2025年蘇人新版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年蘇人新版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷409考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、地錢具有重要的藥用價(jià)值，可用植物組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行快速人工繁育。有關(guān)此過程的敘述不正確的是（）A.發(fā)生了細(xì)胞的脫分化、再分化B.形成的愈傷組織分化程度較高C.依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性D.若發(fā)生雜菌污染則難以獲得目的植株2、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象B.胚胎干細(xì)胞可以用于治療人類的某些疾病C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需使用胃蛋白酶D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等天然成分3、CRISPR/Cas9是應(yīng)用最廣泛的基因組編輯技術(shù)；其操作過程如下：

①人工合成的短鏈RNA作為向?qū)Вê?jiǎn)稱gRNA）；它將部分與細(xì)胞某目的基因中希望被編輯的序列相結(jié)合；

②來自細(xì)菌的核酸酶Cas9與gRNA結(jié)合；切割與gRNA結(jié)合的DNA，使DNA雙鏈斷裂；

③加入大量用于修復(fù)的模板DNA（即大部分序列與被切割位點(diǎn)附近序列相同；個(gè)別位點(diǎn)被人工改變）。這樣，細(xì)胞啟動(dòng)修復(fù)機(jī)制，人類希望改變的堿基序列被引入基因組中，基因組的準(zhǔn)確編輯由此實(shí)現(xiàn)。

以下關(guān)于該技術(shù)敘述正確的是（）A.gRNA的序列與目的基因特定堿基序列部分結(jié)合，結(jié)合區(qū)域最多含6種核苷酸B.Cas9經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工才具有切斷DNA的活性C.CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用相同的gRNAD.CRISPR/Cas9技術(shù)可改變基因結(jié)構(gòu)，也可以使某個(gè)基因失去功能4、以下為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖，其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞，所含有的染色體組分別是AA和BB。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）

A.經(jīng)過程①獲得的a、b稱為原生質(zhì)層，②過程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性B.c細(xì)胞只有AABB這一種類型，再生出細(xì)胞壁標(biāo)志著原生質(zhì)體融合完成C.過程③和④分別是脫分化和再分化，脫分化與再分化過程具有基因選擇性表達(dá)D.獲得的植物d，因?yàn)樵跍p數(shù)分裂時(shí)同源染色體能正常配對(duì)，所以理論上是可育的5、用盆栽優(yōu)質(zhì)鐵皮石斛品種的莖進(jìn)行快速繁殖時(shí)，給莖組織消毒無需使用的是（）A.75%乙醇B.無菌水C.0．5-0．6mol/L的甘露醇D.10%次氯酸鈉6、下列有關(guān)基因工程基本操作程序的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因生物的目的基因都是從供體細(xì)胞中直接分離得到的B.目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因C.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程存在堿基互補(bǔ)配對(duì)D.檢測(cè)目的基因是否表達(dá)可用DNA分子雜交技術(shù)評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)7、下列關(guān)于人早期胚胎發(fā)育過程中桑椹胚和囊胚的敘述中，正確的是（）A.囊胚與桑椹胚相比，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA總量增加B.囊胚期出現(xiàn)了細(xì)胞分化，但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變C.囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞差異不是復(fù)制水平上的差異，而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在輸卵管8、模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對(duì)認(rèn)識(shí)的對(duì)象所做的一種簡(jiǎn)化的概括性描述。對(duì)圖示生物概念模型的分析正確的是（）

A.若該模型表示體外受精技術(shù)，則C不能直接移植到代孕母體B.若該模型表示核移植技術(shù)，則C→D過程與胚胎移植技術(shù)有關(guān)C.若B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞，則C→D的培養(yǎng)過程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象D.若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程，則C可表示Ti質(zhì)粒，D是植物細(xì)胞9、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過程中會(huì)生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件10、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株；并對(duì)其降解纖維素的條件進(jìn)行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境11、甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細(xì)胞雜交，成功地將乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因引入甲中，下圖為該操作示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可使用離心法B.融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后再進(jìn)行組織培養(yǎng)C.雜種細(xì)胞經(jīng)過一定激素和營(yíng)養(yǎng)的誘導(dǎo)，發(fā)育成為雜種植株D.篩選出的雜種植株含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，但只能通過母本進(jìn)行傳遞12、青蒿素主要用于惡性瘧疾的癥狀控制以及耐氯喹蟲株的治療。為了快速檢測(cè)青蒿素；科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗青蒿素的單克隆抗體，其基本操作過程如下圖。以下相關(guān)敘述正確的是（）

A.過程②體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，過程⑤若在體內(nèi)進(jìn)行則操作更簡(jiǎn)單B.過程③常使用選擇培養(yǎng)基，過程④常使用抗原-抗體雜交技術(shù)C.若細(xì)胞乙均由細(xì)胞兩兩融合而成，則細(xì)胞乙、丙、丁的染色體組數(shù)一定相同D.骨髓瘤細(xì)胞通常是從小鼠脾臟中提取的，其表面糖蛋白減少，培養(yǎng)時(shí)失去接觸抑制13、研究人員用無機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對(duì)于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌14、某牧場(chǎng)引進(jìn)一只產(chǎn)肉性能優(yōu)異的良種公羊；為了在短時(shí)間內(nèi)獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場(chǎng)通過以下流程進(jìn)行了相關(guān)操作。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.在體外受精前對(duì)采集到的精子要進(jìn)行獲能處理B.用孕激素對(duì)供體母羊進(jìn)行處理，可獲得更多的卵母細(xì)胞C.為避免受體母羊?qū)χ踩肱咛ギa(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑D.為了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、通過統(tǒng)計(jì)平板上的________________，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。16、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地說，就是按照_____，把一種生物的_____提取出來，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遺傳性狀。17、______——“分子縫合針”18、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為_______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目___________，這是因?yàn)開_____________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測(cè)定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。19、_________℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_______________℃。20、第一步：______21、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。22、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共18分)23、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。()A.正確B.錯(cuò)誤24、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。（選擇性必修3P111）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共5分)25、研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑——內(nèi)皮抑素；它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內(nèi)皮抑素的方法，請(qǐng)分析回答下列問題。

（1）將人的內(nèi)皮抑素基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，能合成人的內(nèi)皮抑素，其原因是_____________________________________________________________。

（2）擴(kuò)增的目的基因與pUC18質(zhì)粒(如下圖所示)都用EcoRⅠ和BamHⅠ進(jìn)行雙酶切；然后用DNA連接酶進(jìn)行連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒。

雙酶切避免了目的基因與載體__________連接；還減少了目的基因與目的基因；載體與載體的連接，提高了重組質(zhì)粒的比例。

（3）大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色物質(zhì)，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有_____________________和氨芐青霉素。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成____________顏色的菌落，原因是__________________。

（4）從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個(gè)菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；獲得粗提表達(dá)產(chǎn)物。將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板，37℃培養(yǎng)。將等量不同濃度的粗提表達(dá)產(chǎn)物加進(jìn)培養(yǎng)孔中，72h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并統(tǒng)計(jì)(或記錄)活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。

。粗提表達(dá)產(chǎn)物濃度/(μg·mL－1)0246810活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目(×102)126210．50．5實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明_____________________________________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)26、閱讀下面的材料；回答問題。

胰島素的應(yīng)用是糖尿病治療歷史上的一個(gè)里程碑。胰島素自1922年用于臨床以來；就成為治療糖尿病的特效藥物。目前全世界糖尿病患者已超過四億，為臨床提供充足；質(zhì)量可靠的胰島素制劑是現(xiàn)代生物制藥領(lǐng)域的一項(xiàng)重要工程。

人胰島素由胰島β細(xì)胞合成；核糖體上最初形成的是前胰島素原單鏈多肽，進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后，信號(hào)肽被切除，形成胰島素原。高爾基體內(nèi)的特異性肽酶將胰島素原的C肽區(qū)域切除，A鏈和B鏈通過二硫鍵形成共價(jià)交聯(lián)的活性胰島素（如圖）。

最初用于臨床的胰島素幾乎都是從豬；牛胰臟中提取的。豬、牛胰島素與人胰島素生理功能相似；但氨基酸序列有微小差異。接受動(dòng)物胰島素治療的患者有5％～10％出現(xiàn)不同程度的過敏反應(yīng)，抗動(dòng)物胰島素抗體還可能對(duì)患者的胰島β細(xì)胞功能產(chǎn)生負(fù)面影響。

隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展；重組人胰島素逐漸取代動(dòng)物胰島素。早期的重組人胰島素生產(chǎn)，采用A；B鏈分別表達(dá)法。后來該方法被胰島素原表達(dá)法取代，即由大腸桿菌合成胰島素原，然后經(jīng)細(xì)胞外酶切獲得胰島素。1987年用酵母菌生產(chǎn)重組人胰島素的方法出現(xiàn)。重組人胰島素的結(jié)構(gòu)與人體自身分泌的胰島素結(jié)構(gòu)完全相同，但無法完全模擬生理胰島素曲線，容易導(dǎo)致血糖波動(dòng)，甚至導(dǎo)致低血糖發(fā)生。

上世紀(jì)90年代；科學(xué)家通過改變胰島素的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)，研制出能更好模擬生理胰島素分泌特點(diǎn)的胰島素類似物，包括速效胰島素和長(zhǎng)效胰島素類似物。例如，將人胰島素B鏈第28位的脯氨酸替換為天門冬氨酸，可有效抑制胰島素單體的聚合，皮下注射這種速效胰島素類似物后，起效快（10-20分鐘起效）；血藥濃度峰值高、藥效消失快，已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用。

（1）用豬胰島素進(jìn)行治療，易誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗豬胰島素抗體，原因是____________。

（2）人胰島素基因有2個(gè)內(nèi)含子。利用大腸桿菌通過胰島素原法生產(chǎn)重組人胰島素，獲取目的基因時(shí)，不宜采用的方法是________

a．直接從細(xì)胞內(nèi)總DNA中分離目的基因。

b．用化學(xué)方法直接人工合成目的基因。

c．以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因。

d．利用PCR擴(kuò)增人胰島素原基因的編碼序列。

（3）與大腸桿菌相比，利用酵母菌生產(chǎn)胰島素的優(yōu)勢(shì)有_____________________。

（4）重組人胰島素工程菌構(gòu)建完成后，還需要通過________工程技術(shù)進(jìn)行胰島素的生產(chǎn)。

（5）正常人胰島素的生理性分泌，可分為基礎(chǔ)胰島素分泌（24小時(shí)持續(xù)脈沖式分泌微量胰島素，維持空腹?fàn)顟B(tài)下血糖穩(wěn)定）和進(jìn)餐后的胰島素分泌。能更好地模擬餐時(shí)生理胰島素曲線的是________（選填“速效”或“長(zhǎng)效”）胰島素類似物。27、塑料膜的主要成分聚乙烯是一種碳?xì)浠衔?；穩(wěn)定性好，不易被分解，易造成“白色污染”。研究人員經(jīng)過分離篩選最終獲得一種能降解聚乙烯的真菌-桔青霉，為利用微生物降解農(nóng)用地膜提供依據(jù)?；卮鹣铝袉栴}：

(1)在實(shí)驗(yàn)過程中，研究人員將獲得的聚乙烯粉末均勻?yàn)⒃谂囵B(yǎng)基甲上，從培養(yǎng)基的碳源及物理性質(zhì)分析，培養(yǎng)基甲是以____________________________培養(yǎng)基，對(duì)配制的甲培養(yǎng)基常采用____________法進(jìn)行滅菌。一段時(shí)間后，從培養(yǎng)基甲上挑選能生長(zhǎng)的菌株，采用____________________法接種獲得5個(gè)真菌的單菌落，儲(chǔ)存?zhèn)溆?。若要長(zhǎng)期保存菌株，常采用的方法是________________。

(2)為確定分離得到的不同菌株分解地膜能力的強(qiáng)弱，可將分離純化獲得的真菌分別接種到含________________的液體培養(yǎng)基中，在一定轉(zhuǎn)速下的搖床上進(jìn)行培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)的目的是________________________________________________________（答兩點(diǎn)）；最后觀察比較各組培養(yǎng)液中地膜體積（面積）的大小，進(jìn)而篩選出高效降解地膜的菌株。

(3)為確定某一培養(yǎng)液中桔青霉的數(shù)量，從中吸取1mL培養(yǎng)液，稀釋100倍，取0.1mL接種到4個(gè)培養(yǎng)基平板上，一段時(shí)間后獲得的菌落數(shù)分別為：25、35、40、42個(gè)，則統(tǒng)計(jì)的平均菌落數(shù)是___________個(gè)。

(4)在不同的土壤使用桔青霉分解地膜的效果存在差異的原因是____________________________。28、供體細(xì)胞的分化狀態(tài)和表觀遺傳修飾模式是影響體細(xì)胞核移植胚胎發(fā)育的重要因素。為研究供體細(xì)胞RNAm6A修飾（即RNA某位點(diǎn)的甲基化）水平對(duì)豬核移植胚胎發(fā)育的影響；研究者進(jìn)行系列實(shí)驗(yàn)。

(1)核移植的受體是_____細(xì)胞，核移植后的重構(gòu)胚發(fā)育至_____階段可利用_____技術(shù)轉(zhuǎn)移到代孕母體子宮內(nèi)以獲得子代個(gè)體，從早期胚胎中分離獲得的具有自我更新和分化潛能的_____可用于醫(yī)學(xué)研究。

(2)RNAm6A修飾可通過提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性來影響早期胚胎發(fā)育。豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（甲組）屬于多能干細(xì)胞，豬胎兒成纖維細(xì)胞（乙組）則是處于分化終端的體細(xì)胞。研究者比較了兩細(xì)胞內(nèi)RNAm6A修飾水平及其作為核供體時(shí)重構(gòu)胚的發(fā)育效率；結(jié)果如圖1；2。

結(jié)果表明，核供體細(xì)胞的分化程度越高，_____越低。

(3)研究發(fā)現(xiàn)甲組細(xì)胞內(nèi)甲基轉(zhuǎn)移酶M（催化RNAm6A修飾）的表達(dá)水平高于乙組，為驗(yàn)證RNAm6A修飾與核移植胚胎發(fā)育能力的關(guān)系，研究者進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：。組別對(duì)核供體細(xì)胞。

的處理方法核移植胚胎發(fā)育能力的檢測(cè)結(jié)果胚胎總數(shù)胚胎卵裂率囊胚率胚胎卵裂率囊胚率對(duì)照組導(dǎo)入空載體18759．4%16．8%實(shí)驗(yàn)組導(dǎo)入M基因過表達(dá)載體18571．3%27%

導(dǎo)入空載體是為了排除_____等對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。結(jié)果表明，_____可提高核移植胚胎的發(fā)育能力。

(4)為研究導(dǎo)致不同供體細(xì)胞RNAm6A修飾水平差異的原因；研究者分析了M基因啟動(dòng)子的甲基化水平，發(fā)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中M基因啟動(dòng)子的甲基化水平為22%，而豬胎兒成纖維細(xì)胞則為50%。

據(jù)此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)組用DNA甲基化抑制劑處理骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；對(duì)照組不處理；檢測(cè)兩組的M基因啟動(dòng)子甲基化水平。

請(qǐng)修正實(shí)驗(yàn)方案：_____

研究者通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了M基因啟動(dòng)子的甲基化是導(dǎo)致不同供體細(xì)胞RNAm6A修飾水平差異的原因。

(5)進(jìn)一步研究表明，RNAm6A修飾水平高的供體細(xì)胞核移植胚胎中DNA損傷位點(diǎn)較少。綜上，推測(cè)豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞核移植胚胎發(fā)育的能力較高的原因：_____。29、PHB2蛋白具有抑制細(xì)胞增殖的作用。為初步探究某動(dòng)物PHB2蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因，研究者從基因數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡(jiǎn)稱phb2基因），大小為0．9kb（1kb=1000堿基對(duì)）；利用大腸桿菌表達(dá)該蛋白?；卮鹣铝袉栴}：

（1）為獲取phb2基因，提取該動(dòng)物肝臟組織的總RNA，再經(jīng)__________過程得到cDNA；將其作為PCR反應(yīng)的模板，并設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物來擴(kuò)增目的基因。

（2）圖1為所用載體圖譜示意圖，圖中限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見下表。為使phb2基因（該基因序列不含圖1中限制酶的識(shí)別序列）與載體正確連接，在擴(kuò)增的phb2基因兩端分別引入__________和__________兩種不同限制酶的識(shí)別序列。經(jīng)過這兩種酶酶切的phb2基因和載體進(jìn)行連接時(shí)，可選用__________（填“E．coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）。

相關(guān)限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)。

。名稱識(shí)別序列及切割位點(diǎn)名稱識(shí)別序列及切割位點(diǎn)HindⅢA↓AGCTTTTCGA↑AEcoRIG↓AATTCCTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTGGTC↑GACPstICTGC↓AGGA↑CGTCKpnIG↓GTACCCCATG↑GBamHIG↓GATCCCCTAG↑G注：箭頭表示切割位點(diǎn)。

（3）轉(zhuǎn)化前需用CaCl2處理大腸桿菌細(xì)胞，使其處于__________的生理狀態(tài)；以提高轉(zhuǎn)化效率。

（4）將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，隨機(jī)挑取菌落（分別編號(hào)為1、2、3、4）培養(yǎng)并提取質(zhì)粒，用（2）中選用的兩種限制酶進(jìn)行酶切，酶切產(chǎn)物經(jīng)電分離，結(jié)果如圖2，________號(hào)菌落的質(zhì)粒很可能是含目的基因的重組質(zhì)粒。

注：M為指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物；小于0．2kb的DNA分子條帶未出現(xiàn)在圖中。

（5）將純化得到的PHB2蛋白以一定濃度添加到人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)液中，培養(yǎng)24小時(shí)后，檢測(cè)處于細(xì)胞周期（示意圖見圖3）不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)量，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖4。分析該蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖可能的原因是將細(xì)胞阻滯在細(xì)胞周期的__________（填“G1”或“S”或“G2/M”）期。

參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

（1）過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）；

（2）原理：植物細(xì)胞的全能性；

（3）條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）；

（4）植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒；人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；此過程中外植體脫分化形成愈傷組織；愈傷組織再分化胚狀體，A正確；

B；愈傷組織是沒有分化的細(xì)胞；B錯(cuò)誤；

C；已分化的植物細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能；即植物細(xì)胞具有全能性，利用此特性可將細(xì)胞培育成植株體，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)要求全程在無菌條件下進(jìn)行；若發(fā)生雜菌污染則難以獲得目的植株，D正確。

故選B。2、C【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官；組織。將材料剪碎；并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機(jī)體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)。

【詳解】

A；結(jié)合分析可知；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中通常會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象，A正確；

B；胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)可分化成多種組織細(xì)胞；因而可以用于治療人類的某些疾病，B正確；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需使用胰蛋白酶將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液；而不能使用胃蛋白酶，C錯(cuò)誤；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等天然成分；從而有利于動(dòng)物細(xì)胞增殖，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。

2；從分子水平上檢測(cè)目的基因的方法：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

A；gRNA與目的基因結(jié)合區(qū)域最多含8種核苷酸（4種脫氧核苷酸和4種核糖核苷酸）；A錯(cuò)誤；

B；Cas9來自于細(xì)菌；細(xì)菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，B錯(cuò)誤；

C；對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)；由于基因序列不同，可能需要使用不同的gRNA，C錯(cuò)誤；

D；CRISPR/Cas9技術(shù)可改變基因堿基排列順序；也可以使某個(gè)基因因?yàn)閴A基序列改變而無法表達(dá)，D正確。

故選D。4、D【分析】【分析】

題圖分析：圖示為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖；其中①是去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程；②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；③是再生形成新的細(xì)胞壁的過程；④是脫分化過程，⑤是再分化過程。

【詳解】

A、經(jīng)①去除植物細(xì)胞壁過程獲得的a、b稱為原生質(zhì)體；A錯(cuò)誤；

B；若只考慮兩兩融合；則融合的細(xì)胞有三種：AA.BB.AABB，B錯(cuò)誤；

C；由分析可知；過程④和⑤分別是脫分化和再分化，C錯(cuò)誤；

D；通過植物體細(xì)胞雜交獲得的植物d；因?yàn)榧?xì)胞中有同源染色體存在，在減數(shù)分裂時(shí)能正常的聯(lián)會(huì)、配對(duì)，所以可育，D正確。

故選D。5、C【分析】【分析】

植物組織胚芽王過程中外植體的消毒：外植體用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30s→無菌水沖洗→吸干表面的水分；放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞和10%的次氯酸鈣溶液中2～4min→無菌水再?zèng)_洗3～5次。

【詳解】

根據(jù)分析；在對(duì)外植體消毒的過程中，首先用70%的酒精浸泡30s，再用無菌水沖洗，然后用10%的次氯酸鈣溶液中浸泡2～4min，再用無菌水沖洗，而適宜濃度甘露醇能維持細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓，防止細(xì)胞吸水脹破，因此給莖消毒時(shí)無需使用甘露醇。

故選C。6、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物所需的目的基因可以從供體細(xì)胞中直接分離得到；也可從基因文庫(kù)中獲得或人工合成，A錯(cuò)誤；

B；目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因；也可以是一些具有調(diào)控作用的因子，B正確；

C；由分析可知；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)，不存在堿基互補(bǔ)配對(duì)，C錯(cuò)誤；

D；檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出產(chǎn)物用的是抗體-抗原雜交法；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共8題，共16分)7、B:C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程：（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎；（3）囊胚：細(xì)胞開始分化，其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔；（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；由桑椹胚發(fā)育到囊胚進(jìn)行的是有絲分裂；形成的每個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA總量不變，A錯(cuò)誤；

B；囊胚期細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化；但細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，因此其遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變，B正確；

C；囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞的差異不是DNA復(fù)制水平上的差異；而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異，即基因的選擇性表達(dá)，C正確；

D；受精卵在輸卵管中形成；后在子宮中發(fā)育，故胚胎發(fā)育的早期不可能在卵巢，D錯(cuò)誤。

故選BC。8、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表達(dá)載體是目的基因和載體重組后形成的。

2；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵的過程。

3；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；能夠分裂和分化。

4；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；若該模型表示體外受精技術(shù)；則C（受精卵）不能直接移植到代孕母體，需要將C移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，才可以將其取出向受體移植，A正確；

B；若該模型表示核移植技術(shù)；A和B表示供體細(xì)胞核和去核的卵細(xì)胞，則C→D過程表示胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)，B正確；

C；若A、B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞；則C→D的傳代培養(yǎng)過程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象，C正確；

D；若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程；則C可表示重組Ti質(zhì)粒，D是農(nóng)桿菌，D錯(cuò)誤。

故選ABC。9、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程；B錯(cuò)誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說明在發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯(cuò)誤。

故選AC。10、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)pH為9時(shí)，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)溫度為35℃時(shí)纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實(shí)驗(yàn)組，故無法判斷該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯(cuò)誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】11、A:B:C【分析】【分析】

題圖分析：該圖為體細(xì)胞雜交過程；其中A為去除細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體，可以用酶解法，B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細(xì)胞應(yīng)該具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因，甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因，該過程的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有化學(xué)法（聚乙二醇）和物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）兩大類；A正確；

B；雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁是細(xì)胞融合成功的標(biāo)志；融合成功之后再進(jìn)行組織培養(yǎng)，B正確；

C；雜種細(xì)胞經(jīng)過外源生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo)；脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，進(jìn)一步成為雜種植株，C正確；

D；甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；雜種植株細(xì)胞核內(nèi)含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因，因此精子中具備一半核基因，并可通過父本（精子）進(jìn)行傳遞，D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

題圖分析：過程①為注射抗原；誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生具有免疫能力的B細(xì)胞；過程②為將具有免疫能力的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；過程③用選擇性培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞；過程④用抗體檢測(cè)和克隆培養(yǎng)得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；過程⑤為提取單克隆抗體。

【詳解】

A；過程②為將具有免疫能力的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性；過程⑤為提取單克隆抗體，若在體內(nèi)進(jìn)行（可從小鼠腹水中提取），則操作更簡(jiǎn)單，A正確；

B；過程③是篩選雜交瘤細(xì)胞；常使用選擇培養(yǎng)基（未融合的細(xì)胞，融合的具有相同核的細(xì)胞均死亡，雜交瘤細(xì)胞能正常生存）；過程④用抗體檢測(cè)和克隆培養(yǎng)得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，常使用抗原—抗體雜交技術(shù)，B正確；

C；因細(xì)胞甲和細(xì)胞乙均來源于小鼠；若細(xì)胞乙均由細(xì)胞兩兩融合而成，則細(xì)胞乙和經(jīng)篩選后的丙、丁的染色體組數(shù)一定相同，C正確；

D；骨髓瘤細(xì)胞是從小鼠的骨髓中提取的；脾臟中無骨髓瘤細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

故選ABC。13、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機(jī)鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會(huì)導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象，對(duì)生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。14、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①對(duì)供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體）。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對(duì)胚胎的收集；檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查；此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑甚胚或胚囊胚階段。④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。

⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；采集到的良種公羊的精子；在體外受精前要進(jìn)行獲能處理，A正確；

B；對(duì)本地母羊注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵；進(jìn)而獲得更多卵母細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；受體母羊?qū)σ迫胱訉m的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；不需要注射免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；

D；采用胚胎分割技術(shù)可提高已有胚胎的利用率；D正確。

故選BC。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30016、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因重組基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細(xì)胞里定向17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶18、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測(cè)定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識(shí)記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2018～2520、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代22、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記四、判斷題(共2題，共18分)23、A【分析】【分析】

早期胚胎發(fā)育從受精卵開始；當(dāng)卵裂分裂到16-32個(gè)細(xì)胞時(shí)，卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑葚時(shí)，這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。胚胎進(jìn)一步發(fā)育，細(xì)胞開始出現(xiàn)分化，形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；滋養(yǎng)層；隨著胚胎進(jìn)一步發(fā)育，胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時(shí)期聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)，故“胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化表述”正確。24、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。故該說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共5分)25、略

【分析】【分析】

此題考查了基因工程技術(shù)；目的基因的獲得方法有三種：從基因文庫(kù)中獲??；PCR技術(shù)擴(kuò)增、人工合成法；基因表達(dá)載體中的LacZ基因被插入滅活。

（1）

將人的內(nèi)皮抑素基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中；能合成人的內(nèi)皮抑素，其原因是各種生物共用一套密碼子，且蛋白質(zhì)的合成都經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。

（2）

雙酶切后；目的基因兩端的黏性末端不同，被切開的運(yùn)載體兩端的黏性末端也不同，這樣可以避免目的基因與載體反向連接，還能減少目的基因與目的基因；載體與載體的連接，還減少了目的基因和質(zhì)粒的自身連接，提高了重組質(zhì)粒的比例。

（3）

大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因；LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖；氮源、無機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有IPTG、Xgal和氨芐青霉素，要使其形成菌落還要加入瓊脂形成固體培養(yǎng)基。因?yàn)橹亟M質(zhì)粒的LacZ基因中插入了目的基因，使LacZ基因不能表達(dá)出β﹣半乳糖苷酶，所以成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成白色菌落。

（4）

由表中數(shù)據(jù)可知；粗提表達(dá)產(chǎn)物濃度越高，活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目越少，說明重組內(nèi)皮抑素（或粗提表達(dá)產(chǎn)物）能夠抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的理解應(yīng)用能力和信息轉(zhuǎn)化能力，屬于中等難度題?！窘馕觥浚?）各種生物共用一套密碼子；且蛋白質(zhì)的合成都經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。

（2）反向(任意)

（3）IPTG；Xgal、瓊脂白重組質(zhì)粒的LacZ基因中插入了目的基因；使LacZ基因不能表達(dá)出β－半乳糖苷酶。

（4）重組內(nèi)皮抑素(或粗提表達(dá)產(chǎn)物)能夠抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖六、綜合題(共4題，共12分)26、略

【分析】【分析】

1；獲得目的基因的方法：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取；②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；③人工合成（化學(xué)合成）。

2；原核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中只有核糖體一種細(xì)胞器。

（1）

豬胰島素可以作為抗原；引起人體產(chǎn)生體液免疫，從而產(chǎn)生抗豬胰島素抗體，因此用豬胰島素進(jìn)行治療，易誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗豬胰島素抗體。

（2）

a；人胰島素基因有2個(gè)內(nèi)含子；而大腸桿菌的基因沒有內(nèi)含子，為了使目的基因能夠在大腸桿菌中表達(dá)出正確的蛋白質(zhì)，獲取的目的基因不應(yīng)該含有內(nèi)含子，而直接從細(xì)胞內(nèi)總DNA中分離的目的基因含有內(nèi)含子，a符合題意；

b、用化學(xué)方法直接人工合成的目的基因不含內(nèi)含子，可在大腸桿菌內(nèi)準(zhǔn)確表達(dá)，b不符合題意；

c；以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因不含內(nèi)含子；可在大腸桿菌內(nèi)準(zhǔn)確表達(dá)，c不符合題意；

d；利用PCR擴(kuò)增人胰島素原基因的編碼序列；獲得的目的基因不含內(nèi)含子，可在大腸桿菌內(nèi)準(zhǔn)確表達(dá)，d不符合題意。

故選a。

（3）

與大腸桿菌細(xì)胞相比；酵母菌細(xì)胞屬于真核細(xì)胞，利用酵母菌生產(chǎn)胰島素的優(yōu)勢(shì)是具有原核生物無法比擬的真核生物蛋白翻譯后修飾加工系統(tǒng)（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工），可對(duì)前胰島素原進(jìn)行翻譯后加工。

（4）

重組人胰島素工程菌構(gòu)建完成后；進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)胰島素還需要采用發(fā)酵工程技術(shù)進(jìn)行胰島素的生產(chǎn)。

（5）

進(jìn)餐后；血糖濃度升高，胰島素分泌增加，根據(jù)“皮下注射這種速效胰島素類似物后，起效快（10-20分鐘起效）；血藥濃度峰值高、藥效消失快”，可知能更好地模擬餐時(shí)生理胰島素曲線的是速效胰島素類似物。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥浚?）豬胰島素可作為抗原；引起人體產(chǎn)生體液免疫。

（2）a

（3）具有原核生物無法比擬的真核生物蛋白翻譯后修飾加工系統(tǒng)；可對(duì)前胰島素原進(jìn)行翻譯后加工。

（4）發(fā)酵。

（5）速效27、略

【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基的制作過程是:計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)整pH、分裝、滅菌、倒平板冷凝后；應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置。

2；選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物；僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

3；實(shí)驗(yàn)室常用的接種方法有平板劃線法或稀釋涂布平板。

(1)

根據(jù)題干信息可知；要分離篩選出一種能降解聚乙烯的真菌-桔青霉，則應(yīng)該選用以聚乙烯為唯一碳源的固體培養(yǎng)基；經(jīng)常使用高壓蒸汽滅菌對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)室常用的接種方法有平板劃線法或稀釋涂布平板，故從培養(yǎng)基甲上挑選能生長(zhǎng)的菌株，采用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種獲得5個(gè)真菌的單菌落，儲(chǔ)存?zhèn)溆?；獲得菌種后若要短期保存，可將菌種接種在固體斜面培養(yǎng)基上，放在4℃冰箱中；若要長(zhǎng)期保存，常采用甘油管藏法。

(2)

確定分離得到的不同菌株分解地膜能力的強(qiáng)弱；自變量為菌株種類，因變量為分解地膜能力，地膜條大小為無關(guān)變量，則應(yīng)該保持培養(yǎng)基中的地膜條大小相同；搖床培養(yǎng)的目的是使降解菌能充分吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；增大培養(yǎng)液中的氧容量，有利于降解菌的生長(zhǎng)繁殖；有利于降解菌的代謝廢物排出等。

(3)

4個(gè)培養(yǎng)基平