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板塊六生物技術(shù)與工程專題十三發(fā)酵工程答案:①醋酸菌②碳源③尿素④稀釋涂布平板法考點1微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)1.無菌技術(shù)常用方法2.微生物的純化技術(shù)(1)制備馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(2)兩種純化微生物方法的比較3.微生物分離與計數(shù)的兩個實例(1)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)(2)纖維素分解菌的分離答案:eq\o(□,\s\up1(1))紫外線eq\o(□,\s\up1(2))接種環(huán)eq\o(□,\s\up1(3))涂布器eq\o(□,\s\up1(4))選擇eq\o(□,\s\up1(5))纖維素eq\o(□,\s\up1(6))紅色復合物eq\o(□,\s\up1(7))透明圈【真題研讀】(2023·廣東選擇考)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷,下列最可能篩選到目標菌的條件組合是(D)A.a(chǎn)點時取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B.b點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.b點時取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D.c點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基解析:由圖可知,隨著堆肥時間的延長,堆肥溫度先升高后保持穩(wěn)定,a點時堆肥溫度最低,c點時堆肥溫度最高。該實驗的目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌,應該用以角蛋白為唯一氮源的培養(yǎng)基進行篩選培養(yǎng),且應該在高溫條件下取樣,即c點時取樣,D符合題意。[命題延伸]——判斷與填空(1)某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病,其篩選流程及抗性檢測如圖。判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小。()(2)不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)。()(3)將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌,可降低培養(yǎng)基污染的概率。()(4)為提高一株石油降解菌的凈化能力,將菌涂布于以石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,以致死率為90%的輻照劑量誘變處理。涂布用的菌濃度應控制在30~300個/mL。()(5)稀釋涂布平板法和平板劃線法均能得到單菌落,都可用于細胞計數(shù)。()(6)采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌,可以用淋洗液為原料制備培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中還需要加入氮源等營養(yǎng)成分,氮源的主要作用是__________________________________(答出1點即可)。(7)為快速分離產(chǎn)淀粉酶的枯草芽孢桿菌,可將土樣用________制成懸液,再將含有懸液的三角瓶置于80℃的________中保溫一段時間,其目的是________________。(8)枯草芽孢桿菌為好氧微生物,液體培養(yǎng)時應采用________(填“靜置”或“搖床振蕩”)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中抽樣檢測活菌數(shù)量時,應采用________________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計數(shù)法”),其原因是_________________________________。提示:(1)√(2)×(3)×(4)×(5)×(6)用于合成微生物細胞中的含氮化合物,如核酸、蛋白質(zhì)等(7)無菌水水浴殺死不耐熱微生物(8)搖床振蕩稀釋涂布平板法用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個菌落一般都來自一個活細胞,而顯微鏡直接計數(shù)法會將死亡的枯草芽孢桿菌也計算在內(nèi)【對點突破】題點1培養(yǎng)基的制備與無菌操作1.(2024·惠州高三一模)微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基,又要防止雜菌污染。下列相關(guān)敘述正確的是(A)A.消毒和滅菌的殺菌程度存在差異B.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高,對微生物的生長越有利C.微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物D.操作者要對操作的空間、自己的衣著和手進行清潔和滅菌解析:由消毒和滅菌的概念可知,二者的殺菌程度存在差異,A正確;培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高,微生物會通過滲透作用失水,對微生物的生長不利,B錯誤;在微生物培養(yǎng)過程中,由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物,C錯誤;操作者對操作的空間、自己的衣著和手進行的是清潔和消毒處理,D錯誤。2.進行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時,利用的培養(yǎng)基組分及含量如下表所示。下列分析錯誤的是(D)組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mLA.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機鹽,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源,又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂在實驗過程中起凝固劑的作用D.蒸餾水既可進行定容,又可對培養(yǎng)液進行稀釋以便于計數(shù)解析:KH2PO4和Na2HPO4可為尿素分解菌提供無機鹽,H2POeq\o\al(\s\up1(-),\s\do1(4))和HPOeq\o\al(\s\up1(2-),\s\do1(4))可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,A正確;培養(yǎng)基中除了尿素無其他含氮物質(zhì),只有尿素分解菌能通過分解尿素進行生長繁殖,故尿素既能為尿素分解菌提供氮源,又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用,B正確;瓊脂在實驗過程中充當凝固劑,C正確;表中的H2O為蒸餾水,起定容作用,蒸餾水不能對培養(yǎng)液進行稀釋,稀釋所用的溶劑應該是無菌水,D錯誤。題點2微生物的培養(yǎng)、篩選與計數(shù)3.(2024·惠州高三調(diào)研)野生型大腸桿菌能在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長,氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株由于無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長。下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖,①②③④代表培養(yǎng)基,A、B、C表示操作步驟,D、E為菌落。下列敘述正確的是(A)A.A操作的目的是提高基因突變的頻率,增加突變株的數(shù)量B.B的正確操作是用接種環(huán)蘸取菌液后在②表面涂布來接種菌種C.圖中①②③為完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)基一般用濕熱滅菌法進行滅菌D.若要獲得氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,可從④中挑取E進行純化培養(yǎng)解析:A操作(紫外線照射)可以提高基因突變的頻率,增加突變株的數(shù)量,A正確;B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面,再用涂布器將菌液均勻地涂布在②表面,B錯誤;由題意分析可知,野生型大腸桿菌菌株能在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長,而氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株由于發(fā)生基因突變無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長,題圖中培養(yǎng)基③中只有部分菌落,故題圖中①②④為完全培養(yǎng)基,③為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,C錯誤;④為完全培養(yǎng)基,③為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,③中不能生長、④中能生長的即為氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,故若要獲得氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株,可從④中挑取D進行純化培養(yǎng),D錯誤。4.(2024·梅州高三一模)某興趣小組為研究“使用公筷對餐后菜品細菌數(shù)量的影響”,將每道菜分為3盤,一盤取樣冷藏,一盤使用公筷,一盤不用公筷,實驗過程如下圖所示。下列相關(guān)操作或敘述正確的是(D)A.將細菌接種在固體培養(yǎng)基X上可采用平板劃線法B.根據(jù)菌落的特征可以準確判斷細菌的種類C.配制的培養(yǎng)基需經(jīng)濕熱滅菌后調(diào)整pH,冷卻后倒平板D.固體培養(yǎng)基X對菜品中的細菌沒有選擇性解析:據(jù)題意可知,在固體培養(yǎng)基X上接種并培養(yǎng)后還需進行計數(shù),故只能用稀釋涂布平板法接種而不能用平板劃線法接種,A錯誤;在一定的培養(yǎng)條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征,根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征,可以初步區(qū)分出不同種微生物,但不能準確判斷,B錯誤;配制的培養(yǎng)基需調(diào)整pH后再進行濕熱滅菌,冷卻后倒平板,C錯誤;固體培養(yǎng)基沒有做任何處理,所以對菜品中的細菌沒有選擇性,D正確??键c2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用1.2.泡菜腌制過程中,乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化答案:eq\o(□,\s\up1(1))乙酸eq\o(□,\s\up1(2))30~35eq\o(□,\s\up1(3))榨汁【真題研讀】1.(2024·湖北選擇考)制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核生物,常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是(D)A.食用醋的酸味主要來源于乙酸B.醋酸菌不適宜在無氧條件下生存C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)解析:醋酸菌常用于食用醋的發(fā)酵,食用醋的酸味主要來源于醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乙酸,A正確;醋酸菌是好氧細菌,不適宜在無氧條件下生存,B正確;當缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛變?yōu)橐宜幔源姿峋写呋掖佳趸梢宜岬拿?,C正確;醋酸菌是原核生物,其細胞內(nèi)無線粒體,D錯誤。2.(2024·河北選擇考改編)中國傳統(tǒng)白酒多以泥窖為發(fā)酵基礎(chǔ),素有“千年老窖萬年糟”“以窖養(yǎng)糟,以糟養(yǎng)泥”之說。多年反復利用的老窖池內(nèi)壁窖泥中含有大量與釀酒相關(guān)的微生物。下列敘述錯誤的是(C)A.傳統(tǒng)白酒的釀造是在以釀酒酵母為主的多種微生物共同作用下完成的B.窖池內(nèi)各種微生物形成了相對穩(wěn)定的體系,使釀造過程不易污染雜菌C.從窖泥中分離的釀酒酵母擴大培養(yǎng)時,需在CO2或N2環(huán)境中進行D.從谷物原料發(fā)酵形成的酒糟中,可分離出產(chǎn)淀粉酶的微生物解析:白酒的釀造主要依靠釀酒酵母,由于窖泥中含有大量與釀酒相關(guān)的微生物,故傳統(tǒng)白酒的釀造是在以釀酒酵母為主的多種微生物共同作用下完成的,A正確;窖池內(nèi)各種微生物形成了相對穩(wěn)定的體系,且釀造過程產(chǎn)生的酒精也會抑制雜菌的生長與繁殖,使釀造過程不易污染雜菌,B正確;酵母菌是兼性厭氧菌,與無氧呼吸相比,細胞有氧呼吸產(chǎn)生的能量更多,更能滿足酵母菌大量繁殖時的需求,因此,對分離的釀酒酵母擴大培養(yǎng)時需要在有氧的環(huán)境條件下進行,C錯誤;谷物原料如高粱、玉米、大米等富含淀粉,因此從谷物原料發(fā)酵形成的酒糟中可分離出產(chǎn)淀粉酶的微生物,D正確。[命題延伸]——判斷與填空(1)關(guān)于小曲白酒的釀造過程,糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖。()(2)啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中,大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后,最終過濾、調(diào)節(jié)、分裝。焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子的胚并進行滅菌。()(3)目前已實現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn),選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中。()(4)果醋發(fā)酵時,發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時。()(5)酵母菌和醋酸菌發(fā)酵過程中控制通氣的情況不同。()(6)某同學在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋時將玻璃瓶用酒精消毒后,裝滿葡萄汁,待酒精發(fā)酵后去除瓶蓋,蓋一層紗布,再進行乙酸發(fā)酵。()(7)制作果酒需要__________菌,這一過程中也需要O2,O2的作用是____________________________________________。提示:(1)√(2)×(3)√(4)√(5)√(6)×(7)酵母促進有氧呼吸,使酵母菌大量繁殖【對點突破】題點1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用1.在《詩經(jīng)》中有“中田有廬,疆場有瓜。是剝是菹,獻之皇祖”的描述,據(jù)東漢許慎《說文解字》解釋:“菹菜者,酸菜也”,由此可見,我國制作酸菜的歷史頗為悠久。下列有關(guān)酸菜的制作,敘述錯誤的是(B)A.酸菜壇中的乳酸菌數(shù)量會逐漸增加至最高峰B.制作酸菜初期,酸菜壇中的氧氣有利于乳酸菌的繁殖C.制作酸菜利用了植物體表面的乳酸菌來進行發(fā)酵D.酸菜壇中的亞硝酸鹽會隨著發(fā)酵時間的延長,先增加后減少解析:酸菜壇中的乳酸菌數(shù)量會逐漸增加至最高峰,隨著乳酸菌發(fā)酵,酸菜壇中乳酸濃度越來越高,逐漸抑制乳酸菌活動,乳酸菌數(shù)量減少,A正確。乳酸菌是厭氧型微生物,制作酸菜時需隔絕空氣,酸菜壇中的氧氣不利于乳酸菌的繁殖,B錯誤。制作酸菜利用了植物體表面的天然的乳酸菌來進行發(fā)酵,C正確。亞硝酸鹽含量的變化規(guī)律是發(fā)酵初期,由于硝酸鹽還原菌的作用使亞硝酸鹽含量增加;發(fā)酵中期,硝酸鹽還原菌受抑制且部分亞硝酸鹽被分解,含量下降;發(fā)酵后期,亞硝酸鹽含量下降至相對穩(wěn)定,酸菜壇中的亞硝酸鹽會隨著發(fā)酵時間的延長,先增加后減少,D正確。2.下圖裝置既可用于制作葡萄酒,也可用于制作葡萄醋。下列關(guān)于該裝置的分析,正確的是(C)A.可使用同一菌種制作葡萄酒和葡萄醋B.制作葡萄酒時要持續(xù)關(guān)閉閥a和閥bC.制作葡萄醋時要持續(xù)打開閥a和閥bD.增加菌種接種量可提高葡萄醋的產(chǎn)量解析:制作葡萄酒的菌種為酵母菌,制作葡萄醋的菌種為醋酸菌,A錯誤;利用該裝置制作葡萄酒時,由于利用的是酵母菌的無氧呼吸,故需保持無氧環(huán)境,操作時應一直關(guān)閉閥a,發(fā)酵過程中會產(chǎn)生二氧化碳,還需要適時打開閥b,排出二氧化碳,B錯誤;葡萄醋發(fā)酵利用的是醋酸菌,醋酸菌是好氧菌,發(fā)酵過程中需要提供有氧環(huán)境,此時閥a、閥b要持續(xù)打開,C正確;增加菌種接種量能加快發(fā)酵速度,但不能提高葡萄醋的產(chǎn)量,D錯誤。題點2發(fā)酵工程及其應用3.與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比,發(fā)酵工程的產(chǎn)品種類更加豐富,產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)如下圖所示,下列敘述錯誤的是(A)A.若能生產(chǎn)人生長激素的工程菌是通過①培育的,①應為誘變育種B.菌種在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是整個過程的中心環(huán)節(jié)C.環(huán)境條件會影響微生物的生長繁殖,也會影響微生物代謝物的形成D.⑥⑦過程中對發(fā)酵產(chǎn)品分離、提純要根據(jù)產(chǎn)品類型選擇合適的方法解析:若能生產(chǎn)人生長激素的工程菌是通過①培育的,則①應為基因工程,實現(xiàn)了兩個物種之間的基因重組,A錯誤。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育,擴大培養(yǎng),培養(yǎng)基的配制、滅菌,接種,發(fā)酵,產(chǎn)物分離、提純等方面,菌種在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是整個過程的中心環(huán)節(jié),B正確。在發(fā)酵過程中,要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等,以了解發(fā)酵進程,還要及時添加必需的營養(yǎng)組分,要嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件,環(huán)境條件會影響微生物的生長繁殖,也會影響微生物代謝物的形成,C正確。分離、提純產(chǎn)物:如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細胞本身,可在發(fā)酵結(jié)束之后,采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥得到產(chǎn)品;如果產(chǎn)品是代謝物,可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品,故⑥⑦過程中對發(fā)酵產(chǎn)品分離、提純要根據(jù)產(chǎn)品類型選擇合適的方法,D正確。4.啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成的。下列相關(guān)敘述錯誤的是(D)A.經(jīng)赤霉素處理的大麥種子可直接用于糖化過程B.碾磨有利于淀粉酶與淀粉充分接觸,提升反應速率C.蒸煮過程可以終止淀粉酶的作用,同時殺死雜菌D.應在發(fā)酵液中的糖分完全消耗后,終止酵母菌的主發(fā)酵過程解析:經(jīng)赤霉素處理的大麥種子無需發(fā)芽就可以產(chǎn)生淀粉酶,可直接用于糖化過程,A正確;碾磨有利于淀粉酶與淀粉充分接觸,提升反應速率,B正確;蒸煮過程中高溫使淀粉酶失活,可以終止淀粉酶的作用,同時殺死雜菌,C正確;酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成,隨著酒精含量的增多,酵母菌的生長受到了抑制,因此主發(fā)酵結(jié)束時,糖分未完全消耗,D錯誤。一、選擇題1.食品保存有干制、腌制、低溫保存和高溫處理等多種方法。下列敘述錯誤的是(C)A.干制降低食品的含水量,使微生物不易生長和繁殖,食品保存時間延長B.腌制通過添加食鹽、糖等制造高滲環(huán)境,從而抑制微生物的生長和繁殖C.低溫保存可抑制微生物的生命活動,溫度越低對食品保存越有利D.高溫處理可殺死食品中絕大部分微生物,并可破壞食品中的酶類解析:干制能降低食品中的含水量,使微生物不易生長和繁殖,進而延長食品保存時間,A正確;腌制過程中添加食鹽、糖等可制造高滲環(huán)境,從而抑制微生物的生長和繁殖,B正確;低溫保存可以抑制微生物的生命活動,但不是溫度越低越好,一般果蔬的保存溫度為零上低溫,C錯誤;高溫處理可殺死食品中絕大部分微生物,并通過破壞食品中的酶類,降低酶類對食品有機物的分解,有利于食品保存,D正確。2.(2024·肇慶高三二模)大腸桿菌顯色培養(yǎng)基是改良的快速檢測培養(yǎng)基,可用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。下列有關(guān)說法正確的是(C)A.從物理性質(zhì)看大腸桿菌顯色培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.大腸桿菌顯色培養(yǎng)基中一般含有水、氮源、無機鹽、抗生素等C.可用稀釋涂布平板法將大腸桿菌接種于顯色培養(yǎng)基并進行計數(shù)D.在大腸桿菌顯色培養(yǎng)基上觀察到的是很多個細菌個體解析:從物理性質(zhì)看大腸桿菌顯色培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,A錯誤;抗生素能抑制大腸桿菌生長,故大腸桿菌顯色培養(yǎng)基不能添加抗生素,B錯誤;稀釋涂布平板法可用于接種和計數(shù),C正確;在大腸桿菌顯色培養(yǎng)基上觀察到的是很多個細菌菌落,而非個體,D錯誤。3.豇豆、黃瓜、蘿卜等蔬菜常用于制作泡菜,下列相關(guān)敘述錯誤的是(D)A.用清水和食鹽配制的鹽水需要加熱煮沸,冷卻后再倒入泡菜壇B.泡菜壇蓋邊沿的水槽中需要注滿水,說明所需菌種進行厭氧發(fā)酵C.泡菜腌制過程中亞硝酸鹽的含量會先升高后降低D.泡菜壇內(nèi)的白色菌膜是由醋酸菌繁殖形成的解析:用清水和食鹽配制的鹽水需要加熱煮沸,以殺滅雜菌,防止污染,冷卻后再倒入泡菜壇,A正確;泡菜壇蓋邊沿的水槽中需要注滿水,這樣能夠確保壇內(nèi)的無氧環(huán)境,故說明所需菌種進行厭氧發(fā)酵,B正確;整個發(fā)酵過程中,亞硝酸鹽的含量先升高后下降,C正確;在泡菜制作過程中,泡菜發(fā)酵液的營養(yǎng)豐富,其表面往往含有氧氣,適合酵母菌生長繁殖,產(chǎn)膜酵母生長繁殖會在泡菜壇液面上形成一層白膜,D錯誤。4.關(guān)于黃酒釀造方法,古遺六法中描述道:黍米必齊、曲蘗必時、水泉必香、陶器必良、湛熾必潔、火劑必得(注:曲蘗主要指酒曲,湛熾是指浸泡和蒸煮)。下列說法錯誤的是(D)A.黃酒中的酒精是酵母菌利用“黍米”經(jīng)無氧呼吸產(chǎn)生的代謝物B.“曲蘗”制作的季節(jié)不同,可能會影響到酵母菌的種類和數(shù)量C.“陶器必良”和“火劑必得”是為了控制發(fā)酵過程的環(huán)境條件D.黃酒釀造過程中發(fā)酵液中出現(xiàn)的氣體都是在酵母菌細胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生的解析:酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精,黃酒中的酒精是酵母菌利用“黍米”經(jīng)無氧呼吸產(chǎn)生的代謝物,A正確;“曲蘗”制作的季節(jié)不同,溫度、濕度等環(huán)境條件會有所改變,可能會影響到酵母菌的種類和數(shù)量,B正確;“陶器必良”是為了有良好的容器從而控制好發(fā)酵過程中的氣體條件,“火劑必得”也是為了控制發(fā)酵過程的環(huán)境條件,C正確;酵母菌是兼性厭氧型生物,可進行有氧呼吸,在線粒體基質(zhì)中產(chǎn)生CO2,D錯誤。5.下列關(guān)于制作果酒以及腌制泡菜的敘述,正確的是(B)A.泡菜發(fā)酵期間,乳酸積累到質(zhì)量分數(shù)為4%~8%時,泡菜的口味、品質(zhì)最佳B.制作果酒時適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率,抑制雜菌生長繁殖C.制作果酒時,每間隔一段時間就應將瓶蓋打開以放出所產(chǎn)生的CO2D.腌制泡菜過程中經(jīng)發(fā)酵會產(chǎn)生多種酸,其中含量最高的酸是亞硝酸解析:泡菜的口味、品質(zhì)最佳時是乳酸積累到質(zhì)量分數(shù)為0.4%~0.8%時,A錯誤;制作果酒時,適當加大接種量,菌體的基數(shù)增大,可快速形成優(yōu)勢菌群,抑制雜菌生長,提高發(fā)酵速率,B正確;制作果酒時,每間隔一段時間就應將瓶蓋擰松以排出產(chǎn)生的CO2,C錯誤;參與泡菜制作的微生物主要是乳酸菌,因此泡菜發(fā)酵過程中,會產(chǎn)生多種酸,其中主要是乳酸,還有少量的亞硝酸,D錯誤。6.(2024·汕頭高三二模)生食海鮮易引發(fā)副溶血性弧菌食物中毒。為開發(fā)天然抑菌劑,研究者先制備海鮮樣液,在某培養(yǎng)基中劃線接種得到該菌(圖中藍綠色菌落)。下列敘述正確的是(C)A.海鮮樣液需多次稀釋后才能劃線接種B.劃線接種時接種環(huán)使用前需進行消毒C.只有第一次劃線前需要蘸取海鮮樣液D.結(jié)果顯示單菌落太多不能達到純培養(yǎng)目的解析:平板劃線接種時不需要稀釋,A錯誤;劃線接種時接種環(huán)使用前需進行灼燒滅菌,B錯誤;只有第一次劃線前需要蘸取海鮮樣液,后面每次劃線菌種都來自上一次劃線的末端,C正確;出現(xiàn)單菌落即達到了菌種純化的目的,D錯誤。7.(2024·廣州高三一模)青貯飼料是指將新鮮秸稈、青草等通過乳酸菌發(fā)酵而制成的飼料。它氣味酸香、柔軟多汁、營養(yǎng)豐富、保存期長,是家畜優(yōu)良飼料。下列敘述錯誤的是(B)A.選擇糖類含量較高的植物作為青貯原料,保證乳酸菌生長所需的碳源B.作為青貯的原料應適當切碎、攪拌并通入空氣,有利于乳酸菌充分發(fā)酵C.發(fā)酵過程中乳酸菌生成乳酸,使pH降低,抑制其他微生物生長D.經(jīng)過乳酸菌發(fā)酵,大分子有機物被分解為多種小分子物質(zhì),易于家畜消化吸收解析:乳酸菌為異養(yǎng)微生物,選擇糖類含量較高的植物作為青貯原料,可保證乳酸菌生長所需的碳源,有利于乳酸菌大量繁殖,加快發(fā)酵進程,A正確;乳酸菌是厭氧微生物,在發(fā)酵的過程中不能通入空氣,否則會影響乳酸菌的無氧呼吸,B錯誤;發(fā)酵過程中乳酸菌生成的產(chǎn)物是乳酸,乳酸使培養(yǎng)液的pH降低,會抑制其他微生物的生長,C正確;經(jīng)過乳酸菌發(fā)酵,大分子有機物被相應的酶分解為多種小分子物質(zhì),易于家畜消化吸收,D正確。8.污水中一般都會含有亞硝酸鹽,科研人員從污水中分離出了亞硝酸鹽降解菌,該微生物能對污水中的亞硝酸鹽進行有效去除。從水體取樣后置于含亞硝酸鹽的培養(yǎng)基中進行富集培養(yǎng),取富集培養(yǎng)6代后的菌液依次等比稀釋。稀釋系列菌液濃度為10-4、10-5、10-6、10-7、10-8,分別取0.1mL培養(yǎng)液涂布平板,37℃倒置培養(yǎng)24h,觀察菌落形態(tài)并進行相關(guān)檢測和純化等。下列說法錯誤的是(C)A.該富集培養(yǎng)基是以亞硝酸鹽作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基B.將菌液置于含亞硝酸鹽的富集培養(yǎng)基中反復培養(yǎng)6代的目的是增加亞硝酸鹽降解菌的數(shù)量C.若稀釋涂布平板上生長出不同形態(tài)的亞硝酸鹽降解菌,即可獲得所需的降解菌D.如果要研究純化后的降解菌的生長曲線,可取其菌落進行液體培養(yǎng)并用臺盼藍染色后進行活菌計數(shù)解析:該富集培養(yǎng)基是以亞硝酸鹽作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基,這樣可以使能利用亞硝酸鹽的細菌大量繁殖,而不能利用亞硝酸鹽的細菌不能生長,A正確;將菌液置于含亞硝酸鹽的富集培養(yǎng)基中反復培養(yǎng)6代的目的是使能利用亞硝酸鹽的微生物增加,從而將不能利用亞硝酸鹽的微生物淘汰掉,B正確;若稀釋涂布平板上生長出不同形態(tài)的亞硝酸鹽降解菌,則說明能利用亞硝酸鹽的微生物有多種,因此需要再進行平板劃線檢測、純化,C錯誤;進行活菌計數(shù)應該用臺盼藍染色,被染色的細胞為死亡細胞,不著色的為活細胞,故如果要研究純化后的降解菌的生長曲線,可取其菌落進行液體培養(yǎng)并用臺盼藍染色后進行活菌計數(shù),D正確。9.為制備圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌微生物菌劑,以降解廚余垃圾廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等物質(zhì),研究人員探究了圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳接種量比,將兩種菌液進行了不同配比的分組處理,如下表所示。下列敘述錯誤的是(C)編號R0R1R2R3圓褐固氮菌∶巨大芽孢桿菌1∶02∶11∶10∶1A.微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等分解廢液中的相關(guān)物質(zhì)B.實驗過程中,需將上述菌液分別接種于相同體積的廚余垃圾廢液中進行培養(yǎng)C.本實驗還需設(shè)置對照組,具體處理是將適量R2組的菌液接種到等量無菌水中D.可通過檢測實驗前后廢液中淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪的含量,以確定適宜的配比解析:酶具有專一性,可分解相應的物質(zhì),微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等分解廢液中的相關(guān)物質(zhì),A正確;實驗過程中,廚余垃圾廢液的作用類似于培養(yǎng)基,其體積是無關(guān)變量,應該保持相同,B正確;本實驗還需設(shè)置對照組,具體處理是將適量R2組的菌液接種到等量的普通培養(yǎng)基中,在無菌水中微生物不能生活,做對照無意義,C錯誤;可通過檢測實驗前后廢液中淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪的含量,以確定適宜的配比,含量最少的比例最適宜,D正確。10.吡咯喹啉醌(PQQ)對生物體的繁殖、生長和發(fā)育有著重要的作用,也是甲醇脫氫酶的輔助因子,在以甲醇為初始底物的細胞呼吸中具有重要作用。有研究人員以甲醇利用細菌為初始菌株,誘變處理后進行多級選擇培養(yǎng),篩選出高產(chǎn)PQQ(FJNU-A26)菌株,流程如下(如圖),據(jù)此推測合理的是(D)A.選擇培養(yǎng)基中還應添加大量的葡萄糖或蔗糖,為其生長提供營養(yǎng)B.已經(jīng)突變的基因,在選擇培養(yǎng)過程中將不再發(fā)生突變C.逐級提高甲醇濃度,目的是提高目標菌株對滲透壓的耐受性D.逐級選擇培養(yǎng)過程中,甲醇利用細菌發(fā)生了適應性進化解析:為了篩選出能利用甲醇的目的菌株,選擇培養(yǎng)基中應以甲醇為唯一碳源,不能添加葡萄糖或蔗糖等,A不合理;基因突變具有隨機性、不定向性等特點,已經(jīng)突變的基因,在選擇培養(yǎng)過程中可能還會發(fā)生突變,B不合理;逐級提高甲醇濃度,目的是篩選出甲醇高耐受菌株,即高產(chǎn)PQQ(FJNU-A26)菌株,C不合理;逐級選擇培養(yǎng)過程中,細菌的變異是不定向的,甲醇濃度不斷增加,甲醇高耐受菌株生存下來,甲醇耐受性低的菌株被淘汰,說明甲醇利用細菌發(fā)生了適應性進化,D合理。11.紙片擴散法是藥敏試驗中一種常用的方法。取少量大腸桿菌的培養(yǎng)液,均勻涂在培養(yǎng)皿內(nèi)的培養(yǎng)基上,再放上4片含有鏈霉素(抗生素)的圓形濾紙,然后在無菌、適宜條件下培養(yǎng)12~16h,濾紙片周圍出現(xiàn)抑制大腸桿菌生長的環(huán)圈(簡稱抑菌圈,見下圖)。下列相關(guān)敘述錯誤的是(C)A.圖1中的培養(yǎng)基需冷卻至50℃左右時再倒平板,該操作需要在酒精燈火焰附近進行B.接種后的平板在培養(yǎng)時的放置應如圖2中的①所示C.抑菌圈越大,說明大腸桿菌對鏈霉素的敏感性越弱D.圖3中Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落,可能是大腸桿菌發(fā)生了基因突變解析:對培養(yǎng)液進行滅菌后需冷卻(至50℃左右)再倒平板,倒平板時應在酒精燈火焰附近進行,盡可能減少培養(yǎng)基污染,A正確;接種后的培養(yǎng)基需要倒置,這樣可以防止培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā),同時防止冷凝形成的水珠滴入培養(yǎng)基,應如題圖2中的①所示,B正確;抑菌圈越大說明抑菌效果越好,即大腸桿菌對該抗生素敏感性越強,C錯誤;Ⅳ的抑菌圈中出現(xiàn)了部分菌落說明這幾個菌落出現(xiàn)了抗藥性,抗藥性的獲得可能是由于大腸桿菌發(fā)生了基因突變,D正確。12.咔唑是一種含N有機物,有潛在致癌性,其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定難以清除。為了獲得高效降解咔唑的微生物,研究人員設(shè)計了下圖所示的實驗方案。下列針對該方案的敘述錯誤的是(D)A.加入無菌水稀釋前的油田淤泥樣品無需滅菌B.在CNFM中加入咔唑的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C.固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是分離得到降解咔唑的微生物D.利用顯微鏡直接計數(shù)測量經(jīng)多瓶培養(yǎng)后培養(yǎng)瓶中目標微生物的數(shù)量小于實際值解析:樣品不能進行滅菌,否則會殺死目的微生物,A正確;咔唑是一種含N有機物,能為降解咔唑的微生物提供氮源,不能降解咔唑的微生物不能利用咔唑,其因為缺少氮源而不能在培養(yǎng)基上生長,該方案中的CNFM僅含生長因子、無機鹽和水,添加咔唑為唯一氮源的培養(yǎng)基是典型的選擇培養(yǎng)基,B正確;微生物能在固體平板培養(yǎng)基上形成菌落,固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是篩選出能降解咔唑的微生物,C正確;利用顯微鏡直接計數(shù)時,菌體數(shù)量中包括了死亡的菌體,所以測出的微生物數(shù)量大于實際值,D錯誤。二、非選擇題13.我國早在公元前22世紀就采用發(fā)酵法釀酒,制醬、制醋、制腐乳、制泡菜等也具有悠久的歷史?;卮鹣铝袉栴}:(1)傳統(tǒng)啤酒釀造的發(fā)酵過程是在敞開式發(fā)酵池中進行的,麥芽汁中接種酵母菌后通入大量無菌空氣,之后會產(chǎn)生大量氣體翻騰逸出,形成厚厚的氣泡層。其中,氣泡層起__________的作用,有利于酒精的生成。(2)制作泡菜時煮沸的鹽水須冷卻后再倒入裝好干凈蔬菜的壇中,以免高溫____________________。發(fā)酵初期發(fā)酵壇的水槽內(nèi)會間歇性有氣泡冒出,這是因為__________________________________。發(fā)酵過程中,除乳酸菌外,其他微生物在密封發(fā)酵2天后均大幅度減少,主要原因是_____________________________________________________。(3)乳酸菌常用于制作酸奶等發(fā)酵食品。制作酸奶時,若牛奶中含有抗生素,會影響酸奶的制作效果,原因是__________________。(4)研究人員為探究發(fā)酵溫度對紅樹莓果酒發(fā)酵的影響做了相關(guān)實驗,得到下圖結(jié)果:①據(jù)圖可知,發(fā)酵的最適溫度是24℃,理由是該溫度時____________________________________________________。②發(fā)酵進行一段時間后殘?zhí)橇坎辉俳档?,推測原因可能是________________________________________________。解析:(1)酵母菌酒精發(fā)酵需要無氧環(huán)境,氣泡層起隔絕空氣的作用。(2)制作泡菜時煮沸的鹽水須冷卻后再倒入裝好干凈蔬菜的壇中,防止高溫殺死蔬菜表面的乳酸菌。發(fā)酵初期發(fā)酵壇的水槽內(nèi)會間歇性有氣泡冒出,這是因為酵母菌等微生物的呼吸作用產(chǎn)生CO2。發(fā)酵過程中,氧氣含量逐漸減少,由于只有乳酸菌能耐受酸性且缺氧的發(fā)酵液環(huán)境,因此除乳酸菌外,其他微生物在密封發(fā)酵2天后均大幅度減少。(3)由于抗生素能抑制乳酸菌的生長,因此制作酸奶時,若牛奶中含有抗生素,會影響酸奶的制作效果。(4)①據(jù)曲線圖分析可知,在發(fā)酵溫度為24℃時,殘?zhí)橇孔畹?,發(fā)酵液酒精度最高,因此該溫度是發(fā)酵
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