ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病課件

ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病輸血前免疫學檢測輸血前檢測：血型鑒定：ABO血型（正反定型）、RhD血型抗體篩選交叉配血：主側(cè)、次側(cè)目的：準確定型，選擇相容血液。意義：輸血安全、及時、有效。2ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病人類血型系統(tǒng)30個血型系統(tǒng)目前被識別的血型抗原的總數(shù)達到328個，其中有284個抗原分別屬于30個血型系統(tǒng)3ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

紅細胞血型系統(tǒng)最具臨床意義：ABO、Rh臨床意義：輸血安全、器官移植、新生兒溶血病。急性溶血性輸血反應(yīng)：ABO抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，能夠激活補體，導致紅細胞在血管內(nèi)立即被破壞。輕癥：發(fā)熱、腰背痛、血紅蛋白尿或手術(shù)創(chuàng)口滲血。重癥：DIC、休克、急性腎衰竭，甚至死亡。4ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO血型系統(tǒng)抗原抗體相對應(yīng)：紅細胞上缺乏相應(yīng)抗原，血清中有相應(yīng)抗體，組織細胞分泌液中有ABH抗原。其它血型系統(tǒng)沒有的特性。免疫原性最強的血型系統(tǒng)，抗體主要是IgM性質(zhì)，可引起急性溶血性輸血反應(yīng)，在臨床輸血中的作用最重要。

5ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO血型分子基礎(chǔ)ABO基因組DNA長度約30Kb，由7個外顯子組成。A和B基因編碼的蛋白都是353個氨基酸，O基因編碼的蛋白只有115個氨基酸。B基因在cDNA上有七個核苷酸與A1基因不同，其中四個核苷酸的變化造成了氨基酸序列的變化。O基因有兩種：①O1基因：最常見的O基因，在cDNA的第261位G缺失，提前終止轉(zhuǎn)移酶的翻譯，使其編碼的蛋白只有115個氨基酸。②O2基因：261位G不缺失，很少見的O基因。6ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO抗原的發(fā)育胚胎期開始產(chǎn)生，出生時還未發(fā)育完全，其抗原數(shù)只有成人的25～50％，與抗A和抗B血型試劑的反應(yīng)也較成人弱。新生兒ABO抗體也很弱，故新生兒定ABO血型是不需要反定型，通常在三個月后才進行反定型。7ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

ABO血型鑒定方法玻片法：瓷板、紙片試管法：經(jīng)典的試管離心方法仍被認為是最可靠的ABO定型方法。微量板法(U型或V型板)：大量標本微柱凝膠法（卡式）：混合外觀mf分子生物學方法8ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1A1BOA1++++0++++0++++0++++0A/HA2++++0+++++++00/+++++0A/HAint+++0++++++++0++++0A/HA3mf0mf+++00++++0A/HAel000++++00/+++++0H9ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO亞型A亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗H抗A1A1BOAy000++++00++++0A/HAm0/±00/±++++00++++0A/HAx0/±0+++++00/+++++0HAendmf0mf++++00++++0HAfinn±0±++++0++++++0H10ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

ABO亞型B亞型正定型反定型分泌物質(zhì)抗A抗B抗AB抗HABOB10++++++++++++++00B/HBint0++++++++++++++00B/HB30mfmf++++++++00B/HBx00/±0/+++++++++w0HBm00/±0/±+++++++00B/HBel000+++++++w0H11ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

紅細胞混合凝集(mf)特征：有部分凝聚細胞，周圍有大量游離細胞類型：按抗原來源分，可分為外源性和內(nèi)源性ABO亞型：A3、B3嵌合體：孿生子、雙精嵌合造血干細胞移植、異型輸血、胎母出血檢測技術(shù)：分子生物學技術(shù)12ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病cisABcisAB的血清學特征：與抗A的反應(yīng)強度：和A1細胞接近；與抗B的反應(yīng)強度：弱于正常B，易被誤定為B3/Bx,可顯混合外觀凝集血清常含有弱抗BH抗原性強家系調(diào)查和分子生物學方法確認cisAB表型13ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符合原因假陰性結(jié)果沒有加抗體試劑忽視溶血結(jié)果試劑和細胞比例不當離心時間、速度不足試劑失效、用法錯誤記錄或結(jié)果判讀錯誤假陽性結(jié)果離心時間、速度過大試劑、細胞、鹽水污染實驗容器不潔記錄或結(jié)果判讀錯誤14ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符合原因正定型：抗原ABO亞型、cisAB疾病致抗原減弱：白血病、淋巴瘤紅細胞被自身抗體致敏紅細胞被細菌污染造成多凝集現(xiàn)象獲得性B抗原：胃腸道疾病、酸化試劑臍帶血中有Wharton膠混合外觀凝集：亞型、骨髓移植、異型輸血、嵌合體15ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符合原因反定型：抗體緡錢狀凝集：球蛋白過高自身抗體：冷凝集素疾病：白血病、惡性淋巴瘤、骨髓移植、使用免疫抑制劑、免疫缺陷、低丙種球蛋白血癥年齡因素：新生兒、老年人近期內(nèi)血漿置換同種抗體：通常IgM性質(zhì)16ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO疑難血型鑒定方法了解樣本情況：病史、采樣

進行重復試驗重新采樣紅細胞洗滌后配成3～5%濃度用試管法，實驗管在室溫和4℃放置30分鐘，陰性者用顯微鏡觀察結(jié)果。更換新的試劑更換試驗方法17ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO疑難血型鑒定方法增加試劑：抗A1、抗H、抗AB增加細胞：自身、O細胞、臍血細胞(i抗原)唾液血型物質(zhì)鑒定吸收放散試驗直接抗球蛋白試驗分子生物學實驗18ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc04＋4＋000分析：血型可能是B型、A亞B型抗體：患者年齡（老人/嬰兒）、疾病診斷（白血病、MM、免疫球蛋白缺乏等）基因檢測

19ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗A1AcBcOc4+04+00/+4＋0分析：血型可能是A2亞型，血清中常有抗A1抗體。

20ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析

抗A抗B抗ABAcBcOc0/+0±/+04＋0分析：患者血型可能是A亞型。 如果是血液病患者，抗原減弱的可能性很大。21ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc2＋4＋4＋4＋2＋2＋分析：患者血型可能是B型。有自身抗體：冷凝集素22ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗AB抗HAcBcOc4＋2+/mf4＋3+0＋0分析：患者血型可能是cisAB型、AB亞型?；驒z測、家系分析

23ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析

抗A抗B抗ABAcBcOc00/+0/+4＋0/+0

分析：患者血型可能是B亞型。吸收放散試驗、血型基因24ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc0004＋4＋2＋分析：患者血型可能是O型，血清中有意外抗體。25ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc自身

4＋2＋4＋04＋00分析：患者血型可能是A型，獲得性B。了解疾病，酸化試劑26ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析

抗A抗B抗AB2＋2＋2＋分析：患者是新生兒，只做正定型。血型可能是O型，臍帶血中有Wharton膠。洗滌被檢細胞。27ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO正反定型不符分析抗A抗B抗ABAcBcOc4＋04＋2＋4＋2＋分析：患者的血型可能是A型。緡錢狀凝集：多發(fā)性骨髓瘤或巨球蛋白血癥患者。28ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

新生兒溶血病新生兒溶血病(HDN)的定義HDN的主要分類HDN的檢測HDN的治療輸血指征輸血策略29ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病新生兒溶血病的定義

新生兒溶血病(hemolyticdiseaseofnewborn，HDN)是母嬰血型不合引起的同種免疫性溶血性疾病，胎兒紅細胞進入母體循環(huán)致使母體產(chǎn)生相應(yīng)的IgG類抗體，孕期母親的IgG血型抗體通過胎盤與胎兒紅細胞發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生不同程度溶血的疾病。30ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病新生兒溶血病的癥狀流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎黃疸、貧血、肝脾腫大膽紅素腦病(核黃疸）：智力發(fā)育不全或死亡HDN檢測已被列為孕婦圍產(chǎn)期保健的重要內(nèi)容。31ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病高膽紅素血癥指新生兒血清總膽濃度超過220μmol/L(13mg/dL)，以間膽升高為主，是新生兒期常見疾病之一。重者產(chǎn)生核黃疸,可損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成智力發(fā)育不全甚至危及生命。按《實用新生兒學》的診斷標準分度:220～277μmol/L為輕度

277～342μmol/L為中度

>342μmol/L為重度32ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病高膽紅素血癥感染、圍產(chǎn)因素、母乳性黃疸敗血癥、肺炎、早產(chǎn)、新生兒溶血病等33ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病新生兒溶血病的分類ABOHDN：第1胎即可發(fā)病，通常臨床癥狀較輕。RhHDN：一般發(fā)生在第2胎或多次妊娠后,黃疸出現(xiàn)早、發(fā)展迅速，臨床癥狀重。MNHDN：臨床上少見，病情較輕。

34ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO新生兒溶血病母嬰ABO血型不合母血清IgG抗A/抗B抗體效價越高，發(fā)病率越高，發(fā)生黃疸的時間越早。病情較輕：常用藍光照射、輸注白蛋白輸血：糾正貧血換血：極少35ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO新生兒溶血病母血型子血型

母抗體子抗體(IgG)OA/B抗A、抗B、抗AB抗A、抗AB/抗B、抗ABAB/AB抗B抗BBA/AB抗A抗A36ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病

ABO新生兒溶血病ABO血型不合對Rh血型不合的妊娠有保護作用。Rh陰性母親的胎兒如同時ABO+Rh血型不合,胎兒Rh陽性紅細胞進入母體后，立即被母親血中的抗A/抗B抗體致敏后破壞,就不能作為抗原刺激母體產(chǎn)生抗D抗體。37ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病Rh血型系統(tǒng)概述ISBT符號：RH,數(shù)字：004Rh基因：主要是RHD和RHCE(高度同源、緊密連鎖)，均為10個外顯子編碼D和C、c、E、e抗原。染色體定位：1p36.13-34.3（短臂）38ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病染色體上位置：

1p36.13-34.339ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病Rh血型的遺傳主要抗原：D、C、E、c、e5種（其它：Cw、Cx、G、es、CG、Dw......）父母的基因組合決定了其子女的基因組合（孟德爾遺傳定律）遺傳的不對等性：某些組合比另一些組合常見CDe/CDe>cDE/cDE>cde/cde>CDE/CDE最重要的是有無D基因（D抗原最具免疫原性）40ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病RhD抗原RhD陽性：遺傳到了D基因，有D抗原，紅細胞與抗D試劑反應(yīng)陽性，稱為RhD陽性。RhD陰性：沒有遺傳到D基因或無效D基因，無D抗原，紅細胞與抗D試劑反應(yīng)陰性，稱為RhD陰性。不同說法：RhD陰性＝Rh陰性＝D陰性

RhD陽性＝Rh陽性＝D陽性41ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病Rh抗原的發(fā)育和分布

與ABO抗原不同，Rh抗原在胎兒早期就得到了充分的發(fā)育，并在整個成年期都維持這種狀態(tài)。臍血或新生兒紅細胞的Rh血型與成人一樣強。只存在于紅細胞膜（包括臍血紅細胞）不存在于其它組織細胞、體液、分泌液血小板、白細胞上無Rh抗原42ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病RhD血型的孟德爾遺傳43ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病人群RhD陰性頻率中國人群大部分民族<1%中國漢族：0.3％--0.5%左右一些少數(shù)民族（哈薩克、烏茲別克、塔塔爾及柯爾克孜族）2-5%北歐白人：15%西非黑人：5％44ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病Rh陰性表型頻率Rh表型數(shù)量頻率人群頻率Rh表型數(shù)量頻率人群頻率ccdee561(↑)55.3%0.22%Ccdee33232.7%0.13%CCdee535.22%21/十萬CcdEe201.97%8/十萬ccdEE20.2%8/十萬CCdEe20.2%8/十萬ccdEe44.33%16/十萬CCdEE///45ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病Rh新生兒溶血病母嬰Rh血型不合常見抗體：抗D、抗E、抗c+抗E、抗D+抗C罕見：母親-D-，子CDe，血清中有抗Hro.常于生后24h內(nèi)出現(xiàn)黃疸并迅速加重,如不及時治療,可形成核黃疸而造成死亡。換血療法是治療Rh溶血病的最有效方法。46ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病新生兒溶血病的檢測父母嬰標本進行血型鑒定(ABO、Rh）母血清進行不規(guī)則抗體篩選患兒標本進行溶血三項試驗直接抗人球蛋白試驗血清游離試驗

抗體釋放試驗：3項試驗中敏感度最高、是判斷HDN最有力的證據(jù)。47ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病ABO新生兒溶血病診斷標準

48ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病Rh新生兒溶血病診斷標準

49ABO疑難血型鑒定和新生兒溶血病新生兒溶血病的治療產(chǎn)前：孕婦抗體檢測、中藥、血漿置換藍光療法：最常用白蛋白輸注輸血：紅細胞、血漿換血療法：重癥RhHDN，是治療RhHDN最快速