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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年西師新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷176考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題,共10分)1、分別將未分化細(xì)胞群培養(yǎng)在植物激素X和植物激素Y濃度比不同的培養(yǎng)基中;未分化細(xì)胞群的變化情況如圖所示。據(jù)圖分析下列敘述正確的是。
A.植物激素X是生長素B.植物激素Y可誘導(dǎo)芽的生成C.實(shí)驗(yàn)所用的未分化細(xì)胞群可來自于不同種植物D.激素X和Y濃度比為1時(shí)細(xì)胞不能分化2、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述,正確的是()A.可以選取新鮮的洋蔥、豬成熟紅細(xì)胞等作為實(shí)驗(yàn)材料B.DNA只能溶于2mol/LNaCI溶液C.預(yù)冷的乙醇可用來溶解DNAD.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱3、“X基因”是DNA分子上一個(gè)有遺傳效應(yīng)的片段;若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如圖甲所示。經(jīng)4輪循環(huán)后,產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子,如圖乙所示,其中第③和④種DNA分子的個(gè)數(shù)有()
A.8個(gè)B.6個(gè)C.4個(gè)D.2個(gè)4、下圖表示改造哺乳動(dòng)物遺傳特性的兩種途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是()
A.將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞使用了顯微注射法B.獲得動(dòng)物1的受體細(xì)胞是受精卵細(xì)胞C.獲得動(dòng)物2的過程體現(xiàn)了受體細(xì)胞具有全能性D.動(dòng)物1和2的獲得過程均運(yùn)用了胚胎移植技術(shù)5、懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi),一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基,一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)貼壁生長,但不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行C.過高的灌流速率會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用,造成培養(yǎng)基浪費(fèi)D.配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓評(píng)卷人得分二、多選題(共6題,共12分)6、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問題的敘述,不正確的是()A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病,不會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細(xì)胞的研究D.世界各國都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器7、為了檢測(cè)藥物X、Y和Z的抗癌效果,在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肺癌細(xì)胞使其貼壁生長。實(shí)驗(yàn)組分別加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X、Y或Z,培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表:。組別細(xì)胞數(shù)目(個(gè)/孔)對(duì)照7.8×106藥物X6.7×104藥物Y5.3×105藥物Z8.0×106
A.對(duì)照組中只需加入等體積的二甲基亞礬溶劑即可B.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.計(jì)數(shù)時(shí)可用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞,使肺癌細(xì)胞脫落下來D.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,三種藥物均具有抗癌效果,但藥物X的抗癌效果最好8、研究發(fā)現(xiàn),跨膜糖蛋白CD47與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,能抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞表面的高,導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。為驗(yàn)證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,科學(xué)家按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是()
A.①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原B.②過程依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性C.③過程需要進(jìn)行抗體檢測(cè)D.與對(duì)照組相比,圖中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)會(huì)下降9、生活中常見的果酒、果醋和泡菜的制作離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是()A.家庭釀酒、制果醋和酸奶均需要選純種菌進(jìn)行發(fā)酵B.果醋制作的溫度一般控制在30~35℃,果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18~25℃C.制作泡菜壇口密封的目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵時(shí)所需的無氧環(huán)境D.果醋制作中期通入氮?dú)猓欣诖姿峋鷮⒁掖甲優(yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?0、科學(xué)研究發(fā)現(xiàn),未經(jīng)人工轉(zhuǎn)基因操作的番薯都含有農(nóng)桿菌的部分基因,而這些基因的遺傳效應(yīng)促使番薯根部發(fā)生膨大產(chǎn)生了可食用的部分,因此番薯被人類選育并種植。下列相關(guān)敘述正確的是()A.農(nóng)桿菌這些特定的基因可以在番薯細(xì)胞內(nèi)復(fù)制B.農(nóng)桿菌和番薯的基因都是4種堿基對(duì)的隨機(jī)排列C.農(nóng)桿菌和番薯的基因都是有遺傳效應(yīng)的DNA片段D.農(nóng)桿菌這些特定的基因可能在自然條件下轉(zhuǎn)入了番薯細(xì)胞11、新冠病毒通過刺突蛋白(S蛋白)的活性域(RBD)與人體細(xì)胞表面的ACE2受體相互作用感染細(xì)胞??茖W(xué)家設(shè)計(jì)了一種自然界中不存在的蛋白質(zhì)LCB1,可與S蛋白的RBD緊密結(jié)合,以干擾新冠病毒的感染。下列說法合理的是()A.LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似B.S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)可為設(shè)計(jì)LCB1提供信息C.設(shè)計(jì)LCB1時(shí),需避免在結(jié)構(gòu)上與ACE2類似D.生產(chǎn)LCB1涉及到基因工程的某些操作技術(shù)評(píng)卷人得分三、填空題(共6題,共12分)12、常用的轉(zhuǎn)化方法:
將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是_______,其次還有______和______等。
將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。
將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______,最常用的原核細(xì)胞是_____,其轉(zhuǎn)化方法是:先用______處理細(xì)胞,使其成為______,再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。13、來源:主要是從______中分離純化出來的。14、細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就______,稱為______。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面______時(shí),細(xì)胞就會(huì)_____,這種現(xiàn)象稱為______。15、什么是生物武器?簡(jiǎn)述生物武器的危害。__________16、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布,經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi),造成大規(guī)模傷亡,但對(duì)植物無害。(選擇性必修3P111)()17、第四步:_____評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題,共8分)18、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。(選擇性必修3P90)()A.正確B.錯(cuò)誤19、生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。(選擇性必修3P106)()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共36分)20、保加利亞桿菌和嗜熱鏈球菌是工業(yè)生產(chǎn)酸奶的常用菌種。酸奶制品在包裝;運(yùn)輸和貯藏過程中;易受酵母菌、霉菌等耐酸性真菌污染。為了篩選出抗真菌污染的乳酸桿菌作為酸奶的輔助發(fā)酵菌,進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。
(1)將待選的多株乳酸桿菌接種到MRS____________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中,進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需提供密閉環(huán)境,原因是_____________。培養(yǎng)后收集發(fā)酵上清液待用。
(2)向放有牛津杯(小金屬環(huán))的培養(yǎng)皿中倒入含耐酸性真菌作指示菌的培養(yǎng)基(圖1),待培養(yǎng)基完全凝固后拔出牛津杯,培養(yǎng)基上留下直徑相等的小孔。往孔中加入等量不同乳酸桿茵的發(fā)酵上清液,待其擴(kuò)散后置于恒溫箱中培養(yǎng)24h,測(cè)量抑菌圈(圖2)的大小。選取____________的乳酸桿菌F作為目標(biāo)菌種。
(3)研究者認(rèn)為還要用___________做指示菌;重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),確認(rèn)F菌確實(shí)可作為工業(yè)生產(chǎn)酸奶的輔助發(fā)酵苗。
(4)為研究F菌在酸奶體系中對(duì)耐酸性真菌的抑制效果;進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。
①霉菌污染實(shí)驗(yàn):
將添加了1×106、1×107單位F菌發(fā)酵后的酸奶作為實(shí)驗(yàn)組(各3杯平行樣品),恒溫放置28d,每7天肉眼觀察一次,記錄杯中酸奶表面是否有霉菌生長。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)記錄原始實(shí)驗(yàn)結(jié)果的表格或呈現(xiàn)最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)表格(二選一,要標(biāo)注表格名稱)。___________________________
②酵母菌污染實(shí)驗(yàn):
在添加1×106、1×107單位F菌發(fā)酵所得的酸奶中接種等量酵母菌,4℃下儲(chǔ)藏28d后,用稀釋涂布法對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù),結(jié)果表明F菌對(duì)酵母菌具有較高的抑菌率。不宜采用直接觀察法研究酸奶中酵母菌的生長情況,原因是________________。
(5)請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)有關(guān)F菌作為酸奶發(fā)酵輔助菌的后續(xù)研究方向。_______________________21、GDNF是一種多肽類的神經(jīng)營養(yǎng)因子;對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞有營養(yǎng)和保護(hù)作用,可用于運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷的治療。
(1)培養(yǎng)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞:接種前需對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌處理,培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的______,以防止污染;當(dāng)培養(yǎng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量時(shí),使用______處理;進(jìn)行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞,用于實(shí)驗(yàn)研究。
(2)研究GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長的影響:將(1)得到的細(xì)胞;平均分成4組進(jìn)行處理,得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示.
GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長的影響。
。分組處理細(xì)胞突起的平均數(shù)量(個(gè))細(xì)胞突起的平均長度(μm)AGDNF0ng/mL176120.12BGDNF50ng/mL217141.60CGDNF100ng/mL241160.39DGDNF200ng/mL198147.68①該實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組是_______。
②由表格中的數(shù)據(jù)可知_______。
③基于上述研究和所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),你能為治療運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷提供的方法有______。22、《本草綱目》記載;“蟬花可治療驚癇,夜啼心悸,功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體,內(nèi)含蟲草多糖;甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進(jìn)行人工培養(yǎng)。
(1)制備培養(yǎng)基:
①該實(shí)驗(yàn)選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基,配方如下:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,KH2PO42g,MgSO40.5g,瓊脂20g,用蒸餾水定容至1000mL,自然pH,培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養(yǎng)成分(至少寫出2種),該培養(yǎng)基的自然pH為______性范圍。
②為了便于篩選蟬擬青霉菌株,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養(yǎng)基從功能上分類屬于______培養(yǎng)基。
③配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理,目的是_______。檢測(cè)固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_____。
(2)蟬擬青霉的分離純化:取新鮮蟬花,挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。
(3)發(fā)酵生產(chǎn):發(fā)酵生產(chǎn)中常用液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)。下表為發(fā)酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測(cè)定結(jié)果,據(jù)表判斷_______(填“能”或“不能”)用發(fā)酵菌絲體替代天然蟬花,判斷的理由是_______。粗蛋白(%)粗纖維(%)灰份(%)水分(%)蟲草多糖(mg/g)甘露醇(mg/g)發(fā)酵菌絲體25.388.327.878.9233.278.9天然蟬花19.653.127.849.8128.553.623、四尾柵藻是一種淡水藻類;繁殖快;適應(yīng)性強(qiáng),可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量,研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶基因(DGAT1)與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體,經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻,主要研究過程如下圖,其中DGAT1-F(5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3')和DGAT1-R(5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3')是以DGAT1基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對(duì)引物,1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落呈現(xiàn)白色。請(qǐng)回答下列問題。
(1)過程①中需要的酶有____________,過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。
(2)研究中,在保存DGAT1基因時(shí),將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。
①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。
(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________(方法)接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株,培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。
(4)為檢測(cè)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá),研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn),請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng),一段時(shí)間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng),編號(hào)備用PCR驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體,提取基因組DNA,以DGAT1-F和DGAT1-R為引物,進(jìn)行PCR驗(yàn)證,未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照油脂含量測(cè)定利用索氏抽提法分別測(cè)定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較PCR驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題,共16分)24、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥;但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收,只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過程如圖1所示,圖2是乙中的培養(yǎng)基配方?;卮鹣铝袉栴}:
(1)從物理性質(zhì)上講,培養(yǎng)液甲與培養(yǎng)基乙的成分的區(qū)別是_____,培養(yǎng)基乙中尿素主要為微生物生長提供_____。
(2)若要對(duì)培養(yǎng)基乙中的微生物進(jìn)行鑒定,可在培養(yǎng)基中加入_____,觀察菌落周圍是否有_____色出現(xiàn)。
(3)稱取1.0g某土壤樣品轉(zhuǎn)入99mL無菌水中,再經(jīng)100倍稀釋后獲得低密度菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在多個(gè)固體培養(yǎng)基上,若經(jīng)培養(yǎng)后平均長出了46個(gè)酵母菌菌落,則該樣品中每克土壤約含酵母菌_____個(gè)。該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際活菌數(shù)_____(填“偏高”或“偏低”),原因是_____。25、基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽?;ㄒ蛉狈λ{(lán)色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開藍(lán)色花,因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細(xì)胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中,以期獲得藍(lán)色矮牽牛新品種,該過程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHI、Sau3AI、HindIII識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為
請(qǐng)回答下列問題:
(1)圖1質(zhì)粒中沒有顯示的結(jié)構(gòu)是______,啟動(dòng)子的功能是______________。
(2)基因工程中除質(zhì)粒外,______也可以作為運(yùn)載體。若用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),最好選用______兩種限制酶來切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段,理由是________。
(3)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌,最終成功導(dǎo)入藍(lán)色素基因的農(nóng)桿菌,在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時(shí)含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是_______________。
(4)檢測(cè)轉(zhuǎn)座酶F35H基因是否成功在普通矮牽牛細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,常采用的檢測(cè)技術(shù)是______。
(5)通過基因工程,將轉(zhuǎn)座酶F35H基因?qū)肫胀ò珷颗V?,獲得藍(lán)色矮牽?;ㄐ缕贩N的育種原理是__________________。相比傳統(tǒng)的花卉育種方法,利用基因工程育種的優(yōu)點(diǎn)是_________(答出2點(diǎn)即可)。26、研究發(fā)現(xiàn);新冠病毒外殼中的S蛋白具有很強(qiáng)的抗原性,可利用其制備單克隆抗體,制備流程設(shè)計(jì)如下圖所示,相關(guān)限制酶及其識(shí)別序列如下表所示,請(qǐng)分析回答問題:
限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)EcoRⅠG↓AATTCBamHⅡG↓GATCCBglⅠA↓GATCTSalⅠG↓TCGAC
(1)人體內(nèi),分泌抗體的細(xì)胞可來自于____________________細(xì)胞的增殖分化。
(2)根據(jù)病毒的結(jié)構(gòu),圖中①過程常用__________酶處理,完成②過程需要的酶是___________。
(3)檢測(cè)④過程是否獲得成功的方法是________________________,⑥過程常用的方法是_________________。
(4)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增無限增殖調(diào)控基因時(shí),科研人員設(shè)計(jì)了如下一對(duì)引物(部分序列):GAATTC____和____CCTAGG,其中下劃線部分序列的設(shè)計(jì)依據(jù)是___________,方框部分序列的設(shè)計(jì)目的是___________。
(5)抗體可變區(qū)氨基酸的組成和排列順序可隨抗體結(jié)合抗原的特異性不同而有較大的變異,由于可變區(qū)中氨基酸的種類以及排列順序干變?nèi)f化,故可形成許多種具有不同結(jié)合抗原特異性的抗體。為克服鼠源性單抗輸入人體后產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng),科研人員通過人工改造鼠源性單抗獲得了嵌合抗體。分析下圖,你認(rèn)為最符合臨床要求的嵌合抗體是A~D中的___________。嵌合抗體的研制屬于___________這一科技范疇。
27、2013年7月;中國試管嬰兒之母——盧光琇教授與研究伙伴共同宣布全球首批經(jīng)全基因組測(cè)序的PGD/PGS試管嬰兒在長沙誕生。新技術(shù)的突破意味著通過設(shè)計(jì)試管嬰兒解決部分不孕不育問題的同時(shí),部分腫瘤疾病;遺傳性疾病的家族性遺傳也將有望避免。
(1)設(shè)計(jì)試管嬰兒時(shí)為了提高受孕率,胚胎移植時(shí)多采用多胚胎移植,因此需要用_________處理;促進(jìn)母親排出更多的卵子。
(2)胚胎發(fā)育的卵裂期在_________內(nèi)進(jìn)行。受精卵經(jīng)72小時(shí)體外培養(yǎng)發(fā)育成32細(xì)胞左右的桑椹胚,可用于__________。
(3)為了某些需要,需對(duì)胚胎的性別進(jìn)行鑒定。目前最有效最準(zhǔn)確的方法是SRY﹣PCR法,操作的基本程序是:從被測(cè)的囊胚中取出幾個(gè)_______(填“部位”)細(xì)胞,提取DNA;然后用位于Y染色體上的性別決定基因(即SRY基因)的一段堿基作____,以_______為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增;與SRY特異性探針出現(xiàn)陽性反應(yīng)者,胚胎為_______性。
(4)設(shè)計(jì)試管嬰兒、克隆人等都是引起人們廣泛爭(zhēng)論的問題。我國不反對(duì)治療性克隆,即可利用人體細(xì)胞核移植等技術(shù)治療人類疾病,在去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核時(shí),可用微型吸管把位于________和透明帶之間的第一極體一并吸出。參考答案一、選擇題(共5題,共10分)1、D【分析】【詳解】
A;在植物組織培養(yǎng)中生長素的主要作用是促進(jìn)細(xì)胞生長、分裂和分化;細(xì)胞分裂素的主要作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂、誘導(dǎo)芽的形成,二者共同起作用,故植物激素Y是生長素,植物激素X是細(xì)胞分裂素,A錯(cuò)誤;
B;植物激素Y是生長素;可以誘導(dǎo)細(xì)胞群分化成根,B錯(cuò)誤;
C;該實(shí)驗(yàn)研究植物激素X和植物激素Y在植物組織培養(yǎng)中的作用;未分化細(xì)胞群應(yīng)來自于同種植物,C錯(cuò)誤;
D;由圖可知;植物激素X與植物激素Y濃度比為1時(shí),利于愈傷組織的形成,細(xì)胞不能分化;比值大于1時(shí),利于細(xì)胞群分化出芽;比值小于1時(shí),利于細(xì)胞群分化出根,D正確。
故選D。2、D【分析】【分析】
DNA的粗提取和分離:
1;DNA的溶解性:(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度最低);利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。
2;DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì);但是對(duì)DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫,而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對(duì)DNA沒有影響。
3;DNA的鑒定:在沸水浴條件下;DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】
A;豬是哺乳動(dòng)物;哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,不含DNA,不能用于做DNA提取實(shí)驗(yàn)材料,A錯(cuò)誤;
B;DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同;當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mo/L時(shí),DNA溶解度最小,0.15mol/L、2mol/LNaCI溶液中溶解度較大,B錯(cuò)誤;
C;在預(yù)冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低;DNA的沉淀量最大,故預(yù)冷的乙醇可用來進(jìn)一步純化粗提的DNA,C錯(cuò)誤;
D;在沸水浴條件下;DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑,D正確。
故選D。
【點(diǎn)睛】3、B【分析】PCR:
(1)概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù);
(2)原理:DNA雙鏈復(fù)制;
(3)條件:模板DNA;四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);
(4)過程:高溫變性;低溫復(fù)性、中溫延伸。
(5)結(jié)果:經(jīng)過n次擴(kuò)增,形成的DNA分子數(shù)是2n個(gè);其中只有2條單鏈不含有引物。
【詳解】
通過圖中信息可知;“X基因”第1次復(fù)制得到兩個(gè)DNA:①和②各1個(gè);“X基因”第2次復(fù)制得到4個(gè)DNA:①復(fù)制得①和③;②復(fù)制得②和④;“X基因”第3次復(fù)制得到8個(gè)DNA:①復(fù)制得①和③、③復(fù)制得③和⑤、②復(fù)制得②和④、④復(fù)制得④和⑤;“X基因”第4次復(fù)制得到16個(gè)DNA:①復(fù)制得①和③、②復(fù)制得②和④、2個(gè)③復(fù)制得2個(gè)③和2個(gè)⑤、2個(gè)④復(fù)制得2個(gè)④和2個(gè)⑤、兩個(gè)⑤復(fù)制得到4個(gè)⑤。
從上面的推測(cè)可知,經(jīng)4輪循環(huán)產(chǎn)物后,產(chǎn)物中有8個(gè)⑤、3個(gè)④、3個(gè)③、1個(gè)②、1個(gè)①。因此,經(jīng)4輪循環(huán)后,第③和④種DNA分子的個(gè)數(shù)有:3+3=6個(gè),故選B。4、C【分析】【分析】
分析題圖:動(dòng)物1是含有外源基因的受體細(xì)胞直接發(fā)育而來的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物;動(dòng)物2是采用基因工程;核移植技術(shù)培養(yǎng)形成的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物。
【詳解】
A;受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí);將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞使用了顯微注射法,A正確;
B;轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的獲得需將目的基因?qū)胧芫眩还诗@得動(dòng)物1的受體細(xì)胞是受精卵細(xì)胞,因?yàn)槭芫训娜苄愿撸珺正確;
C;由重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)完整的生物體動(dòng)物2依據(jù)的原理是全能性;受體細(xì)胞不具有全能性,C錯(cuò)誤;
D;兩種動(dòng)物的獲得均運(yùn)用了胚胎移植技術(shù)(分別需要移植到動(dòng)物1和動(dòng)物2體內(nèi));D正確。
故選C。5、A【分析】【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):(1)概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織;將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和繁殖。(2)原理:細(xì)胞增殖。(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
【詳解】
A;懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞不出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象;A錯(cuò)誤;
B;懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻;而灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行,B正確;
C;過高的灌流速率;培養(yǎng)的細(xì)胞沒有及時(shí)利用營養(yǎng)物質(zhì),會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用,造成培養(yǎng)基浪費(fèi),C正確;
D;動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞外液的滲透壓是相對(duì)穩(wěn)定且適宜的;配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓,D正確。
故選A。二、多選題(共6題,共12分)6、B:C【分析】【分析】
人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾??;但有可能被濫用,如用于設(shè)計(jì)嬰兒性別等,可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響﹔進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí),可通過基因進(jìn)行檢測(cè),也可通過測(cè)定基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)來進(jìn)行;對(duì)于基因歧視現(xiàn)象,可通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播;倫理道德教育和立法得以解決。
【詳解】
A;基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德;A正確;
B;設(shè)計(jì)試管嬰兒如專門用來設(shè)計(jì)嬰兒性別是不符合倫理道德的;可能會(huì)存在負(fù)面影響,B錯(cuò)誤;
C;我國禁止生殖性克隆人;但允許人胚胎干細(xì)胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進(jìn)行,C錯(cuò)誤;
D;生物武器危害巨大;世界各國都應(yīng)禁止生物武器,D正確。
故選BC。7、B:D【分析】【分析】
分析題意可知:該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菣z測(cè)藥物X和Y的抗癌活性;自變量是藥物X或Y,因變量是檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量。
【詳解】
A;加入等體積的二甲基亞礬溶作為空白對(duì)照;排除體積和溶劑等無關(guān)因素的影響,A正確;
B;抗生素具有殺菌(不是殺病毒)作用;為防止培養(yǎng)液被污染,可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素,B錯(cuò)誤;
C;要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來;需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,C正確;
D;分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果;加入X的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是6.7×104,加入Y的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是5.3×105,說明藥物X的抗癌效果比Y好,加入Z的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是8.0×106,與空白對(duì)照相比無抗癌作用,D錯(cuò)誤。
故選BD。8、A:B:C【分析】【分析】
單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng);之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】
A;①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原;通過多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞,A正確;
B;②過程表示誘導(dǎo)細(xì)胞融合;依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性,B正確;
C;③過程表示雜交瘤細(xì)胞多次篩選培養(yǎng);該過程需要進(jìn)行抗體檢測(cè),從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞,C正確;
D;根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用”;因此與對(duì)照組相比,圖中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)會(huì)升高,D錯(cuò)誤。
故選ABC。9、B:C【分析】【分析】
制作果醋的菌種為原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一種好氧菌。當(dāng)氧氣;糖源都充足時(shí);醋酸菌將果汁中的糖分分解成醋酸;當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>
【詳解】
A;家庭制作果酒、果醋和酸奶過程中有多種微生物參與發(fā)酵過程;因此均不是純種發(fā)酵,A錯(cuò)誤;
B;果醋制作的溫度一般控制在30~35℃;果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18~25℃,B正確;
C;泡菜腌制時(shí)需要乳酸菌發(fā)酵;乳酸菌是厭氧細(xì)菌,在無氧的情況下,將葡萄糖分解成乳酸,因此壇子加水密封的目的是營造缺氧環(huán)境,利于乳酸菌發(fā)酵,C正確;
D;當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時(shí);醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿?,D錯(cuò)誤。
故選BC。
【點(diǎn)睛】
本題考查考生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決問題的能力。10、A:C:D【分析】【分析】
1;基因的概念:基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段;是決定生物性狀的基本單位。
2;基因和遺傳信息的關(guān)系:基因中的脫氧核苷酸(堿基對(duì))排列順序代表遺傳信息。
【詳解】
A;DNA能夠自我復(fù)制;農(nóng)桿菌這些特定的基因可以在番薯細(xì)胞內(nèi)復(fù)制,A正確;
B;基因中4種堿基對(duì)的排列順序是特定的;B錯(cuò)誤;
C;農(nóng)桿菌和番薯的基因都是有遺傳效應(yīng)的DNA片段;C正確;
D;農(nóng)桿菌這些特定的基因可能在自然條件下轉(zhuǎn)入了番薯細(xì)胞;如利用運(yùn)載體,D正確。
故選ACD。
【點(diǎn)睛】11、A:B:D【分析】【分析】
1;蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ);通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。
2;蛋白質(zhì)工程崛起的緣由:基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。
3;蛋白質(zhì)工程的基本原理:它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu);又稱為第二代的基因工程。
4;基本途徑:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā);設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列,找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑。
【詳解】
A;S蛋白的抗體能與S蛋白R(shí)BD特異性結(jié)合;而根據(jù)題干可知:LCB1可與S蛋白R(shí)BD緊密結(jié)合,說明LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似,A正確;
B;由于LCB1可與S蛋白R(shí)BD緊密結(jié)合;故LCB1可依據(jù)S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì),B正確;
C;由題干信息分析可知;新冠病毒是通過其表面的S蛋白的RBD與人體細(xì)胞表面的ACE2受體相互作用;而人工合成的LCB1可識(shí)別并緊密結(jié)合S蛋白的RBD,阻止S蛋白的RBD與ACE2受體結(jié)合,由此說明LCB1可能與ACE2受體的某些區(qū)域結(jié)構(gòu)類似,C錯(cuò)誤;
D;可用蛋白質(zhì)工程進(jìn)行LCB1的設(shè)計(jì)和生產(chǎn);而蛋白質(zhì)工程是建立在基因工程的基礎(chǔ)之上的,因此生產(chǎn)LCB1用到了基因工程的操作技術(shù),D正確。
故選ABD。
【點(diǎn)睛】三、填空題(共6題,共12分)12、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子13、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】原核生物14、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】貼附在瓶壁上細(xì)胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細(xì)胞的接觸抑制。15、略
【分析】【詳解】
生物武器種類:包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等,以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布,經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi),造成大規(guī)模傷亡,也能損害植物,若用與戰(zhàn)爭(zhēng),則可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?!窘馕觥可镂淦鞣N類:包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等,以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布,經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi),造成大規(guī)模傷亡,也能損害植物。16、略
【分析】【詳解】
生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布,經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi),造成大規(guī)模傷亡,同時(shí)可毀壞植物,該說法錯(cuò)誤?!窘馕觥垮e(cuò)誤17、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】目的基因的檢測(cè)和鑒定四、判斷題(共2題,共8分)18、B【分析】【詳解】
基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí);說明并未開始實(shí)際應(yīng)用。
故題中描述錯(cuò)誤。19、A【分析】【詳解】
生殖性克隆,即通常所說的克隆人,通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體,即通常所說的克隆人,該說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共36分)20、略
【分析】醇母菌生長時(shí)不出現(xiàn)菌絲;無法肉眼直接觀察研究F菌抑菌的機(jī)理,F(xiàn)茵抑菌物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì),F(xiàn)菌是否會(huì)影響酸奶的感官品質(zhì),F(xiàn)菌對(duì)人體健康的影響(合理即可)
【分析】
菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)是發(fā)酵生產(chǎn)的第一道工序;該工序又稱之為種子制備。種子制備不僅要使菌體數(shù)量增加,更重要的是,經(jīng)過種子制備培養(yǎng)出具有高質(zhì)量的生產(chǎn)種子供發(fā)酵生產(chǎn)使用。擴(kuò)大培養(yǎng)一般選液體培養(yǎng)基,因?yàn)橐后w培養(yǎng)基可與菌種充分接觸。
【詳解】
(1)將待選的多株乳酸桿菌接種到MRS液體培養(yǎng)基中;進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需提供密閉環(huán)境,原因是乳酸菌是厭氧型微生物/為乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境。培養(yǎng)后收集發(fā)酵上清液待用。
(2)據(jù)題意分析可知;選取抑菌圈較大的乳酸桿菌F作為目標(biāo)菌種,因?yàn)橐志Υ?,說明其抑制真菌的能力強(qiáng)。
(3)研究者認(rèn)為還要用保加利亞桿菌和嗜熱鏈球菌做指示菌;重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),確認(rèn)F菌確實(shí)可作為工業(yè)生產(chǎn)酸奶的輔助發(fā)酵苗。
(4)為研究F菌在酸奶體系中對(duì)耐酸性真菌的抑制效果;進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。
①霉菌污染實(shí)驗(yàn):依據(jù)實(shí)驗(yàn)的對(duì)照原則;還應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照組,且同樣設(shè)3杯平行樣品,其它操作及觀察同實(shí)驗(yàn)組,具體圖表見答案。
②酵母菌污染實(shí)驗(yàn):不宜采用直接觀察法研究酸奶中酵母菌的生長情況;原因是醇母菌生長時(shí)不出現(xiàn)菌絲,無法肉眼直接觀察.
(5)請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)有關(guān)F菌作為酸奶發(fā)酵輔助菌的后續(xù)研究方向:研究F菌抑菌的機(jī)理;F茵抑菌物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì),F(xiàn)菌是否會(huì)影響酸奶的感官品質(zhì),F(xiàn)菌對(duì)人體健康的影響。
【點(diǎn)睛】
本題主要考察微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),其中準(zhǔn)確理解微生物培養(yǎng)的步驟,是解題的關(guān)鍵?!窘馕觥恳后w乳酸菌是厭氧型微生物/為乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境抑菌圈較大保加利亞桿菌和嗜熱鏈球菌記錄原始實(shí)驗(yàn)結(jié)果表格。
。組別。
杯號(hào)。
放置時(shí)間(天數(shù))
0
7
14
21
28
21
28
對(duì)照組。
1
2
3
實(shí)驗(yàn)組1(1×106單位)
1
2
3
實(shí)驗(yàn)組2(1×107單位)
1
2
3
呈現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)表格。
。組別。
放置時(shí)間(天數(shù))
0
7
14
21
28
28
對(duì)照組。
實(shí)驗(yàn)組1
實(shí)驗(yàn)組2
21、略
【分析】【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程:取胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞;制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng).
(1)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中;接種前需對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌處理,培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的抗生素,以防止污染;當(dāng)培養(yǎng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量時(shí),使用胰蛋白酶處理,進(jìn)行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞,用于實(shí)驗(yàn)研究。
(2)
①分析表格可知;A組的GDNF濃度為0,作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組。
②由表格中的數(shù)據(jù)可知;與對(duì)照組比較可知,實(shí)驗(yàn)組中的細(xì)胞突起的平均數(shù)量和平均長度都更大,在一定范圍內(nèi),且隨GDNF濃度增加,細(xì)胞突起的平均數(shù)量和平均長度都在增加,因此由表格中的數(shù)據(jù)可知,GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長有促進(jìn)作用;在一定范圍內(nèi),隨GDNF濃度增加,促進(jìn)作用增強(qiáng),超過最適濃度,促進(jìn)作用減弱;GDNF濃度在100ng/ml時(shí)促進(jìn)作用最明顯。
③從實(shí)驗(yàn)可知;GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長有一定的促進(jìn)作用,因此在治療運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷時(shí),可以通過藥物/注射治療;基因治療、動(dòng)物細(xì)胞融合制備單抗等方法治療運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞損傷。
【點(diǎn)睛】
本題考查了動(dòng)物細(xì)胞工程的有關(guān)知識(shí),要求考生能夠識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程,能夠利用對(duì)照實(shí)驗(yàn)的觀點(diǎn)分析表格數(shù)據(jù),難度適中?!窘馕觥浚?)抗生素胰蛋白酶(膠原蛋白酶)
(2)A組GDNF對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞生長有促進(jìn)作用;在一定范圍內(nèi),隨GDNF濃度增加,促進(jìn)作用增強(qiáng),超過最適濃度,促進(jìn)作用減弱;GDNF濃度在100ng/ml時(shí)促進(jìn)作用最明顯藥物/注射治療、基因治療、動(dòng)物細(xì)胞融合制備單抗等22、略
【分析】【分析】
為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物;實(shí)驗(yàn)所配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理;可將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間,以檢測(cè)培養(yǎng)基的滅菌效果,若培養(yǎng)基中無菌落長出,說明培養(yǎng)基的滅菌是合格的;在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。
【詳解】
(1)①馬鈴薯中含有淀粉;蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽等物質(zhì);故培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)成分;
培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性;培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性,即培養(yǎng)蟬擬青霉的培養(yǎng)基的自然pH為酸性范圍。
②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖(細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分)的合成來抑制細(xì)菌的生長;而對(duì)真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉(真菌)菌株,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制細(xì)菌的生長,該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。
③為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物;配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理;將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間,若培養(yǎng)基中無菌落長出,說明固體培養(yǎng)基的滅菌是合格的。
(2)蟬擬青霉的分離純化:由(1)的題干信息可知;PDA為固體培養(yǎng)基,在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。
(3)根據(jù)題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體,內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”,并結(jié)合表格信息可知,發(fā)酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花,故能用發(fā)酵菌絲體來替代天然蟬花?!窘馕觥?1)碳源;氮源、無機(jī)鹽酸細(xì)菌選擇殺滅培養(yǎng)基中的微生物將滅菌的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間;觀察是否長出菌落。
(2)平板劃線(稀釋涂布平板)
(3)能發(fā)酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花23、略
【分析】【分析】
1;基因工程的基本工具:限制性內(nèi)切核酸酶;識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶,將兩個(gè)DNA片段連接起來,恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體,將外源基因送入受體細(xì)胞。
2;基因工程的基本過程:目的基因的篩選與獲??;基因表達(dá)載體的構(gòu)建,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,目的基因的檢測(cè)和鑒定。
【詳解】
(1)過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR,逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與,PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開,對(duì)比幾種限制酶的結(jié)合位點(diǎn)和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列,可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。
(2)將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌;可以與外界環(huán)境隔離,能夠穩(wěn)定保存,準(zhǔn)確復(fù)制,大腸桿菌比基因方便取用,故選①②④。
(3)根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法??寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因;1acZ基因;1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落呈現(xiàn)白色,所以為篩選獲得目標(biāo)菌株,培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。
(4)pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因,所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng),一段時(shí)間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng),液體培養(yǎng)基可以用于擴(kuò)大培養(yǎng),增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照,所以利用索氏抽提法分別測(cè)定(等量的)轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量,從而檢測(cè)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)。【解析】(1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI
(2)①②④
(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素;X-gal、IPTG
(4)卡那霉素?cái)U(kuò)大培養(yǎng)(等量的)轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻六、綜合題(共4題,共16分)24、略
【分析】【分析】
1.培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構(gòu)成。
(1)概念:人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求;配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。
(2)營養(yǎng)構(gòu)成:各種培養(yǎng)基一般都含有水;碳源、氮源、無機(jī)鹽;此外還要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件。
2.微生物常見的接種的方法:
①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板;接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后;均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。
(1)
從物理性質(zhì)上講;培養(yǎng)液甲中無瓊脂,因此為液體狀態(tài),培養(yǎng)基乙為固體狀態(tài),是因?yàn)槠涑煞种屑尤肓四虅?-瓊脂。培養(yǎng)基乙中尿素主要為微生物生長提供氮源,因?yàn)槟蛩刂泻械亍?/p>
(2)
若要對(duì)培養(yǎng)基乙中的微生物進(jìn)行鑒定;可在培養(yǎng)基中加入酚紅溶液,觀察菌落周圍是否有紅色出現(xiàn),因?yàn)槟蛩胤纸饩軐⒛蛩胤纸獬砂焙投趸?,其中氨?huì)使培養(yǎng)基的pH升高,進(jìn)而可使酚紅指示劑變紅。
(3)
稱取1.0g某土壤樣品轉(zhuǎn)入99mL無菌水中,再經(jīng)100倍稀釋后獲得低密度菌懸液。相當(dāng)于稀釋了104倍,分別取0.1mL菌懸液涂布在多個(gè)固體培養(yǎng)基上,若經(jīng)培養(yǎng)后平均長出了46個(gè)酵母菌菌落,則該樣品中每克土壤約含酵母菌46÷0.1×104=4.6×106個(gè)。該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際活菌數(shù)“偏低”;這是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上只能觀察到一個(gè)菌落,而我們也統(tǒng)計(jì)的一個(gè)菌落,因此數(shù)量偏低。
【點(diǎn)睛】
熟知培養(yǎng)基的概念、成分和分類是解答本題的關(guān)鍵,掌握微生物接種的方法以及相關(guān)計(jì)算是解答本題的另一關(guān)鍵。分解尿素的微生物的分離和鑒別是本題的重要考點(diǎn)?!窘馕觥?1)培養(yǎng)液甲中無瓊脂氮源。
(2)酚紅溶液紅。
(3)4.6×106偏低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上只能觀察到一個(gè)菌落25、略
【分析】【分析】
基因工程的基本操作程序:1;目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得、真核基因是人工合成;人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法、化學(xué)合成法、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建;3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;4、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。
【小題1】
基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟;基因表達(dá)載體上包括:目的基因;啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等,根據(jù)圖1所示,質(zhì)粒中含有目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子,沒有標(biāo)注出來的結(jié)構(gòu)是復(fù)制原點(diǎn)。啟動(dòng)子的作用是啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。
【小題2】
基因工程中的運(yùn)載體包括質(zhì)粒;噬菌體和動(dòng)植物病毒。若選用BamHI限制酶;會(huì)將兩種標(biāo)記基因都破壞。選用HindIII和Sau3AI限制酶,既避免了目的基因和質(zhì)粒的任意連接,又保留了一種標(biāo)記基因(氨芐青霉素抗性基因)。
【小題3】
構(gòu)建好的重組質(zhì)粒上;含有氨芐青霉素抗性基因,但四環(huán)素抗性基因受損,因此能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長,但不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。
【小題4】
目的基因是否成功在宿主細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄;可采用PCR等技術(shù)檢測(cè)。
【小題5】
基因工程育種的原理是基因重組。基因工程的優(yōu)點(diǎn)主要有兩點(diǎn):能按照人們的意愿定向改造生物的性狀、能打破不同物種間的生殖障礙。【解析】(1)復(fù)制原點(diǎn)啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄;是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。
(2)噬菌體和動(dòng)植物病毒HindIII;Sau3AI防止
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