2025年冀少新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年冀少新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、在制果酒、果醋、泡菜、腐乳時，發(fā)酵過程中對氧氣的需求分別是（）A.無氧、有氧、無氧、有氧B.有氧、無氧、無氧、有氧C.無氧、有氧、有氧、無氧D.兼氧、無氧、有氧、無氧2、下列有關(guān)基因工程中載體的說法正確的是()A.在進(jìn)行基因工程操作中，被用作載體的質(zhì)粒都是天然質(zhì)粒B.所有的質(zhì)粒都可以作為基因工程中的載體C.質(zhì)粒是一種獨(dú)立于細(xì)菌染色體外的鏈狀DNA分子D.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因3、下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性與倫理性問題的敘述，正確的是（）A.中國不反對治療性克隆B.過多食用轉(zhuǎn)基因植物會導(dǎo)致人體出現(xiàn)外源性基因C.可以通過基因工程等手段進(jìn)行人類嬰兒的改造，制造“完美人類”D.可以通過胚胎工程等相關(guān)技術(shù)進(jìn)行代孕等輔助生殖手段，解決人類不孕問題4、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全問題的敘述，錯誤的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染B.雜草化的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物，可能會影響植物基因庫的遺傳結(jié)構(gòu)C.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題D.重視轉(zhuǎn)基因技術(shù)研發(fā)的同時，應(yīng)重視轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的安全性評價和管理5、下列關(guān)于生物技術(shù)的操作過程、原理或應(yīng)用的說法錯誤的是（）A.基因工程的核心環(huán)節(jié)是構(gòu)建基因表達(dá)載體B.胚胎分割可以看作動物有性生殖方法的之一C.細(xì)胞膜具有流動性是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)D.稀釋涂布平板法可用于微生物的分離與純化評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的觀點(diǎn)，不正確的是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，設(shè)計試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題C.通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業(yè)D.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交7、關(guān)于胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程的理論基礎(chǔ)是體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育B.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子C.受精的標(biāo)志為雌原核和雄原核融合D.胚胎移植時對所有供體牛和受體牛都要進(jìn)行同期發(fā)情處理8、“莖尖脫毒”是少有的可以應(yīng)用于大多數(shù)植物；清除體內(nèi)病毒的最有效的生物技術(shù)，但其深層機(jī)理一直未被揭示。中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)研究發(fā)現(xiàn)植物莖尖存在大量干細(xì)胞無法被病毒侵染，是因為植物干細(xì)胞免疫病毒關(guān)鍵因子——WUSCHEL（WUS）蛋白的作用，機(jī)制如圖。以下說法正確的是（）

A.“莖尖脫毒”誘導(dǎo)愈傷組織過程需要給予適宜光照B.WUS可能存在于多種植物細(xì)胞C.WUS蛋白抑制了病毒蛋白的合成D.植物莖尖干細(xì)胞具有自我更新和分化的潛能9、生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴(yán)重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標(biāo)。衛(wèi)生部門規(guī)定1000mL自來水37℃培養(yǎng)48h后大桿菌菌落數(shù)不能超過3個，于是他們設(shè)計實驗對此冰激凌進(jìn)行檢測。下列實驗操作，不合理的是（）A.再去小店買一個同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基可用來鑒別大腸桿菌），滅菌、倒平板B.取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C.取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個濃度涂3個平板，共培養(yǎng)18個平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD.統(tǒng)計菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏小10、某實驗小組利用下圖所示質(zhì)粒和目的基因來構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞并表達(dá)。下列敘述正確的是（）

A.圖中的質(zhì)粒用酶A切割后，會產(chǎn)生4個游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，可用酶A和酶C切割質(zhì)粒和目的基因C.成功導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長D.若用酶B和酶C切割，可以避免質(zhì)粒的自身環(huán)化11、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結(jié)合，發(fā)揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細(xì)胞取自注射過HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡C.放入96孔板的細(xì)胞為多種雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生所需抗體D.將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體12、研究人員用無機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌13、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實驗。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素14、已知蘇云金芽孢桿菌中的毒蛋白基因B和豇豆中的胰蛋白酶抑制劑基因D均可導(dǎo)致棉鈴蟲死亡，棉花的短果枝由基因A控制，基因A所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死?？蒲腥藛T將抗蟲基因B和D導(dǎo)入棉花的同一條染色體上獲得了基因型為AaBD的多個短果枝抗蟲棉植株，讓其自交得到F1（不考慮減數(shù)分裂時的染色體互換）。下列說法正確的是（）A.若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生的配子基因型為AAaaDB.若基因D與a位于同一條染色體上，則F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長果枝抗蟲＝2:1:1C.若F1中短果枝抗蟲:長果枝不抗蟲＝1:1，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生雌配子的基因型為ABD和aD.若F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長果枝抗蟲:長果枝不抗蟲＝3:1:3:1，則果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對同源染色體上評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、酶是細(xì)胞合成的生物催化劑。隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實驗室，走進(jìn)人們的生產(chǎn)和生活。請回答下面有關(guān)酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進(jìn)行純度鑒定。16、第一步：______17、來源：主要是從______中分離純化出來的。18、純化DNA，去除雜質(zhì)有________________個方案。19、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。20、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過______，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

21、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。22、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評卷人得分四、判斷題(共3題，共9分)23、培養(yǎng)動物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯誤24、要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤25、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共21分)26、番茄果實在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長果實保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長果實保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_____。要檢測感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。27、廚余垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點(diǎn)，極易對環(huán)境造成污染。

（1）為探究圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳接種量比；用于制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

①將兩種菌液進(jìn)行不同配比分組處理；如下表所示：

。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌∶巨大芽孢桿菌1∶00∶11∶12∶1將等量上表菌液分別接種于100mL_____中進(jìn)行震蕩培養(yǎng)。本實驗中對照組的處理應(yīng)為_____。

②培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)。取各組菌液采用_____法接種于基本培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后選取菌落數(shù)在_____范圍內(nèi)的平板進(jìn)行計數(shù)；并依據(jù)菌落的形態(tài)特征對兩種菌進(jìn)行區(qū)分，實驗結(jié)果見圖。

由實驗結(jié)果可知，兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨(dú)接種，從代謝產(chǎn)物角度分析，原因可能是______________。接種量比例為_____________時；廢液中兩菌的有效活菌數(shù)最多。

（2）為進(jìn)一步探究菌種比例對該廚余垃圾廢液中蛋白質(zhì)；脂肪等有機(jī)物的降解效果；測得15天內(nèi)廢液中蛋白質(zhì)、脂肪的含量變化如下圖所示：

由實驗結(jié)果可知，對該廚余垃圾廢液中蛋白質(zhì)、脂肪的降解效果最好的兩種菌接種比分別為_____、_____。

（3）固態(tài)廚余垃圾因富含粗纖維、蛋白質(zhì)、淀粉等物質(zhì)，可以通過蒸發(fā)、碾磨、干燥等方式進(jìn)行加工，使加工后的產(chǎn)物在微生物的作用下形成有機(jī)復(fù)合肥等肥料；收集微生物處理后的廚余垃圾殘渣，經(jīng)晾曬干后制成蛋白飼料；通過以上處理可實現(xiàn)_____（選填選項前的符號）。

A．物質(zhì)循環(huán)再生B．能量多級利用C．提高能量傳遞效率28、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因為依據(jù)設(shè)計的一對引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實驗，請完成下表。實驗步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號備用PCR驗證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進(jìn)行PCR驗證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計并比較PCR驗證結(jié)果及藻體中油脂的含量評卷人得分六、綜合題(共3題，共15分)29、營養(yǎng)缺陷型菌株是指缺乏合成某些營養(yǎng)物質(zhì)（如維生素或者氨基酸等）的能力；必須在基本培養(yǎng)基中加入特殊營養(yǎng)物質(zhì)才能正常生長的菌株。用紫外線照射大腸桿菌并將其接種到甲培養(yǎng)基上一段時間，然后用絨布蓋在甲培養(yǎng)基上，用影印法將其菌落轉(zhuǎn)移到乙培養(yǎng)基上（如圖），經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，篩選出抗青霉素的脯氨酸缺陷型大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：

（1）基本培養(yǎng)基需要保證大腸桿菌所需的____________________________等營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基在使用之前需用__________法進(jìn)行滅菌。

（2）甲培養(yǎng)基上通常使用的接種方法是______________________________；整個接種操作應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行，是因為____________。為了檢測培養(yǎng)基是否被污染，接種前，可以采取的解決方法是__________。

（3）從用途角度分析，乙培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基，乙培養(yǎng)基上獲得的菌落是____________________大腸桿菌。30、面對全球暴發(fā)的新型冠狀病毒肺炎疫情；中國政府付出了巨大的努力?？蒲腥藛T在新冠病毒的免疫應(yīng)答機(jī)制；快速檢測、免疫治療、預(yù)防等方面做了大量的工作，取得了顯著的成效，請回答下列問題：

(1)當(dāng)新冠病毒侵入內(nèi)環(huán)境和感染宿主細(xì)胞時，會激發(fā)人體的_______免疫過程。

(2)我國對新冠肺炎疫情的快速控制，與對新冠病毒的快速檢測能力分不開。除核酸檢測外，還可采用_______(寫出2種)檢測方法；其中核酸檢測采用的是實時熒光定量PCR技術(shù)，即在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時加入熒光探針，探針完整時不發(fā)熒光。與目的基因結(jié)合的探針被耐高溫的DNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被熒光監(jiān)測系統(tǒng)檢測(圖甲)，結(jié)果如圖乙。

新冠病毒為RNA病毒，PCR反應(yīng)體系中除應(yīng)加入TaqDNA聚合酶外，還應(yīng)加入_______酶。疾控中心檢測5位新冠病毒感染者(圖乙)，載毒量最高的是_______，依據(jù)是_______。若出現(xiàn)陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感集，可能產(chǎn)生似陰性的因素有_______。

A樣本中病毒量少；達(dá)不到實時熒光PCR檢測閾值。

B.樣本被污染；RNA酶將病毒RNA降解。

C.病毒發(fā)生變異。

(3)目前，新冠病毒滅活疫苗全程接種需要接種多次，首劑次與第2劑次的接種間隔要在3周及以上，第2劑在首劑接種后8周內(nèi)盡早完成。二次接種同種疫苗的目的是_______；形成較好的免疫效果。

(4)我國科學(xué)工作者研發(fā)的重組腺病毒疫苗已獲批上審，腺病毒是常見病毒，人類感染腺病毒后僅產(chǎn)生輕微的自限性癥狀(疾病不會無限擴(kuò)大，在人體免疫系統(tǒng)正常運(yùn)作下，會逐漸改善)，且不整合進(jìn)入染色體。與其他重組DNA疫苗相比，可減少多種臨床風(fēng)險，請說明理由_____。31、復(fù)合型免疫缺乏癥患者由于缺少腺苷酸脫氨酶基因（ADA基因）而導(dǎo)致免疫功能缺損?？茖W(xué)家將患者的T細(xì)胞取出并轉(zhuǎn)入ADA基因；再將攜帶ADA基因的T細(xì)胞注人患者體內(nèi)，可以改善患者的免疫功能?；卮鹣铝袉栴}。

（1）從正常人的T細(xì)胞中獲取___________（填mRNA或DNA），在___________酶的作用下合成cDNA，在cDNA中還需要篩選才能獲得ADA基因，其原因是___________。

（2）根據(jù)ADA基因兩端的核苷酸序列合成_____________，并通過___________技術(shù)對目的基因進(jìn)行篩選和擴(kuò)增。在擴(kuò)增過程中首先要進(jìn)行90-95℃保溫，其目的是___________

（3）將人正常的ADA基因?qū)说交颊叩腡細(xì)胞時，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是______________。上述治病方法叫做___________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

4；參與泡菜制作的微生物是乳酸菌；其其新陳代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。

【詳解】

果酒制作利用了酵母菌的無氧呼吸并且產(chǎn)生酒精；果醋制作利用了醋酸菌的有氧呼吸；泡菜制作利用了乳酸菌的無氧呼吸；腐乳制作利用了毛霉等真菌的有氧呼吸。

故選A。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

基因工程是按人們的意愿去有目的地改造；創(chuàng)建生物遺傳性，因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分離或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖，需要載體攜帶它們到合適的細(xì)胞中復(fù)制和表現(xiàn)功能。常用的載體有質(zhì)粒，噬菌體和病毒等。

【詳解】

在基因工程中；天然的質(zhì)粒不能直接作為載體，需要進(jìn)行人工改造，A選項錯誤；不是所有的質(zhì)粒都可以作為基因工程中的載體，質(zhì)粒用作載體的基本要求是具有一至多個限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點(diǎn)和具有標(biāo)記基因，B選項錯誤；質(zhì)粒是一種獨(dú)立于細(xì)菌染色體外的環(huán)狀DNA分子，C選項錯誤；作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對重組DNA進(jìn)行鑒別和選擇的標(biāo)記基因，D選項正確。

【點(diǎn)睛】

基因工程中的重組DNA是通過目的基因和載體獲得的，故載體上必須有能夠用限制性核酸內(nèi)切酶識別的切割位點(diǎn)才能進(jìn)行切割，用于獲得重組DNA分子，并不是所有的質(zhì)粒都能符合載體要求。同樣，天然的質(zhì)粒需要人工改造后才能用于基因工程。3、A【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全問題需要驗證才能得到證實。轉(zhuǎn)基因食物中的基因會在消化道被消化；不會轉(zhuǎn)入到人體基因中，人體通常不會出現(xiàn)外源性基因，B錯誤；

C；不可以通過基因工程等手段進(jìn)行人類嬰兒的改造；屬于違法行為，C錯誤；

D；不可以進(jìn)行代孕等輔助生殖手段解決人類不孕問題；代孕為違法行為，D錯誤。

故選A。4、C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。（1）有關(guān)食物安全問題；反對者的觀點(diǎn)是：不能對轉(zhuǎn)基因食物安全性掉以輕心．他們的理由是：①反對“實質(zhì)性等同”；②擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)；③擔(dān)心出現(xiàn)新的過敏源；④擔(dān)心營養(yǎng)成分改變；⑤擔(dān)心會侵犯宗教信仰者或素食者的權(quán)益。（2）有關(guān)生物安全問題，反對者的觀點(diǎn)是：轉(zhuǎn)基因植物可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險和威脅。他們的理由：①轉(zhuǎn)基因植物擴(kuò)散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競爭能力強(qiáng)，可能成為“入侵的外來物種”；③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細(xì)菌或病毒雜交，重組出有害的病原體；④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。（3）有關(guān)環(huán)境安全問題，反對者的觀點(diǎn)是：轉(zhuǎn)基因生物會對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性和人類生活環(huán)境造成破壞。他們的理由：①轉(zhuǎn)基因植物打破自然物種的原有界限，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性；②重組微生物產(chǎn)生的中間產(chǎn)物可能造成二次污染；③重組DNA與微生物雜交是否會產(chǎn)生有害病原微生物；④轉(zhuǎn)基因植物花粉中的有毒蛋白可能通過食物鏈進(jìn)入生物。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中所產(chǎn)生的中間產(chǎn)物；可能會對人類生活環(huán)境產(chǎn)生二次污染，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因作物作為外來品種進(jìn)入自然生態(tài)系統(tǒng)；往往具有較強(qiáng)的“選擇優(yōu)勢”,可能會影響植物基因庫的遺傳結(jié)構(gòu)，淘汰原來棲息地上的物種及其它遺傳資源，致使物種呈單一化趨勢，造成生物數(shù)量劇減，甚至?xí)乖形锓N滅絕，導(dǎo)致生物多樣性的喪失，B正確；

C；即使轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界；也可能會產(chǎn)生安全性問題，如某些轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的蛋白質(zhì)可能會成為某些人的新的過敏源，C錯誤；

D；對轉(zhuǎn)基因生物的管理的總原則是在保證人類健康和環(huán)境安全的前提下；促進(jìn)生物技術(shù)的發(fā)展，需要重視轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的安全性評價和管理，D正確。

故選C。5、B【分析】【分析】

胚胎分割：是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份；4等份或8等份等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)。來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心；一個完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，A正確；

B；胚胎分割可以看作動物無性生殖方法的之一；B錯誤；

C；植物體細(xì)胞雜交涉及原生質(zhì)體的融合；依賴于細(xì)胞膜的流動性，因此細(xì)胞膜具有流動性是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)，C正確；

D；稀釋涂布平板法是將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落，可用于微生物的分離與純化，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)6、A:C:D【分析】【分析】

1；設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別；A錯誤；

B；基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問題；B正確；

C；通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業(yè)；不符合倫理道德，C錯誤；

D；大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染，D錯誤。

故選ACD。7、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎工程--指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動物體內(nèi)產(chǎn)生后代，以滿足人類的各種需求。理論基礎(chǔ)：哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律。

2；精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；胚胎工程的理論基礎(chǔ)是哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律；A正確；

B；胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取早期胚胎；B錯誤；

C；受精的標(biāo)志為在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體；C錯誤；

D；胚胎移植時對供體母牛和受體牛都要進(jìn)行同期發(fā)情處理；對供體公牛不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，D錯誤。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】8、B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性。暗培養(yǎng)有助于愈傷組織的形成；再分化一定要有光照。

【詳解】

A；“莖尖脫毒”誘導(dǎo)愈傷組織過程屬于脫分化過程；脫分化需要避光處理，A錯誤；

B；據(jù)題干信息“植物莖尖存在大量干細(xì)胞無法被病毒侵染；是因為植物干細(xì)胞免疫病毒關(guān)鍵因子WUS蛋白的作用”可知，WUS可能存在于多種植物細(xì)胞，B正確；

C；據(jù)題圖可知；WUS因子可以抑制病毒蛋白質(zhì)的合成，進(jìn)而導(dǎo)致病毒顆粒不能組裝，C正確；

D；植物莖尖干細(xì)胞具有自我更新和分化的潛能；屬于全能性較高的細(xì)胞，故在植物組織培養(yǎng)過程中是較好的材料，D正確。

故選BCD。9、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)。

2；稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目的原理：①當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

【詳解】

A；若只對一個冰激凌進(jìn)行檢測；樣品太少則不能確定是某個冰激凌的質(zhì)量問題還是這個品牌冰激凌的質(zhì)量問題，正確的做法是再去小店隨機(jī)買多個同樣品牌的同種冰激凌，A錯誤；

B、測定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×106；B錯誤；

C；實驗應(yīng)該設(shè)置對照；取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個濃度涂3個平板，再取一個平板接種等量無菌水（作為對照），共培養(yǎng)19個平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48h，當(dāng)對照組無菌落生長時，選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)，C錯誤；

D；因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時；平板上觀察到的只是一個菌落，故統(tǒng)計菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏小，該說法合理，D正確。

故選ABC。10、A:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中質(zhì)粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的識別序列和切割位點(diǎn)；若用酶A切割會同時破壞質(zhì)粒上的兩個抗性基因。

【詳解】

A；質(zhì)粒中含有2個酶A的酶切位點(diǎn)；所以切割后會產(chǎn)生4個游離的磷酸基團(tuán)，A正確；

B；如果用酶A和酶C同時切割質(zhì)粒；會破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，B錯誤；

C；根據(jù)B項分析；需要用酶B和酶C切割質(zhì)粒和目的基因，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因被破壞，所以不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長，C錯誤；

D；若用酶B和酶C切割；產(chǎn)生不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒自身環(huán)化，D正確。

故選AD。11、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細(xì)胞應(yīng)取自注射過HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親本細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞類型、骨髓瘤細(xì)胞類型）和融合的具有同種核的細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞型）都會死亡，B正確；

C；將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后；放入96孔板，不一定都能產(chǎn)生所需抗體，還需進(jìn)行抗體陽性檢測，C錯誤；

D；據(jù)圖可知；圖中細(xì)胞群a在加入HA抗原后呈陽性，說明細(xì)胞群a產(chǎn)生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機(jī)鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象，對生長不利，A錯誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。13、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素；同時使用生長素和細(xì)胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。14、C:D【分析】【分析】

由題意知；B；D位于一條染色體上，因此不遵循自由組合定律?；駻所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死，如果A（a）與BD分別位于兩對同源染色體上，則遵循自由組合定律，基因型為AaBD產(chǎn)生的配子的類型及比例是ABD：a：aBD：A=1：1：1：1；如果A（a）與BD位于一對同源染色體上，則A（a）與BD也不遵循自由組合定律，基因型為AaBD的個體產(chǎn)生的配子的類型是ABD：a=1：1或者是aBD：A=1：1。

【詳解】

A；由于抗蟲基因B和D位于棉花的同一條染色體上；若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生的配子基因型為ABD、A、aBD、a，A錯誤；

B、若基因B、D與a位于同一條染色體上，則該植株產(chǎn)生的雌配子有A、aBD兩種，雄配子只有aBD一種，則F1中AaBD（短果枝抗蟲）：aaBD（長果枝抗蟲）＝1:1；B錯誤；

C、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:長果枝不抗蟲（aa）＝1:1；則可推測親本產(chǎn)生的雄配子為a，故親本產(chǎn)生雌配子的基因型為ABD和a，C正確；

D、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:短果枝不抗蟲（A_）:長果枝抗蟲（aaBD）:長果枝不抗蟲（aa）＝3:1:3:1；則可推測雄配子有a和aBD兩種，即A/a基因與BD基因沒有連鎖關(guān)系，故果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對同源染色體上，D正確。

故選CD。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進(jìn)行純度鑒定。

【點(diǎn)睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嶂久笁A性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學(xué)結(jié)合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】319、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。22、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會提高T4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共3題，共9分)23、A【分析】【分析】

液體培養(yǎng)基主要是模擬動物體內(nèi)環(huán)境；動物體細(xì)胞是生活在組織液當(dāng)中，而且細(xì)胞要直接從組織液里獲得營養(yǎng)和排出廢物。所以液體培養(yǎng)基相當(dāng)于組織液的液體環(huán)境。

【詳解】

為了保證細(xì)胞培養(yǎng)時營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的供給，培養(yǎng)基中需添加一定量的動物血清等天然成分，可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，故該表述正確。24、B【分析】【詳解】

要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計改造，最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的生物合成，故說法錯誤。25、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。本說法正確。五、實驗題(共3題，共21分)26、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實變紅變軟，說明PG基因在果肉中表達(dá)量較高，所以最好從番茄的果肉細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；

（2）據(jù)圖可知；轉(zhuǎn)基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1和mRNA2相結(jié)合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過程，使PG合成量減少，從而延長果實保質(zhì)期；

（3）分析表達(dá)載體的構(gòu)建過程圖可知；目的基因插入到圖中農(nóng)桿菌的四環(huán)素抗性基因上，導(dǎo)致農(nóng)桿菌失去了四環(huán)素的抗性，所以圖中農(nóng)桿菌能夠在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌；

（4）圖中是利用農(nóng)桿菌將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的；此方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。不能用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶；

（5）將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中；需要在培養(yǎng)基中添加有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，原因是該培養(yǎng)過程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的過程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥抗饽孓D(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環(huán)素農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不能番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶要該培養(yǎng)過程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）27、略

【分析】【分析】

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。在統(tǒng)計菌落數(shù)目時；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)。

【詳解】

（1）①要探究圓褐固氨菌和巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液的最佳接種量比；故需要將不同配比的菌液接種在100mL某餐廚垃圾廢液中，為了保證氧氣供應(yīng)及目的菌與培養(yǎng)液充分接觸，需要進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。另外為了減小誤差，還需要設(shè)置對照組，接種等量無菌水，在相同的條件下培養(yǎng)。

②測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進(jìn)行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。可以根據(jù)菌落的形態(tài)區(qū)分兩種菌，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)，根據(jù)實驗數(shù)據(jù)可知，兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨(dú)接種，從代謝產(chǎn)物角度分析，原因可能是兩種菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物作為營養(yǎng)物質(zhì)。當(dāng)兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

（2）由實驗數(shù)據(jù)可知，R3接種組隨著時間的延長，蛋白質(zhì)的含量下降最明顯；R1接種組隨著處理時間的延長；脂肪的含量下降最明顯，即脂肪的降解效果最好。

（3）固態(tài)廚余垃圾因富含粗纖維；蛋白質(zhì)、淀粉等物質(zhì)；可加工形成有機(jī)復(fù)合肥、蛋白飼料等，利用了物質(zhì)循環(huán)再生、能量多級利用的生態(tài)工程的原理，AB正確。故選AB。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖形和表格，主要考查微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生掌握稀釋涂布平板法的操作流程，識記微生物計數(shù)的方法，能結(jié)合所學(xué)知識和圖形信息準(zhǔn)確答題。【解析】某廚余垃圾廢液加入等量無菌水稀釋涂布平板法30~300兩種菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物作為營養(yǎng)物質(zhì)（一種菌的代謝產(chǎn)物是另一種菌的營養(yǎng)物質(zhì)）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細(xì)胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲?。换虮磉_(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結(jié)合位點(diǎn)和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法。克隆載體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴(kuò)大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)?！窘馕觥?1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素擴(kuò)大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻六、綜合題(共3題，共15分)29、略

【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過足夠稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后，可形成單菌落。

3；影印培養(yǎng)試驗主要是一個為了在一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能培養(yǎng)出相同的菌落的試驗。

4；基本培養(yǎng)基需要含有氮源、碳源、水和無機(jī)鹽。

【詳解】

（1）基本培養(yǎng)基需要保證大腸桿菌所需的氮源；碳源、水和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基在使用之前需用高壓汽滅菌法進(jìn)行滅菌。

（2）