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22法I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的本文件起草單位:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)、吉林參王植保科技有1人參銹腐病菌分子檢測實時熒光定量PCR法本文件適用于人參根和土壤中銹腐病菌的實時熒光定量PCR分GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和GB/T28067甘蔗黃葉病毒實時熒光RT-PCR檢測方法3.13.2一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測定每次聚合3.3根據(jù)人參銹腐病強(qiáng)壯土赤殼菌I.robusta組蛋白Histone基因的保守序列設(shè)計一對特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。利用熒光信號伴隨目的PCR產(chǎn)物的增加而增強(qiáng)的原理,收集PCR擴(kuò)增過程的熒25.2.3土壤總DNA提取試劑6.7核酸蛋白分析儀或紫外分光7.1.2.1經(jīng)分子檢測3次未檢出強(qiáng)壯土赤殼菌的健康人參根基因組7.1.2.2經(jīng)分子檢測3次未檢出強(qiáng)壯土赤殼菌的土壤37.2樣品采集與制備每25m2人參田塊采用梅花形采樣法,不少準(zhǔn)備人參根樣品和土壤樣品,參照基因組DNA提取試劑盒說明要求提取基因組DNA。采用核酸蛋體積(μL)按照商品化試劑盒說明書進(jìn)行熒光定量PC49結(jié)果判定與表述
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