2025年魯科五四新版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年魯科五四新版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、自從第一株轉(zhuǎn)基因植物問(wèn)世以來(lái)，已有數(shù)十種乃至上百種轉(zhuǎn)基因植物在世界各地的實(shí)驗(yàn)室中誕生，隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，“基因污染”應(yīng)運(yùn)而生，下列關(guān)于基因污染的說(shuō)法不正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因植物的果實(shí)或其他部分作為食物可能會(huì)引起食用者產(chǎn)生不良反應(yīng)B.轉(zhuǎn)基因植物可能與它們的近緣野生物種發(fā)生自然雜交，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性C.基因污染是一種不可以增殖的污染D.為了防止轉(zhuǎn)基因的擴(kuò)散，在大面積種植時(shí)，必須在周圍設(shè)置緩沖帶作物2、科學(xué)家經(jīng)過(guò)多年的努力，創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)DNA重組技術(shù)，實(shí)施該技術(shù)的最終目的是（）。A.定向提取生物體的DNA分子B.定向地對(duì)DNA分子進(jìn)行“剪切”C.在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造D.定向地改造生物的遺傳性狀3、下列導(dǎo)致各種“膜”產(chǎn)生的微生物，錯(cuò)誤的是（）A.果酒發(fā)酵早期液面的白膜，酵母菌B.變酸的果酒液面的白膜，醋酸菌C.腐乳外部致密的膜（皮），毛霉D.泡菜壇內(nèi)的白膜，乳酸菌4、下列關(guān)于DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.用豬血作為材料，原因是豬血紅細(xì)胞有細(xì)胞核B.用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定，原因是DNA溶液中加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色C.用酒精進(jìn)行提純，原因是DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)不溶于酒精D.用不同濃度的NaCl溶液進(jìn)行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同5、如圖為植物組織培養(yǎng)的流程圖，圖中①②表示相關(guān)過(guò)程，③表示相關(guān)結(jié)構(gòu)。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖中①、②依次為脫分化、再分化過(guò)程B.胚狀體的全能性比愈傷組織的全能性高C.人工種子發(fā)育為植株起關(guān)鍵作用的是③中的人工胚乳D.培育脫毒馬鈴薯，外植體宜選用莖尖也可選用葉片6、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用的敘述，不正確的是（）A.可以將抗病蟲害、抗除草劑等基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物使其具有相應(yīng)的抗性B.可以使用DNA重組技術(shù)，使微生物生產(chǎn)稀缺的藥物，如免疫球蛋白等C.可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)使奶牛變成生物反應(yīng)器，使它們的奶中富含某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、珍貴藥材或人類所需要的蛋白質(zhì)D.將不同生物的DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)移和重組，會(huì)創(chuàng)造出新物種評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中；果醋的制作往往在果酒制作基礎(chǔ)上進(jìn)行。下圖甲是醋酸發(fā)酵裝置，乙是培養(yǎng)液pH變化曲線圖，下列敘述不正確的是（）

A.發(fā)酵初期不通氣，溶液中沒有氣泡產(chǎn)生B.中期可以聞到酒香，說(shuō)明進(jìn)行了酒精發(fā)酵C.后期接種醋酸菌，適當(dāng)通氣并保持原有溫度D.圖乙中能正確表示pH變化的曲線是③8、下列選項(xiàng)是科學(xué)家對(duì)自身克隆結(jié)果的預(yù)測(cè)及理由，其中正確的是（）A.克隆產(chǎn)物是科學(xué)家，因?yàn)榭寺∈切纬赏耆粯拥漠a(chǎn)品B.克隆產(chǎn)物是普通人，因?yàn)榭茖W(xué)知識(shí)是后天獲得的，而非遺傳C.克隆產(chǎn)物與該科學(xué)家完全一樣，因?yàn)檫z傳物質(zhì)完全來(lái)自科學(xué)家D.只能克隆部分器官，不可能克隆完整的人，因?yàn)榭寺〖夹g(shù)有限9、用XhoI和SalI兩種限制性內(nèi)切核酸酶分別單獨(dú)酶切同一種DNA片段；酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果如圖。以下敘述錯(cuò)誤的是（）

A.XhoI和SalI兩種酶識(shí)別的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物C.泳道②中的酶切產(chǎn)物可用DNA連接酶拼接成一個(gè)重組DNA分子D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA10、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動(dòng)物、哺乳動(dòng)物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對(duì)癌細(xì)胞甚至感染了病毒的宿主細(xì)胞均具有殺傷作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過(guò)程B.抗菌肽改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)抗菌肽時(shí)，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對(duì)抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路11、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.克隆羊、試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是頂體反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)D.滋養(yǎng)層細(xì)胞在囊胚期發(fā)育成胎膜和胎盤并可用于性別鑒定12、為對(duì)某樣品中噬菌體計(jì)數(shù)，工作人員將0.1mL稀釋倍的噬菌體樣品與敏感細(xì)菌混合后平鋪在平板上培養(yǎng)一段時(shí)間，長(zhǎng)滿細(xì)菌的平板因部分細(xì)菌被噬菌體裂解而形成圓形透明斑，即噬菌斑（1個(gè)噬菌斑為1個(gè)pfu），噬菌體效價(jià)可用每毫升樣品中含有的pfu數(shù)表示。下列敘述正確的是（）

A.透明的平板培養(yǎng)一段時(shí)間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，是由細(xì)菌大量繁殖造成的B.噬菌體樣品應(yīng)有足夠的稀釋度，以保證初期一個(gè)細(xì)菌最多被一個(gè)噬菌體吸附C.若平均每個(gè)平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價(jià)為1.5×108pfu/mLD.若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細(xì)菌，噬菌斑計(jì)數(shù)結(jié)果比樣品中實(shí)際活噬菌體數(shù)偏低13、某實(shí)驗(yàn)小組利用下圖所示質(zhì)粒和目的基因來(lái)構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞并表達(dá)。下列敘述正確的是（）

A.圖中的質(zhì)粒用酶A切割后，會(huì)產(chǎn)生4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用酶A和酶C切割質(zhì)粒和目的基因C.成功導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)D.若用酶B和酶C切割，可以避免質(zhì)粒的自身環(huán)化14、研究發(fā)現(xiàn)，跨膜糖蛋白CD47與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，能抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞表面的高，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。為驗(yàn)證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是（）

A.①過(guò)程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原B.②過(guò)程依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性C.③過(guò)程需要進(jìn)行抗體檢測(cè)D.與對(duì)照組相比，圖中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)會(huì)下降15、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長(zhǎng)素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、醋酸菌是一種____________細(xì)菌。醋酸生成反應(yīng)式是_____________________。17、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。18、___________（簡(jiǎn)稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術(shù)，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。19、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。20、去除DNA中的雜質(zhì)，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調(diào)節(jié)NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________21、隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物相繼問(wèn)世，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物培育過(guò)程中都要用到的生物技術(shù)包括______。

（2）核移植是動(dòng)物克隆的第一步，包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時(shí)期）的______為受體細(xì)胞。

（3）在“試管動(dòng)物”的培育過(guò)程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個(gè)體一次排出多枚卵母細(xì)胞。從雄性個(gè)體采集的精子需______后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為______；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）若考慮環(huán)境承載力，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物不宜放置到自然環(huán)境中，這遵循了生態(tài)工程的______原理。22、請(qǐng)寫出基因工程的概念：_________________。請(qǐng)寫出胚胎移植的概念：_____________________。請(qǐng)分別寫出植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。23、在我國(guó)市場(chǎng)上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問(wèn)題，進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對(duì)該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國(guó)市場(chǎng)上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點(diǎn)是什么_____？24、干細(xì)胞的應(yīng)用：有著_____能力及_____的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、_____和_____等密切相關(guān)。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)25、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿一異戊醇，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入氯仿一異戊醇離心后，應(yīng)?、賍_____加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對(duì)玉米開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進(jìn)行的四種人工繁殖過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，外植體需要進(jìn)行消毒處理。利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用________消毒30s后；用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導(dǎo)，對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進(jìn)苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是_______（填下列序號(hào)）。

①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散②剛?cè)诤系碾s交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離。

③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細(xì)胞的形態(tài)大小一致26、酵母菌是制作馬奶酒的重要發(fā)酵菌種；實(shí)驗(yàn)人員將馬奶酒中分離到的酵母菌和野生型酵母菌分別加入馬奶中進(jìn)行馬奶酒的發(fā)酵，相關(guān)物質(zhì)變化如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)酵母菌是制作馬奶酒的要發(fā)酵菌種，從同化作用的類型看，酵母菌屬于_____（填“自養(yǎng)型”或“異養(yǎng)型”）生物；從細(xì)胞呼吸類型看，酵母菌屬于_____型生物。

(2)將馬奶酒加入發(fā)酵裝置時(shí)，一般要預(yù)留約1/3的空間，其目的是_____（答出1點(diǎn)）。發(fā)酵過(guò)程中，一般將溫度控制在_____℃進(jìn)行發(fā)酵。

(3)馬奶中的糖類主要是乳糖，馬奶中的某些微生物能將乳糖分解為葡萄糖和半乳糖，進(jìn)而被酵母菌利用產(chǎn)生酒精，制成馬奶酒。據(jù)圖分析，野生型酵母菌優(yōu)先利用_____進(jìn)行酒精發(fā)酵，與野生型酵母菌相比，馬奶酒酵母菌優(yōu)先利用_____進(jìn)行酒精發(fā)酵，且大量產(chǎn)生酒精階段，馬奶酒酵母菌產(chǎn)生酒精的速率_____（填“更快”或“更慢”）。27、某些老陳醋會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)氣現(xiàn)象；原因是老陳醋中含有產(chǎn)氣細(xì)菌。產(chǎn)氣細(xì)菌是一類能產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶的細(xì)菌，產(chǎn)氣菌產(chǎn)生的氣體積累會(huì)引起脹瓶，影響產(chǎn)品安全。實(shí)驗(yàn)小組以瓶裝變質(zhì)老陳醋（脹瓶）；未變質(zhì)老陳醋為實(shí)驗(yàn)材料，篩選出導(dǎo)致老陳醋產(chǎn)氣的細(xì)菌。回答下列問(wèn)題：

(1)為了篩選產(chǎn)氣細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)人員設(shè)置了甲、乙、丙三組培養(yǎng)基，甲作為空白對(duì)照組，乙接種未變質(zhì)的老陳醋，丙接種__________。闡述如何從上述培養(yǎng)基中初步篩選疑似產(chǎn)氣細(xì)菌的菌株：__________。

(2)實(shí)驗(yàn)小組初步篩選出了A1；A2和A3三株疑似的產(chǎn)氣細(xì)菌；篩選過(guò)程如下圖所示。

①過(guò)程a的接種方法是__________，判斷依據(jù)是__________。

②統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致__________，或培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)導(dǎo)致__________。

③現(xiàn)有5%的過(guò)氧化氫溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)器材。寫出判斷A1、A2和A3三種菌株是否為產(chǎn)氣細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)思路：__________。

(3)分別用三組平板培養(yǎng)A1、A2、A3三種菌株，然后在培養(yǎng)基上分別加入等量一定濃度的青霉素溶液，培養(yǎng)一段時(shí)間后可以觀察到一圈清晰區(qū)（抑菌圈），這是細(xì)菌生長(zhǎng)被抑制所致。測(cè)量清晰區(qū)的直徑，數(shù)據(jù)如下表所示：。細(xì)菌不同濃度青霉素條件下清晰區(qū)直徑/mm5/（μg·mL-1）7.5/（μg·mL-1）10/（μg·mL-1）15/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）A10.2281317A2710121516A356566

該實(shí)驗(yàn)的目的是__________。從表中數(shù)據(jù)可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的區(qū)別是__________、__________。28、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來(lái)了無(wú)限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問(wèn)題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過(guò)_______________法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共36分)29、疫苗接種是當(dāng)前新冠肺炎疫情防控工作的一項(xiàng)重要舉措；我國(guó)科學(xué)家研發(fā)了多種新冠疫苗，其中重組腺病毒疫苗研發(fā)策略是：將新冠病毒的S蛋白基因整合到腺病毒DNA中，形成表達(dá)S蛋白的重組腺病毒，注射到健康人體內(nèi)，腺病毒可侵染人體細(xì)胞，達(dá)到預(yù)防新冠病毒感染的效果。

（1）與直接將S蛋白注射到體內(nèi)作為疫苗相比，重組腺病毒疫苗的優(yōu)點(diǎn)是可以引起人體產(chǎn)生__________免疫；更有效清除病毒。

（2）為了構(gòu)建重組腺病毒DNA；需要將S蛋白基因插入腺病毒DNA中，由于腺病毒DNA分子較大，傳統(tǒng)的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理效率較低，所以采取如圖1所示方法獲得重組腺病毒DNA。

將質(zhì)粒1和質(zhì)粒2共同導(dǎo)入受體細(xì)胞中，據(jù)圖推測(cè)，最終重組線性DNA分子上，X所示的原件應(yīng)該為_____________。

（3）生產(chǎn)疫苗的過(guò)程是將上述重組線性DNA分子（不編碼病毒復(fù)制必需的E1蛋白）導(dǎo)入到293細(xì)胞系（該細(xì)胞系可表達(dá)人體細(xì)胞沒有的E1蛋白），最終包裝成完整的腺病毒。這種方式生產(chǎn)的疫苗由于重組腺病毒_________________________________；從而提高了疫苗的安全性。

（4）為了檢測(cè)疫苗的效果，科學(xué)家用不同方式給雪貂接種重組腺病毒疫苗后，感染新冠病毒，一段時(shí)間后檢測(cè)新冠病毒含量，結(jié)果如圖2，說(shuō)明重組腺病毒疫苗_______________，且效果最好的免疫方式是______________。

（5）作為年滿18歲的學(xué)生，你可以采取哪些行動(dòng)響應(yīng)國(guó)家疫苗接種的政策_(dá)________（兩方面）？30、利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體的流程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：

（1）通過(guò)過(guò)程①得到的B淋巴細(xì)胞在從小鼠體內(nèi)分離出之前；需對(duì)小鼠____________________。

（2）該過(guò)程中區(qū)別于原生質(zhì)體融合的方法是用________________處理。

（3）過(guò)程③至少需要通過(guò)兩次篩選和克隆培養(yǎng)；其中第一次篩選的目的是獲得______________。圖中X細(xì)胞具有________________________________的特點(diǎn)。單克隆抗體的特點(diǎn)是______________________________________________。

（4）經(jīng)過(guò)篩選和克隆化培養(yǎng)得到雜交瘤細(xì)胞后，一般采用體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式進(jìn)行培養(yǎng)，動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)環(huán)境條件的要求比較高，如培養(yǎng)液需適宜的溫度、________________________等。（答出兩項(xiàng)即可）31、矮化育種能使水稻等作物品種具有抗倒伏和高產(chǎn)的優(yōu)良特性；但同時(shí)會(huì)引起所育品種的氮肥利用率降低。研究發(fā)現(xiàn)，提高NGR5基因表達(dá)量既能保持矮化特征，又可以提高氮肥的利用率。為了進(jìn)一步研究NGR5蛋白提高氮肥利用率的作用機(jī)制，研究人員利用酵母菌進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉?wèn)題。

(1)酵母菌需要轉(zhuǎn)錄因子（一類蛋白質(zhì)）才能開始轉(zhuǎn)錄過(guò)程，某種轉(zhuǎn)錄因子由BD（DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域）和AD（轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域）兩部分組成，在具備相應(yīng)條件時(shí)，BD與AD會(huì)靠攏并結(jié)合，激活特定基因的轉(zhuǎn)錄。據(jù)此推測(cè)，BD能識(shí)別特定基因前段的_________并與之結(jié)合；但不能激活轉(zhuǎn)錄過(guò)程；

(2)研究人員將NGR5基因連接到含有編碼BD多肽基因的表達(dá)載體中，隨后使用一定方法處理酵母菌細(xì)胞，并將該表達(dá)載體導(dǎo)入其中，使其能表達(dá)_________。

(3)提取水稻根部細(xì)跑的RNA，通過(guò)_________過(guò)程獲得大量的各種cDNA；隨后將不同的cDNA片段連接到含有編碼AD多肽基因的表達(dá)載體中，并導(dǎo)入上述酵母菌細(xì)胞，使其能表達(dá)不同的AD-Xn融合蛋白（“Xn”表示不同cDNA片段表達(dá)的多肽）。

(4)若Xn能與NGR5蛋白相互作用，則AD-Xn融合蛋白和BD-NGR5融合蛋白就會(huì)被牽引靠攏，促使BD與AD結(jié)合，激活標(biāo)記基因的表達(dá)。這能使酵母菌將培養(yǎng)基中的某特殊物質(zhì)轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，因此可選擇_________的菌落進(jìn)行繼續(xù)研究。

(5)為尋找能與NGR5蛋白相互作用的蛋白質(zhì)，研究人員最終完成的實(shí)驗(yàn)如下表所示，設(shè)置3個(gè)對(duì)照組的目的分別是_________。組別表達(dá)的蛋白（多肽）1表達(dá)的蛋白（多肽）2對(duì)照組1BDAD對(duì)照組2BD-NGR5AD對(duì)照組3BDAD-Xn實(shí)驗(yàn)組BD-NGR5AD-Xn32、DDX5基因在細(xì)胞周期調(diào)控、腫瘤發(fā)生等方面發(fā)揮重要作用。研究人員運(yùn)用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)對(duì)口蹄疫病毒易感的PK-15細(xì)胞株中的DDX5基因進(jìn)行敲除，為后續(xù)研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基礎(chǔ)。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。

(1)圖1中，Ori是_______（酶）首先結(jié)合的核苷酸序列。構(gòu)建CRISPR-Cas9表達(dá)載體時(shí)使用的工具酶主要有______。結(jié)合對(duì)圖2中CRISPR-Cas9技術(shù)原理的理解，圖1表達(dá)載體中需要插入兩種sgRNA基因，原因是_____。

(2)研究中先將CRISPR-Cas9表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌DH5a，再將菌液利用________法接種到加有________的細(xì)菌培養(yǎng)基上，待菌落長(zhǎng)成后，直接挑取菌落加入到PCR反應(yīng)系統(tǒng)中進(jìn)行基因鑒定。PCR過(guò)程中不需要先提取細(xì)菌DNA的原因是______。

(3)研究中采用培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌對(duì)CRISPR-Cas9表達(dá)載體進(jìn)行擴(kuò)增。與PCR相比，利用大腸桿菌進(jìn)行目的基因擴(kuò)增的優(yōu)點(diǎn)有________、____________。

(4)取轉(zhuǎn)化的PK15細(xì)胞懸液進(jìn)行有限稀釋，再接種到6孔培莽板上，一段時(shí)間后對(duì)各孔內(nèi)的細(xì)胞株進(jìn)行DDX5蛋白檢測(cè)，結(jié)果如圖（其中B-actin是真核細(xì)胞骨架蛋白）。對(duì)細(xì)胞懸液有限稀釋法的目的是________，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)CO2培養(yǎng)箱中充入的氣體應(yīng)是_______。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，敲除DDX5基因的細(xì)

胞株編號(hào)有___________。

參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；食用轉(zhuǎn)基因的食物時(shí)；可能會(huì)因外源基因產(chǎn)生的性狀對(duì)食用者不適而造成不良反應(yīng)，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因植物是人造物種；可能與自然物種雜交，從而危及生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，B正確；

C；基因污染是一種可增殖的污染；可通過(guò)繁殖而傳遞下去，C錯(cuò)誤；

D；在大面積種植轉(zhuǎn)基因植物時(shí)；要在周圍設(shè)置緩沖帶作物以防轉(zhuǎn)基因的擴(kuò)散，D正確。

故選C。2、D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因技術(shù)是指運(yùn)用科學(xué)手段從某種生物中提取所需要的基因；將其轉(zhuǎn)入另一種生物中，使與另一種生物的基因進(jìn)行重組，從而產(chǎn)生特定的具有變異遺傳性狀的物質(zhì)。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以改變動(dòng)植物性狀，培育新品種。

【詳解】

A；定向提取生物體的DNA；這是基因工程的操作步驟，A錯(cuò)誤；

B；定向地對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”以獲得目的基因；這是基因工程的操作步驟，B錯(cuò)誤；

C；在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造屬于蛋白質(zhì)工程；C錯(cuò)誤；

D；基因工程的最終目的是定向地改造生物的遺傳性狀；創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品，D正確。

故選D。3、D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

泡菜制作的菌種是乳酸菌；代謝類型是厭氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，最適環(huán)境溫度為28℃～30℃。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵早期液面的白膜是酵母菌進(jìn)行有氧呼吸繁殖形成的；A正確；

B；變酸的果酒液面的白膜是由醋酸菌繁殖形成的；B正確；

C；腐乳的制作利用的主要是真菌中的毛霉；其表層致密的一層“皮”由毛霉的匍匐菌絲形成，C正確；

D；泡菜壇內(nèi)出現(xiàn)的一層白膜是產(chǎn)膜酵母不斷繁殖產(chǎn)生的；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

1；DNA粗提取選材的標(biāo)準(zhǔn)：DNA含量高；并且材料易得。由于哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不采用哺乳動(dòng)物的血液。

2；DNA粗提取和鑒定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低)；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

（2）DNA對(duì)酶；高溫和洗滌劑的耐受性不同。

（3）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；豬是哺乳動(dòng)物；做DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)材料用雞血而不用豬血，原因是哺乳動(dòng)物的成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不含DNA，A錯(cuò)誤；

B；DNA溶液加入二苯胺試劑必須在沸水浴條件下才呈現(xiàn)藍(lán)色；B錯(cuò)誤；

C；在對(duì)DNA提純時(shí)；由于DNA不溶于酒精，而其它雜質(zhì)可以溶于酒精，因此可以除去溶于酒精的雜質(zhì)，C錯(cuò)誤；

D；由于DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；根據(jù)此原理可以對(duì)DNA粗提取，D正確。

故選D。5、A【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官；組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。2.細(xì)胞的全能性是指生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能。細(xì)胞全能性的基礎(chǔ)是每個(gè)體細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體的全部基因。

【詳解】

A；外植體發(fā)育為完整的幼苗須先經(jīng)脫分化過(guò)程；即圖中①過(guò)程，再經(jīng)再分化過(guò)程，即圖中②過(guò)程，A正確；

B；胚狀體的分化程度比愈傷組織高；因而，愈傷組織的全能性比胚狀體的全能性高，B錯(cuò)誤；

C；從人工種子圖示可看出；胚狀體再加上人工種皮和人工胚乳組成人工種子，所以圖中③表示人工種皮和人工胚乳，但人工種子可發(fā)育為植株，關(guān)鍵是人工種子中的胚狀體可發(fā)育為植物，C錯(cuò)誤；

D；培育脫毒馬鈴薯時(shí)；因其分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無(wú)病毒，細(xì)胞的全能性較高，而葉肉細(xì)胞帶病毒（病毒載量大）、細(xì)胞的全能性低，所以一般選擇莖尖作為外植體，而不選葉片作為外植體，D錯(cuò)誤。

故選A。6、D【分析】【分析】

植物基因工程的應(yīng)用：（1）抗蟲轉(zhuǎn)基因植物；（2）抗病轉(zhuǎn)基因植物；（3）抗逆轉(zhuǎn)基因植物；（4）轉(zhuǎn)基因改良植物品質(zhì)．總之基因工程在農(nóng)業(yè)上用于生產(chǎn)高產(chǎn)；穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的品種；能產(chǎn)生抗逆性品種．動(dòng)物基因工程的成果：（1）提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速度：外源生長(zhǎng)激素基因；（2）改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)；（3）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物；（4）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體；（5）基因工程藥物，如人胰島素、細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等．

【詳解】

A；可以將抗病蟲害、抗除草劑等基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物使其具有相應(yīng)的抗性；A正確；

B；可以使用DNA重組的微生物；生產(chǎn)稀缺的基因藥物，B正確；

C；可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)使奶牛變成生物反應(yīng)器；使它們的奶中富含某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、珍貴藥材或人類所需要的蛋白質(zhì)，C正確；

D；將不同生物的DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)移和重組；可以創(chuàng)造出新品種，但不能產(chǎn)生新物種，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)7、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O；

（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；若發(fā)酵初期不通入氣體；由于錐形瓶中含有少量空氣，溶液中酵母菌也可通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳，即使沒有空氣，酵母菌也能通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳，因此有氣泡產(chǎn)生，A錯(cuò)誤；

B；中期可以聞到酒香；說(shuō)明有酒精產(chǎn)生，即進(jìn)行了酒精發(fā)酵，B正確；

C；由于醋酸菌是嗜氧菌；也是嗜溫菌，因此后期接種醋酸菌，需通氣并適當(dāng)升高溫度，C錯(cuò)誤；

D；醋酸發(fā)酵過(guò)程中；發(fā)酵液的pH會(huì)進(jìn)一步降低，因此圖乙中能正確表示pH變化的曲線是②，D錯(cuò)誤。

故選ACD。8、B:D【分析】【分析】

克隆動(dòng)物；涉及的技術(shù)手段為核移植和胚胎移植，子代的性別由供核一方確定，又因?yàn)樯锏男誀钣珊嘶蚝唾|(zhì)基因共同決定，同時(shí)還受環(huán)境的影響，故子代不完全和供核一方相同。

【詳解】

A；根據(jù)試題的分析；科學(xué)家自身克隆結(jié)果不完全和科學(xué)家一樣，A錯(cuò)誤；

B；因?yàn)榭茖W(xué)知識(shí)是后天獲得的；而非遺傳，故科學(xué)家自身克隆產(chǎn)物是普通人，B正確；

C；生物的性狀由遺傳物質(zhì)和環(huán)境共同決定；C錯(cuò)誤；

D；現(xiàn)在克隆技術(shù)有限；還有些技術(shù)問(wèn)題尚未解決，故克隆人較困難，但是可以克隆部分器官，D正確。

故選BD。9、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu)；限制酶可以識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列；并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割。

2；圖1中SaLl有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn)；能將DNA片段切成4段，Xhol有2個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，能將DNA片段切成3段。

【詳解】

A；限制酶識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列；不同的限制酶能識(shí)別不同的脫氧核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；Sall將DNA片段切成4段；Xhol將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為Sall，泳道②為XhoⅠ，B正確；

C；同種限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶進(jìn)行連接，可以構(gòu)成重組DNA，C正確；

D；限制酶切割雙鏈DNA；酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA，D錯(cuò)誤。

故選AD。10、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進(jìn)化的特點(diǎn)，病毒是一種體積非常微小，結(jié)構(gòu)極其簡(jiǎn)單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。不能獨(dú)立生活，只能寄生在活細(xì)胞內(nèi)，并在寄主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行繁殖。一旦離開了活細(xì)胞，病毒就無(wú)法生存，就會(huì)變成結(jié)晶體。

2；真菌較細(xì)菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對(duì)蛋白進(jìn)行加工和修飾。

【詳解】

A；通過(guò)題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過(guò)程，A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡”，即改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動(dòng)物、哺乳動(dòng)物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來(lái)源于真核細(xì)胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因?yàn)檎婢钦婧思?xì)胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對(duì)癌細(xì)胞甚至病毒等均具有強(qiáng)有力的殺傷作用”，則對(duì)抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點(diǎn)睛】11、A:C:D【分析】【分析】

哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積?。患?xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)條件下，ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A；試管羊、轉(zhuǎn)基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式屬于無(wú)性生殖，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)；B正確；

C；受精時(shí)防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)；C錯(cuò)誤；

D；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞可用于性別鑒定；將來(lái)可以發(fā)育成胎膜和胎盤，D錯(cuò)誤。

故選ACD。12、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一種個(gè)體微小結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單；只含一種核酸(DNA或RNA)和蛋白質(zhì)組成的，必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物。

【詳解】

A；噬菌體在細(xì)菌細(xì)胞中；沒有裂解細(xì)菌，細(xì)菌繁殖導(dǎo)致透明的平板培養(yǎng)一段時(shí)間后變?yōu)椴煌该鳡顟B(tài)，A正確；

B；噬菌體樣品應(yīng)有足夠的稀釋度；以保證初期一個(gè)細(xì)菌最多被一個(gè)噬菌體吸附，如果稀釋度不夠，會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)噬菌體吸附同一個(gè)細(xì)菌，從而導(dǎo)致噬菌斑數(shù)量減少，噬菌斑計(jì)數(shù)結(jié)果比樣品中實(shí)際活噬菌體數(shù)偏低，B正確；

C、若平均每個(gè)平板的噬菌斑數(shù)量為150，則該樣品的噬菌體效價(jià)為：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C錯(cuò)誤；

D；若有少數(shù)活噬菌體末能侵染細(xì)菌；會(huì)導(dǎo)致形成噬菌斑數(shù)量減少，從而導(dǎo)致噬菌斑計(jì)數(shù)結(jié)果比樣品中實(shí)際活噬菌體數(shù)偏低，D正確。

故選ABD。13、A:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中質(zhì)粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)；若用酶A切割會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒上的兩個(gè)抗性基因。

【詳解】

A；質(zhì)粒中含有2個(gè)酶A的酶切位點(diǎn)；所以切割后會(huì)產(chǎn)生4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，A正確；

B；如果用酶A和酶C同時(shí)切割質(zhì)粒；會(huì)破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，B錯(cuò)誤；

C；根據(jù)B項(xiàng)分析；需要用酶B和酶C切割質(zhì)粒和目的基因，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因被破壞，所以不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；

D；若用酶B和酶C切割；產(chǎn)生不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒自身環(huán)化，D正確。

故選AD。14、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過(guò)程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原；通過(guò)多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；②過(guò)程表示誘導(dǎo)細(xì)胞融合；依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，B正確；

C；③過(guò)程表示雜交瘤細(xì)胞多次篩選培養(yǎng)；該過(guò)程需要進(jìn)行抗體檢測(cè)，從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；

D；根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用”；因此與對(duì)照組相比，圖中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)會(huì)升高，D錯(cuò)誤。

故選ABC。15、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO218、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外擴(kuò)增DNA片段19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質(zhì)析出DNA過(guò)濾溶液中的雜質(zhì)DNA21、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物；

2；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分；除無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，并需添加動(dòng)物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過(guò)胚胎移植獲得新個(gè)體。

（2）核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而體細(xì)胞分化程度高，全能性不易表達(dá)；核移植常用的減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，其中去核的目的是避免原細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的影響，保證克隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個(gè)體超數(shù)排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細(xì)胞。精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應(yīng)；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）要考慮環(huán)境承載力；處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。

【點(diǎn)睛】

本題考查細(xì)胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運(yùn)用能力?！窘馕觥颗咛ヒ浦玻ɑ蚺咛サ脑缙谂囵B(yǎng)和胚胎移植）胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易MⅡ中期去核卵母細(xì)胞促性腺激素獲能透明帶反應(yīng)協(xié)調(diào)與平衡22、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

3；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解掌握程度?！窘馕觥竣?又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖23、略

【分析】【詳解】

目前我國(guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來(lái)源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國(guó)市場(chǎng)上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈?guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來(lái)源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。24、略

【分析】略【解析】自我更新分化潛能再生修復(fù)四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)25、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機(jī)體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細(xì)胞中，前者主要存在于細(xì)胞核中，后者主要存在于細(xì)胞質(zhì)及核仁里。在制備核酸時(shí)，通過(guò)研磨破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，使核蛋白被釋放出來(lái)。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯(lián)系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細(xì)胞得到單倍體植株；B表示通過(guò)胚狀體進(jìn)行無(wú)性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細(xì)胞雜交，其中②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會(huì)研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應(yīng)該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說(shuō)明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。

（3）從表中數(shù)據(jù)可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；整個(gè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌無(wú)毒，利用圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2-3次。

（2）為促進(jìn)愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需降低2，4-D的濃度。當(dāng)玉米愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長(zhǎng)素，以促進(jìn)苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細(xì)胞排列緊密，①錯(cuò)誤；

②剛?cè)诤系闹参矬w細(xì)胞沒有成熟的大液泡；無(wú)法構(gòu)成滲透系統(tǒng)，不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，②錯(cuò)誤；

③胚狀體細(xì)胞出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽；因此其細(xì)胞內(nèi)有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結(jié)果形成了具有根和芽的胚狀體；細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯(cuò)誤。

故選③。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過(guò)程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，意在考查學(xué)生讀圖能力和分析應(yīng)用能力?！窘馕觥垦心コ浞?，低溫抑制酶活性抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分?jǐn)?shù)為70-75%）酒精降低（適量的）生長(zhǎng)素③26、略

【分析】【分析】

酵母菌是兼性厭氧菌；既可以進(jìn)行有氧呼吸（徹底的氧化分解，釋放大量的能量，有利于酵母菌的繁殖），又可以進(jìn)行無(wú)氧呼吸（釋放少量能量，產(chǎn)生酒精）。

【詳解】

（1）酵母菌是制作馬奶酒的要發(fā)酵菌種；從同化作用的類型看，酵母菌代謝過(guò)程中會(huì)消耗葡萄糖，所以屬于異養(yǎng)型生物；酵母菌在有氧無(wú)氧條件都能生存，從細(xì)胞呼吸類型看，酵母菌屬于兼性厭氧型生物。

（2）將馬奶酒加入發(fā)酵裝置時(shí)；要留有大約1/3的空間，不能裝滿，這樣既可以為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又可以防止發(fā)酵旺盛時(shí)發(fā)酵液溢出，發(fā)酵過(guò)程中，一般將溫度控制在18~30℃進(jìn)行發(fā)酵。

（3）馬奶中的糖類主要是乳糖，馬奶中的某些微生物能將乳糖分解為葡萄糖和半乳糖，進(jìn)而被酵母菌利用產(chǎn)生酒精，制成馬奶酒。據(jù)圖分析，第一幅圖中葡萄糖濃度先下降，所以野生型酵母菌優(yōu)先利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，與野生型酵母菌相比，第二幅圖中半乳糖先下降，說(shuō)明馬奶酒酵母菌優(yōu)先利用半乳糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，且大量產(chǎn)生酒精階段，馬奶酒酵母菌產(chǎn)生酒精濃度曲線的斜率更大，說(shuō)明產(chǎn)生酒精的速率更快?！窘馕觥?1)異養(yǎng)型兼性厭氧。

(2)為酵母菌的繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時(shí)發(fā)酵液溢出18~30（或28）

(3)葡萄糖半乳糖更快27、略

【分析】【分析】

題中用瓶裝變質(zhì)老陳醋（脹瓶）；未變質(zhì)老陳醋為實(shí)驗(yàn)材料；經(jīng)過(guò)分離、純化、并初步篩選出A1、A2和A3三株疑似的產(chǎn)氣細(xì)菌，進(jìn)一步探究了不同濃度青霉素對(duì)A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中數(shù)據(jù)所示的清晰區(qū)直徑（抑菌圈）越大，代表該菌種生長(zhǎng)受到的抑制作用越強(qiáng)。

【詳解】

（1）為了篩選產(chǎn)氣細(xì)菌；實(shí)驗(yàn)人員設(shè)置了甲；乙、丙三組培養(yǎng)基，甲作為空白對(duì)照組，乙接種未變質(zhì)的老陳醋，丙接種等量的變質(zhì)老陳醋，對(duì)比乙和丙培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)，從丙培養(yǎng)基上分離出和乙培養(yǎng)基形態(tài)不同的菌落，可以從上述培養(yǎng)基中初步篩選疑似產(chǎn)氣細(xì)菌的菌株。

（2）①過(guò)程a所得待測(cè)培養(yǎng)基中菌落的分布較為均勻；據(jù)此判斷，該過(guò)程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。

②區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形態(tài)；大小、隆起程度和顏色等特征；統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，能有效防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目；或培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)導(dǎo)致菌落粘連影響計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基表面干燥脫水影響菌落數(shù)目的統(tǒng)計(jì)。

③因?yàn)槔详惔字械漠a(chǎn)氣細(xì)菌是一類能產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶的細(xì)菌；若有5%的過(guò)氧化氫溶液，A1；A2和A3菌株，必要的培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)器材，可以將A1、A2和A3菌株分別接種到滴有5%的過(guò)氧化氫溶液的培養(yǎng)基上，觀察是否產(chǎn)生氣泡，若產(chǎn)生氣泡則為產(chǎn)氣細(xì)菌。

（3）根據(jù)題意和表格信息分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是探究不同濃度青霉素對(duì)A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果較差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。【解析】(1)等量的變質(zhì)老陳醋對(duì)比乙和丙培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)；從丙培養(yǎng)基上分離出和乙培養(yǎng)基形態(tài)不同的菌落。

(2)稀釋涂布平板法培養(yǎng)基中長(zhǎng)出的菌落是均勻分布的遺漏菌落的種類和數(shù)目菌落粘連影響計(jì)數(shù)（或培養(yǎng)基表面干燥脫水）將A1；A2和A3菌株分別接種到滴有5%的過(guò)氧化氫溶液的培養(yǎng)基上；若產(chǎn)生氣泡則為產(chǎn)氣細(xì)菌。

(3)探究不同濃度青霉素對(duì)A1、A2、A3菌株的抑制作用在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果較差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大28、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過(guò)稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過(guò)體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定：凝膠中的DNA分子通過(guò)染色；可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過(guò)程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無(wú)，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用五、綜合題(共4題，共36分)29、略

【分析】【分析】

DNA疫苗是指將編碼抗原蛋白的基因插入到適宜的質(zhì)粒中得到的重組DNA分子；將DNA疫苗接種到人體內(nèi)可表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的抗原，引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，進(jìn)而達(dá)到預(yù)防特定的微生物感染的目的。

【詳解】

（1）根據(jù)題意可知；腺病毒可侵入人體細(xì)胞，達(dá)到預(yù)防新冠病毒感染的效果，故可知重組腺病毒疫苗可以以引起人體的細(xì)胞免疫，更有效地清除病毒；

（2）根據(jù)題圖可知；獲得重組線性DNA分子是通過(guò)質(zhì)粒1與質(zhì)粒2的左臂和右臂之間的片段互換實(shí)現(xiàn)的，故可知質(zhì)粒2的左臂與右臂之間含S基因的片段代替了質(zhì)粒1左臂與右臂之間的Amp抗性基因，故對(duì)應(yīng)重組線性DNA分子中的X為Kan抗性基因。

（3）根據(jù)題意可知，重組線性DNA分子中不含病毒復(fù)制必需的E1蛋白，人體細(xì)胞中也不含有E1蛋白，而作為載體的293細(xì)胞系中能夠表達(dá)E1蛋白；故將這樣獲得的重組腺病毒疫苗，能夠在載體中進(jìn)行復(fù)制，誘導(dǎo)刺激人體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，但無(wú)法在人體的宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，提高了疫苗的安全性；

（4）分析題圖可知；通過(guò)滴鼻和口服；肌肉注射兩種方式接種重組腺病毒疫苗的雪貂對(duì)比對(duì)照組，均能夠使雪貂產(chǎn)生對(duì)新冠病毒的免疫能力；題圖中顯示，滴鼻和口服組的新冠病毒相對(duì)含量始終最低，說(shuō)明該免疫方式效果最好。

（5）作為年滿18歲的學(xué)生；我們應(yīng)該主動(dòng)申請(qǐng)接種疫苗；鼓勵(lì)符合接種條件的家人一同申請(qǐng)接種疫苗，以響應(yīng)國(guó)家疫苗接種的政策。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理，掌握基因工程的操作工具及操作步驟，注意各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干中的信息回答，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥考?xì)胞Kan抗性基因無(wú)法在人體宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制不論是滴鼻和口服還是肌肉注射都能夠使機(jī)體產(chǎn)生新冠病毒的免疫能力滴鼻和口服主動(dòng)申請(qǐng)疫苗接種、鼓勵(lì)符合接種條件的家人一同申請(qǐng)接種疫