰、流感、麻疹的疫苗株。(1)2)研制:(1)從自然界中篩選弱毒株—新城疫Ⅱ系弱毒苗;(2)選擇免疫原性好的強(qiáng)毒株,經(jīng)物理、化學(xué)、生物學(xué)方法使其毒力減弱,成為無(wú)致病性(安全)具有良好免疫原性(有效)的弱毒株。(1)3)優(yōu)點(diǎn)(1)激活所有的免疫系統(tǒng);對(duì)所有保護(hù)性抗原均產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不同于抗原性發(fā)生改變的死疫苗的;免疫性持久,交叉反應(yīng)多;成本低;在大多數(shù)的疫苗接種者中可迅速產(chǎn)生免疫性;接種方便,如poliovaccine。4)缺點(diǎn)(1)變異株可能回復(fù)到有毒力的野生株;如果機(jī)體免疫缺陷,減毒株仍可能引起感染或并發(fā)癥;可能激活機(jī)體內(nèi)其他病毒的感染;減毒活苗可能引起持續(xù)感染。1.簡(jiǎn)述鼠單抗用于人體治療存在的主要問(wèn)題1)單克隆抗體的免疫原性。人抗鼠免疫反應(yīng)(HAMA),大劑量鼠源性異源蛋白會(huì)引起超敏反應(yīng)。(2)半衰期短。20h,1%到達(dá)靶細(xì)胞。(1)3)完整抗體分子,相對(duì)分子質(zhì)量大。難通過(guò)血管間隙,靶吸收率較差。(1)五、論述題1.結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際,敘述世界醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)。(8分)(一)世界醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀:1)世界醫(yī)藥市場(chǎng)迅速擴(kuò)大。2)通用名藥市場(chǎng)不斷擴(kuò)大。3)非處方藥(OTC)市場(chǎng)前景廣闊。4)純天然藥物快速發(fā)展。(二)世界醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展趨勢(shì):1)生物制藥成為投資熱點(diǎn)。2)新藥研制、生產(chǎn)成為促進(jìn)醫(yī)藥市場(chǎng)發(fā)展的主動(dòng)力,通用名藥的市場(chǎng)將繼續(xù)擴(kuò)大。3)非處方藥品(OTC)市場(chǎng)銷售增長(zhǎng)速度加快。4)老年疾病用藥、婦女兒童用

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