DB2110∕T 0012-2022 芝麻抗黑斑病鑒定技術(shù)規(guī)范

ICS65.020CCSB33DB2110芝麻抗黑斑病鑒定技術(shù)規(guī)范遼陽市市場監(jiān)督管理局發(fā)布1DB2110/T0012—2022前言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由遼陽市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件起草單位：遼寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：程洪森、孫會杰、那艷斌、安啟源、高德學(xué)、王超、竇淑華、王正軍、呂仕大、陳雅麗、田靜、李傳家、孫曉瑩、王國權(quán)。本文件發(fā)布實施后，任何單位和個人如有問題和意見建議，均可以通過來電和來函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實際情況依法進(jìn)行評估及復(fù)審。聯(lián)系方式如下：遼陽市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局遼陽市文圣區(qū)北翰林路38寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所遼陽市白塔區(qū)勝利路65B2110/T0012—2022芝麻抗黑斑病鑒定技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了芝麻抗黑斑?。ˋlterrariasesami)鑒定技術(shù)的術(shù)語和定義、病原物接種體制備、田間抗性鑒定、病情調(diào)查、抗病評價和鑒定記載方法。本文件適用于芝麻品種及種質(zhì)資源對黑斑病抗性的田間鑒定及評價。2術(shù)語和定義2.1抗病性植物體所具有的能夠減輕或克服病原物致病作用的可遺傳性狀。2.2致病性病原物所具有的破壞寄主和引發(fā)病變的能力，是一種病原物固有的特性。2.3抗性評價根據(jù)采用的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)判別寄主植物對特定病害反應(yīng)程度和抵抗水平的描述。2.4抗病性鑒定通過適宜技術(shù)方法判別植物對特定侵染性病害反應(yīng)程度和抵抗水平的描述。2.5人工接種在適宜條件下，通過人工操作將病原菌接種體直接或間接接種到植物體適當(dāng)部位，并使植物發(fā)病的過程。2.6病情級別人為定量植物個體或群體發(fā)病程度的數(shù)量化描述。2.7病原分離物采用人工方法從植物發(fā)病部位分離獲得的在特定環(huán)境條件下培養(yǎng)的病原物。2.8培養(yǎng)基可以使病原物生長的自然或人工配制的營養(yǎng)基質(zhì)。2.9接種體3DB2110/T0012—2022用于接種以引起病害的病原物或病原物的一部分。2.10接種懸浮液用于接種的含有定量接種體的液體。2.11芝麻黑斑病由芝麻鏈格孢菌(Alternariasesami(Kawamura)Mohanty&Behera)侵染為害芝麻葉片、莖稈的病害。主要危害芝麻葉片，發(fā)病初期葉片上形成褐色或深褐色的圓形、橢圓形病斑；病情嚴(yán)重時病斑擴(kuò)展至整個植株，出現(xiàn)葉片褶皺、邊緣卷曲、脫落、枯死等癥狀，嚴(yán)重影響芝麻產(chǎn)量和品質(zhì)。3病原物接種體制備3.1病原物分離常規(guī)組織分離法從發(fā)病植株葉片的典型病斑分離芝麻黑斑病病原物。取芝麻黑斑病典型癥狀的病葉，取病葉病健交界組織，切成1～2cm的小塊，2%次氯酸鈉（NaOCl）表面消毒2分鐘，后用無菌水漂洗3次，置于水瓊脂培養(yǎng)基（WA）上，28°C培養(yǎng)，待病原菌產(chǎn)生分生孢子后，在高倍體視鏡下從WA培養(yǎng)基上用接種針挑取單孢，獲得純化菌株，-40℃低溫長期保存、備用。3.2接種物繁殖與保存于接種前，將純化的芝麻鏈格孢菌接種到PDA平板上，以菌體在培養(yǎng)基表面多點分布為宜，28℃培養(yǎng)5～7天，待菌落產(chǎn)生大量分生孢子后，將病菌分生孢子用無菌水洗下，2層紗布過濾，加入0.3%吐溫20，配制成孢子懸浮液（濃度1.0×105個孢子/mL供接種用。如孢子懸浮液不能立即接種用，可置4℃冰箱保存，以不超過3天為宜。4田間抗性鑒定4.1抗性鑒定圃設(shè)置鑒定圃設(shè)置應(yīng)具備良好的自然發(fā)病環(huán)境條件和灌溉條件，且地勢平坦、地力均勻的地塊。4.2鑒定設(shè)計鑒定材料按品種生育期早晚分組，同組材料按順序排列，行長5m，2行區(qū)，行距0.55m，小區(qū)保苗80株左右，3次重復(fù)。每50份鑒定材料各設(shè)1組抗、感病對照，抗病對照品種為遼芝9號，感病對照品種為大志白芝麻。4DB2110/T0012—20224.3種植要求鑒定材料播種時間、栽培管理與大田栽培相同。4.4接種4.4.1接種時期芝麻植株盛花期，即50%植株開花6～7朵時進(jìn)行接種，一般在7月22～29日（遼陽早熟品種適當(dāng)提早接種。4.4.2接種方法噴霧法接種。采用高壓噴霧器將孢子懸浮液均勻噴在植株中上部，噴液量以葉片和蒴果上孢子懸浮液不流淌為宜。選擇傍晚或陰天進(jìn)行接種，小雨天接種最佳。4.5接種后管理在接種后若無有效降雨，應(yīng)在接種后24小時內(nèi)進(jìn)行田間人工清水輔助葉面噴霧、保濕，從早晨7時開始每間隔2小時噴霧一次，到晚上6時止。5病情調(diào)查5.1調(diào)查時間接種后30天左右，進(jìn)行發(fā)病情況調(diào)查。5.2調(diào)查方法每小區(qū)隨機(jī)選取10株，目測調(diào)查植株總體發(fā)病程度，逐份材料調(diào)查病株中部（植株1/2處）以上10片葉片，記載葉片病斑面積所占葉片總面積的百分比。5.3病情分級田間抗性評價標(biāo)準(zhǔn)分為9級，病情分級及其對應(yīng)的癥狀描述見表1和圖1。表1芝麻抗黑斑病鑒定病情級別劃分標(biāo)準(zhǔn)病情級別癥狀描述1整株葉片無病癥或葉片上有少量病斑，病斑面積≤5%，葉片平整、無異常；3葉片上有較多斑點，5%＜病斑面積≤15%，葉片正常，偶見輕微褶皺；5葉片上有相連病斑，15%＜病斑面積≤25%，葉片局部有褶皺，邊緣略彎曲；7葉片上有大量病斑相連，有較大斑塊，25%＜病斑面積≤50%，葉片凸凹不平，邊緣明5DB2110/T0012—2022顯卷曲；9葉片幾乎被病斑覆蓋，病斑連片，病斑面積＞50%，葉片卷曲、脫落或枯死。6抗性評價6.1鑒定有效性判別當(dāng)感病對照材料達(dá)到其相應(yīng)感病程度，該批次材料抗黑斑病鑒定視為有效。6.2抗性評價標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)鑒定材料的群體發(fā)病程度（病情級別）確定其對黑斑病的抗性水平。按50%以上的發(fā)病個體（葉片）的病情級別作為鑒定材料的群體病情級別值，確定鑒定材料的抗性水平，劃分標(biāo)準(zhǔn)見表2。表2芝麻黑斑病抗性評價標(biāo)準(zhǔn)病情級別抗性評價135797鑒定記載表格芝麻抗黑斑病鑒定結(jié)果記載表格見表3。表3年芝麻抗黑斑病鑒定結(jié)果記載表編號名稱來源調(diào)查總數(shù)病情級別抗性評價013579注1:鑒定地點注2:接種病原菌分離物編號注3:接種日期調(diào)查日期6DB2110/T0012—2022鑒定技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）：7DB2110/T0012—2022(規(guī)范性附錄)芝麻黑斑病癥狀A(yù)病名和癥狀描述A.1病名芝麻黑斑病A.2癥狀描述芝麻黑斑病是芝麻生產(chǎn)上重要的葉部病害，盛花期最易感病，北方一般在7月下旬～8月中旬開始發(fā)病，感病葉片初期產(chǎn)生黑色斑點，隨后上產(chǎn)生圓形、橢圓形或不規(guī)則病斑，有輪紋，病斑呈暗褐色或黑褐色，病斑上產(chǎn)生黑色霉?fàn)钗铮遣【姆稚咦庸?、分生孢子；隨著病情發(fā)展，病斑顏色變深，病斑相連形成大的枯斑，葉片出現(xiàn)邊緣卷曲，葉片易脫落，嚴(yán)重的可致整株枯死（圖1）。8DB2110/T0012—2022(規(guī)范性附錄)芝麻黑斑病菌B學(xué)名和形態(tài)描述B.1學(xué)名芝麻鏈格孢(Alternariase