2025年湘師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年湘師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、對(duì)基因表達(dá)載體構(gòu)建的一些說(shuō)法，不正確的是（）A.基因表達(dá)載體中含有啟動(dòng)子和內(nèi)含子B.需要限制酶和DNA連接酶參與C.基因表達(dá)載體構(gòu)建是基因工程的核心D.通常用抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因2、下列技術(shù)或方法與原理相符的是（）A.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉和克隆羊多利的培育——基因重組B.植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體的制備——細(xì)胞的全能性C.早期胚胎培養(yǎng)和人鼠細(xì)胞融合——細(xì)胞膜的流動(dòng)性D.人參細(xì)胞的大量培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞增殖3、下圖是利用奶牛乳腺生產(chǎn)血清白蛋白的過(guò)程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.將剪碎的牛組織置于無(wú)菌水中并加入一定量的胰蛋白酶處理可得到單細(xì)胞B.圖中涉及基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植等技術(shù)C.選用未受精的卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞是因?yàn)槠渚哂凶尲?xì)胞核全能性得到表達(dá)的環(huán)境D.經(jīng)過(guò)胚胎分割獲得同卵雙胎或多胎屬于無(wú)性繁殖4、下列不屬于利用基因工程技術(shù)制取的藥物是（）A.從大腸桿菌體內(nèi)獲得白細(xì)胞介素B.從酵母菌體內(nèi)獲得干擾素C.從大腸桿菌體內(nèi)獲得胰島素D.從青霉菌體內(nèi)獲得青霉素5、下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，下列說(shuō)法正確的是（）。成分NaNO3KHPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4（CH2O）H2O青霉素含量3g1g0．5g0．5g0．01g30g1L0．1萬(wàn)單位

A.該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是自養(yǎng)型B.該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)時(shí)均需在搖床上進(jìn)行C.培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3D.若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解性細(xì)菌應(yīng)除去（CH2O），添加纖維素6、下圖是對(duì)基因型為Aabb的玉米所作的處理，據(jù)圖分析下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過(guò)程a所采取的技術(shù)手段是花藥離體培養(yǎng)B.過(guò)程b用秋水仙素處理后可以得到4種基因型的玉米C.c和d分別是脫分化和再分化過(guò)程D.圖中過(guò)程a或過(guò)程c、d能夠說(shuō)明植物細(xì)胞具有全能性7、科學(xué)家培育了一種可以生產(chǎn)人血紅蛋白的轉(zhuǎn)基因煙草。下列敘述正確的是（）A.要獲得該轉(zhuǎn)基因煙草，首先要從人的成熟紅細(xì)胞內(nèi)獲取目的基因B.人血紅蛋白基因?qū)霟煵菁?xì)胞可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C.PCR不能用于鑒定受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)入了目的基因D.該基因轉(zhuǎn)到煙草染色體上使煙草發(fā)生染色體畸變?cè)u(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)8、中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所首席科學(xué)家；動(dòng)物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元；曾主持科研攻關(guān)項(xiàng)目——“攀登”，進(jìn)行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細(xì)胞核放入兔子的去核卵母細(xì)胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問(wèn)題得到解決，異種克隆大熊貓邁過(guò)了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說(shuō)法正確的是（）

A.整個(gè)過(guò)程用到的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.重構(gòu)胚發(fā)育成囊胚所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于“代孕母體”D.步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理9、下列關(guān)于發(fā)酵工程的應(yīng)用，敘述正確的是（）A.檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，可以通過(guò)黑曲霉發(fā)酵制得B.可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過(guò)發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗C.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌特異性強(qiáng)，只能用來(lái)防治一種農(nóng)林害蟲(chóng)D.一種真菌通過(guò)發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來(lái)防治水稻枯紋病10、研究發(fā)現(xiàn)；某些致病菌生長(zhǎng)繁殖需要外界提供相應(yīng)的生長(zhǎng)因子。將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時(shí)，金黃色葡萄球菌周?chē)牧鞲惺妊獥U菌菌落較大，越遠(yuǎn)則菌落越小，稱為衛(wèi)星現(xiàn)象（圖甲）為進(jìn)一步探究流感嗜血桿菌所需生長(zhǎng)因子的種類，把其菌懸液與不含生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分成四個(gè)區(qū)域，將從血液中提取的V；X兩種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）

A.圖甲中的不同菌落可以通過(guò)觀察菌落特征進(jìn)行鑒別B.衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長(zhǎng)因子或引起溶血所致C.可用加熱（破壞血細(xì)胞）血瓊脂平板進(jìn)行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)D.圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長(zhǎng)需要生長(zhǎng)因子V或X11、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過(guò)程中會(huì)生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無(wú)需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件12、驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無(wú)害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.驅(qū)蚊草培育過(guò)程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅(qū)蚊草培育過(guò)程不同于植物組織培養(yǎng)，無(wú)細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程D.驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是基因突變13、生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無(wú)污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙D.生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)14、平板劃線法是通過(guò)____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。15、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為_(kāi)_______________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。17、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點(diǎn)：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。18、第三步：將目的基因?qū)隷_____19、目的基因是指：______20、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)21、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽(tīng)之任之，不管不問(wèn)（______）A.正確B.錯(cuò)誤22、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)23、鐵皮石斛是我國(guó)名貴中藥；生物堿是其有效成分之一，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖（簡(jiǎn)稱PLBs，類似愈傷組織）生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下：

在固體培養(yǎng)基上；PLBs的重量；生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時(shí)間的變化如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

⑴選用新生營(yíng)養(yǎng)芽為外植體的原因是_____，誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過(guò)程稱______。

⑵與黑暗條件下相比，PLBs在光照條件下生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在_______，_______，____。

⑶脫落酸（ABA）能提高生物堿含量；但會(huì)抑制PLBs的生長(zhǎng)。若采用液體培養(yǎng)，推測(cè)添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開(kāi)展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測(cè)，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案是探討了以下問(wèn)題：

①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式：設(shè)4個(gè)ABA處理組，1個(gè)空白對(duì)照組，3次重復(fù)。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無(wú)菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基______后按比例加入。②實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣：實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，將樣品（PLBs）稱重（g/瓶）后再測(cè)定生物堿含量。如初始（第0天）數(shù)據(jù)已知，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需測(cè)定的樣品數(shù)為_(kāi)_____。

③依所測(cè)定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時(shí)間：當(dāng)某3個(gè)樣品（重復(fù)樣）的_____時(shí)，其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。24、【生物技術(shù)實(shí)踐】

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白的抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_____________處理。25、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對(duì)沒(méi)有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。26、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來(lái)了無(wú)限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問(wèn)題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過(guò)_______________法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共4分)27、利用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄—馬鈴薯”雜種植株；實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示，遺憾的是該雜種植株并非是想象中的地上長(zhǎng)番茄，地下結(jié)馬鈴薯的“超級(jí)作物”。

(1).材料中所用到的植物體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)用了植物組織培養(yǎng)和_____技術(shù)，植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是_____。

(2).圖中①步驟所示用_____除去植物細(xì)胞的細(xì)胞壁；分離出有活力的原生質(zhì)體。

(3).圖中②過(guò)程細(xì)胞兩兩融合時(shí)，可出現(xiàn)_____種融合細(xì)胞，要促進(jìn)雜種細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有_____和_____兩類激素。

(4).由雜種細(xì)胞培育成試管苗，需要經(jīng)過(guò)細(xì)胞的④_____和⑤_____過(guò)程。

(5).利用馬鈴薯和番茄的_____得到單倍體植株，然后取單倍體植株的細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交，再用_____處理之后也可得到可育的“番茄—馬鈴薯”雜種植株。28、水稻穗粒數(shù)可影水稻產(chǎn)量。研究者篩選到一株穗粒數(shù)異常突變體；并進(jìn)行了相關(guān)研究。

（1）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA序列，可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的___________中；導(dǎo)致被插入的基因功能喪失。研究者用此方法構(gòu)建水稻突變體庫(kù)，并從中篩選到穗粒數(shù)異常突變體。

（2）研究者分別用EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三種限制酶處理突變體的總DNA；用HindⅢ處理野生型的總DNA，處理后進(jìn)行電泳，使長(zhǎng)短不同的DNA片段分離。電泳后的DNA與DNA分子探針（含放射性同位素標(biāo)記的T-DNA片段）進(jìn)行雜交，得到下圖所示放射性檢測(cè)結(jié)果。

（注：T-DNA上沒(méi)有EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三種限制酶的酶切位點(diǎn)）

根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，可分析得到___________

A．突變體雜交帶的位置不同；是由于不同限制酶切割后含T-DNA的片段長(zhǎng)度不同。

B．結(jié)果表明野生型水稻DNA中不存在HindⅢ的酶切位點(diǎn)；突變體水稻細(xì)胞中有農(nóng)桿菌。

C．突變體均出現(xiàn)雜交帶；野生型無(wú)條帶，表明T-DNA已成功轉(zhuǎn)移到水稻DNA中。

D．突變體最可能為T(mén)-DNA單個(gè)位點(diǎn)插入；因?yàn)椴煌拗泼柑幚矶贾坏玫揭粭l雜交帶。

（3）研究者用某種限制酶處理突變體的DNA（如下圖所示），用___________將兩端的黏性末端連接成環(huán)，以此為模板，再利用圖中的引物___________組合進(jìn)行PCR；擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列。經(jīng)過(guò)與野生型水稻基因組序列比對(duì)，確定T-DNA插入了2號(hào)染色體上的B基因中。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，該突變體產(chǎn)量明顯低于野生型，據(jù)此推測(cè)B基因可能___________（填“促進(jìn)”或“抑制”）水稻穗粒的形成。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建的目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用?；虮磉_(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因；啟動(dòng)子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始；終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。由于受體細(xì)胞有植物；動(dòng)物以及微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，因此基因表達(dá)載體的構(gòu)建是不完全相同的。

【詳解】

A；基因表達(dá)載體中含有啟動(dòng)子；但未必有內(nèi)含子，A錯(cuò)誤；

B；構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶切割目的基因和運(yùn)載體；用DNA連接酶處理具有相同黏性末端的目的基因和運(yùn)載體進(jìn)而形成重組DNA，B正確；

C；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心；在細(xì)胞外進(jìn)行，使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用，C正確；

D；通常用抗生素基因作為標(biāo)記基因；便于目的基因的鑒定和篩選，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

1；基因重組是指具有不同遺傳性狀的雌、雄個(gè)體通過(guò)有性生殖時(shí)；控制不同性狀的基因重新組合，導(dǎo)致后代不同于親本類型的現(xiàn)象或過(guò)程。包括：（1）交叉互換；（2）自由組合；（3）肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化；（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)。

2；單克隆抗體的制備的基本方法是：（1）用外界抗原刺激動(dòng)物；使其發(fā)生免疫反應(yīng)；（2）利用仙臺(tái)病毒或聚乙二醇等作介導(dǎo)，使經(jīng)免疫的動(dòng)物的脾細(xì)胞與可以無(wú)限傳代的骨髓瘤細(xì)胞融合；（3）經(jīng)過(guò)篩選、克隆培養(yǎng)，獲得來(lái)自單一細(xì)胞的既能產(chǎn)生特異性抗體、又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞克隆。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的原理是基因重組；但克隆羊多利的培育利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；

B；植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；但單克隆抗體的制備是利用細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖的原理，B錯(cuò)誤；

C；人鼠細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；但早期胚胎培養(yǎng)只是利用了細(xì)胞增殖的原理，C錯(cuò)誤；

D；人參細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理都是細(xì)胞增殖；D正確。

故選D。3、A【分析】【分析】

據(jù)圖可知；首先把血清蛋白基因?qū)肱５募?xì)胞中，獲得轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞，取該轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因奶牛。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞需要在特定的培養(yǎng)液中培養(yǎng)；用胰蛋白酶可以分離得到單細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；圖示有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植等技術(shù)；B正確；

C；未受精的卵母細(xì)胞較大；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，C正確；

D；為獲得同卵雙胎或多胎；可通過(guò)胚胎分割獲得多個(gè)胚胎，一般分割囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，且需均等分割，該技術(shù)屬于無(wú)性繁殖，D正確。

故選A。4、D【分析】【分析】

基因工程藥物（從化學(xué)成分上分析都應(yīng)該是蛋白質(zhì)）：

（1）來(lái)源：轉(zhuǎn)基因工程菌。工程菌是指采用基因工程的方法；使外源基因得到高效率表達(dá)的菌株類細(xì)胞系。

（2）成果：人胰島素；細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等。

【詳解】

A；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如將外源白細(xì)胞介素基因?qū)氪竽c桿菌中并表達(dá)制取白細(xì)胞介素，A錯(cuò)誤；

B；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如使外源干擾素基因在酵母菌體內(nèi)表達(dá)獲得干擾素，B錯(cuò)誤；

C；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如使外源胰島素基因在大腸桿菌體內(nèi)表達(dá)獲得胰島素，C錯(cuò)誤；

D；青霉素是青霉菌自身基因表達(dá)產(chǎn)生的；因此在青霉菌體內(nèi)提取的青霉素不屬于基因工程藥品，D正確。

故選D。5、C【分析】【分析】

分析圖表；該培養(yǎng)基的配方中，含有青霉素，可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖，所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、該培養(yǎng)基中含有有機(jī)物碳源（CH2O）；所以該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是異養(yǎng)型，A錯(cuò)誤；

B；該培養(yǎng)基沒(méi)有加入凝固劑；屬于液體培養(yǎng)基，搖床可以增加培養(yǎng)液中的溶解氧，對(duì)于厭氧型微生物的培養(yǎng)不需要用搖床，B錯(cuò)誤；

C、分析表格可知，（CH2O）含有C，NaNO3中含有N，該培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3；C正確；

D、纖維素分解性細(xì)菌能利用纖維素（碳源），且青霉素能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解性細(xì)菌應(yīng)除去（CH2O）和青霉素；添加纖維素，D錯(cuò)誤；

故選C。6、B【分析】【分析】

1；花藥離體培養(yǎng)是指將發(fā)育到一定階段的花藥接種到培養(yǎng)基上；來(lái)改變花藥內(nèi)花粉粒的發(fā)育程序，形成愈傷組織，并由愈傷組織再分化成植株；

2；離體的植物組織或細(xì)胞；在培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)通過(guò)細(xì)胞分裂形成愈傷組織；愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞；由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程，稱為植物細(xì)胞的脫分化；脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過(guò)程叫做再分化；再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植株體。

【詳解】

A；a過(guò)程由花粉粒變?yōu)閱伪扼w植株；要經(jīng)過(guò)花藥離體培養(yǎng)，A正確；

B、基因型為Aabb的玉米能產(chǎn)生2種基因型的花粉：Ab和ab，經(jīng)花藥離體培養(yǎng)后可得到2種單倍體幼苗，幼苗再經(jīng)秋水仙素處理后得到AAbb和aabb；2種基因型的可育玉米，B錯(cuò)誤；

C；由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程；稱為脫分化，脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過(guò)程叫做再分化，所以c是脫分化，d是再分化，C正確；

D；過(guò)程a或過(guò)程c、d是植物細(xì)胞培育成了植物個(gè)體；所以能夠說(shuō)明植物細(xì)胞具有全能性，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。目的基因的檢測(cè)與鑒定∶分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；人的細(xì)胞都含有控制血紅蛋白合成的基因；故要獲得該轉(zhuǎn)基因煙草，不一定要從人的成熟紅細(xì)胞內(nèi)獲取目的基因，A錯(cuò)誤；

B；為使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)；應(yīng)將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法使目的基因插入到煙草細(xì)胞中的染色體DNA上，B正確；

C；鑒定篩選時(shí)；通過(guò)PCR技術(shù)可以檢測(cè)目的基因是否插入了受體細(xì)胞染色體DNA上，也可以檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，C錯(cuò)誤；

D；該基因轉(zhuǎn)到煙草染色體上；使控制不同性狀的基因重新組合，屬于基因重組，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共6題，共12分)8、A:B【分析】【分析】

1；析題圖：步驟甲為細(xì)胞核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

2；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物。

3；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)；使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體叫“受體”。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指細(xì)胞核移植和胚胎移植作用；所以整個(gè)過(guò)程用到的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（重組胚胎培養(yǎng)）、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等，A正確；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；重組細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于去核的卵母細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理；甲不需要，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】

分本題結(jié)合圖解，考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記體外受精的過(guò)程及條件；識(shí)記早期胚胎培養(yǎng)的過(guò)程及條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。9、A:B【分析】【分析】

發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段；利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育；培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。

【詳解】

A；檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑；可以通過(guò)黑曲霉發(fā)酵制得，A正確；

B；可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過(guò)發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗；B正確；

C；利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌可以用來(lái)防治80多種農(nóng)林害蟲(chóng)；C錯(cuò)誤；

D；一種放線菌通過(guò)發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來(lái)防治水稻枯紋病；D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】10、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析可知；流感嗜血桿菌的菌落主要分布于添加了X和V的區(qū)域的交界處，說(shuō)明該菌生長(zhǎng)需要的生長(zhǎng)因子是X和V。

菌落的特征：形狀；大小、顏色、隆起程度、質(zhì)地、邊緣等。

培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成：碳源；氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、特殊生長(zhǎng)因子。

【詳解】

A；鑒定不同種的菌落可以觀察菌落的特征；比如形態(tài)、顏色、隆起程度等，A正確；

B；流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時(shí)；金黃色葡萄球菌周?chē)牧鞲惺妊獥U菌菌落較大，越遠(yuǎn)則菌落越小，由此推測(cè)衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長(zhǎng)因子或引起溶血所致，B正確；

C；分析題干信息可知；可用加熱（破壞血細(xì)胞）血瓊脂平板進(jìn)行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)，C正確；

D、圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長(zhǎng)需要生長(zhǎng)因子V和X，不是V或X，D錯(cuò)誤。11、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過(guò)特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過(guò)程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過(guò)程；B錯(cuò)誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過(guò)程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說(shuō)明在發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過(guò)程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯(cuò)誤。

故選AC。12、C:D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的；采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅(qū)蚊草培育過(guò)程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程，C錯(cuò)誤；

D；驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯(cuò)誤。

故選CD。13、A:C:D【分析】【分析】

本題考查微生物的培養(yǎng)及鑒定。據(jù)圖分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的區(qū)域的交界處，說(shuō)明該嗜熱菌所需的生長(zhǎng)因子是乙和丙。

【詳解】

A；倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無(wú)菌落的出現(xiàn)；可以判斷培養(yǎng)基有無(wú)污染，A正確；

B；在制作培養(yǎng)基的過(guò)程中；需要先進(jìn)行滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤；

C；分析題圖可知；嗜熱菌在添加了乙、丙生長(zhǎng)因子的區(qū)域生長(zhǎng)，故該菌需要的生長(zhǎng)因子是乙和丙，C正確；

D；不同的菌種所需的生長(zhǎng)因子不同；利用生長(zhǎng)圖形法可用于某些菌種的篩選，某菌種只會(huì)在提供其需要的生長(zhǎng)因子區(qū)域生長(zhǎng)，D正確。

故選：ACD。三、填空題(共7題，共14分)14、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個(gè)細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個(gè)細(xì)胞?.單個(gè)的菌落15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細(xì)胞19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、判斷題(共2題，共8分)21、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯(cuò)誤。22、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)23、略

【分析】【分析】

【詳解】

⑴新生營(yíng)養(yǎng)芽分裂能力強(qiáng)；細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成PLBs；根據(jù)題干可知，PLBs，類似愈傷組織，外植體形成愈傷組織的過(guò)程是脫分化。⑵據(jù)圖分析，光照下PLBs的重量高于黑暗條件下，原因可能是生長(zhǎng)起始較快，快速生長(zhǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，PLBs產(chǎn)量較高。⑶①由于ABA受熱易分解，所以各種液體培養(yǎng)基滅菌后，冷卻，再加入不同濃度的ABA。②根據(jù)題干可知，實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，需要取5次樣；空白組不需要重復(fù)，處理組，每組重復(fù)三次，因此每次取樣中，需要記錄15個(gè)樣品中的數(shù)據(jù)，取樣5次共需要測(cè)定的樣品數(shù)為75。③適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量，當(dāng)樣品的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時(shí)，其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。

【考點(diǎn)】

本題主要考查植物組織培養(yǎng)和設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系、具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究的能力和并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力?！窘馕觥考?xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成PLBs細(xì)胞的脫分化生長(zhǎng)起始較快快速生長(zhǎng)時(shí)間較長(zhǎng)PLBs產(chǎn)量較高滅菌、冷卻75PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大24、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質(zhì)；是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷；大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質(zhì)較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應(yīng)該不能生長(zhǎng)或生長(zhǎng)很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應(yīng)該能生長(zhǎng)，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，是為了防止細(xì)菌擴(kuò)散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會(huì)破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場(chǎng)所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場(chǎng)所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對(duì)沒(méi)有分化的薄壁細(xì)胞團(tuán)；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過(guò)稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過(guò)體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定：凝膠中的DNA分子通過(guò)染色；可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過(guò)程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無(wú)，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒(méi)有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒(méi)有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用六、綜合題(共2題，共4分)27、略

【分析】【分析】

據(jù)圖示可知：利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育雜種植物細(xì)胞；具體過(guò)程包括誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合成雜種細(xì)胞和植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成雜種植株兩過(guò)程。過(guò)程①是通過(guò)酶解法去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，過(guò)程②通過(guò)物理或化學(xué)方法（如聚乙二醇試劑）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融