第5章黃酮類化合物教學案例

第5章黃酮類化合物廈門大學醫(yī)學院藥學系丘鷹昆第1節(jié)概述分布廣泛1974年，共1674個2003年，超過9000個黃酮醇：1/3黃酮：1/4雙黃酮：多分布于裸子植物一、黃酮類化合物簡介黃酮類化合物簡介基本結構：2-(或3-)苯基苯并γ-吡喃酮現(xiàn)認為具有C6-C3-C6單位的化合物均為黃酮，其中C6為芳香環(huán)，C3可為共軛也可不共軛二、結構分類分類依據(jù)C環(huán)的不同：氧化、成環(huán)？B環(huán)連接位置聚合度(二氫)黃酮(醇)黃烷3,4-二醇(二氫)查爾酮黃烷3-醇(二氫)異黃酮橙酮xanthones花色素高異黃酮分類分類分類雙黃酮類(biflavonoids)2分子黃酮2分子二氫黃酮1分子黃酮+1分子二氫黃酮通過C-O-C、C-C相連黃酮木脂素(flavonolignan)1分子黃酮+1分子木脂素生物堿型黃酮黃酮骨架上連有生物堿黃酮苷多與糖成結合成苷，可成O-苷，也有C-苷單糖D-Glc、D-Gal、D-Xyl、L-Rha、L-Ara、D-GluA雙糖類槐糖：Glcβ1→2glc龍膽二糖Glcβ1→6glc蕓香糖Rhaα1→6glc新陳皮糖Rhaα1→2glc三糖類龍膽三糖Glcβ1→6glcα1→2fru槐三糖Glcβ1→2glcβ1→2glc代表化合物舉例三、生物活性對心血管系統(tǒng)的作用降低毛細血管脆性及異常通透性：蘆丁、橙皮苷擴張冠狀動脈，治療冠心?。焊鸶亟祲阂种蒲“寰奂把ㄐ纬煽垢味咀饔茫核w薊素、(+)-兒茶素抗炎作用：二氫槲皮素雌激素樣作用：大豆素、染料木素等抗菌、抗病毒作用：木樨草素、黃芩苷、黃芩素、槲皮素、山萘素、二氫槲皮素瀉下作用：營石苷A解痙作用：異甘草素、大豆素第2節(jié)理化性質(zhì)與顯色反應一、性狀物態(tài)：多結晶性固體，少無定型粉末光學活性苷元黃酮（醇），無光學活性二氫黃酮（醇）、黃烷醇，具光學活性苷：有光學活性顏色交叉共軛體系的存在助色團的引入→顏色加深7,4’引入助色團→顏色加深二、溶解性苷、苷元：相似相溶與分子平面性有關平面性越強，水溶性越差黃酮(醇)<查爾酮<二氫黃酮<二氫黃酮醇<花色素與母核取代基類型有關-OH取代，水溶性↑羥基甲基化后，水溶性↓與母核取代基位置有關3-O-苷>7-O-苷三、酸堿性酸性：酚OH影響酸性強弱OH數(shù)目、位置7,4′-二OH>7-OH或4-OH>一般Ar-OH>5-OH5%NaHCO3→5%Na2CO3→0.2%NaOH→4%NaOH2、堿性來源：

-吡喃酮環(huán)-O-孤對電子四、顯色反應還原反應金屬鹽類試劑絡合反應硼酸顯色反應堿性試劑顯色反應1、還原反應鹽酸-鎂粉(或鋅粉)反應(二氫)黃酮(醇)：+多數(shù)為：橙紅～紫紅色少數(shù)為：紫色～藍色(3’-OR→顏色加深)查耳酮、橙酮、異黃酮、兒茶素類：-假陽性反應：花色素、查耳酮+HCl→淡紅，加Mg顏色不加深!四氫硼鈉(NaBH4)反應二氫黃酮：紅色～紫色其它黃酮：(-)二氫黃酮與磷鉬酸試劑→棕褐色2、金屬鹽類試劑絡合反應反應官能團3-OH，4-C=O5-OH，4-C=O鄰二酚OH1)AlCl3反應鋁鹽反應：AlCl3反應(PC)試劑：1%AlCl3絡合物：多為黃色(λmax=415nm)多有熒光，UV下熒光增強：可用于定性、定量金屬鹽類試劑絡合反應2)鎂鹽反應：MgAc2反應(PC)二氫黃酮(醇)：天藍色熒光(尤其有5-OH)其他黃酮類：黃色～橙黃～褐色3)鉛鹽反應與1%醋酸鉛或堿式醋酸鉛，可生成黃～紅色↓Pb(Ac)2：鄰二酚OH或3-OH，4-C=O或5-OH，4-C=OPb(OH)(Ac)：沉淀能力強，可與一般酚OH↓4)鋯鹽反應鋯鹽-枸櫞酸反應(PC)試劑：2%ZrOCl2→2%枸櫞酸條件：含3或5-OH的黃酮絡合物多為黃綠色，帶熒光穩(wěn)定性：加枸櫞酸后黃色消失：5-OH黃酮黃色變淡：3,5-OH黃酮黃色不褪：3-OH黃酮3-OH,4-CO5-OH,4-CO黃色穩(wěn)定，不褪色不穩(wěn)定分解，顯著褪色+2%ZrOCl2H+金屬鹽類試劑絡合反應5)氨性氯化鍶反應6)FeCl3反應含5-OH時顏色明顯3、硼酸絡合反應反應條件：酸性條件5-OH黃酮(醇)2’-OH查耳酮現(xiàn)象：亮黃色二氫黃酮(醇)、異黃酮、橙酮，(-)4、堿性試劑顯色反應黃酮類日光下顯黃色或黃色加深UV下顯熒光或熒光增強OH-空氣NaOH引起的色變不褪NH4OH引起的色變褪去黃酮醇類黃色OH-空氣棕色二氫黃酮類橙色~黃色OH-例：用化學方法鑒別HCl-MgMg(Ac)2SrCl2ZrOCl2+檸檬酸NaBH4五、Wessely-Moser重排黃酮6，8-C苷酸性條件下不能發(fā)生水解發(fā)生重排反應!第3節(jié)黃酮類的提取與分離一、粗提苷元CHCl3，Et2O，EtOAc苷類和極性大的苷元EtOAc,Me2CO，EtOH,MeOH,H2O極性大的混合溶劑（MeOH-H2O1：1）注意避免酶對苷的水解作用二、粗提物的精制溶劑萃取法醇提物中的脂溶性雜質(zhì)：石油醚萃取水提液中的水溶性雜質(zhì)：水醇法堿提酸沉法：注意堿度、酸度應適宜炭粉吸附法：用于黃酮苷的精制黃酮/MeOH吸苷C洗脫劑：活性C

沸水沸MeOH7%酚/水15%酚/醇三、分離柱色譜法硅膠聚酰胺SephadexLH20pH梯度萃取法利用特殊官能團的性質(zhì)分離1、硅膠柱色譜吸附：異黃酮、二氫黃酮（醇）、高度甲基化分配：多羥基黃酮醇及其苷仙人掌正丁醇提取物為例正丁醇提取物90g組分12.4g組分26.0g組分37.3g適量MeOH-水溶解旋轉蒸發(fā)儀濃縮至小體積組分44.0g組分520.0g+223g硅膠，拌樣旋轉蒸發(fā)儀蒸干+1200g硅膠起始溶劑(CHCl3-MeOH10:1)裝柱，上樣組分622.6g組分713.1g氯仿-甲醇-水梯度洗脫(10：1，10：3：0.57：3：0.5，6：4：1，MeOH)硅膠柱層析法制備薄層層析法示例正丁醇層流份26.0g流分8650mg硅膠柱層析CHCl3-MeOH洗脫3-甲基槲皮素358mg條形點樣CHCl3-MeOH5:1展開，晾干少量CHCl3-MeOH(2：1)溶解山萘酚48mg按色帶刮板，合并硅膠分別用丙酮洗脫回收溶劑2、聚酰胺柱色譜聚酰胺分離原理：H鍵影響吸附力的因素(溶質(zhì))-OH多C=O多分子內(nèi)H鍵少芳香化程度大MW小洗脫力(洗脫劑)水<含水醇<醇<尿素/水例聚酰胺TLC，Rf值： E＞B＞A＞C＞D聚酰胺柱，洗脫順序： E→B→A→C→D3、葡聚糖凝膠柱色譜常用型號SephadexGSephadexLH-20雙重分離原理吸附原理：苷元分子篩原理：苷常用洗脫劑MeOH、MeOH-H2OMe2CO、Me2CO-H2OCHCl3-MeOH堿水、鹽水SephadexLH-20柱層析法示例正丁醇層流份6-10流份6178.7mgHPLC50%甲醇洗脫流份4114.5mg化合物4620.6mg化合物1780.0mgSephadexLH-20柱甲醇洗脫SephadexLH-20柱甲醇洗脫4、pH梯度萃取法酸性7,4’-二