2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、中國首例設計試管嬰兒的父母均為地中海貧血基因的攜帶者，為了挽救患有重度地中海貧血的姐姐，用他的臍帶血幫助姐姐進行造血干細胞移植。下列相關說法正確的是（）A.該嬰兒的獲得運用體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植和基因工程等技術B.移植前需對胚胎進行遺傳學診斷C.姐姐健康后所生的孩子不含地中海貧血基因D.表明我國放開設計試管嬰兒技術的研究與應用2、下列關于促進雌性動物大量排卵的敘述中，正確的是（）A.給未成年的雄性動物注射大量的相關激素，使其排卵B.給性成熟的雄性動物注射大量的相關激素，使其超數排卵C.給未成年的雌性動物注射一定的相關激素，使其排卵D.給性成熟的雌性動物注射一定的相關激素，使其超數排卵3、下列有關生物工程的敘述；不正確的有（）

①基因工程的核心步驟是構建基因表達載體。

②蛋白質工程可通過直接改造蛋白質的結構從而改變其功能。

③克隆羊的培育涉及細胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術。

④PCR技術需要利用限制性核酸內切酶打開DNA雙鏈。

⑤利用核移植技術可以培育試管嬰兒。

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

⑦利用動物細胞培養(yǎng)技術和細胞融合技術可以制備單克隆抗體。

⑧利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時，全程都需要光照A.一項B.兩項C.三項D.四項4、甘薯由于能增強免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止動脈硬化等越來越被人們喜愛。但甘薯屬無性繁殖作物，同時又是同源六倍體，具有自交不育和雜交不親和性，這使甘薯生產和育種存在諸多常規(guī)方法難于解決的問題。下列相關操作不合理的是（）A.利用組織培養(yǎng)形成的胚狀體制作人工種子，解決種苗用量大、成本高的問題B.利用莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒苗，使植株具備抗病毒的能力，產品質量得到提高C.利用原生質體融合實現體細胞雜交，可以克服雜交不親和，充分利用遺傳資源D.利用培養(yǎng)的愈傷組織進行誘變育種，可以顯著提高變異頻率，大大縮短育種年限5、我國利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久，在多種文獻中均有記載。下列說法錯誤的是（）

①《齊民要術》中記載：“作鹽水；令極咸，于鹽水中洗菜，即內雍中?！?/p>

②《北山酒經》中記載：“每壇加蠟三錢；竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口。”

③《齊民要術》中記載了二十三種利用谷物釀制食醋的工藝。其經歷的三個主要發(fā)酵過程為：糖化→酒化→醋化。

④《本草綱目拾遺》中記述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌過酒糟或醬制者，味咸甘心。”A.①介紹的是泡菜制作，配制鹽水要煮沸冷卻后使用，且鹽度不宜過大B.②中每壇加蠟隔水煮開，乘熱灌封壇口有助于陳酒的儲藏C.③中從酒化到醋化的過程需要移至溫度較低的環(huán)境中進行D.④中發(fā)酵產腐乳用的豆腐坯屬固體培養(yǎng)基，不需對其進行嚴格滅菌6、馬鈴薯利用塊莖進行無性生殖，種植的世代多了以后往往會感染病毒而減產，為此農戶都希望得到無病毒的幼苗進行種植，獲得無病毒幼苗的最佳辦法是（）A.選擇優(yōu)良品種進行雜交B.進行遠緣植物體細胞雜交C.利用莖尖進行組織培養(yǎng)D.人工誘導基因突變7、下列有關培養(yǎng)基的敘述，正確的是（）A.培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素B.培養(yǎng)基中都只含有碳源、氮源、水和無機鹽C.固體培養(yǎng)基表面可形成肉眼可見的單個細菌D.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、下列就“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”實驗的有關敘述，正確的是（）A.經高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時的平板均要倒置B.同一稀釋度下至少要涂布三個平板并且要培養(yǎng)到菌落數穩(wěn)定時計數C.在稀釋度足夠高時，所形成的單個菌落中所有細胞的遺傳信息必定相同D.在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染9、模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對認識的對象所做的一種簡化的概括性描述。對圖示生物概念模型的分析正確的是（）

A.若該模型表示體外受精技術，則C不能直接移植到代孕母體B.若該模型表示核移植技術，則C→D過程與胚胎移植技術有關C.若B表示培養(yǎng)液和胚胎干細胞，則C→D的培養(yǎng)過程中有可能出現分化現象D.若該模型表示農桿菌轉化法操作流程，則C可表示Ti質粒，D是植物細胞10、下列實驗過程中，出現的正?，F象有（）A.制作果酒時，發(fā)酵瓶中溶液產生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲D.用固定化酵母進行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面11、下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項目獲得成功B.將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的就是導入了重組質粒的細菌C.將人的生長激素基因與質粒A結合的過程共形成了4個磷酸二酯鍵D.將重組質粒導入細菌B之前，可以用Ca2+處理細菌B12、免疫PCR是對微量抗原的一種檢測方法。下圖是利用該技術檢測牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標記的抗體2，進行PCR擴增，最后進行電泳檢測，相關敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現假陽性現象C.電泳檢測結果只能判斷陽性與否，無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應通過PCR技術間接擴增放大，從而達到可檢測的水平13、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種14、據人民網報道，“一對名為露露和娜娜的基因編輯嬰兒于2018年11月在中國健康誕生。這對雙胞胎的一個基因經過修改，使她們出生后即能天然抵抗艾滋病。這是世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒”。下列有關說法不正確的是（）A.基因編輯制造人類的行為是符合倫理道德的B.基因編輯技術，可改變人類進化的速度和方向，有利于人類的進化C.通過基因編輯技術改變了人類的遺傳物質，使人類進化成新物種D.基因編輯技術可用于疾病預防領域研究，但不能用于編輯嬰兒15、剛果紅是一種染料，可以與纖維素形成紅色復合物，當紅色復合物中的纖維素被分解后紅色消失。表中是篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基，利用此培養(yǎng)基可從土壤中篩選纖維素分解菌，結果如圖。下列說法正確的是（）。培養(yǎng)基的成分：纖維素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g剛果紅適量MgSO40．5g瓊脂20g定容1L

A.培養(yǎng)基中纖維素和尿素分別提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pHC.將土壤稀釋液接種在平板上的方法為稀釋涂布平板法D.平板上5個菌落都有透明圈，說明5個菌落都能分解纖維素評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)16、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________17、人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現固態(tài)。）18、加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇___________，導致DNA分子不能形成__________。19、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。20、科學家采用定點誘變的方法構建T4溶菌酶的新蛋白質，發(fā)現其中一種新蛋白質的第9和第164位氨基酸殘基被轉換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術的要點是什么？_________21、在日常生活中，我們還遇到哪些有關生物技術安全與倫理問題？我們能基于所學生物學知識參與這些問題的討論嗎？嘗試舉一個實例加以說明______。評卷人得分四、判斷題(共1題，共5分)22、“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要對胚胎進行遺傳學診斷。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共30分)23、鑒江是粵西沿海最大的河流，沿河兩岸的居民生活用水基本來源于鑒江。但若生活污水未經處理排放到鑒江中，會導致大腸桿菌超標，進而引發(fā)細菌性痢疾等腸道疾病。研究發(fā)現，大腸桿菌能分解乳糖，產生酸性物質和氣體。某研究小組擬對鑒江中的大腸桿菌進行鑒別和統計。用到的兩種培養(yǎng)基配方和濾膜法步驟如下：。培養(yǎng)基名稱配方（L-1）pH乳糖蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g，牛肉膏5g，乳糖5g，NaCl5g，溴甲酚紫0．016g（溴甲酚紫在酸性時呈黃色，堿性時呈紫色）7．4牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g7．4

濾膜法具體步驟：

（一）用無菌的三角瓶接取1000毫升水樣；蓋好瓶塞。

（二）將漏斗和抽濾瓶固定好；用鑷子夾住濾膜邊緣，將水樣倒入漏斗中，邊抽濾；邊加水。

（三）用鑷子將濾膜取出；放在無菌平板上進行培養(yǎng)；觀察并記錄實驗結果。

回答下列問題：

(1)在乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中，提供氮源的物質有______________________。

(2)高壓滅菌條件常為121℃，15min，但乳糖蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌時，因為乳糖在121℃會被破壞，而選用了115℃，為了達到相同滅菌效果可以______________________；

(3)研究小組取兩支含乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管A和B，A管中加入1ml待測水樣，B管不做處理，然后都放人培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若A試管產生氣體，同時出現______________________（填顏色）時；則提示水樣被大腸桿菌污染。

(4)制作濾膜法中所用的無菌平板時，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基礎上還應加入______________________，便于統計菌落。按上述濾膜法步驟制作的3個樣品平板上的菌落初步從______________________（答出兩點）等方面進行形態(tài)學鑒定。然后統計三個平板上所有的菌落數分別為49、51、47，能否據此得出每升水樣中大腸桿菌數約為49的結論?______________________。理由是_________________________________________。24、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會發(fā)生落葉、落果，嚴重時葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因導入柑橘可獲得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術則可培育無病毒植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉基因植株的過程：

①基因表達載體必需的結構除復制原點、啟動子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時，Ti質粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導愈傷組織生根、生芽的先后順序為______。

⑤從個體生物學水平鑒定柑橘再生植株時可采用______（填具體操作）的方法。經鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據______的特異性堿基序列設計引物，擴增后利用______進行檢測；結果如圖2。

據圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。25、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應。CYP3A是豬體內降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調控序列，為研究T-2毒素誘導CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構建表達載體，再分別導入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結果如圖1所示。據圖可知，B1和B2調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導；B2是Spl的結合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結合，與Sp1共同調控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結合位點，研究者依據B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結果如圖2．據實驗結果推測，第4組出現阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結果產生的原因是_____。

②研究者設計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調控功能，實驗設計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據此分析，實驗假設是_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)26、水果可以用來加工制作果汁；果酒和果醋等?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制作果汁時；可以用果膠酶；纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、___________、_________。纖維素酶可以分解植物__________（填“細胞膜”或“細胞壁”）中的纖維素。

（2）用果膠酶處理果泥時；為了提高出汁率，需要控制反應的溫度，原因是__________。

（3）現有甲乙丙三種不同來源的果膠酶；某同學擬在果泥用量；溫度、pH等所有條件都相同的前提下比較這三種酶的活性。通常，酶活性的高低可用_____來表示。

（4）獲得的果汁（如蘋果汁）可以用來制作果酒或者果醋，制作果酒需要______菌，其代謝類型是________。果酒制作過程中也需要O2，O2的作用是___________。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌屬于________（填“好氧”或“厭氧”）的細菌，其生長所需最適溫度和增殖方式分別是____和_____。27、某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌；并統計每克土壤樣品中活菌數目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL，再經高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。

。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1．4g2．1g0．2g1．0g10．0g1．0g15．0g

（1）根據培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？________（填“能”或“不能”），原因是________________________________。

（2）培養(yǎng)基常用________法滅菌，培養(yǎng)皿常用________法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到________（填“20”、“30”、“40”或“50”）℃左右時，在________附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止________________；造成污染。

（3）要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用________法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的________就能大約推測出樣品中活菌數。

（4）培養(yǎng)分解尿素的細菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是______________________________________。28、維生素C既是人與動物必需的營養(yǎng)成分；并有抗氧化作用而廣泛應用于食品工業(yè)。中國科技工作者發(fā)明的維生素C“二步發(fā)酵法”生產工藝是世界首創(chuàng)：第一步發(fā)酵用醋酸桿菌為菌種，第二步發(fā)酵用氧化葡萄糖酸桿菌（“小菌”）和假單胞桿菌（“大菌”）混合菌種。下圖為二步發(fā)酵法的生產流程，請回答有關問題：

(1)為純化和保存菌種，將一步發(fā)酵液抽樣稀釋用_________法接種含有碳酸鈣粉的培養(yǎng)基上，以________（填下列選項代號）為最佳指標；分離保存菌種。

A.菌落直徑大小B.溶鈣圈大小C.溶鈣圈直徑與菌落直徑比值。

(2)對一步發(fā)酵培養(yǎng)液檢測發(fā)現幾乎沒有雜菌存在，請推測可能的原因是_________。

(3)二步發(fā)酵過程中大小菌的菌種數比例會影響產酸率，種液接入發(fā)酵罐前衢對種液中的大小菌計數。計數所用的培養(yǎng)基除含有與發(fā)酵液相同的成分外，還需添加__________，根據菌落的____________對培養(yǎng)波中的大小菌分別計數?，F某檢測員將種液稀釋接種了3個平板，統計假單孢桿菌的菌落數分別是30、100和200，取平均值110。該結果可信度低，原因是_____________。

(4)若要嘗試固定化混合菌進行二步發(fā)酵來生產古龍酸，你認為固定化混合菌操作時要注意哪些方面？_______________至少提出兩點）。29、多不飽和脂肪酸（PUFAs）是人體必需脂肪酸；豬肉是我國最主要的肉類消費品，提高其PUFAs含量對居民健康具有重要意義。為解決豬肉中PUFAs含量不足的問題，研究者從線蟲中獲得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育轉fat1基因豬，操作過程如圖1。

(1)利用PCR技術擴增fat1基因時，應在兩種引物的一端分別加上限制酶_____和_____識別與切割的序列。為防止酶切產物自身環(huán)化，構建表達載體一般選用兩種限制酶，選擇的原則是_____。

a；目的基因編碼蛋白質的序列中有兩種限制酶切割位點。

b；表達載體內；每種限制酶只有一個切割位點。

c；酶切后；目的基因兩端的黏性末端序列相同。

d；酶切后；載體形成的兩個黏性末端序列不同。

(2)圖1中的連接產物需先導入大腸菌中的原因是_____；所構建的重組基因表達載體中未標注出的必需元件還有_____。

(3)將重組表達載體轉染豬成纖維細胞，另設一組空白對照。48小時后于熒光顯微鏡下觀察到_____；說明轉染成功。然后以轉基因細胞為核供體構建克隆胚胎，最終獲得轉fat1基因豬。

(4)研究者提取轉基因豬的基因組DNA，利用限制酶DraⅢ將其完全酶切并電泳分離。然后用探針通過_____的方法；檢測fat1基因是否成功整合在豬基因組DNA中，酶切方式及檢測結果如圖2。

①轉基因豬1、2、3中分別被轉入了_____個fat1基因。

②請解釋圖2檢測結果中4條雜交帶位置不同的原因：_____。

③該實驗_____（填“能”或“不能”）說明成功培育轉基因豬，理由是_____。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。

2；設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

【詳解】

A；設計試管嬰兒運用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植和遺傳學診斷等技術；A錯誤；

B；移植前需對胚胎進行遺傳學診斷；從中選擇符合要求的胚胎，B正確；

C；姐姐進行造血干細胞移植沒有改變其基因；故姐姐健康后所生的孩子仍含地中海貧血基因，C錯誤；

D；設計試管嬰兒會帶來倫理道德問題；我國未放開設計試管嬰兒技術的研究與應用，D錯誤。

故選B。2、D【分析】【分析】

下丘腦可以分泌促性腺激素釋放激素作用于垂體；促進垂體釋放促性腺激素，該激素能夠促進性腺分泌性激素，同時性激素能夠促進生殖器官的發(fā)育和生殖細胞的形成。

【詳解】

促進雌性動物大量排卵；首先要選擇性成熟的雌性動物，注射促性腺激素，同時注射的量要適宜，太多了會導致產生的性激素過多，通過反饋調節(jié)，抑制自身下丘腦和垂體的活動，導致自身的性腺萎縮，故給性成熟的雌性動物注射一定的促性腺激素，可使其超數排卵，即D正確。

故選D。

【點睛】3、D【分析】【分析】

1.將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體．用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

2.植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織；器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株（新植體）。

3.植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞；進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。

4.基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

①基因表達載體的構建是基因工程的第二步；也是基因工程的核心步驟，①正確；

②蛋白質工程是通過直接改造基因的結構從而實現了對蛋白質的結構的改造；②錯誤；

③克隆羊的培育涉及細胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術；屬于無性繁殖，③正確；

④PCR技術需要利用高溫打開DNA雙鏈；④錯誤；

⑤利用體外受精；胚胎移植技術可以培育試管嬰兒；⑤錯誤；

⑥哺乳動物胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體；牛也不例外，⑥正確；

⑦制備單克隆抗體的過程利用了動物細胞培養(yǎng)技術和細胞融合技術；⑦正確；

⑧利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時；誘導芽形成的過程需要光照，其他過程中未必需要光，⑧錯誤。

共四項錯誤。

故選D。

【點睛】4、B【分析】【分析】

植物的體細胞雜交是將不同種的植物體細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞；進而利用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。

【詳解】

A；植物細胞工程應用之一是利用胚狀體包囊人工胚乳和人工種皮制成人工種子；實現大規(guī)模生產，從而降低成本，A正確；

B；莖尖等分裂旺盛部位病毒極少或無病毒感染；所以利用莖尖分生組織培養(yǎng)出無病毒且保持優(yōu)良性狀的幼苗，脫毒苗不等于抗毒苗，通過基因工程將抗病毒基因轉移至受體細胞從而培育出抗病毒的轉基因植物，B錯誤；

C；通過植物體細胞雜交技術可以實現兩個植物物種間的體細胞雜交；得到同時具有兩種遺傳物質的植物，可以實現種間的雜交，克服了遠緣雜交不親和的障礙，C正確；

D；愈傷組織具有分裂旺盛的優(yōu)點；適于誘變育種的取材，能提高突變頻率，D正確。

故選B。5、C【分析】【分析】

1；用谷物釀制食醋經歷的三個主要發(fā)酵過程為：糖化→酒化→醋化。分別是淀粉在微生物的作用下水解成葡萄糖；葡萄糖在微生物的作用下分解成乙醇和二氧化碳（在無氧的條件下），乙醇被微生物在有氧的環(huán)境下氧化成乙酸。

2；在制作泡菜時所配制的泡菜鹽水要煮沸；以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。泡菜制作過程中，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短、容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

3；采用較低溫度（一般在60～82℃）；在規(guī)定的時間內，對食品進行加熱處理，達到殺死微生物營養(yǎng)體的目的，是一種既能達到消毒目的又不損害食品品質的方法。由法國微生物學家巴斯德發(fā)明而得名。巴氏殺菌熱處理程度比較低，一般在低于水沸點溫度下進行加熱，加熱的介質為熱水?！侗鄙骄平洝分杏涊d：“每壇加蠟三錢，竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口。”這種用加熱殺菌保存酒液的原理和方法，與釀酒中普遍使用的巴氏殺菌法基本相同。

4；腐乳發(fā)酵過程中；豆腐就是毛霉的固體培養(yǎng)基；現代腐乳生產是在嚴格無菌條件下將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上；味咸是因為加了鹽，加鹽的目的除了調味外，還有抑制微生物的生長，避免腐敗變質以及具有析出豆腐中的水分、使豆腐變硬的作用，酒的含量一般控制在12%左右，目的是抑制微生物生長，同時使腐乳具有獨特的香味。

【詳解】

A；根據以上分析可知；①介紹的是泡菜制作技術，配制的鹽水要煮沸冷卻后使用，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染，同時鹽水的鹽度不宜過大，避免使發(fā)酵過程中的乳酸菌大量失水而死亡，A正確；

B；蠟封壇口可以創(chuàng)造無氧環(huán)境；有助于陳酒的儲藏；另外隔水煮開即加熱可以殺菌，B正確；

C；酵母菌發(fā)酵的適宜溫度為18~25℃；而醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度為30~35℃，所以③中從酒化到醋化的過程需要移至溫度較高的環(huán)境中進行，同時需要通氧，C錯誤；

D；從微生物培養(yǎng)的角度看；豆腐是固體培養(yǎng)基，腐乳制作時主要利用的是空氣中的毛霉，接種時不需要對其進行嚴格滅菌，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

1；植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體．植物組織培養(yǎng)依據的原理是植物細胞的全能性。

2；培育無病毒植株苗；應選擇不含病毒部分培養(yǎng)，而植物體新生部位不含病毒，如根尖和莖尖。

【詳解】

進行植物微型繁殖時常采用莖尖或根尖作為外植體；原因是莖尖或根尖病毒極少，因此切取一定大小的莖尖或根尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就可能不帶病毒，C正確；

故選C。7、A【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質。

【詳解】

A；在培養(yǎng)乳酸桿菌時；需要在培養(yǎng)基中添加維生素即生長因子，A正確；

B；培養(yǎng)基中一般都含碳源、氮源、水和無機鹽；但還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質的需求，B錯誤；

C；微生物在固體培養(yǎng)基上生長時；稀釋度足夠高時，可形成肉眼可見的單個菌落，肉眼不能看到單個細菌，C錯誤；

D；液體培養(yǎng)基沒有加入凝固劑；固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，加入少量水也不會制成液體培養(yǎng)基，D錯誤。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)8、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數的關鍵是經梯度稀釋后的倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數。

【詳解】

A；倒置培養(yǎng)的原因是可以防止培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染；經高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時的平板均要倒置，以防止雜菌污染，A正確；

B；為使實驗結果更準確；同一稀釋度下可以多涂布幾個平板，至少要涂布三個平板并且要培養(yǎng)到菌落數穩(wěn)定時計數，求平均值，B正確；

C；細菌在分裂生殖中也會產生基因突變；雖然一個菌落是由一個活菌繁殖而來，但是個菌落中所有細胞的遺傳信息不一定相同，C錯誤；

D；證明選擇培養(yǎng)基沒有被雜菌污染的方法是對培養(yǎng)基進行空白培養(yǎng)；即選取未接種的培養(yǎng)皿與接種樣品的培養(yǎng)皿同時培養(yǎng)，在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染，D正確。

故選ABD。9、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表達載體是目的基因和載體重組后形成的。

2；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵細胞結合形成受精卵的過程。

3；胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性；能夠分裂和分化。

4；動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物。

【詳解】

A；若該模型表示體外受精技術；則C（受精卵）不能直接移植到代孕母體，需要將C移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。當胚胎發(fā)育到適宜的階段時，才可以將其取出向受體移植，A正確；

B；若該模型表示核移植技術；A和B表示供體細胞核和去核的卵細胞，則C→D過程表示胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術，B正確；

C；若A、B表示培養(yǎng)液和胚胎干細胞；則C→D的傳代培養(yǎng)過程中有可能出現分化現象，C正確；

D；若該模型表示農桿菌轉化法操作流程；則C可表示重組Ti質粒，D是農桿菌，D錯誤。

故選ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時；除了產生酒精，還會產生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點睛】11、C:D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯誤；

B；根據題意；細菌B不含有質粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導入了普通質?；蛘咧亟M質粒的細菌，B錯誤；

C；將人的生長激素基因與質粒A結合的過程連接兩個切口；該過程共形成4個磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因導入細菌時，需要用Ca2+處理細菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點睛】12、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測系統；將一段已知序列的DNA片段標記到抗體2上，通過抗原抗體的特異性識別并結合，抗體2會和固定抗體1；抗生素形成復合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進行擴增，通過檢測PCR產物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測的牛乳中可能含有牛乳腺細胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經過PCR擴增后的產物中，不僅有抗體2上的DNA擴增產物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴增產物，使檢測結果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴增，會出現假陽性現象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應；是通過PCR技術擴增抗體2上連接的DNA，最后通過檢測擴增產物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴增產物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關，抗原、抗體的數量可通過PCR技術間接擴增放大，C錯誤，D正確。

故選ABD。13、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應為無菌水，B錯誤；

C；由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應呈藍色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，因此周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

基因編輯技術屬于基因工程；而對于人體胚胎的操作又涉及胚胎工程，所有對于人體的操作都應經過安全性審查，要符合倫理道德；但用于疾病預防領域的研究又具有進步意義。

【詳解】

A；基因編輯制造人類的行為不符合倫理道德；A錯誤；

B；基因編輯技術；只是對個別人個別基因進行編輯，不一定改變人類進化的速度和方向，B錯誤；

C；基因編輯技術改變了人類的遺傳物質；但并沒有出現生殖隔離，即沒有形成新物種，C錯誤；

D；基因編輯技術可用于疾病預防領域研究；具有進步意義，但不能用于編輯嬰兒，D正確。

故選ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

本題知識點為剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理、培養(yǎng)基中各物質的作用。剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應。當我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH。獲取單個菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術完成。

【詳解】

A；在此培養(yǎng)基中；纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，A正確；

B、KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH，B正確；

C；從平板上纖維素分解菌的菌落分布可以看出（菌落較均勻）；接種方法為稀釋涂布平板法，C正確；

D；菌落周圍有透明圈不一定是細胞分解了纖維素；還有可能是分解了剛果紅染料，D錯誤；

故選ABC。三、填空題(共6題，共12分)16、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)17、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代20、略

【分析】【詳解】

蛋白質形成二硫鍵，使蛋白質的結構更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術屬于蛋白質工程技術，其步驟為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術屬于蛋白質工程技術，該技術的要點是從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。21、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到的有關生物技術安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設計試管嬰兒倫理問題、轉基因產品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉基因產品的安全性：轉基因技術的安全性的爭議；主要集中在兩個方面，一是對人是否安全，二是對環(huán)境的影響。

對人的安全方面；支持轉基因技術的人認為投放市場的轉基因作物都是經過充分實驗的，被改變的基因僅限于增加作物的抗病；抗災害能力，并且在北美地區(qū)轉基因食品已經使用的很多年，可以說現在美國加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉基因食品長大的；反對轉基因技術的人認為轉基因食品有害，他們的證據主要是一位科學家的實驗證明，用轉基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問題是這個實驗只成功過一次，后來別的科學家在相同的條件下都沒能再現這個實驗結果。

在環(huán)境方面對轉基因技術的爭議是最大的；也是歐洲人反對轉基因技術的重要依據，反對人持有的觀點是，通過改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲害和其他災害的植物，這種技術如果失去控制可能會把農作物改造成適應性極強的超級植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對優(yōu)勢地位，但轉基因技術產生的超級植物可能會打破自然平衡而泛濫成災。

倫理問題：由于轉基因技術創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預見,這就使轉基因技術創(chuàng)新呈現前所未有的復雜性,并不可避免地會引發(fā)很多全新的社會倫理問題,引出種種有關生物科學家的道德責任和學術自由的哲學爭論。在轉基因植物技術創(chuàng)新中,功利主義的預設和學術自由的主張必須以人類的價值、尊嚴和社會公正為前提條件。相關領域的科學家必須擔當起必要的道德責任,把握好倫理橫桿,以促使轉基因植物技術創(chuàng)新沿著科學的軌道健康發(fā)展。【解析】在日常生活中；我們遇到的有關生物技術安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設計試管嬰兒倫理問題、轉基因產品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉基因產品的安全性：轉基因技術的安全性的爭議；主要集中在兩個方面，一是對人是否安全，二是對環(huán)境的影響。

對人的安全方面；支持轉基因技術的人認為投放市場的轉基因作物都是經過充分實驗的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災害能力，并且在北美地區(qū)轉基因食品已經使用的很多年，可以說現在美國加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉基因食品長大的；反對轉基因技術的人認為轉基因食品有害，他們的證據主要是一位科學家的實驗證明，用轉基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問題是這個實驗只成功過一次，后來別的科學家在相同的條件下都沒能再現這個實驗結果。

在環(huán)境方面對轉基因技術的爭議是最大的；也是歐洲人反對轉基因技術的重要依據，反對人持有的觀點是，通過改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲害和其他災害的植物，這種技術如果失去控制可能會把農作物改造成適應性極強的超級植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對優(yōu)勢地位，但轉基因技術產生的超級植物可能會打破自然平衡而泛濫成災。

倫理問題：由于轉基因技術創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預見,這就使轉基因技術創(chuàng)新呈現前所未有的復雜性,并不可避免地會引發(fā)很多全新的社會倫理問題,引出種種有關生物科學家的道德責任和學術自由的哲學爭論。在轉基因植物技術創(chuàng)新中,功利主義的預設和學術自由的主張必須以人類的價值、尊嚴和社會公正為前提條件。相關領域的科學家必須擔當起必要的道德責任,把握好倫理橫桿,以促使轉基因植物技術創(chuàng)新沿著科學的軌道健康發(fā)展。四、判斷題(共1題，共5分)22、A【分析】【分析】

“設計試管嬰兒”在植入前需要對胚胎進行遺傳學診斷；而“試管嬰兒”是解決不孕不育等問題，不需要進行遺傳學診斷。

【詳解】

“設計試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要通過多種技術手段對胚胎進行遺傳學診斷；以便選擇合適的設計出來的試管嬰兒。

故正確五、實驗題(共3題，共30分)23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質；根據物理性質分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質和氧氣的要求。(1)

由配方表分析可知；在乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中，提供氮源的物質有蛋白胨和牛肉膏。

(2)

高壓滅菌條件常為121℃；15min；但乳糖蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌時，因為乳糖在121℃會被破壞，而選用了115℃，為了達到相同滅菌效果可以適當延長滅菌時間。

(3)

研究小組取兩支含乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管A和B；A管中加入1mL待測水樣，B管不做處理，然后都放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若A試管產生氣體，還不可以提示水樣可能被大腸桿菌污染，這時還需要再觀察試管中的顏色變化，由于大腸桿菌能產生酸性物質和氣體，同時培養(yǎng)基中的溴甲酚紫在酸性時呈黃色，故若A試管出現黃色時，則提示水樣被大腸桿菌污染。

(4)

制作濾膜法中所用的無菌平板時；在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基礎上還應加入瓊脂形成固體培養(yǎng)基，便于統計菌落。按上述濾膜法步驟制作的3個樣品平板上的菌落初步從形態(tài)；大小、顏色和透明度等方面進行形態(tài)學鑒定。該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，在平板上生長的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落，因此大腸桿菌實際數值應該小于49。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的種類和作用，掌握菌落計數的方法和具體操作等知識，意在考查學生識記所學知識要點，把握知識間的內在聯系，形成知識網絡的能力，同時獲取題干信息準確答題?！窘馕觥?1)牛肉膏；蛋白胨##蛋白胨、牛肉膏。

(2)適當延長滅菌時間。

(3)黃色。

(4)①.瓊脂②.形態(tài)、大小、顏色和透明度③.否#不能④.培養(yǎng)基表面的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達載體上除有復制原點；啟動子、終止子、目的基因外；還有標記基因（便于篩選目的基因）；

②農桿菌Ti質粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細胞；

④先誘導生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導愈傷組織生芽，待長出芽后，再將其轉接到誘導生根的培養(yǎng)基上，進一步誘導形成試管苗；

⑤在個體生物學水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設計引物，擴增后用（凝膠）電泳分離PCR產物進行檢測；植株B、C沒有出現條帶，則可能是因為沒有導入目的基因；植株A、E、F出現條帶但不具有抗病能力，則可能是因為導入植物細胞的目的基因不能轉錄或轉錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質沒有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標記基因攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細胞先誘導生芽，再誘導生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導入植物細胞的目的基因不能表達（或不能轉錄，轉錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質沒有活性等，合理即可）沒有導入目的基因25、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導其表達水平升高，當用兩種調控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結合；突變型探針不能與NF-Y結合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結合。

【詳解】

（1）初級代謝產物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內。次級代謝產物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調控序列；根據單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結合；根據第2組和第3組結果，依據B1序列制備的NF-Y結合位點野生型探針能與NF-Y結合，根據第4組結果，突變型探針不能與NF-Y結合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結合。故可以解釋為：結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結合，所以第4組與第2組同樣位置出現阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結合NF-Y，因此第5組中出現標記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結合物，結合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性?！窘馕觥?1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導啟動子活性增強。

(3)結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結合，所以第4組與第2組同樣位置出現阻滯帶。NF-Y的抗體結合NF-Y，因此第5組中出現標記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結合物，結合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共4題，共36分)26、略

【分析】【分析】

1；果膠酶的種類：多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶、果膠分解酶；果膠酶能分解植物的細胞壁，瓦解植物細胞之間的胞間層，能將果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，從而提高果汁的出汁率和澄清度。2、溫度通過影響酶的活性，從而影響化學反應速率。3、果酒制作的菌種是酵母菌，代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧，果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

（1）果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱；包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠酯酶、果膠分解酶，酶具有專一性，纖維素酶能分解植物細胞壁中的纖維素。

（2）溫度是影響果膠酶活性的因素之一；為了提高出汁率，需要將溫度控制在果膠酶的最適溫度，因為在最適宜的溫度下果膠酶的活性最強。

（3）酶活性是指酶催化一定化學反應的能力；酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化某一化學反應的速度來表示，在該實驗中可通過比較在一定條件下，單位時間內；單位體積中反應物的消耗量或產物的增加量來表示。

（4）制作果酒需要酵母菌，酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧型微生物；果酒制作過程中O2的作用是促進酵母菌有氧呼吸大量繁殖；制作果醋需要醋酸菌；醋酸菌屬于好氧細菌，醋酸菌生長的最適溫度是30-35℃，繁殖方式是二分裂。

【點睛】

熟知果膠酶的種類及其催化作用的特點是解答本題的關鍵，識記果酒和果醋制作的基本原理?！窘馕觥抗z分解酶果膠酯酶細胞壁在最適宜的溫度下果膠酶的活性最強單位時間內單位體積中反應物的消耗量或產物的增加量酵母菌異養(yǎng)兼性厭氧型促進有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧30-35℃二分裂式27、略

【分析】【分析】

1；配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基；在該培養(yǎng)基上能夠生長的細菌就是能分解尿素的細菌，分解尿素的細菌能合成脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

2；為了保證稀釋涂布平板法統計菌落數目的結果準確；一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。

（1）

該培養(yǎng)基中含有蛋白胨和尿素；蛋白胨和尿素中都含有氮元素，故尿素不是唯一氮源，該培養(yǎng)基不能選擇出只以尿素為氮源的微生物。

（2）

培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；培養(yǎng)皿常用干熱滅菌法滅菌。待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右不太燙手時可以進行倒平板，倒平板操作需要在酒精燈火焰附近進行。等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染，也避免了培養(yǎng)基中水分過快的揮發(fā)。

（3）

要統計每克土壤樣品中活菌數目；宜采用稀釋涂布平板法接種。稀釋倍數足夠大時，每個細胞則會長成單菌落，故根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數目就能大約推測出樣品中活菌數。

（4）

檢測固體培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間；觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生，如果有菌落產生，則說明培養(yǎng)基被污染了。

【點睛】

本題考查微生物培養(yǎng)中的無菌技術、微生物的分離和計數、培養(yǎng)基的分類和作用等相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構能力，對相關知識點的識記和理解是解題的關鍵?！窘馕觥浚?）不能培養(yǎng)基含蛋白胨；尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）

（2）高壓蒸汽滅菌干熱滅菌50酒精燈火焰培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基。

（3）（稀釋）涂布平板菌落數目。

（4）將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生28、略

【分析】【分析】

1.微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后，可形成單菌落。

2.固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術；包括包埋法；化學結合法和物理吸附法。一般來說，酶更合適采用化學結合和物理吸附法固定化，而細胞多采用包埋法固定化。這是因為細胞體積大，而酶分子小；體積大的細胞難以被吸附或結合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

3.菌落：是指由單個微生物細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內部生長繁殖到一定程度；形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的；有一定形態(tài)、構造等特征的子細胞集團。各種微生物在一定條件下形成的菌落特征，如大小、形狀、邊緣、表面、質地、顏色等，具有一定的穩(wěn)定性，是衡量菌種純度、辨認和鑒定菌種的重要依據。

(1)

為純化和保存菌種；將一步發(fā)酵液抽樣稀釋后用稀釋涂布平板法接種在含有碳酸鈣粉的培養(yǎng)基上，由于醋酸菌代謝過程中產生的醋酸會與培養(yǎng)基中的碳酸鈣發(fā)生反應，形成溶鈣圈，我們以溶鈣圈直徑與菌落直徑比值，即C為最佳指標