2025年中圖版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年中圖版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷547考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、在核酸分子雜交技術(shù)中；常常使用已知序列的單鏈核酸片段作為探針。為了獲得B鏈作探針，可應用PCR技術(shù)進行擴增，應選擇的引物種類是。

A.引物1與引物2B.引物3與引物4C.引物2與引物3D.引物1與引物42、嚴格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進行的關(guān)鍵，直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高，產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物，通常所指的發(fā)酵條件不包括()A.溫度控制B.溶氧控制C.pH控制D.酶的控制3、下列有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述錯誤的是（）A.先將菌液進行一系列的梯度稀釋B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面C.適宜條件下培養(yǎng)D.結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落4、草莓皺縮病毒（SCV）感染草莓時，會使其葉片扭曲皺縮，植株矮化，導致減產(chǎn)。為了能快速有效檢測出該病毒，研究人員利用SCV的病毒粒子免疫健康小鼠，制備相應的單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得的B細胞可無限增殖B.在獲得能分泌相應抗體的雜交瘤細胞的過程中，需要進行兩次篩選C.用單克隆抗體檢測草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗體雜交的原理D.在制備單克隆抗體的過程中，用到了動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)5、下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)與應用的敘述正確的是（）A.用涂布分離法分離細菌時，需要用接種環(huán)將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上B.在尿素固體培養(yǎng)基上，產(chǎn)脲酶細菌菌落周圍會出現(xiàn)白色的透明環(huán)帶C.利用醋酸菌將果酒發(fā)酵成果醋，需要不斷向發(fā)酵裝置中通入無菌空氣D.利用微生物進行發(fā)酵制成的泡菜美味可口，含有的成分對人體均有益6、PCR一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應，由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時()。A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進行DNA子鏈的延伸B.與引物Ⅱ結(jié)合進行DNA子鏈的延伸C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進行子鏈的延伸D.無需與引物結(jié)合，在酶的作用下從頭合成子鏈7、如圖為哺乳動物早期胚胎發(fā)育的過程；下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.Ⅰ時期為桑椹胚，該時期的細胞具有發(fā)育的全能性B.過程a和b比卵裂期胚胎，細胞數(shù)目增多，有機物的含量增多C.胚胎移植選擇處于Ⅰ或Ⅱ時期的胚胎最易成功D.細胞分化從Ⅱ時期開始貫穿于動物的整個生命歷程評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、下列就“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)”實驗的有關(guān)敘述，正確的是（）A.經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時的平板均要倒置B.同一稀釋度下至少要涂布三個平板并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時計數(shù)C.在稀釋度足夠高時，所形成的單個菌落中所有細胞的遺傳信息必定相同D.在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染9、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應用的說法中，正確的是（）A.植物體體內(nèi)具完整細胞結(jié)構(gòu)的活細胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體B.不同培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例應不同C.單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可實現(xiàn)某些重要細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)10、地中海貧血癥是一種遺傳性溶血性貧血癥。有一對表現(xiàn)型正常的夫婦，他們以前生育過地中海貧血癥兒子，該患兒的珠蛋白結(jié)構(gòu)異常，在一歲時死去。現(xiàn)在妻子又懷孕了，于是進行了產(chǎn)前診斷，診斷時用限制酶PstI酶切后電泳結(jié)果如圖1所示，圖2為珠蛋白基因及其側(cè)翼序列的Pst酶切位點。下列敘述正確的是（）

A.正常的珠蛋白基因長度為4．4kb突變后的致病基因長度為3．7kbB.若未產(chǎn)生新的PsI酶切位點，則致病基因可能是堿基對缺失產(chǎn)生的C.致病基因是隱性基因，并且夫妻兩人都是隱性致病基因的攜帶者D.孕婦體內(nèi)的胎兒雖然含有致病基因，但是生下來并不會患該病11、營養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種生長因子的能力，只能在補充了相應的生長因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.乙中生長的酵母菌都不屬于營養(yǎng)缺陷型菌株12、北方白犀牛目前僅剩兩頭雌性個體，科研人員嘗試通過現(xiàn)代生物技術(shù)，利用實驗室冷凍保藏的少量北方白犀牛精子拯救該物種。下列說法正確的是（）A.科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術(shù)繁育北方白犀牛的試管動物B.若利用體細胞核移植技術(shù)培育出北方白犀牛的克隆動物，該動物一定是雌性C.為了繁育更多子代，可以選擇人工繁育技術(shù)得到的原腸胚期的胚胎進行分割D.進行胚胎移植時，經(jīng)同期發(fā)情處理過的雌性北方白犀牛不會發(fā)生免疫排斥反應13、克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細胞的細胞核吸出注入去核卵母細胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個細胞融合。世界首例體細胞克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小C.供體細胞注入卵母細胞透明帶內(nèi)后，就可自行進入卵母細胞D.細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組14、剛果紅是一種染料，可以與纖維素形成紅色復合物，當紅色復合物中的纖維素被分解后紅色消失。表中是篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基，利用此培養(yǎng)基可從土壤中篩選纖維素分解菌，結(jié)果如圖。下列說法正確的是（）。培養(yǎng)基的成分：纖維素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g剛果紅適量MgSO40．5g瓊脂20g定容1L

A.培養(yǎng)基中纖維素和尿素分別提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pHC.將土壤稀釋液接種在平板上的方法為稀釋涂布平板法D.平板上5個菌落都有透明圈，說明5個菌落都能分解纖維素15、免疫PCR是對微量抗原的一種檢測方法。下圖是利用該技術(shù)檢測牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標記的抗體2，進行PCR擴增，最后進行電泳檢測，相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象C.電泳檢測結(jié)果只能判斷陽性與否，無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應通過PCR技術(shù)間接擴增放大，從而達到可檢測的水平16、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設計并人工合成了AmyS2基因，將其導入芽孢桿菌內(nèi)，具體過程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導入質(zhì)粒B相比，導入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說法錯誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過基因工程實現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時需用限制酶Eco52I和BamHI同時切割質(zhì)粒B和信號肽基因C.信號肽基因表達的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術(shù)檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)17、第三步：將目的基因?qū)隷_____18、目的基因是指：______19、植物基因工程：______。20、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80℃的高溫，而DNA在_________℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解或破壞_______，食鹽能____________細胞膜。21、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。22、沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌；被感染了沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會使人發(fā)生食物中毒。沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門氏菌的繁殖。回答下列問題：

（1）培養(yǎng)沙門氏菌時要進行無菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對獲得的沙門氏菌常采用________的方法長期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學特性，可采用________法來提取，提取過程中影響精油品質(zhì)的因素有________。23、近年來，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過與克隆技術(shù)有關(guān)的問題嗎？_____。24、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________25、應用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共1題，共3分)26、胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共8分)27、下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）泡菜是乳酸菌發(fā)酵的產(chǎn)物，乳酸菌的代謝類型是___________________。制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜，原因是____________________________。

（2）將鹽與清水按照一定的比例配制鹽水，待鹽水煮沸冷卻后，注入裝好原料的泡菜壇中，同時加入一定量的“老汁”(陳泡菜水)。將鹽水煮沸冷卻的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）測定亞硝酸鹽含量的方法是_________________。即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與____________________________發(fā)生重氮化反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成_______________色的染料，然后將顯色反應后的樣品與已知濃度的____________進行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。28、化合物S被廣泛應用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。碳源細胞干重（g/L）S產(chǎn)量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18

回答下列問題。

(1)通常在實驗室分離純化培養(yǎng)微生物時，需要設置對照實驗，如果自變量設為培養(yǎng)基不同，則是檢測____________________________。如果自變量設為_________________；則是檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底。

(2)由實驗結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是______；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是______。菌株C的生長除需要碳源外，還需要______（答出2點即可）等營養(yǎng)物質(zhì)。

(3)由實驗結(jié)果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，其根本原因是______。

(4)若以制糖廢液作為碳源，為進一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學進行了相關(guān)實驗。請簡要寫出實驗思路：______。

(5)為測定菌株C的含量，常用_________________進行接種，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，原因是_____________。29、某些老陳醋會出現(xiàn)產(chǎn)氣現(xiàn)象；原因是老陳醋中含有產(chǎn)氣細菌。產(chǎn)氣細菌是一類能產(chǎn)生過氧化氫酶的細菌，產(chǎn)氣菌產(chǎn)生的氣體積累會引起脹瓶，影響產(chǎn)品安全。實驗小組以瓶裝變質(zhì)老陳醋（脹瓶）；未變質(zhì)老陳醋為實驗材料，篩選出導致老陳醋產(chǎn)氣的細菌。回答下列問題：

(1)為了篩選產(chǎn)氣細菌，實驗人員設置了甲、乙、丙三組培養(yǎng)基，甲作為空白對照組，乙接種未變質(zhì)的老陳醋，丙接種__________。闡述如何從上述培養(yǎng)基中初步篩選疑似產(chǎn)氣細菌的菌株：__________。

(2)實驗小組初步篩選出了A1；A2和A3三株疑似的產(chǎn)氣細菌；篩選過程如下圖所示。

①過程a的接種方法是__________，判斷依據(jù)是__________。

②統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時間不足導致__________，或培養(yǎng)時間太長導致__________。

③現(xiàn)有5%的過氧化氫溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培養(yǎng)基等實驗器材。寫出判斷A1、A2和A3三種菌株是否為產(chǎn)氣細菌的實驗思路：__________。

(3)分別用三組平板培養(yǎng)A1、A2、A3三種菌株，然后在培養(yǎng)基上分別加入等量一定濃度的青霉素溶液，培養(yǎng)一段時間后可以觀察到一圈清晰區(qū)（抑菌圈），這是細菌生長被抑制所致。測量清晰區(qū)的直徑，數(shù)據(jù)如下表所示：。細菌不同濃度青霉素條件下清晰區(qū)直徑/mm5/（μg·mL-1）7.5/（μg·mL-1）10/（μg·mL-1）15/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）A10.2281317A2710121516A356566

該實驗的目的是__________。從表中數(shù)據(jù)可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的區(qū)別是__________、__________。30、科學家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分數(shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實驗設計思路______________評卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)31、2015年；屠呦呦因發(fā)現(xiàn)青蒿素治療瘧疾的新療法而獲得諾貝爾獎。工業(yè)上青蒿素一般從黃花蒿中提取，產(chǎn)量低，價格高。基因工程和細胞工程等技術(shù)為培育出含青蒿素高的黃花蒿提供了思路?？茖W家先通過紫外線處理大量黃花蒿幼苗后，偶然發(fā)現(xiàn)了一株高產(chǎn)植株。通過基因測序發(fā)現(xiàn)該高產(chǎn)植株中與青蒿素合成相關(guān)的一種關(guān)鍵酶的基因發(fā)生了突變。

（1）提取了高產(chǎn)植株的全部DNA后，要想快速、大量獲得該突變基因可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是_________；PCR儀實質(zhì)上是能夠自動調(diào)控溫度的儀器，因此，在合成子鏈時，必須加入______酶；這種酶在高溫下仍能保持活性。

（2）如果用黃花蒿發(fā)育某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的cDNA與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就稱為黃花蒿的_________，獲得的cDNA與黃花蒿細胞中該基因的堿基序列________(填“相同”或“不同”)。

（3）將獲得的突變基因?qū)肫胀S花蒿之前；先構(gòu)建基因表達載體，圖1；2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答：

用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_______，構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在其目的基因前要加上啟動子，啟動子是______識別和結(jié)合的部位。

（4）檢測目的基因是否表達出相應蛋白質(zhì)，應采取_____________技術(shù)。32、黃色鐮刀菌污染動物飼料后會產(chǎn)生一種毒性較高的代謝產(chǎn)物—－脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）；這給飼養(yǎng)的動物及人類健康帶來巨大威脅?？蒲腥藛T利用雜交瘤技術(shù)制備出抗DON的單克隆抗體，實現(xiàn)了對DON的高效低成本檢測。回答下列問題:

（1）制備單克隆抗體時，首先需要_______，隨后從小鼠脾臟獲得Ｂ淋巴細胞進行培養(yǎng)，進行細胞培養(yǎng)時所需氣體____________。

（2）通過_________技術(shù)獲得雜交細胞后，再經(jīng)過篩選獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是______________。

（3）為獲得大量的單克隆抗體，可將雜交瘤細胞進行______，從________中提取;或?qū)㈦s交瘤細胞注射到小鼠腹腔；從小鼠腹水中提取。

（4）將已知濃度帶熒光標記DON的溶液（標準樣品）、未知濃度不帶熒光標記DoN的溶液（待測樣品）等量混合，加入事先吸附有上述單克隆抗體的固相載體中保溫一段時間，________________________（抗體與兩種DoN的結(jié)合能力相同）。得出劃線部分判斷所依據(jù)的原理是____________________。33、腎上腺-腦白質(zhì)營養(yǎng)不良（ALD）是一種伴X染色體的隱性遺傳病（致病基因用d表示）；患者發(fā)病程度差異較大，科研人員對該病進行了深入研究。圖1是關(guān)于該病的某家系的遺傳系譜圖。研究人員提取了該家系中四名女性與此基因有關(guān)的DNA片段并進行PCR，產(chǎn)物用限制酶Ⅰ酶切后進行電泳（已知正?；蛑泻粋€限制酶Ⅰ的酶切位點，突變基因中增加了一個限制酶Ⅰ的酶切位點），結(jié)果如圖2所示：

(1)由圖2可知，突變基因新增的酶切位點位于_________（填“310bp”“217bp”“118bp”或“93bp”）。圖2所示的四名女性中_______________是雜合子。

(2)已知女性每個細胞所含兩條X染色體中的任意一條總是保持固縮狀態(tài)而失活，推測失活染色體上的基因無法表達的原因是______________________________。

由此推斷，Ⅱ-3、Ⅱ-4發(fā)病的原因是來自__________（填“父親”或“母親”）的X染色體失活概率較高；以另一條染色體上的基因表達為主。

(3)ALD可造成腦白質(zhì)功能不可逆損傷，圖1家系中Ⅱ-1（不攜帶d基因）與Ⅱ-2婚配后，不考慮新的突變，若生女孩，則_____（填“一定”“不一定”或“一定不”）患病，原因是______________________________。

(4)ALD可造成腦白質(zhì)功能不可逆損傷，尚無有效的治療方法，可通過遺傳咨詢和_________對該病進行監(jiān)測和預防。若要調(diào)查該病在人群中的發(fā)病率，需要保證___________________（答出兩點）。34、玉米是我國重要的糧食作物，白粉病是一種造成玉來嚴重減產(chǎn)的病害。科研人員利用基因工程技術(shù)將抗白粉病基因隨機轉(zhuǎn)入玉米中，獲得抗病株。為進一步研究抗病株的遺傳特性.讓抗病株與原種進行雜交，結(jié)果如表所示。請回答下列問題。組別親本F1F2表型及比例1♀抗病株x♂原種自交原種:抗病株≈4.93:12♂抗病株x♀原種自交原種:抗病株≈4.85:1

(1)玉米的感病與抗病是一對______________性狀。相對于原種的感病性狀，抗病性狀為_______性。

(2)根據(jù)F2的表型及比例能否判斷控制這對性狀的基因的遺傳遵循分離定律還是自由組合定律?請說明理由。_______________

(3)為了闡明抗病性狀的遺傳基礎，研究者分別選取原種和抗病株的葉片,對候選染色體1和2上相關(guān)的基因進行PCR擴增，電泳結(jié)果如圖所示，請推測抗病株抗病性狀出現(xiàn)的原因。________________

(4)研究過程得知，插入抗病基因會引起某種配子部分致死，請設計實驗確定是雄配子部分致死還是雄配子部分致死,并預測結(jié)果和結(jié)論。___________參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

本題考查PCR的相關(guān)知識。PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)。PCR的原理是DNA復制，需要的條件包括：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。PCR擴增DNA的過程包括：高溫變性、低溫復性、中溫延伸過程。

【詳解】

要獲得B鏈，則要獲得引物之間的DNA片段，根據(jù)PCR中子鏈延伸方向為5，到3，，故需選擇引物2與引物3進行擴增，選C。2、D【分析】【詳解】

試題分析：微生物的生活需要適宜的溫度和PH；溶氧量的多少直接影響到發(fā)酵產(chǎn)物的生成，都需要加以控制，酶由微生物細胞產(chǎn)生，對微生物細胞的代謝有催化作用，通常不需要加以控制，A；B、C三項均錯誤，D項正確。

考點：本題考查微生物發(fā)酵的相關(guān)知識，意在考查學生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。3、D【分析】【分析】

稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落；即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞；

計數(shù)時；首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度；一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)．此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)。

【詳解】

AB；稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，AB正確；

C；涂布平板后需要將其放置在適宜的條件下培養(yǎng)；以便長出菌落，C正確；

D；在不同稀釋度的菌液接種后；只有在一定的稀釋度的菌液里，聚集在一起的微生物才能分散成單個細胞，從而能夠在培養(yǎng)基表面形成單個菌落；如果稀釋度過低，將不會形成單個菌落；如果稀釋度過高，可能沒有菌落生成，D錯誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞。

（2）獲得雜交瘤細胞。①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；從小鼠體內(nèi)中分離獲得的已免疫的B細胞；能產(chǎn)生抗體，但不能增殖，A錯誤；

B；將已免疫的小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細胞的過程中至少要進行兩次篩選，一次是通過選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，另一次是通過專一抗體檢測篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細胞，B正確；

C；單克隆抗體的優(yōu)點特異性強；靈敏度高，可大量制備，單克隆抗體檢測草莓是否感染SCV，利用了抗原-抗體雜交的原理，C正確；

D；動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程技術(shù)的基礎；動物細胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體，D正確。

故選A。5、C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；用涂布分離法分離細菌時；所用的工具是涂布器，不是接種環(huán)，A錯誤；

B；在尿素固體培養(yǎng)基上；產(chǎn)脲酶細菌菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶，因為細菌產(chǎn)生的脲酶催化尿素分解產(chǎn)生了氨，導致培養(yǎng)基呈堿性，培養(yǎng)基中的酚紅指示劑遇堿性條件會變紅，B錯誤；

C；醋酸菌在有氧條件下才能將乙醇氧化成醋酸；所以利用醋酸菌將果酒發(fā)酵成果醋，需要不斷向發(fā)酵裝置中通入無菌空氣，C正確；

D；利用微生物進行發(fā)酵制成的泡菜中含有一定量的亞硝酸鹽；其對人體是有害的，D錯誤。

故選C。6、B【分析】【分析】

關(guān)于PCR技術(shù)的相關(guān)知識：

1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2、原理：DNA復制。

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；②低溫復性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

當由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時，此單鏈引物固定端為5′端，因此與它互補的子鏈從另一端開始合成，即與引物II結(jié)合進行DNA子鏈的延伸。

故選B。7、B【分析】1；胚胎發(fā)育的過程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。①卵裂期：細胞進行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加。②桑椹胚：32個細胞左右的胚胎（之前所有細胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞）。③囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔（注：囊胚的擴大會導致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化）。④原腸胚：內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。（細胞分化在胚胎期達到最大限度）

2；分析題圖：Ⅰ表示桑椹胚；Ⅱ表示囊胚，Ⅲ表示原腸胚。

【詳解】

A；Ⅰ時期為桑椹胚；含有的所有細胞都是全能細胞，該時期的細胞具有發(fā)育的全能性，A正確；

B、過程a表示卵裂形成桑椹胚，過程b表示桑椹胚形成囊胚；這兩個過程細胞均需要消耗能量，故胚胎中有機物的含量均減少，B錯誤；

C；胎移植選擇處于Ⅰ桑椹胚或Ⅱ囊胚時期的胚胎最易成功；C正確；

D；細胞分化從Ⅱ囊胚時期開始貫穿于動物的整個生命歷程；D正確。

故選B。

【點睛】二、多選題(共9題，共18分)8、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的倍數(shù)要合適，計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實驗組平板進行計數(shù)。

【詳解】

A；倒置培養(yǎng)的原因是可以防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染；經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時的平板均要倒置，以防止雜菌污染，A正確；

B；為使實驗結(jié)果更準確；同一稀釋度下可以多涂布幾個平板，至少要涂布三個平板并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時計數(shù)，求平均值，B正確；

C；細菌在分裂生殖中也會產(chǎn)生基因突變；雖然一個菌落是由一個活菌繁殖而來，但是個菌落中所有細胞的遺傳信息不一定相同，C錯誤；

D；證明選擇培養(yǎng)基沒有被雜菌污染的方法是對培養(yǎng)基進行空白培養(yǎng)；即選取未接種的培養(yǎng)皿與接種樣品的培養(yǎng)皿同時培養(yǎng)，在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染，D正確。

故選ABD。9、A:B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)：1；過程：離體的植物組織；器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化產(chǎn)生胚狀體，最好發(fā)育成植株（新植體）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要。

2；原理：植物細胞的全能性。

3；應用：植物繁殖的新途徑（快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種和突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的植物細胞必須具有完整的細胞核；以保證有全套的遺傳信息，因此植物體體內(nèi)具完整細胞結(jié)構(gòu)的活細胞均可作為組織培養(yǎng)的外植體，A正確；

B；脫分化過程和再分化過程所需的培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例應不同；如生長素與細胞分裂素用量比值適中時，促進愈傷組織的形成；生長素與細胞分裂素用量比值低時，有利于芽的形成；生長素與細胞分裂素用量比值高時，有利于根的形成，B正確；

C；單倍體育種和轉(zhuǎn)基因植物的培育都要經(jīng)歷細胞到植株的過程；因此都需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C正確；

D；利用某些細胞能產(chǎn)生特定的產(chǎn)物；通過組織培養(yǎng)使細胞數(shù)量增加，進而增加產(chǎn)量，實現(xiàn)工廠化生產(chǎn)，D正確。

故選ABCD。

【點睛】10、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A、由圖示可知，兩個PstI酶切位點之間分別是4.4kb和3.7kb，正常的β珠蛋白基因和突變的致病基因位于酶切位點內(nèi)部，因此兩個基因長度分別小于4.4kb和3.7kb；A錯誤；

B、含有珠蛋白基因的DNA片段的PstI酶切位點之間的長度由4.4kb變?yōu)?.7kb；而突變并未產(chǎn)生新的酶切位點，由此可知酶切位點之間發(fā)生了堿基對的缺失，而且這種差異導致了正?；蛲蛔?yōu)橹虏』?，因此突變可能就是堿基對的缺失所導致的，B正確；

C；該夫婦已經(jīng)生育過患病孩子；因此致病基因是隱性的，夫妻兩人都是攜帶者，C正確；

D、圖1可以看出胎兒含有3.7kb，即含有致病基因，但是同時含有4.4kb；即含有顯性的正常β-珠蛋白基因，即胎兒為雜合子，不會患病，D正確。

故選BCD。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種；劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；由甲平板觀察可知；平板中菌落分布均勻，采用的是稀釋涂布平板法，A正確；

B；由題圖信息分析可知；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多，含有野生型酵母菌菌株和某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，而乙培養(yǎng)皿菌株是某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，據(jù)此推測，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是補充了相應的生長因子的培養(yǎng)基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；因此接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，故甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；由題圖信息分析可知；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)皿中能夠形成的菌落是野生型菌株，不屬于營養(yǎng)缺陷型菌株，D正確。

故選ACD。12、A:B:D【分析】【分析】

胚胎移植：（1）概念：是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的；生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”；

（2）胚胎移植的基本程序主要包括：①對供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；因為有兩頭雌性個體和少量北方白犀牛精子；所以科研人員可以使用體外受精、胚胎移植等技術(shù)繁育北方白犀牛的試管動物，拯救北方白犀牛物種，A正確；

B；目前只有雌性個體；即體細胞只有雌性動物的體細胞，若利用體細胞核移植技術(shù)培育出北方白犀牛的克隆動物，該動物一定是雌性，B正確；

C；為了繁育更多子代；可以選擇人工繁育技術(shù)得到的桑椹胚或囊胚時期的胚胎進行分割，C錯誤；

D；在進行胚胎移植時；要用激素進行同期發(fā)情處理，為胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，經(jīng)同期發(fā)情處理過的雌性北方白犀牛不會發(fā)生免疫排斥反應，D正確。

故選ABD。13、A:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成為動物個體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細胞來自野生北極狼；卵母細胞來自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質(zhì)，A錯誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細胞的細胞核；操作簡單且對供體細胞核損傷小，同時注射的位置是卵母細胞外的透明帶，然后誘導兩個細胞融合，對卵母細胞的損傷小，B正確；

C；供體細胞注入卵母細胞透明帶內(nèi)后；還需要電融合法等誘導才能使供體細胞進入卵母細胞形成重構(gòu)胚，C錯誤；

D；細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程，D錯誤。

故選ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

本題知識點為剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理、培養(yǎng)基中各物質(zhì)的作用。剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。當我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH。獲取單個菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術(shù)完成。

【詳解】

A；在此培養(yǎng)基中；纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，A正確；

B、KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH，B正確；

C；從平板上纖維素分解菌的菌落分布可以看出（菌落較均勻）；接種方法為稀釋涂布平板法，C正確；

D；菌落周圍有透明圈不一定是細胞分解了纖維素；還有可能是分解了剛果紅染料，D錯誤；

故選ABC。15、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測系統(tǒng)；將一段已知序列的DNA片段標記到抗體2上，通過抗原抗體的特異性識別并結(jié)合，抗體2會和固定抗體1；抗生素形成復合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進行擴增，通過檢測PCR產(chǎn)物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測的牛乳中可能含有牛乳腺細胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經(jīng)過PCR擴增后的產(chǎn)物中，不僅有抗體2上的DNA擴增產(chǎn)物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴增產(chǎn)物，使檢測結(jié)果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴增，會出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應；是通過PCR技術(shù)擴增抗體2上連接的DNA，最后通過檢測擴增產(chǎn)物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴增產(chǎn)物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關(guān)，抗原、抗體的數(shù)量可通過PCR技術(shù)間接擴增放大，C錯誤，D正確。

故選ABD。16、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲??；構(gòu)建基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開始多肽鏈的合成。當合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對蛋白質(zhì)做進一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運到細胞膜，與細胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設計并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過蛋白質(zhì)工程和基因工程實現(xiàn)的，A錯誤；

B；BamHI會破壞AmyS2基因；B錯誤；

C；在分泌蛋白的合成過程中；信號肽序列可幫助肽鏈進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號肽基因表達的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導其進入高爾基體，C錯誤；

D；可用PCR技術(shù)檢測芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過PCR擴增，不出現(xiàn)擴增產(chǎn)物，說明沒有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。三、填空題(共9題，共18分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細胞18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80細胞膜溶解21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代22、略

【分析】【分析】

微生物實驗中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當菌落長成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上；對于需要長期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提取；對于如橘皮精油，其主要儲存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，又會產(chǎn)生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個細菌在平板上會形成菌落，通常可根據(jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過一系列梯度稀釋。對獲得的沙門氏菌進行長期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲存；高溫加工方法進行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進行提取，提取過程中蒸餾的溫度、時間都會影響精油品質(zhì)。

【點睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運用，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力，能運用所學知識，準確判斷問題的能力。【解析】灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時間23、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過的與克隆技術(shù)有關(guān)的問題有：

①瀕臨滅絕動物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國家保護動物以及植物；我們可運用克隆，復制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克隆：應用于農(nóng)業(yè)等領域；通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題；比如胚胎干細胞；

④畜牧業(yè)克?。簯糜谛竽翗I(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限?！窘馕觥坑校热纾孩贋l臨滅絕動物的克??；②農(nóng)業(yè)克?。簯糜谵r(nóng)業(yè)等領域，通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細胞克隆替代或者修復人體細胞問題，比如胚胎干細胞；④畜牧業(yè)克隆：應用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。24、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標記25、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術(shù)有體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據(jù)治療目的誘導干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應用到的技術(shù)為干細胞培養(yǎng)技術(shù)。【解析】生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復制品用于醫(yī)學研究和疾病的治療四、判斷題(共1題，共3分)26、A【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。聚集在胚胎一端的細胞形成內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)，故該表述正確。五、實驗題(共4題，共8分)27、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/p>

2；泡菜的制作過程：按照清水與鹽的質(zhì)量比為4：1的比例配制鹽水；將鹽、水煮沸冷卻。將經(jīng)過預處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡萊壇內(nèi)，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續(xù)裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。在發(fā)酵過程中要注意經(jīng)常向水槽中補充水。發(fā)酵時間長短受室內(nèi)溫度的影響。

3；泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定；即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

（1）

乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料；這是因為新鮮的蔬菜亞硝酸鹽的含量低。

（2）

將鹽水煮沸冷卻的目的是煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）

測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法。即在鹽酸酸化條件下；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成玫瑰紅色的染料，然后將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。

【點睛】

本題考查制作泡菜，要求考生識記制作泡菜的原理和過程，理解用比色法測定亞硝酸鹽的含量，意在考查考生的識記能力和分析能力。【解析】（1）異養(yǎng)厭氧型亞硝酸鹽的含量低。

（2）煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）比色法對氨基苯磺酸玫瑰紅標準顯色液28、略

【分析】【分析】

微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法，二者都可以用于篩選單菌落，但是前者可以用于計數(shù)，后者不行。培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對特殊營養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。利用稀釋涂布平板法得到數(shù)值往往偏小，因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

【詳解】

（1）在實驗室分離純化培養(yǎng)微生物時；常見的對照實驗有兩種，當用不同的培養(yǎng)基作為自變量進行對照實驗時，常用來檢測所配制的培養(yǎng)基是否具有選擇作用，例如以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進行對照實驗，可以后者篩選分解尿素的微生物，驗證其起到選擇培養(yǎng)基的作用；當用同一種培養(yǎng)基進行接種和不接種微生物的對照實驗時，則可檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格，若未接種的空白培養(yǎng)基上生長出部分菌落，說明該培養(yǎng)基滅菌不合格。

（2）由實驗結(jié)果可知；當碳源為葡萄糖時，菌株C的細胞干重最大，為3.12g/L，因此，菌株C生長的最適碳源是葡萄糖。當碳源為制糖廢液時，S產(chǎn)量最大，為0.18g/L，因此菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是制糖廢液。

微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源；氮源、無機鹽、水等。

（3）碳源為淀粉時菌株C細胞干重為0.01g/L；幾乎不能生長，其直接原因是該菌細胞內(nèi)不含有分解淀粉的酶，因此無法分解淀粉作為碳源，根本原因是菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

（4）若要探究生產(chǎn)S的最適制糖廢液的濃度；則實驗自變量為不同濃度的制糖廢液，因變量為S產(chǎn)量，因此需要配制一系列不同濃度梯度的制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，接種菌株C，然后將其置于相同且適宜的環(huán)境中進行培養(yǎng)，一段時間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中的S產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時對應的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

（5）微生物接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者可以用于計數(shù)，前者不行，在進行稀釋涂布平板法計數(shù)微生物時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此該計數(shù)方法得到的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少?！窘馕觥?1)選擇培養(yǎng)基是否具有選擇性接種與不接種。

(2)葡萄糖制糖廢液氮源；無機鹽、水。

(3)菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

(4)分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基；培養(yǎng)菌株C，其他條件相同且適宜，一段時間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產(chǎn)量，S產(chǎn)量最高時對應的制糖廢液濃度即為生產(chǎn)S的最適碳源濃度。

(5)稀釋涂布平板法當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落29、略

【分析】【分析】

題中用瓶裝變質(zhì)老陳醋（脹瓶）；未變質(zhì)老陳醋為實驗材料；經(jīng)過分離、純化、并初步篩選出A1、A2和A3三株疑似的產(chǎn)氣細菌，進一步探究了不同濃度青霉素對A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中數(shù)據(jù)所示的清晰區(qū)直徑（抑菌圈）越大，代表該菌種生長受到的抑制作用越強。

【詳解】

（1）為了篩選產(chǎn)氣細菌；實驗人員設置了甲；乙、丙三組培養(yǎng)基，甲作為空白對照組，乙接種未變質(zhì)的老陳醋，丙接種等量的變質(zhì)老陳醋，對比乙和丙培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，從丙培養(yǎng)基上分離出和乙培養(yǎng)基形態(tài)不同的菌落，可以從上述培養(yǎng)基中初步篩選疑似產(chǎn)氣細菌的菌株。

（2）①過程a所得待測培養(yǎng)基中菌落的分布較為均勻；據(jù)此判斷，該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。

②區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形態(tài)；大小、隆起程度和顏色等特征；統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，能有效防止因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的種類和數(shù)目；或培養(yǎng)時間太長導致菌落粘連影響計數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水影響菌落數(shù)目的統(tǒng)計。

③因為老陳醋中的產(chǎn)氣細菌是一類能產(chǎn)生過氧化氫酶的細菌；若有5%的過氧化氫溶液，A1；A2和A3菌株，必要的培養(yǎng)基等實驗器材，可以將A1、A2和A3菌株分別接種到滴有5%的過氧化氫溶液的培養(yǎng)基上，觀察是否產(chǎn)生氣泡，若產(chǎn)生氣泡則為產(chǎn)氣細菌。

（3）根據(jù)題意和表格信息分析可知，該實驗的目的是探究不同濃度青霉素對A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果較差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。【解析】(1)等量的變質(zhì)老陳醋對比乙和丙培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)；從丙培養(yǎng)基上分離出和乙培養(yǎng)基形態(tài)不同的菌落。

(2)稀釋涂布平板法培養(yǎng)基中長出的菌落是均勻分布的遺漏菌落的種類和數(shù)目菌落粘連影響計數(shù)（或培養(yǎng)基表面干燥脫水）將A1；A2和A3菌株分別接種到滴有5%的過氧化氫溶液的培養(yǎng)基上；若產(chǎn)生氣泡則為產(chǎn)氣細菌。

(3)探究不同濃度青霉素對A1、A2、A3菌株的抑制作用在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果較差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大30、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗目的是iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產(chǎn)生情況，實驗設計應遵循對照與單一變量原則，故可設計實驗如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用六、綜合題(共4題，共36分)31、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。簭幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）

PCR技術(shù)利用的是DNA雙鏈復制的原理。將PCR所需的物質(zhì)準備完畢后；在PCR儀上用94～96℃的溫度預熱5min，其目的是利用高溫使DNA變性形成單鏈片段，故需要加入Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合）酶，該酶在高溫下仍能保持活性。

（2）

該基因庫是由青蒿某個時期mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的雙鏈cDNA片段組成；因此只包含某種生物的部分基因，因此該雙鏈與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫做黃花蒿的cDNA文庫（或部分基因文庫）。通過逆轉(zhuǎn)錄得到的目的基因中缺少基因結(jié)構(gòu)中的非編碼區(qū)以及編碼區(qū)的內(nèi)含子，因此獲得的cDNA與黃花蒿細胞中該基因堿基序列不同。

（3）

分析圖2可知；目的基因和抗生素抗性基因中含有SmaⅠ限制酶的切割位點，因此用SmaⅠ切割圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因，所以不能使用SmaⅠ切割。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在其目的基因前要加上特殊的啟動子，啟動子是RNA聚合酶識別結(jié)合位點，用于驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。

（4）

檢測目的基因是否表達出相應蛋白質(zhì)；應采取抗原—抗體雜交技術(shù)。

【點睛】

本題考查PCR技術(shù)及基因工程的相關(guān)知識，學生要熟悉基因工程的過程，同時要理解好限制酶的使用要求和完整載體所需的條件?！窘馕觥浚?）DNA雙鏈復制Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合)

（2）cDNA文庫不同。

（3）SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因RNA聚合酶。

（4）抗原—抗體雜交32、略

【分析】1、動物細胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

2；單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

（1）結(jié)合分析可知，為獲得抗DON的單克隆抗體，制備單克隆抗體時，需要先給小鼠注射DON，以刺激機體產(chǎn)生的抗體；動物細胞培養(yǎng)時所需的氣體是95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

（2）為制備雜交細胞；需要通過動物細胞融合技術(shù)獲得雜交細