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降脂與降糖活性研究綜述目錄TOC\o"1-2"\h\u7176降脂與降糖活性研究綜述 1215111.1體外降脂降糖活性研究方法 1315111.1.1膽酸鹽含量檢測方法 1166271.1.2胰脂肪酶活性檢測方法 214531.1.3α-淀粉酶活性檢測方法 2241291.2膽酸鹽結(jié)合研究進展 2253841.2.1膽酸鹽概述 2245041.1.2膽酸鹽結(jié)合機理 3252631.1.3膽酸鹽結(jié)合劑概況 3247161.3胰脂肪酶抑制研究進展 4165391.3.1胰脂肪酶概述 424721.3.2胰脂肪酶抑制劑概況 4205501.4α-淀粉酶抑制研究進展 4160741.5體內(nèi)降脂降糖活性研究方法 51.1體外降脂降糖活性研究方法目前關(guān)于測定體外降脂活性方法主要有體外結(jié)合膽酸鹽能力和抑制胰脂肪酶活性等,而體外降糖活性主要從對抑制淀粉酶活性和葡萄糖苷酶活性等方面進行測定。1.1.1膽酸鹽含量檢測方法測定膽酸鹽含量的主要方法有紫外分光光度法、糠醛比色法和高效液相色譜法等。紫外分光光度法的原理是因為膽汁酸的本身缺乏π電子,不能發(fā)生電子躍遷,對其進行紫外掃描時沒有特殊吸收波長,但通過添加濃硫酸會將其變?yōu)榉宇愇镔|(zhì),在387nm時會出現(xiàn)吸收峰。其方法操作簡單,但靈敏性低??啡┍壬ㄊ菣z測膽酸鹽含量的一種常用的方法,其原理是糠醛分子的羧基會在濃硫酸催化下與膽汁酸分子的羥基發(fā)生縮合反應,對反應物質(zhì)進行紫外掃描時,膽汁酸分子會在490~550nm的波長范圍內(nèi)產(chǎn)生明顯的吸收峰。該檢測方法較為簡便,并且靈敏度高,準確度和重現(xiàn)率較好。高效液相色譜法是近年來流行的方法,主要用于膽汁酸含量的精密檢測,其結(jié)果較為穩(wěn)定,最低檢測限值低,但操作方法較為復雜,成本較高。1.1.2胰脂肪酶活性檢測方法測定胰脂肪酶活性的檢測方法主要有堿滴定法、對硝基苯酚(PNP)法和銅皂法等。堿滴定法的原理是油脂會在胰脂肪酶的作用下水解產(chǎn)生游離脂肪酸,使用NaOH標準溶液作為滴定液,酚酞溶液作為指示劑,以每分鐘產(chǎn)生的脂肪酸含量作為胰脂肪酶活力單位,從而測得胰脂肪酶的活性,該測定速度快,但準確性不高。PNP法的原理是對硝基苯酚棕櫚酸酯(PNPP)在胰脂肪酶的作用下產(chǎn)生PNP,PNP在405nm下有吸收峰,通過測定吸光度值來得出胰脂肪酶的活性。銅皂法是利用苯溶液來萃取脂肪酸再加入醋酸銅顯色劑,離心后取有機相,在710nm下測定吸光度值以得到胰脂肪酶的活性,該方法比較繁瑣,且具有一定的毒性,較少使用(江慧芳2007)。1.1.3α-淀粉酶活性檢測方法檢測α-淀粉酶的方法主要有:碘比色法、3,5-二硝基水楊酸(DNS)比色法和凝膠擴散法等,其中最常用的是DNS比色法。該方法的原理是淀粉水解后會生成還原性糖,還原糖和DNS加熱后反應生成紅棕色的氨基化合物,化合物在580nm波長下具有最大吸收峰,通過測定吸光度值來得出α-淀粉酶的活性(張雪嬌等2020)。1.2膽酸鹽結(jié)合研究進展1.1.1膽酸鹽概述人體內(nèi)的膽細胞可以分泌膽汁,其中膽汁酸是膽汁的主要成分,其他成分包括水、膽固醇、無機鹽等。大多數(shù)的膽汁酸會和鈉離子、鉀離子、甘氨酸和?;悄懰嵯嘟Y(jié)合而形成膽(汁)酸鹽。膽汁酸鹽在結(jié)構(gòu)上既具有磺酸基、羥基等親水基團,又具有甲基等疏水的基團。由于具有兩種的親側(cè)面基團,所以膽汁酸鹽具有較強的界面活性(Alrefai2007)。根據(jù)不同的來源可將膽汁酸分為兩種類型:初級膽汁酸和次級膽汁酸。初級膽汁酸是來源于肝臟,由其中的膽固醇在肝臟細胞微液和線粒體中一系列轉(zhuǎn)錄酶的作用下催化而來的。根據(jù)形態(tài)分布,可以將初級膽汁酸分為:游離型和結(jié)合型。其具有較強的親水性能力,極性高的特點,可以與鉀鈉離子結(jié)合而形成膽汁酸鹽。次級膽汁酸是將初級膽汁酸被腸道中微生物的分解脫羥而形成的,同樣分為游離型和結(jié)合型。前者包括脫氧膽酸和石膽酸,而后者包括甘氨脫氧膽酸和?;敲撗跄懰幔⊿jovall1960)。在肝臟中的膽細胞首先分泌產(chǎn)生膽汁,在腸道中絕大多數(shù)的膽酸鹽會經(jīng)過重吸收,重回血液中經(jīng)過靜脈循環(huán)的方式重新回到肝臟中。在腸道循環(huán)中游離型膽汁酸會變?yōu)榻Y(jié)合型膽汁酸,兩種方式得到的結(jié)合型膽汁酸會和膽汁一起進入腸道中。整個過程就是膽汁酸鹽的腸道循環(huán)過程。在腸道中對于膽酸鹽的重吸收的類型大多是主動型,有少量游離型膽汁酸會通過被動型重吸收的作用而回到血液中,石膽酸和復溶物不被吸收而直接通過糞便排出(Zarras1999)。1.1.2膽酸鹽結(jié)合機理膽酸鹽的生物合成與代謝起到著維持體內(nèi)膽固醇水平平衡的作用,如果膽汁酸在循環(huán)前被結(jié)合,從而不能進入肝臟,會促進肝臟膽固醇的降解得到的更多的膽汁酸,從而使血液中的膽固醇進入肝臟(彭新磊1998)。膽酸鹽的結(jié)合劑可以降血脂,在腸道中與膽汁酸相結(jié)合會降低其重吸收率,不溶的復合物增多,排泄物的增多會使得膽汁酸無法從腸道循環(huán)而回到肝臟,從而促使膽汁酸的含量增多,降低血液或肝臟中的膽固醇含量。1.1.3膽酸鹽結(jié)合劑概況膽酸鹽結(jié)合劑是指可以在腸道循環(huán)過程中結(jié)合膽酸鹽形成不溶性物質(zhì)并排出體外,從而增加膽汁酸的分泌,增強分解膽固醇的能力,從而減少膽固醇的含量。膽酸鹽結(jié)合劑可分為陰離子交換樹脂和膳食纖維結(jié)合劑。研究表明,不溶性的膳食纖維的對膽酸鹽的結(jié)合能力要強于可溶性膳食纖維。膳食纖維結(jié)合膽酸鹽包括直接結(jié)合作用、結(jié)合水分和溶脹作用三種。Zacherl等(2011)發(fā)現(xiàn)檸檬中膳食纖維是通過直接結(jié)合的方式來結(jié)合膽酸鹽;燕麥β-葡聚糖、果膠等多糖既可以通過直接結(jié)合的方式來結(jié)合膽酸鹽,也可以經(jīng)過水分結(jié)合,增加胃腸道的粘度來增加膽酸鹽的排出量;某些海藻類膳食纖維可以通過溶脹作用來降低膽酸鹽的濃度。Kahlon(2000)等人研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)燕麥麩中不溶性膳食纖維體外結(jié)合膽酸鹽的能力存在著很大的差異,米麩的降血脂機理與其結(jié)合膽酸鹽的能力呈正相關(guān)。1.3胰脂肪酶抑制研究進展1.3.1胰脂肪酶概述在日常進食中的絕大部分脂肪都是經(jīng)過TG而吸收的,整個消化過程是食物從進入開始,在腸道中被脂肪酶消化水解,隨后經(jīng)過十二指腸中胰脂肪酶(PPL)和其輔酶的作用下,水解生成游離脂肪酸和單脂等產(chǎn)物。在人進食后,自由脂肪酶經(jīng)過腸道循環(huán),通過依靠脂蛋白來運輸?shù)讲煌钠鞴伲瑥亩纬尚碌腡G分子。而PPL在TG的有效消化中起著重要作用。能夠負責一半以上的膳食脂肪的水解。因此,胰脂肪酶水解飲食中絕大多數(shù)的脂肪,其產(chǎn)生的脂肪酸與甘油單酯會結(jié)合膽固醇和膽鹽等物質(zhì)而形成凝膠基團,這些基團會被腸道細胞所吸收從而形成人體的甘油三酯,過度的脂肪積累將會形成肥胖。抑制PPL的活性,從而減少TG的吸收,是降低血脂水平,改善肥胖的一大方面。如今,唯一臨床批準使用的抑制PPL活性的藥物只有奧利司他,但其使用后會有腹脹腹瀉、便秘、油性斑點等副作用。而天然的PPL抑制劑并不會有這些毒副作用,所以從天然產(chǎn)物中尋找高效、低毒的PPL抑制劑就成了如今研究的熱點。1.3.2胰脂肪酶抑制劑概況PPL的抑制劑主要來源有三種,分別是化學合成產(chǎn)物、天然產(chǎn)物和微生物的代謝產(chǎn)物,而治療肥胖的PPL抑制劑主要來源于后兩者。其中天然產(chǎn)物主要包括皂苷、黃酮和多酚類等從天然植物中提取的產(chǎn)物。如今有研究發(fā)現(xiàn),多糖類化合物在降脂方面有著不錯的效果。多糖類化合物對動物的TG、TC、LDL-C和游離脂肪酸等血脂的代謝指標有不錯的抑制效果,并可以提高血液中HDL-C的含量。李向陽等研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)金釵石斛多糖能明顯降低高脂飲食大鼠血清中的TG、TC、LDL-C的含量,抵消其肝臟細胞的脂肪化效果。楮盼盼等(2015)的研究結(jié)果表明苦蕎麥多糖對PPL有著良好的抑制效果,抑制率可達到50%以上。植物多糖在抑制胰脂肪酶活性方面是值得深入研究的1.4α-淀粉酶抑制研究進展抑制α-淀粉酶的活性是控制血糖水平的重要影響因素,通過抑制淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶,可以延遲餐后血糖的升高,控制血糖指數(shù)的升高,對胰島素的抗性也有一定的幫助。α-淀粉酶在消化途徑中發(fā)揮重要作用,可將食物中的碳水化合物轉(zhuǎn)化為葡萄糖,經(jīng)小腸進入血液而升高血糖,一些已投入使用的抗糖藥物,如阿卡波糖、米格列醇等,通過抑制α-淀粉酶等腸道關(guān)鍵酶的活性,來控制糖尿病患者飯后的血糖含量。天然產(chǎn)物及微生物的代謝產(chǎn)物有著不錯抑制α-淀粉酶的效果,例如茶葉(Wangetal2010)、玫瑰茄(Hansawasdi2020)等提取物都對α-淀粉酶有著不錯的抑制效果。王飛等(2012)在研究桃膠多糖的降血糖活性作用時,發(fā)現(xiàn)桃膠多糖可以通過抑制α-淀粉酶的方式來降低血糖水平。Hasan等(2014)研究表明石巖楓多糖具有α-淀粉酶抑制活性,并在之后的動物試驗中發(fā)現(xiàn)其能有效降低大鼠的血糖水平。BelHadj等人(2013)研究發(fā)現(xiàn)石莼多糖干預下的糖尿病大鼠模型的血漿和小腸中α-淀粉酶活性受到抑制,并且血漿中TG和TC水平有著明顯的下,說明石莼多糖具有治療糖尿病的潛在作用。如今

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