2025年仁愛科普版選擇性必修3生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年仁愛科普版選擇性必修3生物下冊月考試卷224考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下圖表示研究人員利用胚胎工程培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程；下列相關(guān)說法正確的是（）

A.①代表體外受精，與體內(nèi)受精不同的是體外受精前精子需要獲能B.②代表早期胚胎培養(yǎng)，可移植的胚胎應(yīng)發(fā)育到原腸胚或囊胚階段C.③代表胚胎分割，需均等分割桑椹胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)D.⑤代表胚胎移植，移植之前需要對供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理2、胰島素可用于治療糖尿??；但胰島素注射后易在皮下堆積，需較長時(shí)間才能進(jìn)入血液，進(jìn)入血液后又易被分解，因此治療效果受到影響。下圖是新的速效胰島素的生產(chǎn)過程，有關(guān)敘述正確的是（）

A.新的胰島素的預(yù)期功能是構(gòu)建新胰島素結(jié)構(gòu)模型的主要依據(jù)B.若用大腸桿菌生產(chǎn)新的胰島素，需用顯微注射法導(dǎo)入大腸桿菌C.新胰島素基因和人體胰島素基因相同，新的胰島素生產(chǎn)過程中不涉及中心法則D.新的胰島素功能直接由新的胰島素基因結(jié)構(gòu)發(fā)揮3、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)過程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.制作細(xì)胞懸液時(shí)，可以使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.懸液中分散的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上，細(xì)胞貼壁體現(xiàn)了細(xì)胞的適應(yīng)性C.10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持細(xì)胞正常的二倍體核型D.細(xì)胞培養(yǎng)在含混合氣體的培養(yǎng)箱中，其中的CO2可刺激細(xì)胞的呼吸4、下列有關(guān)幾種發(fā)酵食品的發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間和發(fā)酵菌種等的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.葡萄酒發(fā)酵時(shí)應(yīng)將溫度控制在18～30℃B.生產(chǎn)醋酸所用的醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃C.腐乳發(fā)酵時(shí)，毛霉中蛋白酶的合成只需要核糖體參與D.剛裝壇密封好的泡菜，夏季的發(fā)酵時(shí)間比冬季的短5、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是人們在日常生活過程中對微生物的應(yīng)用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.果酒應(yīng)該密封保存，否則醋酸菌可利用酒精直接轉(zhuǎn)化為醋酸而影響口感B.制作泡菜時(shí)加入的“老湯”中含有純度較高的酵母菌可加速發(fā)酵進(jìn)程C.欲將果酒制備成果醋，制備時(shí)的溫度無需改變但需通入充足的氧氣D.酸奶發(fā)酵時(shí)，溶液pH值逐漸降低，是乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸造成的6、剛果紅是一種染料，纖維素能夠與剛果紅結(jié)合形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。為探究土壤中甲、乙兩種微生物能否產(chǎn)生纖維素酶及分解纖維素能力的大小，某小組分別將兩種微生物接種于含剛果紅的培養(yǎng)基上并在相同條件下培養(yǎng)，結(jié)果如下圖。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，且以纖維素為唯一碳源B.甲、乙菌均能產(chǎn)生纖維素酶，但乙菌的分解能力較強(qiáng)C.剛果紅不能與纖維素降解產(chǎn)生的葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.要篩選出高效降解菌株，應(yīng)從透明圈較大的菌落中挑取微生物接種7、人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，改造后的t-PA蛋白能顯著降低出血副作用。下圖表示構(gòu)建含t-PA改良基因重組質(zhì)粒的過程示意圖。相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）

A.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡB.需要DNA聚合酶將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接C.新霉素抗性基因的作用是便于將導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來D.在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株8、GUS基因作為一種報(bào)告基因，編碼β-葡萄糖苷酸酶，該酶可催化特定底物水解，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，借此用來觀察轉(zhuǎn)基因植物中外源基因的表達(dá)情況，鑒定轉(zhuǎn)基因植株。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.GUS基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，由多個(gè)核糖核苷酸構(gòu)成B.GUS基因編碼β-葡萄糖苷酸酶合成的過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯C.應(yīng)將GUS基因和外源基因融合后導(dǎo)入受體細(xì)胞以觀察表達(dá)情況D.藍(lán)色的深淺可表示外源基因表達(dá)量的多少9、水稻胚乳含直鏈淀粉和支鏈淀粉；直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)。科研人員將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個(gè)突變品系。各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如下圖所示。下列分析不合理的是（）

A.構(gòu)建基因編輯系統(tǒng)的DNA重組載體所需的酶是限制酶和DNA連接酶B.Wx基因啟動子序列的改變可能影響RNA聚合酶與啟動子的識別和結(jié)合C.根據(jù)各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果，可推測品系3的糯性最強(qiáng)D.與野生型相比，3個(gè)突變品系中直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列發(fā)生改變評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的β－淀粉樣蛋白體，它的逐漸積累可能導(dǎo)致神經(jīng)元損傷和免疫功能下降，某些基因的突變會導(dǎo)致β－淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術(shù)能用于老年癡呆癥治療的是（）A.胚胎移植技術(shù)B.胚胎干細(xì)胞技術(shù)C.單克隆抗體技術(shù)D.核移植技術(shù)11、下圖是胚胎干細(xì)胞潛能示意圖,相關(guān)敘述正確的是()

A.由細(xì)胞形態(tài)判斷,4種細(xì)胞中細(xì)胞②最可能連續(xù)分裂B.胚胎干細(xì)胞能分化為各種細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)C.分化得到的各種細(xì)胞,功能不同的主要差異是特定蛋白不同D.定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成的組織或器官,進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)12、重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋；互為模板；經(jīng)過多次PCR擴(kuò)增。從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴(kuò)增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方而具有廣泛的應(yīng)用前景，下圖表示利用重疊延伸PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過程。下列敘述正確的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高B.在第一階段由于引物2和引物3發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中C.引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制，共產(chǎn)生4種雙鏈DNA分子D.在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經(jīng)過3次復(fù)制13、下列有關(guān)利用不同材料進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是（）A.雞血細(xì)胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于瓦解細(xì)胞膜B.洋蔥鱗片葉碎片中，加入沐浴液和食鹽后研磨有利于去除細(xì)胞壁C.魚白（精巢）提取的DNA濾液中，加入嫩肉粉有利于去除蛋白質(zhì)D.菜花提取的DNA濾液中，加入冷酒精有利于析出DNA14、MIC是指藥敏試驗(yàn)中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。某研究小組將含有相同濃度抗生素I~IV的四個(gè)大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上，進(jìn)行藥敏試驗(yàn)以了解病原微生物對四種抗生素的敏感程度，用于指導(dǎo)臨床合理選用抗生素。圖1為實(shí)驗(yàn)器材，圖2為實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列敘述正確的是（）

A.為獲得長滿測試菌的瓊脂平板，需要使用圖1中工具①②③B.據(jù)圖2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素IV的突變株D.圖2抑菌圈中離紙片越近的菌落對抗生素IV的抗性越強(qiáng)15、為探究不同糖源（蜂蜜、黃冰糖）對藍(lán)莓酒發(fā)酵產(chǎn)物的影響，某研究小組研發(fā)出如下的藍(lán)莓酒發(fā)酵工藝，其中“主發(fā)酵”時(shí)酵母菌會繁殖、大部分糖的分解和代謝物會生成，“后發(fā)酵”是在低溫、密閉的環(huán)境下藍(lán)莓酒會成熟。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.菌種甲在產(chǎn)生CO2的同時(shí)會產(chǎn)生酒精B.切片后需對發(fā)酵液進(jìn)行消毒然后再分組C.倒罐均需保留空間以促進(jìn)菌種有氧呼吸D.主發(fā)酵要控制無氧，后發(fā)酵要控制有氧16、進(jìn)行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時(shí)，利用的培養(yǎng)基組分及含量如表所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）。組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機(jī)鹽，又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂既可為尿素分解菌提供碳源，又起到凝固劑的作用D.蒸餾水既可進(jìn)行定容，又可對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于計(jì)數(shù)17、利用枯草芽孢桿菌的發(fā)酵可以生產(chǎn)亮氨酸脫氫酶。在啟動子和亮氨酸脫氫酶基因之間插入信號肽（SPN）基因并將重組質(zhì)粒導(dǎo)人枯草芽孢桿菌構(gòu)建工程菌，可提高亮氨酸脫氫酶的生產(chǎn)水平。重組質(zhì)粒的構(gòu)建如圖所示，KmR為卡那霉素抗性基因，ApR為氨芐青霉素抗性基因，圖中各限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端不同。下列敘述正確的是（）

A.重組質(zhì)粒pMA5-SPN-leudh除圖中標(biāo)注外還應(yīng)具有終止子、復(fù)制原點(diǎn)等結(jié)構(gòu)B.構(gòu)建重組質(zhì)粒用NdeI和BamHI兩種酶有助于正確插入目的基因C.圖中KmR和ApR存在于質(zhì)粒中的作用是便于重組DNA分子的篩選D.圖中各限制酶切開的是氫鍵和磷酸二酯鍵，切下的DNA片段拼接需依靠DNA連接酶評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)18、平板劃線法是通過____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來的肉眼可見的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。19、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的______——“分子運(yùn)輸車”20、第一步：______21、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。22、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。23、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共3分)24、單克隆抗體技術(shù)在生物工程中有著廣泛的應(yīng)用；下圖1是單克隆抗體制備流程圖，下圖2是我國科研人員為了準(zhǔn)確篩選沒有明顯表型特征的某種微生物所采用的流程圖，圖3是某雙特異性抗體作用示意圖，雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合。

（1）據(jù)圖2分析，科研人員利用目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的基因序列，構(gòu)建____________________，并導(dǎo)入用__________處理的大腸桿菌細(xì)胞中；獲取大量膜蛋白。

（2）已知細(xì)胞合成DNA有“D途徑”和“S途徑”兩條途徑，其中“D途徑”能被氨基嘌呤阻斷。兔子的已免疫的淋巴細(xì)胞有上述兩種途徑，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤細(xì)胞中只有“D途徑”，但能不斷分裂增殖。據(jù)此，圖1所示的__________（填“HAT培養(yǎng)基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以達(dá)到篩選目的，其原理是______________________________。

（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，目的是______________________________。

（4）與直接使用抗腫瘤藥物相比，將抗腫瘤藥物與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是________________________________________，體現(xiàn)的是雙特異性單克隆抗體在__________方面的用途。評卷人得分五、綜合題(共4題，共40分)25、新型冠狀病凝肺炎（COVID-19）的病原體嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（SARS-CoV-2）是一種RNA病毒?；卮鹣铝袉栴}。

（1）SARS-CoV-2的基因組測序工作由我國科學(xué)家率先完成。為提高準(zhǔn)確率，檢測樣本中是否含有SARS-CoV-2，應(yīng)選擇其基因組中特有的_______（多選）的基因。

A.單個(gè)B.多個(gè)C.堿基序列穩(wěn)定D.堿基序列易變。

（2）檢測采集的樣本中是否含有SARS-CoV-2的步驟如下：

①利用樣本中獲取的RNA得到cDNA.該過程需要使用________酶。

②利用PCR技術(shù)對上述cDNA進(jìn)行擴(kuò)增。PCR過程的原理是______，該過程需要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，需提供DNA聚合酶、引物、______，同時(shí)通過控制溫度使該過程在體外反復(fù)進(jìn)行。擴(kuò)增的過程包括______。

③對擴(kuò)增后的cDNA進(jìn)行熒光檢測；過程如下圖所示。DNA探針只能與特有的SARS-CoV-2基因中部分序列結(jié)合，DNA探針中R基團(tuán)發(fā)出的熒光會被距離很近的Q基團(tuán)吸收，不能發(fā)出熒光。在對結(jié)合有探針的cDNA擴(kuò)增過程中，DNA聚合酶會將遇到的探針?biāo)?，使DNA探針上R基團(tuán)與Q基團(tuán)分離，R基團(tuán)發(fā)出熒光。釋放到溶液中的R基團(tuán)達(dá)到一定量時(shí)，才能檢測到發(fā)出的熒光。

樣本中不含病毒時(shí)，檢測不到熒光的原因是____________。當(dāng)樣本中病毒含量較少時(shí)，能檢測到熒光值所需的擴(kuò)增次數(shù)比病毒含量較多時(shí)___________（填“多”或“少”）。26、如果已知一小段DNA的序列；可采用PCR的方法，簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，具體流程如圖（以EcoRⅠ酶切為例）：

請據(jù)圖回答問題：

（1）步驟Ⅰ用的EcoRⅠ主要存在于_____生物中，限制酶存在于該類生物中的主要作用是_____。

（2）步驟Ⅱ用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成_________；PCR每次循環(huán)一般可分為_____（按順序書寫）三步，其中第二步的目的是_____。

（3）若下表所列為已知的DNA序列和設(shè)計(jì)的一些PCR引物，步驟Ⅲ選用的PCR引物必須是_____________（從引物①②③④中選擇；填編號）。

。

DNA序列（虛線處省略了部分核苷酸序列）

已知序列。

PCR引物。

①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′②5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′

③5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′

（4）對PCR產(chǎn)物測序，經(jīng)分析得到了片段F的完整序列。下列DNA單鏈序列中（虛線處省略了部分核苷酸序列），結(jié)果正確的是_____________。A．5′-AACTATGCGAGCCCTT-3′B．5′-TTGATACGCCGAGTAC-3′C．5′-GCAATGCGTTCGGGAA-3′D．5′-AATTCCATGCTGAATT-3′27、水稻的雄性不育植株是野生型水稻的隱性突變體（正?；騇突變?yōu)閙）。雄性不育植株不能產(chǎn)生可育花粉；但能產(chǎn)生正常雌配子。

（1）水稻的花為兩性花，自花授粉并結(jié)種子。在雜交育種時(shí)，雄性不育植株的優(yōu)點(diǎn)是無需進(jìn)行_____________；大大減輕了雜交操作的工作量。

（2）我國科研人員將緊密連鎖不發(fā)生交換的三個(gè)基因M、P和R（P是與花粉代謝有關(guān)的基因，R為紅色熒光蛋白基因）與Ti質(zhì)粒連接，構(gòu)建_____________，通過_____________法轉(zhuǎn)入雄性不育水稻植株細(xì)胞中；獲得轉(zhuǎn)基因植株，如下圖所示。

（3）向雄性不育植株轉(zhuǎn)入M基因的目的是讓轉(zhuǎn)基因植株_____________。轉(zhuǎn)基因植株自交后代中，雄性不育植株為_____________熒光植株，由無熒光植株和紅色熒光植株的性狀分離比為_____________，分析P基因的功能是_____________。

（4）雄性不育植株不能通過自交將雄性不育的特性傳遞給它的子代，而育種工作者構(gòu)建出的轉(zhuǎn)基因植株的特點(diǎn)是_______________________________________。

（5）不用擔(dān)心轉(zhuǎn)基因植株自交時(shí)，轉(zhuǎn)基因植株中的M、P和R基因會隨著花粉擴(kuò)散，這是由于轉(zhuǎn)基因植株_____________。28、枸杞果酒果香濃郁；保留了原果實(shí)中特有的營養(yǎng)成分；其生產(chǎn)流程大致如下?；卮鹣铝袉栴}：

(1)果酒釀制過程中應(yīng)適時(shí)排氣，其原因是___________。果汁發(fā)酵后可用酸性重鉻酸鉀溶液來檢驗(yàn)酒精是否產(chǎn)生，若觀察到__________的顏色變化；則可說明有酒精產(chǎn)生。

(2)可采取___________法進(jìn)行接種；以進(jìn)行酵母菌的分離純化。

(3)果酒釀造過程中如果果汁滅菌不合格，含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸?___________請說明理由：__________。

(4)枸杞汁調(diào)配過程中要控制初始糖濃度。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，若初始糖濃度過高，所得果酒酒精濃度反而偏低。從酵母菌生長，繁殖的角度分析，其原因是__________。

(5)發(fā)酵后進(jìn)行離心收集的目的是___________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；分析題圖，①是體外受精過程，②是早期胚胎培養(yǎng)，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢復(fù)，⑤是胚胎移植。

【詳解】

A；①代表體外受精；體外受精前和體內(nèi)受精前精子均需要獲能，A錯(cuò)誤；

B；②代表早期胚胎培養(yǎng)；可移植的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚，B錯(cuò)誤；

C；③代表胚胎分割；在對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，而桑椹胚階段的胚胎還未形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，C錯(cuò)誤；

D；⑤代表胚胎移植；胚胎移植能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)，要對供體、受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供體和受體的生理狀態(tài)相同，D正確。

故選D。2、A【分析】【分析】

分析題圖：圖示是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過程。蛋白質(zhì)工程的過程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程得到的蛋白質(zhì)一般不是天然存在的蛋白質(zhì)。

【詳解】

A；根據(jù)蛋白質(zhì)工程的過程；構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵，而構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)就是新的胰島素的預(yù)期功能，A正確；

B；若要利用大腸桿菌生產(chǎn)新的胰島素；常用感受態(tài)法導(dǎo)入目的基因，B錯(cuò)誤；

C；新胰島素基因和人體胰島素基因不同；新的胰島素生產(chǎn)過程中涉及中心法則，C錯(cuò)誤；

D；新的胰島素功能的發(fā)揮必須依賴于胰島素蛋白質(zhì)正確的高級結(jié)構(gòu)；D錯(cuò)誤。

故選A。3、D【分析】【分析】

1；動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶的原因：胃蛋白酶作用的適宜pH約為2；當(dāng)pH大于6時(shí)，就失去活性，胰蛋白酶作用的pH為7.2-8.4，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2-7.4。

【詳解】

A；在利用動物組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)；可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以消化組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，得到單個(gè)細(xì)胞，A正確；

B；細(xì)胞貼壁是指懸浮液中分散的細(xì)胞很快就貼在瓶壁上的現(xiàn)象；體現(xiàn)了細(xì)胞的適應(yīng)性，B正確；

C；原代培養(yǎng)一般傳代1～10代；細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不會發(fā)生改變，能夠保持二倍體核型，C正確;

D、細(xì)胞培養(yǎng)在含混合氣體的培養(yǎng)箱中，其中的CO2可調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；由于酵母菌適宜生長的溫度是18~30℃；因此制葡萄酒時(shí)，要將溫度控制在18~30℃，A正確;

B；醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃；故果醋發(fā)酵時(shí)溫度宜控制在30-35℃，B正確；

C；腐乳發(fā)酵時(shí)；毛霉中蛋白酶的合成除了需要核糖體參與，還需要線粒體提供能量，C錯(cuò)誤；

D；泡菜腌制過程中；溫度高更容易發(fā)酵，故夏季的發(fā)酵時(shí)間比冬季的短，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

果醋制作原理：利用醋酸菌有氧呼吸將葡萄糖或者乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸。泡菜（酸菜）的制作原理：在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。腐乳制作的原理：多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如毛霉；曲霉、根霉、酵母菌等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。在多種微生物的協(xié)同作用下，普通的豆腐轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨(dú)特的腐乳。

【詳解】

A；當(dāng)糖源不足（果酒制作時(shí)已經(jīng)將糖源分解）時(shí)；醋酸菌可將酒精變成乙醛，再將乙醛最終轉(zhuǎn)變成醋酸，A錯(cuò)誤；

B；泡菜利用的是乳酸菌；B錯(cuò)誤；

C；制作果酒利用的是酵母菌；其最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃，而制作果醋利用的是醋酸菌，其最適生長溫度為30～35℃，故欲將果酒制備成果醋，制備時(shí)需要將溫度升高，同時(shí)還需通入充足的氧氣，C錯(cuò)誤；

D；酸奶發(fā)酵所需的菌種是醋酸菌；無氧呼吸可產(chǎn)生乳酸，酸奶發(fā)酵時(shí)，溶液pH值逐漸降低，是乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸造成的，D正確。

故選D。6、B【分析】【分析】

據(jù)題干分析可知；當(dāng)微生物產(chǎn)生纖維素酶以后，就無法產(chǎn)生紅色復(fù)合物，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，透明圈直徑越大，其分解纖維素酶的能力越強(qiáng)。從甲乙兩個(gè)培養(yǎng)基中微生物周圍的透明圈可知，甲；乙兩種微生物均能產(chǎn)生纖維素酶，但甲菌種周圍的透明圈直徑大于乙菌種，因此甲菌種分解纖維素的能力更強(qiáng)。

【詳解】

A；甲乙培養(yǎng)基中出現(xiàn)菌落；菌落只能在固體培養(yǎng)基中形成，且實(shí)驗(yàn)探究甲、乙兩種微生物能否產(chǎn)生纖維素酶，所以以纖維素為唯一碳源，A正確；

B；甲、乙菌種周圍都出現(xiàn)透明圈；即兩種微生物都能產(chǎn)生纖維素酶，但甲菌種周圍透明圈直徑大于乙菌種，甲菌的分解能力較強(qiáng)，B錯(cuò)誤；

C；剛果紅不能與纖維素分解后產(chǎn)生的葡萄糖形成紅色復(fù)合物；所以能分解纖維素的微生物周圍出現(xiàn)透明圈，C正確；

D；透明圈較大說明降解纖維素的能力越強(qiáng)；因此要篩選出高效降解菌株，應(yīng)從透明圈較大的菌落中挑取微生物接種，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入，③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；根據(jù)圖中目的基因兩端的黏性未端以及各種限制酶的的切制位點(diǎn)可知；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用限制酶Xmal和BglⅡ切割質(zhì)粒，才能與目的基因t-PA改良基因高效連接，A正確；

B；將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接的酶是DNA連接酶；不是DNA聚合酶，B錯(cuò)誤；

C；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)；其中的新霉素抗性基因沒有被破壞，因此可以根據(jù)對新霉素的抗性將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，即該基因的作用是便于將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，C正確；

D；重組質(zhì)粒已經(jīng)破壞了mlacZ基因；其不會表達(dá)產(chǎn)物，即細(xì)胞呈白色。所以，在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株，D正確。

故選B。8、A【分析】【分析】

基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過程；其中轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，該過程主要在細(xì)胞核中進(jìn)行，需要解旋酶和RNA聚合酶參與；翻譯是以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過程，該過程發(fā)生在核糖體上，需要以氨基酸為原料，還需要酶；能量和tRNA等。

【詳解】

A；GUS基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段；DNA的基本單位是脫氧核苷酸，A錯(cuò)誤；

B；β-葡萄糖苷酸酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)；GUS基因編碼β-葡萄糖苷酸酶合成的過程包括轉(zhuǎn)錄（以基因的一條鏈為模板合成RNA）和翻譯（以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)），B正確；

C；GUS基因作為一種報(bào)告基因；能夠在適宜條件下產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故GUS基因和外源基因融合后導(dǎo)入受體細(xì)胞，可通過藍(lán)色的產(chǎn)生情況觀察表達(dá)情況，C正確；

D；GUS基因可編碼β-葡萄糖苷酸酶；β-葡萄糖苷酸酶可催化特定底物水解，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，將GUS基因和外源基因融合后導(dǎo)入受體細(xì)胞，理論上藍(lán)色的深淺可表示外源基因表達(dá)量的多少，D正確。

故選A。9、D【分析】【分析】

根據(jù)題干信息“將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻；實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個(gè)突變品系”，說明突變品系的獲得是由于啟動子發(fā)生改變，啟動子位于編碼區(qū)是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)。

根據(jù)圖中信息；品系3的WxmRNA含量最低，說明其直鏈淀粉合成酶基因表達(dá)量最少。

【詳解】

A；將目的基因與Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)；需要限制酶的切割，將目的基因插入載體時(shí)需要DNA連接酶的連接，A正確；

B；啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)；如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結(jié)合和識別，進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄水平，B正確；

C；圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少；那么合成的直鏈淀粉酶最少，直鏈淀粉合成量最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強(qiáng)，C正確；

D；在真核生物中；編碼蛋白質(zhì)的序列是基因中編碼區(qū)，編碼區(qū)中不包括啟動子序列，因此直鏈淀粉合成酶的基因堿基序列中不含有啟動子，因此3個(gè)突變品系中Wx基因中控制合成直鏈淀粉酶的氨基酸序列不發(fā)生改變，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共8題，共16分)10、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意；治療老年癡呆癥的思路有，通過生產(chǎn)抗體對抗患者體內(nèi)的β－淀粉樣蛋白體積累，通過增殖補(bǔ)充損傷死亡的神經(jīng)元改善患者的情況。

【詳解】

A；胚胎移植技術(shù)只可用于培養(yǎng)新的個(gè)體；對該疾病無應(yīng)用意義，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞技術(shù)可以培養(yǎng)誘導(dǎo)增殖新的神經(jīng)元；有可能用于治療該疾病，B正確；

C；單克隆抗體技術(shù)可以用于生產(chǎn)抗體對抗患者體內(nèi)的β－淀粉樣蛋白體；有助于治療該疾病，C正確；

D；核移植技術(shù)主要運(yùn)用于克隆動物等；對該病沒有實(shí)際應(yīng)用意義，D錯(cuò)誤。

故選BC。11、A:B:C:D【分析】【分析】

干細(xì)胞：在個(gè)體發(fā)育過程中；通常把那些具有自我復(fù)制能力，并能在一定條件下分化形成一種以上類型的細(xì)胞的多潛能細(xì)胞稱為干細(xì)胞。

（1）全能干細(xì)胞：如胚胎干細(xì)胞；

（2）多能干細(xì)胞：如造血干細(xì)胞；

（3）專能干細(xì)胞：如骨髓瘤細(xì)胞；皮膚生發(fā)層干細(xì)胞。

【詳解】

A；由細(xì)胞形態(tài)判斷；①為精細(xì)胞，③為肌肉細(xì)胞，④為神經(jīng)細(xì)胞，這3種細(xì)胞都是高度分化的細(xì)胞，所以推測圖示4種細(xì)胞中細(xì)胞②分化程度最低，最可能連續(xù)分裂，A正確；

B；胚胎干細(xì)胞分化為各種細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；B正確；

C；分化得到的各種細(xì)胞；功能不同的主要差異是特定蛋白不同，C正確；

D；定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成的組織或器官；進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選ABCD。

【點(diǎn)睛】12、A:B【分析】【分析】

PCR擴(kuò)增運(yùn)用DNA分子復(fù)制的原理；經(jīng)過變性；復(fù)性、延伸，最終獲得大量DNA的過程。

【詳解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之間是三個(gè)氫鍵連接，因此引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高，A正確；

B；圖中可知；引物2和引物3分別作用同一段DNA的兩條鏈，會發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中，B正確；

C；引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制；共產(chǎn)生2種雙鏈DNA分子，C錯(cuò)誤；

D；在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中；經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經(jīng)過2次復(fù)制，D錯(cuò)誤。

故選AB。13、C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；雞血細(xì)胞液加入蒸餾水；使得雞血細(xì)胞的細(xì)胞膜吸水漲破，A錯(cuò)誤；

B；洋蔥鱗片葉碎片中；加入沐浴液有利于去除細(xì)胞膜，食鹽能溶解DNA，B錯(cuò)誤；

C；向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破壞其中的蛋白質(zhì)，有利于去除蛋白質(zhì)，獲得較純凈DNA，C正確；

D；由于DNA不溶于酒精；蛋白質(zhì)溶于酒精，因此需向DNA濾液中加入冷酒精有利于析出DNA，一步純化DNA，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】14、A:B:C【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；為獲得長滿測試菌的瓊脂平板；需要用到的接種方法是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法需要用到酒精燈、涂布器和培養(yǎng)基，A正確；

B；MIC是指藥敏試驗(yàn)中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。含有相同濃度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四個(gè)大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。說明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要達(dá)到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加濃度才行，B正確；

C；圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素Ⅳ的突變株；這些突變株在抗生素的環(huán)境下能夠存活并繁殖形成菌落。細(xì)菌是原核生物，發(fā)生變異最可能是基因突變，C正確；

D；在抑菌圈中出現(xiàn)的菌落都是對該種抗生素具有抗性的菌株；它們之間抗性的強(qiáng)弱無法根據(jù)題干信息進(jìn)行判斷。如果要判斷它們之間抗性的強(qiáng)弱還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)才能確定，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】

本題考查的知識點(diǎn)包括：微生物接種，微生物培養(yǎng)及微生物的應(yīng)用。15、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一類單細(xì)胞真菌；能以多種糖類作為營養(yǎng)物質(zhì)和能量的來源，因此在一些含糖量較高的水果；蔬菜表面經(jīng)常可以發(fā)現(xiàn)酵母菌的存在。酵母菌是兼性厭氧微生物，在無氧條件下能進(jìn)行酒精發(fā)酵，可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長的重要因素，釀酒酵母的最適生長溫度約為28℃。

【詳解】

A、發(fā)酵產(chǎn)生果酒的菌種是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸產(chǎn)生CO2；但不產(chǎn)生酒精，A錯(cuò)誤；

B；切片后對發(fā)酵液進(jìn)行消毒；防止雜菌污染，再進(jìn)行分組，B正確；

C；壓榨倒罐用于主發(fā)酵需保留空間以促進(jìn)酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐時(shí)菌種是進(jìn)行無氧呼吸，C錯(cuò)誤；

D；主發(fā)酵先有氧促進(jìn)酵母菌大量繁殖；后無氧進(jìn)行酒精發(fā)酵，后發(fā)酵要控制無氧，D錯(cuò)誤。

故選ACD。16、C:D【分析】【分析】

實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基按照功能劃分；可以分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可為尿素分解菌提供無機(jī)鹽，H2PO4-和HPO42-又是一種調(diào)節(jié)pH的緩沖對；A正確；

B；培養(yǎng)基中除了尿素?zé)o其他含氮物質(zhì)；只有尿素分解菌能通過分解尿素進(jìn)行生長繁殖，故尿素既能為尿素分解菌提供氮源，又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用，B正確；

C；瓊脂不能被微生物利用；只能充當(dāng)凝固劑，C錯(cuò)誤；

D、表中的H2O為蒸餾水；起定容作用，蒸餾水不能對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋，稀釋所用的溶劑應(yīng)該是無菌水，D錯(cuò)誤。

故選CD。17、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。

【詳解】

A；重組質(zhì)粒pM5-SPN-leudh中除圖中標(biāo)注外；還應(yīng)該具有終止子，復(fù)制原點(diǎn)等結(jié)構(gòu)，A正確；

B；NdeI和BamHI兩種酶切割形成的黏性末端不同；構(gòu)建重組質(zhì)粒用NdeI和BamHI兩種酶切有助于目的基因正確插入，B正確；

C；KmR和A_pR為標(biāo)記基因；圖中KmR和A_pR存在于質(zhì)粒中的作用是便于重組DNA分子的篩選，C正確；

D；限制酶和DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵；D錯(cuò)誤。

故選ABC。三、填空題(共6題，共12分)18、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個(gè)細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個(gè)細(xì)胞?.單個(gè)的菌落19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用23、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共3分)24、略

【分析】【分析】

單克隆抗體制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）

據(jù)圖分析，科研人員利用基因工程將目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的基因序列，構(gòu)建基因表達(dá)載體，并導(dǎo)入用CaCl2處理的大腸桿菌細(xì)胞中；使目的基因增殖并表達(dá)可獲取大量膜蛋白。

（2）

雜交瘤細(xì)胞由淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成；其合成DNA有“D途徑”和“S途徑”兩條途徑?！癏AT培養(yǎng)基”有篩選作用，在添加了氨基喋吟的HAT培養(yǎng)基中，雜交瘤細(xì)胞“D途徑”雖然被氨基嘌呤阻斷，但可通過“S途徑”合成DNA，不斷分裂增殖；而淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力，而不能在HAT培養(yǎng)基中生長；骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中因DNA合成途徑被氨基嘌呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制，也不生長。

（3）

帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合；可起到標(biāo)記目標(biāo)微生物的作用。

（4）

雙特異性單克隆抗體借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用；能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。體現(xiàn)的是雙特異性單克隆抗體在治療疾病方面起到運(yùn)載藥物的用途。

【點(diǎn)睛】

本題考查單克隆抗體的制備過程和動物細(xì)胞的培養(yǎng)，意在考查學(xué)生對所學(xué)知識的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學(xué)生分析圖示、獲取信息、解決問題的綜合應(yīng)用的能力?！窘馕觥浚?）基因的表達(dá)載體Ca2+或CaCl2

（2）HAT培養(yǎng)基淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力；故不能在HAT培養(yǎng)基中生長；骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中因DNA合成途徑被氨基嘌呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制，而不生長。

（3）標(biāo)記目標(biāo)微生物。

（4）雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到腫瘤細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞治療疾病（運(yùn)載藥物）五、綜合題(共4題，共40分)25、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

（1）為提高基因組測序的準(zhǔn)確率；應(yīng)該選擇基因組中特有的多個(gè)基因，且需要堿基序列穩(wěn)定不變。

（2）①RNA到cDNA是逆轉(zhuǎn)錄過程；因此需要逆轉(zhuǎn)錄酶；

②PCR的基本原理是DNA半保留復(fù)制，以需要擴(kuò)增的DNA為模板，以一對分別與模板的5'和3'末端相互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，重復(fù)這一過程，即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。PCR的基本步驟包括：a變性：將反應(yīng)系統(tǒng)加熱至95°C，使模板DNA全部變性變成單鏈DNA。b退火：將溫度下降至適當(dāng)溫度；使引物與模板DNA退火結(jié)合。c延伸：將溫度升至72°C，DNA聚合酶以脫氧核糖核苷酸為底物催化DNA的合成反應(yīng)。上述三個(gè)步驟稱為一個(gè)循環(huán)，這樣的循環(huán)重復(fù)25~30次，就可以得到大量的目標(biāo)DNA，因此需要提供DNA聚合酶；引物、模板以及四種脫氧核糖核苷酸。

③當(dāng)樣本中不含病毒時(shí)；檢測不到熒光是因?yàn)樘结槦o法和SARS-CoV-2基因中的序列結(jié)合，不會被水解，不會發(fā)出熒光；當(dāng)樣本中病毒含量少時(shí)，需要多擴(kuò)增，使R基因達(dá)到一定量，才能被檢測，病毒含量高時(shí)，特有的SARS-CoV-2基因多，只需要擴(kuò)增一點(diǎn)，因此病毒含量少時(shí)需要擴(kuò)增次數(shù)多。

【點(diǎn)睛】

本題考查了PCR技術(shù)的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。【解析】BC逆轉(zhuǎn)錄DNA復(fù)制模板和4種脫氧核苷酸（或“模板和dNTP”）變性、退火、延伸探針無法和SARS-CoV-2基因中的序列結(jié)合，不會被水解，不會發(fā)出熒光多26、略

【分析】【分析】

1.限制酶主要從原核生物中分離純化出來。限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。限制酶處理雙鏈DNA后形成黏性末端或平末端。

2.PCR擴(kuò)增過程中；在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。

（1）

步驟Ⅰ用的EcoRⅠ是一種限制酶；主要存在于原核生物中，它能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，進(jìn)而在特定部位將雙鏈DNA切開，顯然限制酶在原核生物中能切割外源DNA，保證自身安全。

（2）

步驟Ⅱ用的是DNA連接酶；DNA連接酶催化形成的是磷酸二酯鍵，即催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成磷酸二酯鍵；PCR循環(huán)包括變性；復(fù)性和延伸三步，該過程中升溫到95℃是為了使DNA變性解旋，進(jìn)而獲得DNA單鏈，其中第二步復(fù)性是指引物與兩條模板DNA單鏈結(jié)合，進(jìn)而為后續(xù)的延伸做準(zhǔn)備。

（3）

由于DNA聚合酶只能從5′→3′方向催化子鏈延伸；根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則可知，引物①是以目的基因下邊一條鏈的左端為模板向右側(cè)延伸，引物②是以目的基因上邊一條鏈為模板的右端向左側(cè)延伸，引物③是以目的基因下邊那條鏈的右端為模板向右側(cè)延伸，引物④是以目的基因上邊那條鏈的左端為模板向左側(cè)延伸，本題的目的是要擴(kuò)增已知序列兩側(cè)的未知序列，因此，應(yīng)該選擇引物③和④。

（4）

以下選項(xiàng)中；A；B、C都是已知序列，只有D是未知序列，而要測定的是未知序列，故選D。

【點(diǎn)睛】

熟知熟知P