2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷673考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列有關(guān)“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗的敘述正確的是（）A.高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時應(yīng)按順時針方向依次旋緊每一個螺旋B.選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類C.對培養(yǎng)皿進行編號或?qū)N進行標注時，應(yīng)使用記號筆在皿底標記D.利用平板劃線法可對微生物進行接種、純化、分離和計數(shù)2、紫草素具有抗菌、消炎效果。在工業(yè)化生產(chǎn)中，取紫草植株部分組織誘導(dǎo)形成紫草愈傷組織，再轉(zhuǎn)入紫草素形成培養(yǎng)基，然后再將細胞破碎后提取出紫草素。下列相關(guān)敘述中，不正確的是（）A.工業(yè)化生產(chǎn)過程包括細胞的脫分化和再分化B.愈傷組織是具有再分化能力的薄壁細胞C.紫草素在細胞內(nèi)合成后被分泌到細胞外D.紫草的愈傷組織細胞在低滲溶液中一般不會漲破3、下圖為某動物克隆流程圖；下列說法錯誤的是（）

A.同一個體的體細胞都能經(jīng)過該流程得到新個體B.②過程操作前常對離體體細胞進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)C.①過程可以使用紫外線破壞細胞核D.③過程剛開始時細胞核中的基因沒有表達4、煙薯-25是一種甜度大、抗病力強、產(chǎn)量高的紅薯。它是通過無性繁殖的作物，多代繁殖后病毒會在體內(nèi)積累，導(dǎo)致含糖量不足，產(chǎn)量下降。大面積栽培時，一般都用脫毒苗。下列有關(guān)脫毒苗培育過程的敘述，錯誤的是（）A.脫毒苗培育過程的原理是高度分化的植物細胞具有全能性B.脫毒苗培育過程需經(jīng)歷脫分化和再分化兩個階段C.脫分化和再分化的培養(yǎng)基成分是相同的，但兩個階段光照條件不同D.培育脫毒苗應(yīng)將組織塊進行消毒處理，接種過程應(yīng)進行無菌操作5、某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，通過一定的技術(shù)，使青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿中得到了過量表達，其過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.PCR過程中，溫度需要控制在90C以上的目的是破壞氫鍵B.構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中，目的基因需插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上C.農(nóng)桿菌的作用是感染植物、并將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中D.用熒光標記的fps基因作為探針可以檢測目的基因是否表達6、下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述,正確的是（）（）A.B.使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌C.果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵D.腐乳制作所需要的適宜溫度最高使用的菌種都具有細胞壁、核糖體、DNA和RNA7、人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，改造后的t-PA蛋白能顯著降低出血副作用。下圖表示構(gòu)建含t-PA改良基因重組質(zhì)粒的過程示意圖。相關(guān)說法錯誤的是（）

A.構(gòu)建重組質(zhì)粒時，選用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡB.需要DNA聚合酶將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接C.新霉素抗性基因的作用是便于將導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來D.在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、下圖表示形成cDNA并進行PCR擴增的過程。據(jù)圖分析；下列敘述錯誤的是（）

A.①過程所需的原料是脫氧核苷酸B.②過程所需的酶必須耐高溫C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的引物對之間不能互補配對9、下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述，不正確的是（）A.用蒸餾水使家兔的紅細胞吸水漲破，可獲取富含DNA的濾液B.植物材料需先用洗滌劑破壞細胞壁再吸水脹破，釋放DNAC.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液D.鑒定DNA時，將絲狀物加入二苯胺試劑中并進行沸水浴，冷卻后觀察現(xiàn)象10、為探究某物種的等位基因“CST1”與“cst1E81K”的功能，科研人員將表達CST1和cst1E81K的質(zhì)粒分別導(dǎo)入無法吸收葡萄糖的酵母菌（以麥芽糖為碳源），經(jīng)處理后再將其接種在含不同碳源的培養(yǎng)基上，結(jié)果如下圖所示，下列說法正確的是（）

A.上述酵母菌在接種前的處理是對其進行等濃度梯度的稀釋B.在含葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入CST1的酵母菌存活率最高C.據(jù)圖推測，CST1的功能可能是轉(zhuǎn)運葡萄糖進入細胞D.導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于導(dǎo)入CST1的酵母菌11、甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細胞雜交，成功地將乙品種細胞質(zhì)中的可育基因引入甲中，下圖為該操作示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可使用離心法B.融合的原生質(zhì)體再生出細胞壁后再進行組織培養(yǎng)C.雜種細胞經(jīng)過一定激素和營養(yǎng)的誘導(dǎo)，發(fā)育成為雜種植株D.篩選出的雜種植株含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，但只能通過母本進行傳遞12、下圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項目獲得成功B.將完成導(dǎo)入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的就是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細菌C.將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程共形成了4個磷酸二酯鍵D.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細菌B之前，可以用Ca2+處理細菌B13、2019年12月以來，新型冠狀病毒導(dǎo)致的肺炎在世界范圍爆發(fā)，造成多人死亡?？茖W(xué)工作者經(jīng)研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)種快速檢驗新冠肺炎病原體的方法，以正確診斷。下列與新型冠狀病毒研究、診斷有關(guān)的說法中正確的是（）A.鏡檢法：在光學(xué)顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液，以發(fā)現(xiàn)病原體B.PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)，可把病原體的基因逆轉(zhuǎn)錄后在幾十分鐘內(nèi)擴增到數(shù)百萬倍C.抗原—抗體法：用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合，發(fā)現(xiàn)病原體D.DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理來檢測病原體14、某對美國夫婦將用他們精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亞墨爾本一家不孕癥治療中心。在一次外出時，他們因飛機失事而去世。于是有親人提出，可以將該夫婦冷藏的胚胎植入某個受體母親子宮，生下一個孩子來繼承遺產(chǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技術(shù)B.若實施胚胎移植，需要受體母親處于合適的生理狀態(tài)C.受體母親與胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.該件事反映了“胚胎冷藏”技術(shù)可能帶來倫理問題評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、一般包括______、______等技術(shù)16、回答下列問題。

（1）目前人類對基因________及基因間的________________尚缺乏足夠的認識，要想通過基因檢測達到預(yù)防疾病的目的是困難的；況且人類的____________病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和________________有關(guān)。

（2）生物武器種類包括__________、________、__________，以及經(jīng)過___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下_____________、_____________、______________生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散。17、重組DNA或重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞后，篩選______的依據(jù)是______。18、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。19、在我國市場上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問題，進行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認為：目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點是什么_____？20、科學(xué)家采用定點誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點是什么？_________評卷人得分四、實驗題(共4題，共32分)21、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）將發(fā)酵裝置放在18～25℃環(huán)境中，每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設(shè)計成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對從出料口c取樣的物質(zhì)進行檢驗，若樣液變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。

（4）產(chǎn)生酒精后，若在發(fā)酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環(huán)境中，適時打開______向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________。22、《本草綱目》記載；“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進行人工培養(yǎng)。

(1)制備培養(yǎng)基：

①該實驗選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基，配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，瓊脂20g，用蒸餾水定容至1000mL，自然pH，培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養(yǎng)成分（至少寫出2種），該培養(yǎng)基的自然pH為______性范圍。

②為了便于篩選蟬擬青霉菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養(yǎng)基從功能上分類屬于______培養(yǎng)基。

③配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理，目的是_______。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_____。

(2)蟬擬青霉的分離純化：取新鮮蟬花，挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

(3)發(fā)酵生產(chǎn)：發(fā)酵生產(chǎn)中常用液體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)。下表為發(fā)酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測定結(jié)果，據(jù)表判斷_______（填“能”或“不能”）用發(fā)酵菌絲體替代天然蟬花，判斷的理由是_______。粗蛋白（%）粗纖維（%）灰份（%）水分（%）蟲草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）發(fā)酵菌絲體25．388．327．878．9233．278．9天然蟬花19．653．127．849．8128．553．623、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分數(shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實驗設(shè)計思路______________24、番茄果實在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，但不利于保鮮。科學(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長果實保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈式反應(yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長果實保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭毎姆椒ǚQ為_____。要檢測感染農(nóng)桿菌后的番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機營養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。評卷人得分五、綜合題(共4題，共32分)25、生物技術(shù)已經(jīng)滲入到了我們生活的方方面面；比如：

（1）目前臨床用的胰島素生效較慢，科學(xué)家將胰島素B鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對_______（胰島素/胰島素mRNA/胰島素基因/胰島）進行定向改造。

（2）許多不孕不育的夫婦受益于試管嬰兒技術(shù)，在體外受精前，要對采集到的精子進行_____處理，才能與卵子受精。受精后形成的受精卵要移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)一段時間再移植到母親體內(nèi)，早期胚胎發(fā)育到________階段的某一時刻，會沖破透明帶，稱之為“_______”。

（3）生態(tài)工程是實現(xiàn)________經(jīng)濟最重要的手段之一。在進行林業(yè)工程建設(shè)時，一方面要號召農(nóng)民種樹，保護環(huán)境。另一方面要考慮貧困地區(qū)農(nóng)民的生活問題，如糧食、燒柴以及收入等問題，其主要體現(xiàn)的生態(tài)工程的基本原理是_________________（只填一個）。連年種植單一品種造成病蟲害增加主要違反了原理________________。

（4）一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對已破壞的生態(tài)系統(tǒng)進行修復(fù)，對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。與傳統(tǒng)的工程相比，生態(tài)工程具有少消耗、多效益、_________等特點。26、新型冠狀病毒的檢測方法很多；實時熒光RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)）法是目前核酸檢測的主要方法，操作流程：采集樣本→提取RNA→逆轉(zhuǎn)錄成cDNA→PCR擴增→結(jié)果分析。下圖是RT-PCR兩步法的過程圖，在PCR擴增時加入能與目的基因（新冠病毒的核殼蛋白N基因）結(jié)合的熒光探針。目的基因合成越多，熒光信號越強，回答下列問題。

(1)構(gòu)建cDNA文庫時，會利用_____酶，將cDNA斷開并與載體結(jié)合，然后把各個片段_____到一個受體菌群中儲存。cDNA文庫構(gòu)建的意義有_____（回答1點）。

(2)在配置PCR擴增液時，加入的熒光探針序列：5′-TTGCTAGATT-3′，如果模板中存在N基因序列，與探針結(jié)合的序列應(yīng)該是5′_____3′。如果某人沒有感染新冠病毒，則PCR時DNA實時熒光信號強度_____（增強/減弱/不變）。

(3)我國前不久推出新冠病毒抗原檢測的方法，相較核酸檢測，方便簡單，出結(jié)果較快，其原理是_____，目前國家推廣“抗原篩查，核酸診斷”的監(jiān)測模式，如果取樣中所含病原體數(shù)量較少時，核酸檢測的優(yōu)點是_____。27、許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因；其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽氖荏w細胞中篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞，過程如圖所示。請據(jù)圖回答：

(1)基因工程中，基因表達載體的組成包括復(fù)制原點、啟動子、終止子、_________、_________。

(2)限制酶EcoRI的識別序列和切割位點是Sma_I的識別序列和切割位點是圖中目的的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是_________，連接過程中需要的基本工具是_________。

(3)轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+處理，使其處于能吸收周圍_________的狀態(tài)。

(4)菌落顏色為白色的是_________，原因是_________。

(5)檢測菌落③中的目的基因是否表達，可采用的方法是_________。28、煙青蟲是一種對煙草危害極大的昆蟲；現(xiàn)要將一段抗煙青蟲基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入煙草細胞，再通過組織培養(yǎng)技術(shù)得到抗煙青蟲的轉(zhuǎn)基因煙草。

（1）在構(gòu)建表達載體的過程中，要先用兩種不同的______分別切割目的基因和質(zhì)粒，原因是防止，質(zhì)粒自身環(huán)化，并保證______之后用連接酶連接形成______

（2）在以上重組質(zhì)粒中，目的基因和抗卡那霉素抗性基因，都應(yīng)該位于質(zhì)粒的______片段內(nèi)，原因是______

（3）用______處理農(nóng)桿菌，可使重組的質(zhì)粒更容易轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，然后將得到的農(nóng)桿菌和煙草細胞愈傷組織共同培養(yǎng)一段時間后，將愈傷組織置于含有______（抗生素）的培養(yǎng)基上進行組織培養(yǎng)，通過調(diào)整______（植物激素）的比例使其脫分化、再分化形成轉(zhuǎn)基因植株，再用煙青蟲進行進一步選擇。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

培養(yǎng)基按功能分：選擇培養(yǎng)基（根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌；從而提高該菌的篩選率）和鑒別培養(yǎng)基（依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計）。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時；將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)，再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣，A錯誤；

B；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類；B錯誤；

C；對培養(yǎng)皿進行編號或?qū)N進行標注時；應(yīng)使用記號筆在皿底標記，C正確；

D；統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)量時；接種方法可采用稀釋涂布平板法，D錯誤。

故選C。2、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1；過程：離體的植物組織；器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。

2；原理：植物細胞的全能性。

3；條件：（1）細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；（2）一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。

4；植物細胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；工業(yè)化生產(chǎn)過程包括細胞的脫分化和再分化；脫分化和再分化的關(guān)鍵激素是生長素和細胞分裂素，A正確；

B；愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則；是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞，愈傷組織在形成培養(yǎng)基中發(fā)生了一定程度的分化，B正確；

C；根據(jù)題干中“將細胞破碎后提取出紫草素”可知；紫草素在細胞內(nèi)合成后不能分泌到細胞外，C錯誤；

D；紫草的愈傷組織細胞有細胞壁；在低滲溶液中一般不會脹破，D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。原理：動物細胞核的全能性。

【詳解】

A；不同部位的體細胞提供的細胞核全能性不同；會導(dǎo)致重組細胞的發(fā)育出現(xiàn)差異，A錯誤；

B、核移植操作前需對供體細胞進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)，以利于細胞核的一系列變化和基因表達分子的開關(guān)的啟動，B正確；

C；紫外線可以破壞細胞結(jié)構(gòu)；包括破壞細胞核，可用紫外線破壞未受精卵細胞的細胞核，從而獲得去核卵細胞，C正確；

D；核移植的重組細胞可以理解為是類似于受精卵的細胞；這樣的細胞剛開始的三次有絲分裂被稱為卵裂，這個過程中，細胞核基因并沒有表達，D正確。

故選A。4、C【分析】植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官；組織或細胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。

【詳解】

A；脫毒苗的培育采用了植物組織技術(shù)；而該技術(shù)的原理是植物細胞具有全能性，A正確；

B；脫毒苗培育經(jīng)過脫分化和再分化兩個階段；且需要添加植物生長素、細胞分裂素等植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，B正確；

C；植物組織培養(yǎng)中脫分化和再分化的培養(yǎng)基中激素的成分和含量不同；C錯誤；

D；培育脫毒苗應(yīng)將莖尖進行消毒處理；接種過程應(yīng)進行無菌操作，避免微生物污染，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。

(4)目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；利用PCR技術(shù)擴增目的基因時；使反應(yīng)體系中的模板DNA解旋為單鏈的條件是加熱至90℃以上，目的是破壞DNA分子中的氫鍵，A正確；

B；構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過程中；需將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，B正確；

C；將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ玫姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；由圖可知，農(nóng)桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中，C正確；

D；檢驗?zāi)康幕蚴欠窀窈系角噍锘蚪M中；可用DNA分子雜交法，即將fps基因制成基因探針，與青萵基因組DNA雜交，而檢測目的基因是否表達，常用抗原-抗體雜交法，D錯誤。

故選D。6、D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型；果醋制作的原理：當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷⑴c腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

參與果酒、果醋和腐乳制作的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、毛霉，A錯誤；醋酸菌是嗜氧菌，只能進行有氧發(fā)酵，B錯誤；不同微生物適宜生存的溫度不同，果酒、果醋和腐乳在發(fā)酵過程中的溫度分別為18～25℃、30～35℃、15-18℃，所以果醋制作所需的適宜溫度最高，C錯誤；酵母菌、醋酸菌、毛霉都是有細胞結(jié)構(gòu)的生物，它們的細胞都具有細胞壁、核糖體、DNA和RNA等，D正確。7、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點和標記基因等。載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入，③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；根據(jù)圖中目的基因兩端的黏性未端以及各種限制酶的的切制位點可知；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，選用限制酶Xmal和BglⅡ切割質(zhì)粒，才能與目的基因t-PA改良基因高效連接，A正確；

B；將t-PA改良基因與質(zhì)粒連接的酶是DNA連接酶；不是DNA聚合酶，B錯誤；

C；在構(gòu)建重組質(zhì)粒時；其中的新霉素抗性基因沒有被破壞，因此可以根據(jù)對新霉素的抗性將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，即該基因的作用是便于將成功導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，C正確；

D；重組質(zhì)粒已經(jīng)破壞了mlacZ基因；其不會表達產(chǎn)物，即細胞呈白色。所以，在加入新霉素的培養(yǎng)基中選擇呈白色的菌落選育工程菌株，D正確。

故選B。二、多選題(共7題，共14分)8、B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后；使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準備；

②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后；溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

【詳解】

A；①過程為逆轉(zhuǎn)錄；所需的原料是脫氧核苷酸，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程所需要的DNA聚合酶不需要耐高溫；B錯誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要DNA解旋酶破壞氫鍵，C錯誤；

D；④過程為復(fù)性；溫度降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結(jié)合，但引物對之間不能互補配對，D正確。

故選BC。9、A:B:D【分析】【分析】

1；DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；

2；DNA不溶于酒精溶液；但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精；

3；DNA的鑒定：在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；兔屬于哺乳動物；哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核，吸水漲破，得不到含DNA的濾液，A錯誤；

B；植物材料需先用洗滌劑溶解細胞膜；B錯誤；

C；DNA不溶于95%的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液；而溶于2mol/L的NaCl溶液，C正確；

D；將絲狀物溶于2mol/L的NaCL溶液后加入二苯胺試劑；沸水浴冷卻后呈藍色，D錯誤。

故選ABD。

【點睛】10、A:C【分析】【分析】

從左圖看出；在添加麥芽糖的培養(yǎng)基中空質(zhì)粒組；導(dǎo)入CST1和導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落數(shù)目相差不大，但在麥芽糖+葡萄糖類似物組中，導(dǎo)入CST1的酵母菌菌落數(shù)目最少，說明吸收葡萄糖類似物最多。

【詳解】

A；從圖中可以看出；后一稀釋濃度是前一稀釋濃度的5倍，所以是進行等濃度梯度的稀釋，A錯誤；

B；在含葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上；導(dǎo)入CST1的酵母菌菌落顏色最淺，說明存活率最低，B錯誤；

C；導(dǎo)入CST1的酵母菌在葡萄糖類似物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目降低；由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測CST1能轉(zhuǎn)運葡萄糖類似物進入酵母菌，所以其功能可能是轉(zhuǎn)運葡萄糖進入細胞，C正確；

D、在麥芽糖+葡萄糖類似物的培養(yǎng)基中，導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌菌落數(shù)目多，說明其存活率更高，由于葡萄糖類似物被吸收后可以殺死酵母菌，因此可以推測導(dǎo)入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于導(dǎo)入CST1的酵母菌；D錯誤。

故選C。11、A:B:C【分析】【分析】

題圖分析：該圖為體細胞雜交過程；其中A為去除細胞壁，制備原生質(zhì)體，可以用酶解法，B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細胞應(yīng)該具備乙品種細胞質(zhì)中的可育基因，甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因，該過程的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。

【詳解】

A；人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有化學(xué)法（聚乙二醇）和物理法（離心、振動、電刺激等）兩大類；A正確；

B；雜種細胞再生出細胞壁是細胞融合成功的標志；融合成功之后再進行組織培養(yǎng)，B正確；

C；雜種細胞經(jīng)過外源生長素和細胞分裂素的誘導(dǎo)；脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，進一步成為雜種植株，C正確；

D；甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀；雜種植株細胞核內(nèi)含有控制甲青花菜優(yōu)良性狀的基因，具備乙品種細胞質(zhì)中的可育基因，因此精子中具備一半核基因，并可通過父本（精子）進行傳遞，D錯誤。

故選ABC。12、C:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯誤；

B；根據(jù)題意；細菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質(zhì)粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛘咧亟M質(zhì)粒的細菌，B錯誤；

C；將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程連接兩個切口；該過程共形成4個磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因?qū)爰毦鷷r，需要用Ca2+處理細菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點睛】13、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；

2；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；鏡檢法：在電子顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液；以發(fā)現(xiàn)病原體，但光學(xué)顯微鏡不能觀察到新冠病毒，A錯誤；

B；PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)；可在幾十分鐘內(nèi)把病原體的基因擴增到數(shù)百萬倍，再經(jīng)過電泳與病毒樣本進行對比，便能知道是否感染病毒，B正確；

C；病毒進入人體后會刺激機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)；產(chǎn)生相應(yīng)抗體，由于抗體與抗原結(jié)合具有特異性，因此抗原通過用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合以發(fā)現(xiàn)病原體，C正確；

D；DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標記的DNA分子做探針；利用核酸分子雜交原理來檢測病原體，鑒定被檢測標本上的遺傳信息，達到檢測是否感染病毒的目的，D正確。

故選BCD。14、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動物發(fā)情排卵后；同種動物的供；受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；人工授精技術(shù)是輔助生殖技術(shù)；在臨床上利用工具把精液放置進入子宮內(nèi)，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是體外受精技術(shù)，不是人工授精技術(shù)，A錯誤；

B；若實施胚胎移植；需要受體母親處于受孕狀態(tài)，即處于合適的生理狀態(tài)，B正確；

C；子宮對外來胚胎一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此不需要受體母親與胚胎的主要HLA相似，C錯誤；

D；“胚胎冷藏”技術(shù)所引起的這些爭論；實質(zhì)是冷凍胚胎的道德與法律地位的爭論，即帶來的倫理問題，D正確。

故選BD。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動物細胞融合與單克隆抗體16、略

【分析】【分析】

【詳解】

（1）人類對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識；人類的多基因病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和生活習(xí)慣有關(guān)。

（2）生物武器種類包括致病菌；病毒、生化毒劑、以及經(jīng)過基因重組的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器?！窘馕觥竣?結(jié)構(gòu)②.相互作用③.多基因④.生活習(xí)慣⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒劑⑧.基因重組⑨.不發(fā)展⑩.不生產(chǎn)?.不儲存17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】含有基因表達載體受體細胞標記基因是否表達。18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)19、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國市場上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈袌錾系霓D(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、實驗題(共4題，共32分)21、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關(guān)實驗操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機要清洗干凈；并晾干；②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進行，及時的監(jiān)測。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進行進行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）榨汁機要清洗干凈，并晾干，發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發(fā)酵裝置放在18～23℃環(huán)境中，發(fā)酵過程中由于酵母菌呼吸作用會產(chǎn)生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設(shè)計成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會產(chǎn)生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會變?yōu)榛揖G色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與，因此要適時向發(fā)酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識點，要求學(xué)生掌握果酒的制作的原理、過程以及發(fā)酵過程中的注意事項是該題的重點，識記果酒的制作過程是解決重點的關(guān)鍵。理解并識記果醋的發(fā)酵過程和原理是解決第（4）問的關(guān)鍵?！窘馕觥繘_洗CO2防止排氣時空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細菌，酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M行22、略

【分析】【分析】

為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；實驗所配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理；可將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，以檢測培養(yǎng)基的滅菌效果，若培養(yǎng)基中無菌落長出，說明培養(yǎng)基的滅菌是合格的；在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）①馬鈴薯中含有淀粉；蛋白質(zhì)和無機鹽等物質(zhì)；故培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機鹽等營養(yǎng)成分；

培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，即培養(yǎng)蟬擬青霉的培養(yǎng)基的自然pH為酸性范圍。

②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖（細菌細胞壁的主要成分）的合成來抑制細菌的生長；而對真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉（真菌）菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制細菌的生長，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。

③為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理；將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，若培養(yǎng)基中無菌落長出，說明固體培養(yǎng)基的滅菌是合格的。

（2）蟬擬青霉的分離純化：由（1）的題干信息可知；PDA為固體培養(yǎng)基，在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）根據(jù)題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并結(jié)合表格信息可知，發(fā)酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花，故能用發(fā)酵菌絲體來替代天然蟬花?！窘馕觥?1)碳源；氮源、無機鹽酸細菌選擇殺滅培養(yǎng)基中的微生物將滅菌的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間；觀察是否長出菌落。

(2)平板劃線（稀釋涂布平板）

(3)能發(fā)酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗?zāi)康氖莍PS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產(chǎn)生情況，實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故可設(shè)計實驗如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用24、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈式反應(yīng)制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，說明PG基因在果肉中表達量較高，所以最好從番茄的果肉細胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；

（2）據(jù)圖可知；轉(zhuǎn)基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1和mRNA2相結(jié)合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過程，使PG合成量減少，從而延長果實保質(zhì)期；

（3）分析表達載體的構(gòu)建過程圖可知；目的基因插入到圖中農(nóng)桿菌的四環(huán)素抗性基因上，導(dǎo)致農(nóng)桿菌失去了四環(huán)素的抗性，所以圖中農(nóng)桿菌能夠在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌；

（4）圖中是利用農(nóng)桿菌將反向連接PC基因?qū)敕鸭毎模淮朔椒ǚQ為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。不能用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶；

（5）將轉(zhuǎn)化的番茄細胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中；需要在培養(yǎng)基中添加有機營養(yǎng)物質(zhì)，原因是該培養(yǎng)過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的過程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準確答題?！窘馕觥抗饽孓D(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環(huán)素農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不能番茄細胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶要該培養(yǎng)過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）五、綜合題(共4題，共32分)25、略

【分析】【分析】

1；蛋白質(zhì)工程--指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。

2；生態(tài)工程的基本原理：（1）物質(zhì)循環(huán)再生原理：物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)；分層分級利用；（2）物種多樣性原理：物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性；（3）協(xié)調(diào)與平衡原理：生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過環(huán)境承載力（環(huán)境容納量）的限度；（4）整體性原理：生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟、社會的整體影響；（5）系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理：系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理：要通過改善和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改善功能；系統(tǒng)整體性原理：系統(tǒng)各組分間要有適當?shù)谋壤P(guān)系，使得能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通順利完成，并實現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。

【詳解】

（1）將胰島素B鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序后可獲得速效胰島素。因此；要生產(chǎn)速效胰島素，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，這就需要對胰島素基因進行定向改造。

（2）體外受精前；要對采集到的精子進行獲能處理，才能與卵子受精。受精后形成的受精卵要移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)到4細胞階段再移植到母親體內(nèi)。早期胚胎發(fā)育到囊胚階段的某一時刻，會沖破透明帶，稱之為“孵化”。

（3）生態(tài)工程是實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一。在進行林業(yè)工程建設(shè)時；一方面要號召農(nóng)民種樹，保護環(huán)境。另一方面要考慮貧困地區(qū)農(nóng)民的生活問題，如糧食；燒柴以及收入等問題，即生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟、社會的整體影響，其主要體現(xiàn)的生態(tài)工程的基本原理是整體性原理。連年種植單一品種造成病蟲害增加主要違反了物種多樣性原理。

（4）與傳統(tǒng)的工程相比；生態(tài)工程具有少消耗；多效益、可持續(xù)等特點，它是實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一。

【點睛】

本題考查蛋白質(zhì)工程、胚胎工程和生態(tài)工程等知識，要求考生識記相關(guān)知識點，形成知識網(wǎng)絡(luò)并能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題?！窘馕觥恳葝u素基因獲能囊胚孵化循環(huán)整體性原理物種多樣性可持續(xù)26、略

【分析】【分析】

cDNA文庫與基因組DNA文庫不同；它是由組織細胞提取分離的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶作用獲得的互補DNA（cDNA）構(gòu)建的。某種意義上，cDNA文庫可看是表達基因的文庫，它所包含的cDNA片段代表了該特定組織細胞中正在表達甚因的外顯子部分。因而由發(fā)育進程和組織細胞種類不同，基因組中表達功能的其因存在差異，所建的cDNA文庫就不同。這就成為研究不同發(fā)育分化的正常細胞與腫瘤細胞等進行差異顯示的理論基礎(chǔ)。cDNA文庫特異地反映某種組織或細胞中，在特定發(fā)育階段表達的蛋白質(zhì)的編碼基因，因此cDNA文庫具有組織或細胞特異性。

(1)

cDNA是RNA逆轉(zhuǎn)錄得到的DNA；用限制性核酸內(nèi)切酶可以將cDNA切成不同的片段；再分別把各小段與載體結(jié)合，導(dǎo)入到一個受體菌群中，檢測相應(yīng)的菌落特征及菌株特性，建立cDNA文庫；cDNA文庫在研究具體某類特定細胞中基因組的表達狀態(tài)及表達基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢，從而使它在個體發(fā)育；細胞分化、細胞周期調(diào)控、細胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應(yīng)用價值，是研究工作中最常使用到的基因文庫。

(2)

RT-PCR是先將新型冠狀病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA；然后再進行PCR（體外DNA復(fù)制），探針能與N基因序列特異性結(jié)合，由于D