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PAGE4/41.2基因工程的基本操作程序(第1課時)【學習目標】1、簡述基因工程的基本操作步驟;2、了解獲取目的基因方法;3、了解基因表達載體的構(gòu)建過程及基因表達載體的組成?!咀灾鲗W習1】從基因文庫中獲取目的基因1、基因文庫定義:將含有某種生物不同基因的許多,導入受體菌的群體中,各個受體菌分別含有這種生物的不同基因,稱為基因文庫。:含有一種生物的基因2、種類:含有一種生物的基因3、如何從基因文庫中得到所需要的基因??!竞献魈骄?】如何構(gòu)建部分基因文庫(cDNA文庫)?【自主學習2】利用PCR技術(shù)擴增目的基因1、PCR(多聚酶鏈式反應):是一項在生物體外特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。2、原理:。3、反應條件:模板、、、?!竞献魈骄?】PCR與體內(nèi)DNA復制的比較PCR技術(shù)DNA復制相同點原則原料條件不同點解旋方式場所酶結(jié)果【自主學習3】基因表達載體的構(gòu)建1、基因表達載體的組成(1)啟動子:位于基因的,它是識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA。(2)終止子:位于基因的,終止。(3)標記基因:受體細胞中是否含有,從而將含有目的基因的細胞篩選出來2、目的意義:使目的基因在受體細胞中,并且給下一代;使目的基因和。【合作探究3】1、畫出完整的基因表達載體2、簡述構(gòu)建基因表達載體的過程個切口個黏性末端重組DNA分子(重組質(zhì)粒)兩個切口獲得目的基因處理DNA分子質(zhì)?!净A(chǔ)鞏固】1、基因工程的操作步驟包括以下幾步,正確的操作順序是()①目的基因與運載體結(jié)合②將目的基因?qū)胧荏w細胞③目的基因的檢測與鑒定④提取目的基因。A.④①②③B.②④①③C.③②④①D.③④①②2、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是()①從基因文庫中獲取目的基因②利用PCR技術(shù)擴增目的基因③反轉(zhuǎn)錄法④通過DNA合成儀利用化學方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③3、如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物,生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切酶。下列說法錯誤的是()A.圖示過程是基因工程的核心步驟B.表達載體構(gòu)建時需要用到限制酶SmaⅠC.抗卡那霉素基因的存在有利于將含有抗原基因的細胞篩選出來D.除圖示組成外,表達載體中還應該含有啟動子和終止子等結(jié)構(gòu)【能力提升】4、嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶,為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應用,開展了以下試驗:Ⅰ.利用大腸桿菌表達BglB酶(1)PCR擴增bglB基因時,選用基因組DNA作模板。(2)右圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識別序列。為使PCR擴增的bglB基因重組進該質(zhì)粒,擴增的bglB基因兩端需分別引入和
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