DB45T 2028-2019 甘蔗組織培養(yǎng)污染控制操作規(guī)程

DB45甘蔗組織培養(yǎng)污染控制操作規(guī)程廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I II 1 1 1 2 4 4 4 III1甘蔗組織培養(yǎng)污染控制操作規(guī)程2.12.22.3接種vaccinate2.43.1培養(yǎng)基滅菌3.1.1培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌器進(jìn)行高溫高壓濕熱滅菌。3.1.2滅菌程序及安全操作技術(shù)按高壓蒸汽滅菌容器操作說(shuō)明進(jìn)行。3.1.4經(jīng)過(guò)滅菌處理的培養(yǎng)基在儲(chǔ)藏室放置5d～7d后，污染率≤5.0％。23.2接種室清潔、消毒3.2.1操作使用前3.2.1.1先用吸塵設(shè)備吸干凈接種室地面塵埃，再用濕拖把拖擦1～2遍。3.2.2操作結(jié)束后3.2.2.1吸塵設(shè)備吸塵后用0.10.2％苯扎溴銨溶液擦拭地板1～2遍。3.3工作人員的清潔和消毒3.3.1進(jìn)入接種室前，先用洗手液和自來(lái)水洗凈雙手，后更換專用鞋子、穿工作服、戴帽子和口罩。3.3.3操作結(jié)束后，在緩沖間脫下專用工作服、帽子和口罩，放回原位；離開(kāi)緩沖間換下專用鞋子。3.4工作人員用品的清潔和消毒3.5超凈工作臺(tái)的消毒3.5.2對(duì)超凈工作臺(tái)的頂部、左右壁及臺(tái)面、接種轉(zhuǎn)管用具3.6接種轉(zhuǎn)管工具的消毒滅菌3.6.1每天接種轉(zhuǎn)管所用的剪刀、鑷子、刀子等工具，與培養(yǎng)基一起在高壓蒸汽滅菌器內(nèi)進(jìn)行高溫高3.6.2已滅菌的接種轉(zhuǎn)管工具不得與未滅菌培養(yǎng)瓶或物品混放。3.6.3轉(zhuǎn)管前,將3.6.1滅菌的接種轉(zhuǎn)管工具用753.6.5操作工作結(jié)束后，所有使用過(guò)的剪刀、鑷子、刀子等工具，先用自來(lái)水清洗干凈，再按3.6.14.1外植體的選取和預(yù)處理34.2接種的消毒滅菌4.2.1葉鞘幼嫩組織4.2.1.2剝?nèi)ネ鈱永先~鞘，每剝一層葉鞘更換一次滅過(guò)菌的刀片。4.2.1.3內(nèi)部幼嫩組織誘導(dǎo)培養(yǎng)產(chǎn)生胚性細(xì)胞團(tuán)。4.2.1.4誘導(dǎo)培養(yǎng)污染率5.07.0％。4.2.2腋芽4.2.2.4腋芽分化培養(yǎng)產(chǎn)生叢生小苗。4.2.2.5分化培養(yǎng)污染率5.010.0％。4.2.3莖尖4.2.3.2在超凈工作臺(tái)內(nèi)先用754.2.3.3剝?nèi)フ嵫客鈱尤~鞘，取莖尖組織。每剝一層葉鞘更換一次滅過(guò)菌的刀片或接種針。4.2.3.4莖尖分化培養(yǎng)產(chǎn)生叢生小苗。4.2.3.5莖尖分化培養(yǎng)污染率4.06.0％。4.3轉(zhuǎn)管4.3.1轉(zhuǎn)管前對(duì)污染或疑似污染的材料一律去除。4.3.3培養(yǎng)基、準(zhǔn)備進(jìn)行轉(zhuǎn)管的材料及包扎滅菌好的其他物品，應(yīng)在超凈工作臺(tái)內(nèi)開(kāi)啟。4.3.4在操作區(qū)內(nèi)，每次不宜放入過(guò)多的待用培養(yǎng)基和材料。4.3.5打開(kāi)培養(yǎng)容器時(shí)，應(yīng)拿成斜角，以避免塵埃落入培養(yǎng)容器中；培養(yǎng)容器口與送風(fēng)的流動(dòng)方向平4.3.7每次轉(zhuǎn)完超凈工作臺(tái)內(nèi)材料后，用75％的乙醇溶液消毒雙手和工作臺(tái)面。4.3.8轉(zhuǎn)管材料污染率3.05.0％。45.1濕度控制應(yīng)用空調(diào)、空氣抽濕機(jī)等對(duì)培養(yǎng)室的空氣濕度控制在50.060.0％。