2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷170考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、圖為用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)某細菌的結(jié)果；對此下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.此結(jié)果是利用平板劃線法得到，劃線的順序是①→③→②B.圖示顯示的接種方法為涂布平板法，②處可見單菌落C.每次劃線前均需灼燒接種環(huán)，其目的都是防止雜菌污染D.培養(yǎng)基中的糖類、瓊脂等含碳物質(zhì)，可為該細菌提供碳源2、白蟻是自然環(huán)境中存在的能夠高效降解纖維素的昆蟲之一；原因是白蟻消化道中的某些微生物能分泌纖維素酶。某生物興趣小組從白蟻消化道中分離能高效降解纖維素的細菌，實驗流程如下圖。下列敘述正確的是（）

A.纖維素酶是由多種酶組成的復合酶，其中催化纖維二糖水解的酶是C1酶和CX酶B.選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，纖維素是唯一的碳源，且要持續(xù)通入無菌空氣，提供充足氧氣C.鑒別纖維素分解菌時，不能在長出菌落的培養(yǎng)基上直接滴加剛果紅染液D.要長期保存菌種，可將菌液與滅菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷凍箱中保存3、關(guān)于設(shè)計試管嬰兒的問題，下列哪項不合乎道德規(guī)范（）A.利用試管嬰兒提供骨髓造血干細胞救治病人B.設(shè)計試管嬰兒不考慮其性別C.利用試管嬰兒的臍帶血救治病人D.利用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)設(shè)計畸形嬰兒，以供醫(yī)學研究4、固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.在單寧酶純化時可采用透析法去除雜蛋白B.化學結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小C.酶的高效性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分D.溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性5、下列有關(guān)利用葡萄酸制果酒過程的敘述，錯誤的是（）A.適當增加酵母菌的接種量，可以縮短發(fā)酵的時間B.酒精積累是導致發(fā)酵液中細菌數(shù)量降低的原因之一C.果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋D.葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會影響果酒的品質(zhì)6、如圖表示某動物的卵子的發(fā)生過程，與此相關(guān)的敘述，錯誤的是（）

A.圖中A是第一極體，B是合子，C是受精B.不同動物排出的卵子所處細胞時期可能不同C.圖中②是減數(shù)第一次分裂，③④是減數(shù)第二次分裂D.當觀察到兩個極體時，可以表明卵子已經(jīng)完成了受精評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾病，不會出現(xiàn)負面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細胞的研究D.世界各國都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲存和發(fā)展生物武器8、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的觀點，正確的是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，設(shè)計試管嬰兒B.基于科學和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.運用試管嬰兒技術(shù)解決不孕問題D.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交9、下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性的敘述，正確的是（）A.病毒可感染動物細胞，因此誘導動物細胞融合一般不用病毒B.我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實行了嚴格的標識制度C.經(jīng)過基因重組的致病菌可能成為生物武器D.轉(zhuǎn)基因物種的迅速擴散有利于增加生物多樣性10、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過程如下圖所示。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過程中使用了動物細胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細胞A的捐獻者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來避免細胞質(zhì)遺傳病的遺傳11、進行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時，利用的培養(yǎng)基組分及含量如表所示。下列分析錯誤的是（）。組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機鹽，又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂既可為尿素分解菌提供碳源，又起到凝固劑的作用D.蒸餾水既可進行定容，又可對培養(yǎng)液進行稀釋以便于計數(shù)12、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素13、下圖為科學家培育克隆猴的基本步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.動物細胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動物細胞的全能性B.對A猴卵母細胞去核是為了保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來自B猴C.必須將重組細胞培育到一定程度后才能植入代孕動物體內(nèi)D.A猴的卵母細胞的細胞質(zhì)中含有促進B猴體細胞核全能性表達的物質(zhì)14、凋亡誘導因子（AIF）位于線粒體膜間隙中，它既是對細胞凋亡起重要作用的蛋白質(zhì)，又具有氧化還原酶活性。有研究表明，AIF在胃癌細胞中的表達量高于在正常胃細胞中的。某醫(yī)學實驗室人員從胃癌患者的胃癌組織中提取AIF基因進行PCR擴增，并進行鑒定，相關(guān)過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.檢測AIF在胃細胞中的表達量，可能成為預防胃癌的手段B.AIF引起的細胞凋亡是基因所決定的細胞死亡，不受環(huán)境條件的影響C.圖中逆轉(zhuǎn)錄和PCR均可獲取DNA產(chǎn)物，兩個過程所需要的原料和酶是相同的D.電泳鑒定AIF基因時，DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小等有關(guān)15、治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細胞，然后將該細胞的遺傳物質(zhì)植入一個去除了細胞核的卵細胞中，該卵細胞開始自行分裂，直至形成一個早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關(guān)說法正確的是（）A.可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細胞B.該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內(nèi)部的細胞團不斷增殖分化而來C.治療性克隆中運用胚胎移植技術(shù)，一般不選擇原腸胚進行胚胎移植D.我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實驗評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、第一步：______17、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。18、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就______，稱為______。細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面______時，細胞就會_____，這種現(xiàn)象稱為______。19、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。20、請回答有關(guān)植物細胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細胞，經(jīng)過________的誘導，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。21、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。22、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()評卷人得分四、判斷題(共3題，共18分)23、制備單克隆抗體時，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯誤24、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯誤25、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共8分)26、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實驗測定結(jié)果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請回答下列問題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿一異戊醇，實驗過程中加入氯仿一異戊醇離心后，應(yīng)?、賍_____加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對玉米開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進行的四種人工繁殖過程，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）植物組織培養(yǎng)過程中，外植體需要進行消毒處理。利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用________消毒30s后；用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導，對形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當玉米愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是_______（填下列序號）。

①綠色芽點細胞排列松散②剛?cè)诤系碾s交細胞發(fā)生質(zhì)壁分離。

③胚狀體細胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細胞的形態(tài)大小一致27、《傷寒論》中記載的芍藥甘草湯是由芍藥和甘草兩味藥物制成，具有調(diào)和肝脾，緩急止痛的作用，芍藥和甘草的主要活性成分分別為芍藥苷和甘草酸?？蒲袌F隊通過制備抗芍藥苷的單克隆抗體，將其純化后結(jié)合在固相載體上，讓芍藥甘草湯流過，去除湯中芍藥苷，用于探究芍藥苷與芍藥甘草湯對小鼠鎮(zhèn)痛作用的相關(guān)性?；卮鹣铝袉栴}。

(1)制備單克隆抗體依賴的生物技術(shù)有______________、_________________等。將芍藥苷與蛋白質(zhì)結(jié)合作為抗原，定期間隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾臟，剪碎并用_____________酶處理得到小鼠脾臟細胞。

(2)圖中誘導其與骨髓瘤細胞融合的試劑X是____________，經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細胞Y具有________________________特點。用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞Y并收集上清液，利用___________________技術(shù)對上清液進行抗體陽性檢測。

(3)研究人員將生理狀態(tài)相同的小鼠隨機分為對照組、造模組進行如下處理，造模組前期已完成冰醋酸致痛處理（冰醋酸能引起深部的、大面積且較持久的疼痛刺激，此時小鼠會出現(xiàn)扭體反應(yīng)）。請完善實驗方案。。組別前期處理后期處理對照組腹腔注射生理鹽水I造模組腹腔注射冰醋酸模型組：口服生理鹽水陽性藥組：口服芍藥甘草湯陽性藥組：口服芍藥甘草湯實驗組：Ⅱ?qū)嶒灲M：Ⅱ

①表中I的處理是_____________、Ⅱ的處理_______________。

②結(jié)果與分析：

若前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著__________對照組，表明致痛處理成功。后期處理結(jié)束后測定各組小鼠扭體次數(shù)，若結(jié)果為______________________，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。評卷人得分六、綜合題(共4題，共8分)28、基因定點整合可替換特定基因，該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由某基因（A）突變引起的，將正常A基因定點整合到A基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因，可用來研究該病的基因治療過程?；蚨c整合的過程如圖所示，已知neor基因可作為標記基因，含有neor的細胞具有對G418的抗性?；卮鹣铝袉栴}：

(1)構(gòu)建重組載體，常用的工具酶有__________。構(gòu)建重組載體時，需要大量A基因，常用__________技術(shù)合成A基因，利用該方法合成A基因時需要設(shè)計并合成__________種引物。

(2)將重組載體導入患病小鼠胚胎干細胞的常用方法為__________。檢測患病小鼠胚胎干細胞中是否導入重組載體的方法是在含有__________的培養(yǎng)液中培養(yǎng)胚胎干細胞。

(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細胞時，會出現(xiàn)A基因錯誤整合。錯誤整合時，重組載體上的兩個HSV-tk至少會有一個neor一起整合到染色體DNA上。已知HSV-tk1、HSV-tk2的產(chǎn)物都把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細胞死亡。將導入重組載體胚胎干細胞置于同時含有G418和DHPG的培養(yǎng)，存活下來的是__________（填“正確整合”或“錯誤整合”）的胚胎干細胞。

(4)將上述篩選得到的胚胎干細胞培育成轉(zhuǎn)基因小鼠，還需要__________技術(shù)和_________技術(shù)。29、羊乳因其營養(yǎng)成分最接近人乳；且不含牛乳中的某些可致過敏的異性蛋白質(zhì)而受到消費者的青睞,但市場上存在著用牛乳冒充羊乳欺騙消費者的現(xiàn)象。對此，研究人員開發(fā)制了羊乳as1-酪蛋白單克隆抗體檢測試劑盒。下圖為制備as1-酪蛋白單克隆抗體的示意圖，1~6代表相關(guān)過程，a~e代表相關(guān)細胞。據(jù)圖回答下列問題：

(1)過程1是指將____（填“asl-酪蛋白抗原”或“asl-酪蛋白抗體”）注入小鼠體內(nèi)，一段時間后，取小鼠的脾臟組織，剪碎后用______酶處理使其分散成單個細胞，以獲得相應(yīng)的細胞；圖中細胞b一般選用_____細胞。

(2)對于圖中的細胞d，需用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出_______；過程3再對其進行_______；經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的細胞e，該種細胞的特點是既能大量增殖，又能產(chǎn)生asl-酪蛋白抗體。

(3)DNA的合成一般有兩條途徑。主要途徑（途徑一）是在細胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑（途徑二）是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶催化合成DNA，而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。根據(jù)這樣的原理，向經(jīng)誘導后的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤______（填“能”或“不能”）篩選所需的細胞。30、下圖是將乙肝病毒表面主蛋白基因HBsAg導入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過程示意圖。巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營養(yǎng)型酵母；能將甲醇作為其唯一碳源，此時AOX1基因受到誘導而表達，圖中pPIC9K質(zhì)粒上5'AOX1和3'AOX1（TT）分別是基因AOX1的啟動子和終止子。該酵母菌體內(nèi)無天然質(zhì)粒，科學家改造出了圖1所示質(zhì)粒用作載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合于染色體中以實現(xiàn)表達。請回答:

(1)用PCR技術(shù)擴增HBsAg基因時原料是_______________，Taq酶需要_______________激活。

(2)為實現(xiàn)HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重組，設(shè)計引物時需要在引物的_______________端添加相應(yīng)限制酶的識別序列，則在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置添加的堿基序列分別是_______________、_______________，這樣設(shè)計的優(yōu)點是_______________。

(3)酶切獲取HBsAg基因后，需用_______________（填“EcoliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上，形成重組質(zhì)粒，構(gòu)建重組質(zhì)粒的目的是______________。

(4)若用限制酶SnaBI、BglII聯(lián)合酶切pPIC9K質(zhì)粒，獲得的DNA片段的長度分別是38kb、27kb、67kb；用限制酶BglII、AvrII聯(lián)合酶切pPIC9K質(zhì)粒，得到的DNA片段的長度分別是38kb、40kb、54kb；已知HBsAg基因長度是55kb。步驟3中應(yīng)選用限制酶_______________來切割重組質(zhì)粒以獲得重組DNA，切割后的重組DNA的長度是_______________。

(5)轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間后，需要向其中加入甲醇，其目的是_______________。31、研究發(fā)現(xiàn)；新冠病毒外殼中的S蛋白具有很強的抗原性，可利用其制備單克隆抗體，制備流程設(shè)計如下圖所示，相關(guān)限制酶及其識別序列如下表所示，請分析回答問題：

限制酶識別序列和切割位點EcoRⅠG↓AATTCBamHⅡG↓GATCCBglⅠA↓GATCTSalⅠG↓TCGAC

（1）人體內(nèi)，分泌抗體的細胞可來自于____________________細胞的增殖分化。

（2）根據(jù)病毒的結(jié)構(gòu)，圖中①過程常用__________酶處理，完成②過程需要的酶是___________。

（3）檢測④過程是否獲得成功的方法是________________________，⑥過程常用的方法是_________________。

（4）利用PCR技術(shù)擴增無限增殖調(diào)控基因時，科研人員設(shè)計了如下一對引物（部分序列）：GAATTC____和____CCTAGG，其中下劃線部分序列的設(shè)計依據(jù)是___________，方框部分序列的設(shè)計目的是___________。

（5）抗體可變區(qū)氨基酸的組成和排列順序可隨抗體結(jié)合抗原的特異性不同而有較大的變異，由于可變區(qū)中氨基酸的種類以及排列順序干變?nèi)f化，故可形成許多種具有不同結(jié)合抗原特異性的抗體。為克服鼠源性單抗輸入人體后產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)，科研人員通過人工改造鼠源性單抗獲得了嵌合抗體。分析下圖，你認為最符合臨床要求的嵌合抗體是A~D中的___________。嵌合抗體的研制屬于___________這一科技范疇。

參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、A【分析】【分析】

1.微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2.劃線分離操作中的有關(guān)問題：

①在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)；在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)。第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染或感染操作者；

②在灼燒接種環(huán)之后；要等其冷卻后再進行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

③在進行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后；線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

【詳解】

A；根據(jù)菌落的生長狀態(tài)可知；此結(jié)果是利用平板劃線法得到，劃線的順序是①→③→②，A正確；

B；圖示顯示的菌落生長狀態(tài)的接種方法不是涂布平板法得到的；②處可見單菌落，B錯誤；

C；每次劃線前均需灼燒接種環(huán)；其目的都是殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，從而保證菌落來自上一次劃線的末端，C錯誤；

D；培養(yǎng)基中的瓊脂是凝固劑；不能為細菌提供碳源，D錯誤。

故選A。

【點睛】2、D【分析】【分析】

1、纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶三種；其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶。

2；微生物的培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無機鹽；有的還有特殊營養(yǎng)物質(zhì)（生長因子、維生素）。

3；纖維素分解菌常采用剛果紅染液進行鑒定；剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色物質(zhì)，纖維素分解菌由于能夠?qū)⒗w維素分解而在平板上的菌落周圍出現(xiàn)無色的透明圈，透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少。

【詳解】

A、纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；其中葡萄糖苷酶可以將纖維二糖分解成葡萄糖，A錯誤；

B；從白蟻消化道中分離能高效降解纖維素的細菌；呼吸類型應(yīng)該為無氧呼吸，B錯誤；

C；鑒別纖維素分解菌時；可以向長出菌落的培養(yǎng)基上直接滴加剛果紅染液，C錯誤；

D；要長期保存菌種；采用甘油管藏的方方法，將菌液與滅菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷凍箱中保存，D正確。

故選D。3、D【分析】【分析】

本題考查生物技術(shù)中的倫理問題。識記試管嬰兒技術(shù)和設(shè)計試管嬰兒技術(shù)的概念；明確兩者都需要采用體外受精；胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；利用試管嬰兒提供骨髓造血干細胞救治病人；合乎道德規(guī)范，A不符合題意；

B；設(shè)計試管嬰兒；不一定非考慮他的性別，合乎道德規(guī)范，B不符合題意；

C；利用試管嬰兒的臍帶血治療白血病等；合乎道德規(guī)范，C不符合題意；

D；利用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)設(shè)計畸形胎兒；以供醫(yī)學研究，不合乎道德規(guī)范，D符合題意。

故選D。4、D【分析】【分析】

固定化酶：固定化酶是指用物理學或化學的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復合物．在催化反應(yīng)中；它以固相狀態(tài)作用于底物，反應(yīng)完成后，容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離，可被反復使用；

制備固定化酶：目前；制備固定化酶的方法主要有吸附法；交聯(lián)法、包埋法等，吸附法的顯著特點是工藝簡便且條件溫和，在生產(chǎn)實踐中應(yīng)用廣泛；交聯(lián)法是利用多功能試劑進行酶與載體之間的交聯(lián)，在酶和多功能試劑之間形成共價鍵，從而得到三維的交聯(lián)網(wǎng)架結(jié)構(gòu)；包埋法是將酶包埋在能固化的載體中。

【詳解】

A；透析法是利用膜的選擇透過性去除混合物中的小分子物質(zhì)；而單寧酶和雜蛋白都是大分子，所以不能去除雜蛋白，A錯誤；

B；物理吸附法比化學結(jié)合法對單寧酶活性影響更??；B錯誤；

C；酶的專一性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分；C錯誤；

D；酶需要溫和的條件；其活性受外界因素的影響，所以溫度、pH和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性，D正確。

故選D。

【點睛】5、C【分析】【分析】

制作果酒利用的微生物是酵母菌；它的異化作用類型是兼性厭氧型；制作果醋利用的微生物是醋酸菌，它的異化作用類型是需氧型。

果酒制作的原理：在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。方程式:C?H??O?2C?H?OH+2CO?

醋酸菌在30-35℃有氧條件下糖源充足時；將葡萄糖分解成醋酸；糖源缺乏時，將乙醇變成乙醛再變成醋酸。

【詳解】

A；若適當增加酵母菌的接種量；則可以縮短發(fā)酵的時間，A正確；

B；酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精；酒精具殺菌作用，發(fā)酵液中酒精積累是細菌數(shù)量降低的原因之一，B正確；

C；醋酸菌是需氧菌；且果醋發(fā)酵溫度高于果酒發(fā)酵溫度，因此果酒制成后需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高并且通入氧氣的環(huán)境中才可制作果醋，C錯誤；

D；葡萄的品質(zhì)、酵母菌菌種的純度都會影響酵母菌的發(fā)酵過程；進而影響果酒品質(zhì)，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

由圖分析可知：①為減數(shù)第一次分裂前的間期；完成DNA的復制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；③表示減數(shù)第一次分裂，形成的子細胞為次級卵母細胞和極體；④為減數(shù)第二次分裂，在受精過程中，次級卵母細胞完成減數(shù)第二次分裂，并排出第二極體。A為第一極體，B為合子，C為受精作用過程。

【詳解】

A；圖中③為減數(shù)第一次分裂；④為減數(shù)第二次分裂，在受精過程中，次級卵母細胞完成減數(shù)第二次分裂，因此C是受精過程，B是合子，A正確；

B；不同動物排出的卵子所處細胞時期可能不同；如馬、犬排出的卵子可能是初級卵母細胞，豬、羊排出的卵子可能是次級卵母細胞，B正確；

C；圖中③為減數(shù)第一次分裂；④為減數(shù)第二次分裂，C錯誤；

D；當觀察到兩個極體時；表明卵子已完成了受精作用，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)7、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾?。坏锌赡鼙粸E用，如用于設(shè)計嬰兒性別等，可能會出現(xiàn)負面影響﹔進行基因檢測時，可通過基因進行檢測，也可通過測定基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)來進行;對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學知識傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計試管嬰兒如專門用來設(shè)計嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會存在負面影響，B錯誤；

C；我國禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進行，C錯誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。8、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

【詳解】

A；設(shè)計試管嬰兒；會引起性別失調(diào)，違背倫理道德，我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，A錯誤；

B；應(yīng)基于科學和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；運用試管嬰兒技術(shù)可以解決不孕問題；C正確；

D；大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯誤。

故選BC。9、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．生物安全：①轉(zhuǎn)基因植物擴散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”，③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。

【詳解】

A；誘導動物細胞可用滅活的病毒；A錯誤；

B；我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實施標識制度；比如由轉(zhuǎn)基因大豆加工制成的大豆油，標注為“本產(chǎn)品加工原料中含有轉(zhuǎn)基因大豆，但本產(chǎn)品已不再含有轉(zhuǎn)基因成分”，其相關(guān)的生物學依據(jù)是大豆油屬于脂肪，不含目的基因編碼的蛋白質(zhì)，B正確；

C；生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等；C正確；

D；轉(zhuǎn)基因物種的無序迅速擴散可能變成野生種類或變成入侵的外來物種；威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，甚至會破壞生物的多樣性，D錯誤。

故選BC。10、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過程中使用了動物細胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細胞A的捐獻者提供的是細胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過核移植來避免細胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。11、C:D【分析】【分析】

實驗室的培養(yǎng)基按照功能劃分；可以分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可為尿素分解菌提供無機鹽，H2PO4-和HPO42-又是一種調(diào)節(jié)pH的緩沖對；A正確；

B；培養(yǎng)基中除了尿素無其他含氮物質(zhì)；只有尿素分解菌能通過分解尿素進行生長繁殖，故尿素既能為尿素分解菌提供氮源，又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用，B正確；

C；瓊脂不能被微生物利用；只能充當凝固劑，C錯誤；

D、表中的H2O為蒸餾水；起定容作用，蒸餾水不能對培養(yǎng)液進行稀釋，稀釋所用的溶劑應(yīng)該是無菌水，D錯誤。

故選CD。12、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。13、B:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物，克隆動物的核基因完全來自供體動物，而細胞質(zhì)基因來自受體細胞。核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，因為體細胞的全能性低于胚胎細胞。

【詳解】

A；動物細胞核移植技術(shù)；不能體現(xiàn)動物細胞的全能性，而是體現(xiàn)動動物細胞核的全能性，A錯誤；

B；去除A猴卵母細胞的細胞核；目的是排除A猴核遺傳物質(zhì)的干擾，保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來自B猴，B正確；

C；必須將重組細胞培育到桑椹胚或囊胚階段后才能植入代孕動物體內(nèi)；才可正常繼續(xù)發(fā)育，C正確；

D；卵母細胞的細胞質(zhì)中含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)；故體細胞的細胞核需移植到去核卵母細胞后才能表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選BCD。14、B:C【分析】【分析】

DNA分子具有可解離的基團；在一定的pH下，這些基團可以帶上正電荷或負電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，這個過程就是電泳。DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息；有研究表明，AIF在胃癌細胞中的表達量高于在正常胃細胞中的，因此檢測AIF在胃細胞中的表達量，可能成為預防胃癌的手段，A正確；

B；AIF引起的細胞凋亡是基因所決定的細胞死亡；會受環(huán)境條件的影響，B錯誤；

C；逆轉(zhuǎn)錄和PCR均可獲取DNA產(chǎn)物；兩個過程所需要的原料均是脫氧核苷酸，但逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶，而PCR需要耐高溫的DNA聚合酶，C錯誤；

D；電泳鑒定AIF基因時；DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小等有關(guān)，分子越大，遷移速率越慢，D正確。

故選BC。15、C【分析】【分析】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；不反對治療性克隆。

【詳解】

A；開放式組織培養(yǎng)一般是指使組織培養(yǎng)脫離嚴格無菌的操作環(huán)境；在自然、開放的有菌環(huán)境中進行操作。，動物細胞一般不能采用這種方式，A錯誤；

B；胚胎是由整個受精卵發(fā)育而來的；囊胚內(nèi)部的細胞不能發(fā)育為完整的胚胎，B錯誤；

C；胚胎移植技術(shù)；一般采用桑椹胚或囊胚進行移植，C正確；

D；我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克?。坏遣环磳χ委熜钥寺?，D錯誤。

故選C。三、填空題(共7題，共14分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍色二苯胺18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細胞的接觸抑制。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）20、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細胞，經(jīng)過激素的誘導，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學的知識準確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽21、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。22、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤四、判斷題(共3題，共18分)23、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，故正確。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。25、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克隆：是指把克隆出來的組織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g(shù)在實驗室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實驗題(共2題，共8分)26、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細胞中，前者主要存在于細胞核中，后者主要存在于細胞質(zhì)及核仁里。在制備核酸時，通過研磨破壞細胞壁和細胞膜，使核蛋白被釋放出來。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯(lián)系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細胞得到單倍體植株；B表示通過胚狀體進行無性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細胞雜交，其中②是誘導原生質(zhì)體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應(yīng)該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。

（3）從表中數(shù)據(jù)可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過程中；整個過程應(yīng)嚴格無菌無毒，利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用體積分數(shù)為70%的酒精消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）為促進愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時需降低2，4-D的濃度。當玉米愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長素，以促進苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細胞排列緊密，①錯誤；

②剛?cè)诤系闹参矬w細胞沒有成熟的大液泡；無法構(gòu)成滲透系統(tǒng)，不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，②錯誤；

③胚狀體細胞出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽；因此其細胞內(nèi)有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結(jié)果形成了具有根和芽的胚狀體；細胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯誤。

故選③。

【點睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過程及實驗結(jié)果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，意在考查學生讀圖能力和分析應(yīng)用能力?！窘馕觥垦心コ浞郑蜏匾种泼富钚砸种艱NA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分數(shù)為70-75%）酒精降低（適量的）生長素③27、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。具有特異性強、靈敏度高；并可能大量制備的特點。

2；單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞(A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞)，不需要A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】

（1）單克隆抗體制備的基本步驟：對小鼠進行免疫→提取B淋巴細胞→將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合→通過篩選；克隆化培養(yǎng)和擴大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體；此過程依賴的生物技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合等。剪碎后的組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個細胞。

（2）誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合的試劑是聚乙二醇（PEG）；因此試劑X是聚乙二醇（PEG）。用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選，只有雜交瘤細胞才能成活，因此經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細胞Y具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體的特點。上清液中含有雜交瘤細胞，由于雜交瘤細胞能分泌抗體，故利用抗原-抗體雜交技術(shù)對上清液進行抗體陽性檢測，以便篩選出能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞，選擇陽性孔中的細胞（即能產(chǎn)生芍藥苷抗體的細胞）繼續(xù)植入小鼠腹腔內(nèi)進行體內(nèi)培養(yǎng)，從小鼠腹水中可提取到抗芍藥苷的單克隆抗體，也可以將陽性孔中的細胞在體外進行擴大培養(yǎng)。

（3）①正常對照組：前期處理為腹腔注射生理鹽水(空白對照)；后期處理為a腹腔注射生理鹽水(空白對照)；造模組：模型組為口服生理鹽水(產(chǎn)生模型小鼠)，陽性藥組為口服芍藥甘草湯(藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用)，實驗組為c口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯(檢驗去除芍藥苷的芍藥甘草湯是否具有鎮(zhèn)痛作用)。

②因為造模組注射了冰醋酸，結(jié)合題意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭體反應(yīng)，因此前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著高于正常對照組，表明致痛處理成功。如果芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一，則陽性藥組小鼠的扭體次數(shù)最低，實驗組小鼠雖然口服的是去除了芍藥苷的芍藥甘草湯，但芍藥甘草湯中除了芍藥苷還有其他成分能夠起到鎮(zhèn)痛作用，則實驗組小鼠扭體次數(shù)低于模型組，因此若結(jié)果為實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。【解析】(1)動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合胰蛋白（膠原蛋白）

(2)聚乙二醇（PEG）既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗體抗原—抗體雜交

(3)腹腔注射生理鹽水口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯高于實驗組小鼠扭體次數(shù)高于陽性藥組低于模型組六、綜合題(共4題，共8分)28、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

(1)

構(gòu)建重組載體時；需要使用的工具酶為限制酶和DNA連接酶。大量制備A基因，即特定基因的擴增，常用PCR技術(shù)，利用PCR技術(shù)擴增基因時需要合成基因兩側(cè)的兩種不同的引物。

(2)

由題意可知，小鼠胚胎干細胞為受體細胞，培育轉(zhuǎn)基因動物時將重組載體導入受體細胞的常用方法為顯微注射法。由題意可知，neor為標記基因；結(jié)合題中該基因的作用可知，欲篩選含有重組載體的小鼠胚胎干細胞，應(yīng)將處理后的胚胎干細胞放在含有G418的培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，存活下來的即為導入重組載體的胚胎干細胞。

(3)

由題意可知，含有neor基因的細胞具有對G418的抗性，轉(zhuǎn)化的胚胎干細胞能在含G418的培養(yǎng)液中存活，說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含neor基因；HSV-tk1、HSV-tk2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細胞死亡，故能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中不含HSVtk，則在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中能存活的胚胎干細胞中含neor基因；而不含HSVtk，即發(fā)生正確整合的胚胎干細胞。

(4)

將正確整合的胚胎干細胞培育成小鼠；還需借助胚胎工程相關(guān)操作，如早期胚胎培養(yǎng)；胚胎移植等技術(shù)。

【點睛】

本題結(jié)合圖形，主要考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理和應(yīng)用，正確從圖中獲取有效信息并合理運用，屬于考綱中識記和理解層次的考查?！窘馕觥?1)限制酶和DNA連接酶PCR兩。

(2)顯微注射法G418

(3)正確整合。

(4)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)胚胎移植技術(shù)29、略

【分析】【分析】

分析題圖，1代表用asl-酪蛋白抗原對小鼠進行免疫，2代表細胞融合，3指經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，篩選特定的雜交瘤細胞，4代表體外培養(yǎng)雜交瘤細胞，5代表體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細胞，6代表對抗體進行提取和檢測。a是小鼠的B淋巴細胞，b是小鼠的骨髓瘤細胞；c是細胞融合后的雜交細胞，d為雜交瘤細胞，e為產(chǎn)生asl-酪蛋白抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】

（1）要制備as1-酪蛋白單克隆抗體，因而過程1要將asl-酪蛋白抗原注入小鼠體內(nèi)；將小鼠的脾臟組織分散成單個細胞，可以用胰蛋白酶、膠原蛋白酶進行處理；圖中細胞b要具有無限增殖的能力；因而可以用小鼠的骨髓瘤細胞。

（2）對于圖中的細胞d；需要用特定的選擇培養(yǎng)基（HAT選擇培養(yǎng)基）篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長；過程3再對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞e，該種細胞的特點是既能大量增殖，又能產(chǎn)生asl-酪蛋白抗體。

（3）由題干信息知，B淋巴細胞的DNA合成途徑有兩條，骨髓瘤細胞中的DNA合成途徑只有一條。向經(jīng)誘導后的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤，雜交瘤細胞中的DNA合成途徑一被阻斷，可通過輔助途徑合成DNA，故向經(jīng)誘導后的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤能篩選雜交瘤細胞?！窘馕觥?1)asl-酪蛋白抗原胰蛋白##膠原蛋白骨髓瘤。

(2)雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

(3)能30、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中質(zhì)粒含有SnaB、AvrⅡ、BglⅡ和SacI限制酶切割位點，其中SacI位于啟動子上，Bgl