2024-2025學(xué)年新教材高中生物第1章發(fā)酵工程第2節(jié)第1課時(shí)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)教案新人教版選擇性必修3

PAGE12-第1課時(shí)微生物的基本培育技術(shù)課標(biāo)內(nèi)容要求核心素養(yǎng)對(duì)接1.闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培育物的前提。2．闡明無菌技術(shù)是在操作過程中，保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)。3．概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是試驗(yàn)室進(jìn)行微生物分別和純化的常用方法。1.科學(xué)思維：依據(jù)微生物的代謝類型分析培育基的組成。2．科學(xué)探究：探討并駕馭無菌技術(shù)的試驗(yàn)操作方法；探討并駕馭微生物的純培育的方法。一、培育基的配制1．培育基人們依據(jù)微生物對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的養(yǎng)分基質(zhì)。2．培育基的種類3．培育基的養(yǎng)分組成各種培育基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)，此外還須要滿意微生物生長對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及O2的需求。二、無菌技術(shù)1．獲得純凈的微生物培育物的關(guān)鍵：防止雜菌污染。2．消毒和滅菌消毒滅菌概念運(yùn)用較為溫柔的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物運(yùn)用劇烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、酒精消毒法、紫外線消毒法濕熱滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌適用對(duì)象操作空間、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培育基等3.詳細(xì)操作(1)對(duì)試驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。(2)將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等進(jìn)行滅菌。(3)為避開四周環(huán)境中微生物的污染，試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行。(4)試驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周的物品接觸。三、微生物的純培育1．純培育：在微生物學(xué)中，將接種于培育基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培育物。由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培育物，獲得純培育物的過程就是純培育。2．微生物純培育的步驟：微生物的純培育包括配制培育基、滅菌、接種、分別和培育等步驟。3．酵母菌的純培育(1)菌落：分散的微生物在相宜的固體培育基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有肯定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。(2)獲得單菌落的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。推斷對(duì)錯(cuò)(正確的打“√”，錯(cuò)誤的打“×”)1．液體培育基含有水，而固體培育基不含水。 (×)提示：液體培育基和固體培育基都含有水，它們的區(qū)分為是否含有凝固劑。2．獲得純凈微生物培育物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。 (√)3．用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基都要進(jìn)行消毒。 (×)提示：用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基都要進(jìn)行滅菌。4．培育基分裝到培育皿后進(jìn)行滅菌。 (×)提示：培育基分裝到培育皿之前要進(jìn)行滅菌。5．平板冷凝后應(yīng)將平板倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培育基，造成污染。 (√)6．轉(zhuǎn)換劃線角度后須要灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線。 (√)制備培育基1．培育基的配制原則(1)目的要明確：不同的微生物需求不同，依據(jù)培育目的進(jìn)行配制。(2)養(yǎng)分要協(xié)調(diào)：養(yǎng)分物質(zhì)的濃度和比例要相宜。(3)pH要相宜：為維持pH的相對(duì)恒定，可在培育基中加入緩沖劑，常用K2HPO4－KH2PO4。2．培育基的成分及功能養(yǎng)分物質(zhì)作用功能主要來源碳源能為微生物代謝供應(yīng)碳元素構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸等氮源能為微生物的代謝供應(yīng)氮元素合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機(jī)化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等水是生命活動(dòng)所必需的不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定外界攝入無機(jī)鹽為微生物供應(yīng)除碳、氮以外的各種重要元素，包括大量元素細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)整物質(zhì)，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑無機(jī)化合物合作探究：(1)能夠利用無機(jī)碳源的微生物的同化作用類型是什么？提示：能利用無機(jī)碳源的微生物的同化作用類型是自養(yǎng)型微生物。(2)牛肉膏蛋白胨培育基是一種常見的細(xì)菌培育基，其中牛肉膏、蛋白胨能夠供應(yīng)哪些養(yǎng)分成分？提示：牛肉膏、蛋白胨能夠供應(yīng)碳源、氮源、維生素(生長因子)和無機(jī)鹽。(3)在科研和生產(chǎn)上，探討和應(yīng)用微生物的前提是什么？在試驗(yàn)室中培育微生物應(yīng)留意哪些問題？提示：在科研和生產(chǎn)上，探討和應(yīng)用微生物的前提是防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培育物。在試驗(yàn)室中培育微生物，一方面要為人們須要的微生物供應(yīng)合適的養(yǎng)分和環(huán)境條件，另一方面確保其他微生物無法混入。1．下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的敘述，錯(cuò)誤的是()A．操作依次為計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培育基冷卻至50℃左右時(shí)倒平板D．待培育基冷卻凝固后將平板倒過來放置A[制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，其依次不能顛倒，A錯(cuò)誤；牛肉膏比較黏稠，所以稱好后需將稱量紙一同放入燒杯中加熱，當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分別后，用玻璃棒取出稱量紙，B正確；待培育基冷卻至50℃左右，起先倒平板，C正確；培育基冷卻凝固后需將平板倒置，D正確。]2．回答下列與細(xì)菌培育相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培育時(shí)，培育基中能同時(shí)供應(yīng)碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”(2)用平板培育細(xì)菌時(shí)一般須要將平板________(填“倒置”或“正置”)。(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，探討人員通?？梢罁?jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，緣由是___________________________。(4)有些運(yùn)用后的培育基在丟棄前須要經(jīng)過________處理，這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。[解析](1)細(xì)菌培育時(shí)常用牛肉膏蛋白胨培育基，牛肉膏能供應(yīng)碳源、氮源、磷酸鹽、維生素，蛋白胨能供應(yīng)碳源、氮源、維生素，而葡萄糖不能供應(yīng)氮源，NaNO3不能為微生物供應(yīng)碳源。不同細(xì)菌生長繁殖所須要的最適pH是不同的，應(yīng)當(dāng)依據(jù)培育細(xì)菌的不同來調(diào)整培育基的pH。硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)型細(xì)菌，可以空氣中的CO2為碳源，因此在沒有碳源的培育基上能夠生長。(2)用平板培育細(xì)菌時(shí)，一般需將平板倒置，這樣可以防止皿蓋上的水珠落入培育基。(3)不同種類的細(xì)菌所形成的菌落，在大小、形態(tài)、光澤度、顏色、硬度、透亮度等方面具有肯定的特征，不同種細(xì)菌在肯定培育條件下表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。(4)運(yùn)用后的培育基在丟棄前需進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。[答案](1)蛋白胨不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)倒置(3)在肯定的培育條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌消毒和滅菌消毒滅菌概念運(yùn)用較為溫柔的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)運(yùn)用劇烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物(包括芽孢和孢子)常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥物消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌適用對(duì)象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培育基等常用滅菌和消毒方法的比較常用滅菌與消毒方法的比較滅菌和消毒的種類主要方法應(yīng)用范圍滅菌濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌法）100kPa、121℃維持15～30min培育基及多種器材、物品干熱滅菌干熱滅菌箱160～170℃加熱2～3h玻璃器皿(如吸管、培育皿等)、金屬用具等凡不相宜用其他方法滅菌而又能耐高溫的物品灼燒滅菌酒精燈火焰灼燒微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中的試管口或瓶口等消毒煮沸消毒法100℃煮沸5～6min家庭餐具等生活用品巴氏消毒法62～65℃煮30min或80～90℃煮30s～1min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進(jìn)行高溫滅菌的液體紫外線消毒30W紫外燈照耀30min接種室空氣化學(xué)藥物消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%～75%的乙醇、碘酒涂抹，來蘇爾噴灑等皮膚、傷口、動(dòng)植物組織表面和空氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等合作探究：1.無菌技術(shù)除了用來防止試驗(yàn)室的培育物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？提示：無菌技術(shù)還能有效避開操作者被微生物感染。2．對(duì)培育基、培育皿、接種環(huán)、試驗(yàn)者的雙手、空氣和牛奶常采納的滅菌或消毒方法分別是什么？提示：分別為高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒、巴氏消毒。3．用于生物消毒的微生物具有什么特點(diǎn)？提示：用于生物消毒的微生物能產(chǎn)生殺死其他微生物的代謝產(chǎn)物或是寄生性的微生物。1．下列關(guān)于滅菌和消毒的說法不正確的是()A．滅菌是指殺死環(huán)境中的全部微生物，包括芽孢和孢子B．滅菌和消毒實(shí)質(zhì)上是相同的C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌等B[滅菌與消毒的實(shí)質(zhì)是不同的。滅菌是指殺死肯定環(huán)境中的全部微生物，包括芽孢和孢子，運(yùn)用的是較為劇烈的理化因素，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌等，依據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法，如接種環(huán)的滅菌用灼燒法；消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，運(yùn)用的是較為溫柔的物理或化學(xué)方法。]2．在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染。請(qǐng)回答下列問題：(1)在試驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器具_(dá)_______(填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采納巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是_______________________________。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒，其緣由是紫外線能________。在照耀前，適量噴灑________，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的緣由是____________________。[解析](1)在試驗(yàn)室中，能耐高溫的、須要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)為在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，養(yǎng)分物質(zhì)損失較少。(3)紫外線照耀能消毒的緣由是其能夠破壞微生物細(xì)胞中的DNA分子。在利用紫外線照耀前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。(4)自來水通常是采納氯氣進(jìn)行消毒的。(5)采納高壓蒸汽滅菌時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而溫度未達(dá)到相應(yīng)要求，最可能的緣由是沒有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。[答案](1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，養(yǎng)分物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡(1)酒精消毒液中酒精濃度對(duì)效果的影響：70%的酒精殺菌效果最好。緣由是濃度過高，菌體表面蛋白質(zhì)變性過快而凝固成一層愛護(hù)膜，酒精不能滲入其中；濃度過低，殺菌實(shí)力減弱。(2)無菌技術(shù)措施的選擇原則。①考慮效果：滅菌的效果比消毒要好。②考慮操作對(duì)象的承受實(shí)力：活體生物材料、操作者的手等只能采納消毒的方法，而不能采納滅菌的方法。微生物的純培育1．平板劃線法平板劃線操作及培育結(jié)果：接種環(huán)在固體培育基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步分散到培育基的表面。平板劃線示意圖(A)及培育后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。2．稀釋涂布平板法(1)主要操作環(huán)節(jié)：系列稀釋和涂布平板。(2)系列稀釋和涂布平板后培育結(jié)果如圖所示：3．平板劃線法與稀釋涂布平板法的留意事項(xiàng)(1)平板劃線法：①接種環(huán)的灼燒：a．第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避開污染培育物。b．每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端。c．劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避開污染環(huán)境和感染操作者。②灼燒接種之后，要冷卻后再進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌種。③劃線時(shí)最終一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。④劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大劃破培育基。(2)稀釋涂布平板法：①稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9mL水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處。②涂布平板時(shí)：a．涂布器浸在體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。b．不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。c．酒精燈與培育皿距離要合適，移液管管頭不接觸任何物體。4．兩種純化細(xì)菌方法的比較項(xiàng)目優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)平板劃線法可以視察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分別不能計(jì)數(shù)稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù)，可以視察菌落特征汲取量較小，較麻煩，平板不干燥效果不好，簡單擴(kuò)散合作探究：(1)倒平板時(shí)，培育基冷凝后，為什么要將平板倒置？提示：培育基冷凝后，皿蓋上會(huì)凝聚水珠，將平板倒置既可以防止皿蓋上的水珠落入培育基，又可以避開培育基中的水分過快地?fù)]發(fā)。(2)接種操作時(shí)每次劃線接種前與接種后都要灼燒接種環(huán)或接種針，其目的分別是什么？提示：劃線前灼燒是為了殺死上次劃線結(jié)束后殘留的菌種。劃線結(jié)束后灼燒，能剛好殺死接種環(huán)或接種針上殘留的菌種，避開污染環(huán)境和感染操作者。(3)接種結(jié)束后，為什么要將一個(gè)未接種的培育基和一個(gè)接種的培育基放在一起培育，未接種的培育基表面是否有菌落生長很關(guān)鍵。假如有菌落生長，說明白什么？提示：培育未接種培育基的作用是比照，未接種的培育基在恒溫箱中保溫1～2d后無菌落生長，說明培育基的制備是勝利的。若有菌落形成，說明培育基滅菌不徹底，或培育基被污染了，須要重新制備。1．下圖為試驗(yàn)室培育和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯(cuò)誤的是()A．①②③步驟操作時(shí)須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行B．步驟①中待倒入的培育基冷卻后蓋上培育皿的皿蓋C．步驟③中，每次劃線前后都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理D．劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培育箱中培育B[由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)蘸取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培育。①②③步驟操作時(shí)須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，A正確；倒完平板后應(yīng)馬上蓋上培育皿，冷卻后將平板倒過來放置，B錯(cuò)誤；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種干脆來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目漸漸削減，以便得到單菌落，C正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培育箱中培育，可以避開培育基中的水分過快地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染，D正確。]2．下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方式，回答相關(guān)問題：(1)圖甲是利用________法進(jìn)行微生物接種的，圖乙是利用_______________法進(jìn)行微生物接種的。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)平板劃線時(shí)，為保證微生物的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐步削減，每次劃線都要從________________起先，平板劃線結(jié)束后，最終一次劃的線不能與第一次劃的線________。(3)接種操作為什么肯定要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行？___________________。(4)下圖是接種后培育的效果圖解，其接種方法是__________(填“圖甲”或“圖乙”)所示方法。(5)假設(shè)用圖乙所示方法接種培育結(jié)束后，發(fā)覺培育基上菌落連成一片，可能的緣由是什么？________________________________。[解析](1)圖甲和圖乙分別是利用平板劃線法和稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物接種的，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。(2)平板劃線時(shí)，每次劃線前都要從上一次劃線的末端起先，最終一次劃線不能與第一次劃線相連。(3)在酒精燈火焰旁邊存在著無菌區(qū)域，因此接種常在火焰旁邊進(jìn)行。(4)培育基上的菌落分布勻稱，接種方法為稀釋涂布平板法。(5)采納稀釋涂布平板法進(jìn)行菌種分別時(shí)，稀釋度要足夠高，否則會(huì)使微生物不能分散成單個(gè)細(xì)胞。[答案](1)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌(2)上一次劃線的末端相連(或相接、相交、交叉等)(3)酒精燈火焰旁邊存在著無菌區(qū)域(4)圖乙(5)稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高單細(xì)胞菌落的獲得(1)利用平板劃線法接種時(shí)，單細(xì)胞菌落從后劃線的區(qū)域挑取。(2)利用稀釋涂布平板法接種時(shí)，只有合適的稀釋度才能得到單細(xì)胞菌落。[課堂小結(jié)]知識(shí)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建核心語句背誦1.各種培育基都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)。2.獲得純凈微生物培育物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。3.消毒是指運(yùn)用較為溫柔的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。4.滅菌是指運(yùn)用劇烈的理化方法殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子。5.由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培育物，獲得純培育物的過程就是純培育。6.菌落是分散的微生物在相宜的固體培育基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有肯定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。1．不同培育基的詳細(xì)配方不同，但一般都含()A．碳源、磷酸鹽和維生素B．氮源和維生素C．水、碳源、氮源和無機(jī)鹽D．碳元素、氧元素、氫元素、氮元素C[培育基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，此外還應(yīng)考慮pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)及O2等條件。]2．采納干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照耀等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌()A．接種環(huán)、吸管、培育基、接種室B．吸管、接種環(huán)、培育基、接種箱C．培育基、吸管、接種環(huán)、接種箱D．培育皿、吸管、培育基、雙手B[干熱滅菌是將滅菌物品放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下加熱2～3h，適用于耐高溫且須要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金屬用具等；灼燒滅菌是利用酒精燈火焰的充分燃燒層滅菌，如接種針、接種環(huán)等；高壓蒸汽滅菌用高壓蒸汽滅菌鍋，一般在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下，維持15～30min，主要用于培育基滅菌；紫外線照耀適用于物體表面滅菌和空氣滅菌，如接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)等，運(yùn)用前用紫外線照耀約30min。]3．下列有關(guān)平板劃線操作的描述，錯(cuò)誤的是()A．將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．接種環(huán)在平板上劃線的位置是隨機(jī)的C．在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過酒精燈火焰D．最終一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)相連B[接種環(huán)在平板上劃線的位置并不是隨機(jī)的：將蘸有菌種的接種環(huán)伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線后應(yīng)蓋上皿蓋，并灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端起先往其次區(qū)域內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。]4．下列關(guān)于微生物試驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A．培育微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C．接種后的培育皿要倒置，以防培育基被污染D．菌種分別和菌落計(jì)數(shù)都可以運(yùn)用固體培育基A[接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理，接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培育皿等常用干熱滅菌法處理，培育基及多種器材用高壓蒸汽滅菌法處理，A錯(cuò)誤；為了防止雜菌污染，每次接種前后，接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒滅菌，B正確；接種后，培育皿須要倒置，以防皿蓋上水珠落入培育基造成污染，C正確；分別菌種可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者還可以用于微生物的計(jì)數(shù)，所用培育基為固體培育基，D正確。故選A。]5．下表是培育某微生物的培育基的配方，請(qǐng)回答下