(高清版)DB41∕T 1586-2018 飼料中志賀氏菌的檢測(cè) EMA-PCR法_第1頁(yè)
(高清版)DB41∕T 1586-2018 飼料中志賀氏菌的檢測(cè) EMA-PCR法_第2頁(yè)
(高清版)DB41∕T 1586-2018 飼料中志賀氏菌的檢測(cè) EMA-PCR法_第3頁(yè)
(高清版)DB41∕T 1586-2018 飼料中志賀氏菌的檢測(cè) EMA-PCR法_第4頁(yè)
(高清版)DB41∕T 1586-2018 飼料中志賀氏菌的檢測(cè) EMA-PCR法_第5頁(yè)
已閱讀5頁(yè)，還剩3頁(yè)未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

DB41DB41/T1586—2018飼料中志賀氏菌的檢測(cè)EMA-PCR法2018-04-17發(fā)布2018-07-17實(shí)施河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I14.32×PremixTaq緩沖液：內(nèi)含TaqDNA聚合酶1.25a）上游引物：5＇-TTGCTGCTGATGCCACTGAGA-3';4.10疊氮溴化乙錠（EMA，0.2mg/mL見(jiàn)附錄A的A.4。4.11溴化乙錠（10mg/mL）。4.12滅菌離心管：1.5mL，15mL。25.4離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥12000r/min。上，鹵素?zé)粽丈湎缕毓?min，然后水浴煮沸10min，再將離心管轉(zhuǎn)移至冰浴中使其快速冷卻。渦旋混勻裂解物，12000r/min離心2min，收集上清液，作為PCR擴(kuò)增的模板（模板稱取1.5g瓊脂糖（4.5）加入100mL1×TAE電泳緩沖與1μL6×上樣緩沖液（4.9）混合后加入到上樣孔內(nèi)，設(shè)Marker2000（4.6）對(duì)照。5V/cm～8V/cm恒壓下電泳20min～30min。3如果志賀氏菌陽(yáng)性對(duì)照的PCR產(chǎn)物在386bp處出現(xiàn)條帶（參見(jiàn)附錄B），同時(shí)陰性對(duì)照PCR產(chǎn)物于樣品的PCR產(chǎn)物電泳后在386bp處出現(xiàn)條帶樣品的PCR產(chǎn)物電泳后在386bp處未出現(xiàn)條帶，判定25g樣品中未檢出志賀氏菌。4培養(yǎng)基和試劑A.1.1成分20g1g2g5g0.5g4g1.5g5g水1000mLA.1.2制法將以上成分混合加熱溶解，冷卻至25℃左右調(diào)節(jié)至pH7.0±0.2。115℃高壓滅菌15min。A.2.1成分242.0g37.2g57.1mL942.9mLA.2.2制法調(diào)節(jié)至pH8.3，定容至1L后，室溫保存。使用時(shí)稀釋50倍即為A.3.1成分0.5g0.5g0.5mol/L乙二胺四乙酸（EDTA，pH8.0）0.06mL360mL5滅菌水640mLA.3.2制法0.5mol/LEDTA（pH8.0）溶于500mL滅菌水中，加入溴酚藍(lán)和二甲苯氰FF溶解，與甘油混合，定容至1000mL，分裝后4℃保存。A.4.1成分疊氮溴化乙錠5mg滅菌水25mLA.4.2制法5mg疊氮溴化乙錠溶于5mL滅菌水中，定容至25mL，充分混勻，分裝后-20℃避光保存。6(資料性附錄)志賀氏菌活

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論