淋球菌適宜臨床檢驗技術介紹

張樹文中國醫(yī)學科學院皮膚病醫(yī)院全國性病麻風病控制中心淋球菌，學名淋病奈瑟球菌，是淋病的病原體，屬奈瑟球菌。

典型男性淋病病人圖片典型女性淋病病人圖片

60%的女性淋病患者無明顯自覺癥狀，呈亞臨床或帶菌狀態(tài)。無癥狀女性淋病攜帶者在傳播淋球菌感染中起重要作用，也是引起新生兒淋病的主要原因。所以，在孕前準確地篩查出女性淋病攜帶者對于預防新生兒淋病有重要意義。

微生物三大類檢測方法1、微生物涂片及分離培養(yǎng)+生化鑒定是傳統(tǒng)的經(jīng)典的方法，已有100多年歷史。

目的：尋找病原體。2、免疫學檢測方法

測抗原：多用于局部感染的微生物，如淋球菌、衣原體、白念、滴蟲等。

測抗體：多用于血行或全身感染的微生物，如艾滋、梅毒、乙肝、丙肝等。自70年代開始發(fā)展，目前有酶免法、免疫層析法、化學發(fā)光法、熒光免疫法等。

目的：尋找能代表病原體的特殊蛋白成分（抗原）或人產(chǎn)生的針對該種微生物的特異性抗體。3、分子生物學方法自90年代迅速發(fā)展，檢測DNA或RNA，其中最具代表性的為PCR檢測。

目的：尋找能代表病原體的核酸。

淋球菌三大類檢測方法1.病原體檢查：涂片加培養(yǎng)及其生化鑒定2.免疫學檢測：免疫層析法測抗原3.分子生物學檢測：PCR測DNA涂片法優(yōu)點：簡便快捷，成本低廉；對男性淋病的準確度可達到90%以上。涂片法缺點：1.患者就診前曾經(jīng)服用抗生素，涂片法將難以找到典型特征的淋球菌。2.不能用于女性淋病的篩查。二、培養(yǎng)法用T-M淋球菌培養(yǎng)基對男、女生殖道分泌物標本進行分離培養(yǎng)，如有典型的淋球菌菌落生長，必要時輔助某些生化反應，如氧化酶試驗，可對疑似菌落進行確認。優(yōu)點：培養(yǎng)陽性能確認淋病患者無誤，特異性為100%。缺點：漏檢較多；耗時2天，操作繁瑣。

淋球菌培養(yǎng)要求在標本取材、運送、培養(yǎng)三個環(huán)節(jié)中，淋球菌必須保持活性。但在孕檢項目實施過程中難以保證一一做到。計生系統(tǒng)工作特點（縣鄉(xiāng)共同服務流程—下鄉(xiāng)、現(xiàn)場采集標本、標本運回縣計生站統(tǒng)一檢驗）決定了標本中淋球菌難以存活。三、核酸檢測PCR是核酸類檢測方法的代表。它檢測的是淋球菌的DNA。優(yōu)點：①敏感性高，特異性好；②對標本采集及運送的要求不高。缺點：需要PCR儀，對場地、人員和設備等要求均很高，操作過程復雜，試劑成本比較貴。四、抗原檢測檢測標本中是否含有淋球菌特異性抗原的存在來判斷標本中是否含有淋球菌。

該類方法因檢測對象為淋球菌抗原，所以無論標本中淋球菌死活均可以順利檢出。

目前，商品化的抗原檢測方法有免疫熒光法及免疫層析法。免疫熒光法免疫熒光法因需用戶配備熒光顯微鏡而不適宜基層使用。免疫層析法免疫層析試劑示意圖測試線（T線）控制線（C線）膠體金/乳膠墊吸水濾紙樣品墊NC膜（硝酸纖維素膜）層析方向PVC底板樣品五、其他方法1.氧化酶實驗：該方法應該由于淋球菌培養(yǎng)之后，對可疑菌落進行鑒定時使用。原理是淋球菌分泌產(chǎn)生的氧化酶可與氧化酶試條反應使其變色。此方法并不能直接用于病人標本檢測。因為取自病人的標本中，除淋球菌外，其它一些雜菌也可以分泌氧化酶。因此，直接用氧化酶試條與病人標本反應，既容易造成假陽性，也可因標本中淋球菌死亡而漏檢。2.過氧化氫酶試驗：原理是利用淋球菌產(chǎn)生的過氧化氫酶水解過氧化氫產(chǎn)生氧和水，在淋球菌菌落上形成細小的氣泡。俗稱“發(fā)泡試驗”：向患者尿液中滴加數(shù)滴過氧化氫溶液，搖晃后觀察有無泡沫產(chǎn)生來判斷是否為淋病。就淋病而言，男性患者癥狀、體征明顯，即使沒有實驗室檢查也能依靠典型的臨床癥狀體征基本正確診斷男性淋病患者。女淋病患者多無明顯癥狀及體征，因此，能否準確地篩查出無癥狀女性淋病攜帶者，成為評價一個實驗室淋球菌檢測能力的核心指標。

淋球菌檢測方法及商品化試劑一覽表（至2012年12月止）淋球菌檢測方法及商品化試劑