2025年粵教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷440考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、“治療性克隆”可用胚胎干細胞克隆出人體不同的組織、細胞，以用于醫(yī)學研究和治療。下列相關敘述錯誤的是（）A.該技術有望解決臨床上供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題B.人類治療性克隆可達到治療疾病的目的C.胚胎干細胞可克隆出不同組織、細胞的根本原因是基因的選擇性表達D.中國政府既反對克隆人或動物，反對治療性克隆2、下列有關酶制劑應用的敘述，正確的是（）A.加酶洗衣粉因為添加了酶制劑，所以比普通洗衣粉更易污染環(huán)境B.固定化葡萄糖異構(gòu)酶只能催化一種化學反應C.加酶洗衣粉的洗滌效果總比普通洗衣粉的好D.腐乳發(fā)酵前期主要依賴毛霉產(chǎn)生的淀粉酶3、目前實驗室培養(yǎng)的小鼠干細胞經(jīng)過定向誘導分化，可成功地修復小鼠損傷的心臟，下列相關敘述正確的是（）A.此項研究體現(xiàn)了細胞的全能性B.在培養(yǎng)干細胞時需通入O2，不需通入CO2C.干細胞具有免疫力，不需要在無菌環(huán)境中培養(yǎng)D.此成果的應用可避免器官移植出現(xiàn)的免疫排斥4、生物學問題的解決依賴于一定的研究方法。下列研究方法與研究問題不匹配的組合是（）。選項研究方法研究問題A同位素標記法細胞內(nèi)物質(zhì)變化的一系列過程B抗源-抗體雜交棉花的染色體DNA上是否插入Bt基因C熒光標記技術證明細胞膜具有流動性D建構(gòu)模型法達爾文對生物進化和適應形成的解釋A.AB.BC.CD.D5、下列關于高中生物學實驗的敘述，正確的是（）A.提取綠葉中光合色素時，加入碳酸鈣以幫助迅速、充分研磨B.觀察洋蔥根尖制作的臨時裝片，僅部分細胞中可觀察到染色體C.培養(yǎng)離體菊花組織，再分化使細胞形成不定形的薄壁組織團塊D.家庭制作果酒、果醋前，必須對所有的發(fā)酵原料進行濕熱滅菌評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、運用細胞工程技術獲得單克隆抗體時，必要的操作是（）A.對小動物注射特定抗原B.融合并篩選雜交瘤細胞C.原代培養(yǎng)效應B細胞D.將胰蛋白酶注入小動物腹腔7、下列就“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)”實驗的有關敘述，正確的是（）A.經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時的平板均要倒置B.同一稀釋度下至少要涂布三個平板并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時計數(shù)C.在稀釋度足夠高時，所形成的單個菌落中所有細胞的遺傳信息必定相同D.在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染8、利用PCR技術擴增目的基因；其原理與細胞內(nèi)DNA復制類似（如圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。下列敘述正確的是（）

A.用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列B.設計引物時需要避免引物之間形成堿基互補配對而造成引物自連C.退火溫度過高可能導致PCR得不到任何擴增產(chǎn)物D.每一循環(huán)都消耗引物和原料，需要在操作中及時補充9、MIC是指藥敏試驗中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。某研究小組將含有相同濃度抗生素I~IV的四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上，進行藥敏試驗以了解病原微生物對四種抗生素的敏感程度，用于指導臨床合理選用抗生素。圖1為實驗器材，圖2為實驗結(jié)果。下列敘述正確的是（）

A.為獲得長滿測試菌的瓊脂平板，需要使用圖1中工具①②③B.據(jù)圖2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素IV的突變株D.圖2抑菌圈中離紙片越近的菌落對抗生素IV的抗性越強10、基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.若某基因是從人的細胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成C.導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞D.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上11、下列關于微生物發(fā)酵的敘述，錯誤的是（）A.制備培養(yǎng)基過程中，需要在滅菌后進行pH的調(diào)節(jié)B.制作果酒時適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長C.現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后即可進行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵D.醋酸菌能將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜?，故夏天開瓶后的紅酒容易變酸12、如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，1～3代表相關過程，a～e代表相關細胞，其中c是兩兩融合的細胞。以下敘述錯誤的是（）

A.過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應B.過程2的促融方法可采用電融合技術，該技術能擊穿核膜促使核融合C.c細胞有三種，每種細胞染色體組數(shù)不相等，e細胞是雜交瘤細胞D.過程3是進行抗體檢測，并克隆產(chǎn)生陽性細胞的過程13、為保障公共健康；需要定期對公共飲用水進行衛(wèi)生檢測。飲用水的衛(wèi)生標準是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測，過程如下圖所示。下列相關敘述錯誤的是（）

A.檢測前一般需要對水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實驗誤差，應按照上述實驗步驟多次取樣重復進行檢測D.可用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量14、下列有關菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.實驗中使用的培養(yǎng)基、器械和外植體都要滅菌B.外植體用酒精消毒30s后，再用流水充分沖洗C.誘導愈傷組織期間不需要光照，后續(xù)培養(yǎng)需要適當?shù)墓庹誅.一般先誘導根的形成，再轉(zhuǎn)接到誘導生芽的培養(yǎng)基上評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應和__________反應。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。16、一般包括______、______等技術17、本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學的方法。在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學反應是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。18、來源：主要是從______中分離純化出來的。19、___________（簡稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個小時內(nèi)復制出上百萬份的DNA拷貝。20、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。21、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。22、我國中科院神經(jīng)科學研究所團隊率先攻克了體細胞克隆靈長類動物這一世界難題?他們首次成功培育出體細胞克隆猴，分別叫中中和華華（下圖）?猴子與人類同屬靈長類，此前克隆靈長類動物在技術上存在著不可逾越的障礙?克隆猴的誕生打破了這個障礙，也再次引起人們對于克隆人的擔憂和猜測?

從1997年宣布克隆羊多莉（上圖）的出生，到2018年克隆猴中中?華華的誕生，這期間一些科學家試圖克隆人?舉例說出克隆人面臨哪些倫理問題?_____評卷人得分四、判斷題(共3題，共24分)23、胚胎發(fā)育早期，細胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤24、利用基因工程技術建立移植器官工廠是目前基因工程取得實際應用成果非常多的領域。（選擇性必修3P90）()A.正確B.錯誤25、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共18分)26、如圖是從土壤中篩選纖維素分解菌的流程圖；回答下列問題：

（1）土壤取樣時，一般選擇__________________豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是________________________。

（2）若測得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計算得知每毫升樣品中有5.1×107個纖維素分解菌，則該稀釋液的稀釋倍數(shù)為_________。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應加入CR染料，它可以與纖維素形成_________色復合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落（如圖），則降解纖維素能力最強的是菌落__________。

27、豆豉是中國傳統(tǒng)特色發(fā)酵豆制品調(diào)味料。豆豉以黑豆或黃豆為主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用，經(jīng)復雜工序制作而成。程序如下：黑豆→篩選→洗滌→浸泡→瀝干→蒸煮→冷卻→接種→制曲→洗豉→浸→拌鹽→發(fā)酵→晾干→成品（干豆豉）。請回答下列問題：

（1）蒸煮目的是_________，冷卻后再接種的原因是_____________。

（2）觀察發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器中上層豆類的發(fā)酵效果比底層的好，說明該菌是________。

（3）制作過程中要加入適量的鹽，鹽能______________；避免變質(zhì)。

（4）從黑豆到豆豉。它的成分會發(fā)生一定的變化。其中最顯著的變化是________。

（5）豆豉制作過程中用到的菌種與課本上_________________________制作的菌種最接近，從細胞結(jié)構(gòu)看，它們屬于___________生物。評卷人得分六、綜合題(共4題，共28分)28、由西班牙研究團隊在《Science》雜志上刊登的一項最新研究成果表明；當T淋巴細胞的代謝能力發(fā)生變化時，體內(nèi)積累的炎癥會讓動物未老先衰，出現(xiàn)各種“老年病”。這一成果表明了T淋巴細胞在動物體衰老進程中的重要作用?；卮鹣铝袉栴}：

（1）對于多細胞生物而言個體的衰老意味著體內(nèi)大多數(shù)細胞的衰老，生物體內(nèi)衰老細胞的及時清除體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的___________功能。

（2）有科學家提出可利用人體細胞培養(yǎng)出T淋巴細胞；再通過向人體內(nèi)適當輸入T淋巴細胞來延緩衰老。下面是該設想的流程圖。

過程①的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外，還需添加___________等天然成分，同時要保證被培養(yǎng)的細胞處于___________的環(huán)境中。進行過程②時，需要先利用___________技術將四種目的基因擴增。iPS細胞是一類具有胚胎干細胞特性的細胞。哺乳動物的胚胎干細胞是由___________中分離出來的一類細胞，在功能上具有發(fā)育的___________。過程③的實質(zhì)是___________。29、麗輪枝菌（一種絲狀真菌）是引起棉花黃萎病的主要病原菌。為觀察大麗輪枝菌對棉花根侵染路徑，研究人員利用綠色熒光蛋白基因（sGFP）轉(zhuǎn)染大麗輪枝菌，培育出表達綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因菌株，主要過程如下（圖中a鏈和b鏈分別是相應基因轉(zhuǎn)錄模板鏈）。分析回答：

（1）過程①中，PCR擴增sGFP的原理是________，該過程除需要根據(jù)________設計特異性引物序列外，為保證sCFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物的5ˊ端添加限制酶識別序列，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5ˊ→3ˊ）為________。

（2）過程①中，除了要添加模板、引物、原料外，還需添加_____酶。若1個sGFP片段連續(xù)擴增4次，則會形成_____個兩條鏈等長的sGFP片段，消耗_____個引物1。

（3）過程②需要的工具酶是________。研究中將sGFP插入到構(gòu)巢曲霉啟動子和終止子之間的目的是_________。

（4）將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時，需要用_______處理農(nóng)桿菌；使其轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細胞。

（5）過程③中需要配制細菌培養(yǎng)基，配制時要在培養(yǎng)基滅菌并冷卻到80℃左右后，再加入用潮霉素溶液，潮霉素不能與培養(yǎng)基一同滅菌的原因是_________。

（6）選擇過程③篩選培養(yǎng)得到的不同農(nóng)桿菌菌落，分別提取細菌質(zhì)粒DNA，并用BamHI和HindIII完全酶切可以得到________種長度不同的DNA片段。

（7）將導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌加入大麗輪枝菌的孢子細胞懸液中，在適宜條件完成轉(zhuǎn)染后利用濾膜過濾得到孢子細胞，再在真菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得菌落，最終通過檢測_______篩選出綠色熒光蛋白旺盛表達的大麗輪枝菌。30、苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，基因定點整合可以將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因，用于研究該病的治療?；蚨c整合的過程是：從染色體DNA的突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因K1、K2連接，中間插入正常PKU基因和標記基因neor；構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換，導致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換（如下圖）。

(1)構(gòu)建重組載體時，需采用PCR技術對PKU基因進行擴增，PCR擴增的原理是_______。擴增時，需要先加熱至90~95℃使DNA解鏈后，后冷卻至55～60℃的目的是___________。

(2)重組載體中的HB1和HB2之間除了插入正常的PKU基因和neor基因以外，還必須含有_____。neor基因的作用是_________。

(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化時，會出現(xiàn)一些PKU基因錯誤整合的胚胎干細胞。錯誤整合時，載體的兩個K基因中至少會有一個與neor基因一起整合到染色體DNA上，已知含有neor基因的細胞具有G418的抗性。Kl、K2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細胞死亡。根據(jù)上述信息，設計簡要的實驗方案從轉(zhuǎn)化的胚胎干細胞中篩選出正確整合的胚胎干細胞_____。31、下圖為試管牛及牛胚胎分割示意圖。請據(jù)圖回答：

(1)為了獲得足夠多的細胞1，需要給供體母牛注射相關激素進行______________處理，采集到1后要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂的____________期才具備與獲能精子受精的能力。

(2)判斷1是否受精的依據(jù)是在卵細胞膜和透明帶之間出現(xiàn)兩個____________。

(3)進行胚胎分割時，應選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的發(fā)育到____________或____________時期胚胎進行操作。在分割得到3、4時應注意對____________均等分割，以免影響胚胎的恢復和進一步發(fā)育。要鑒定分割胚胎的性別，可取_____________的細胞做DNA分析性別鑒定。胚胎分割可能是_______________的一種生殖方式。

(4)獲得試管牛的最后一道工序是________________。

(5)胚胎在受體內(nèi)能夠存活的生理學基礎是_______________________________________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

1；治療性克?。褐咐每寺〖夹g產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植；

生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體；

2；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人。

【詳解】

A；治療性克隆目的是培養(yǎng)出能夠用于醫(yī)學治療的供體器官；以解決目前臨床上存在的供體器官不足和移植后免疫排斥的問題，A正確；

B；治療性克隆的目的是治療疾??；B正確；

C；用胚胎干細胞通過基因的選擇性表達（細胞分化）能夠培養(yǎng)出不同的組織細胞；C正確；

D；中國政府反對生殖性克隆人；但不反對治療性克隆，D錯誤。

故選D。2、B【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉；目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

2；酶是活細胞產(chǎn)生的具有催化功能的有機物；具有高效性、專一性，酶的作用條件較溫和。酶對有機溶劑非常敏感，容易失活。

【詳解】

A；加酶洗衣粉中的酶制劑屬于有機物；易被分解，不會造成環(huán)境污染，A錯誤；

B；固定化葡萄糖異構(gòu)酶只能催化一種化學反應；固定化細胞可催化一系列化學反應，B正確；

C；酶發(fā)揮作用需要適宜的條件；因此加酶洗衣粉的洗滌效果不一定總比普通洗衣粉好，C錯誤；

D；腐乳前期發(fā)酵主要依賴毛霉產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)水解為小分子的多肽和氨基酸；D錯誤。

故選B。

【點睛】3、D【分析】【分析】

干細胞包括胚胎干細胞和成體干細胞；胚胎干細胞屬于全能干細胞，全能性容易表達；成體干細胞屬于多能或?qū)Ｄ芨杉毎?，全能性難以表達。

【詳解】

A；小鼠干細胞經(jīng)過定向誘導分化；可成功地修復小鼠損傷的心臟，沒有形成完整個體，不能體現(xiàn)細胞的全能性，A錯誤；

B、在培養(yǎng)干細胞時需通入95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）；B錯誤；

C；干細胞需要在無菌環(huán)境中培養(yǎng)；C錯誤；

D；患者自身細胞制備的干細胞；在體外分化培養(yǎng)出某種組織細胞，并植入患者體內(nèi)，此成果的應用可避免器官移植出現(xiàn)的免疫排斥，D正確。

故選D。4、B【分析】【分析】

同位素標記法也叫同位素示蹤法；同位素可用于追蹤物質(zhì)的運行和變化規(guī)律。在生物學研究中，用于研究分泌蛋白的合成過程；噬菌體侵染細菌的實驗、光合作用過程中水的來源和二氧化碳的轉(zhuǎn)移途徑等方面。

【詳解】

A；同位素可用于追蹤物質(zhì)的運行和變化規(guī)律；因此科學家通過追蹤同位素標記的化合物，可以弄清化學反應的詳細過程，A正確；

B；棉花的染色體DNA上是否插入Bt基因可以采用PCR等技術進行檢測；檢測Bt基因是否翻譯成Bt抗蟲蛋白可采用抗原—抗體雜交，B錯誤；

C；科學家用發(fā)綠色熒光的染料標記小鼠細胞表面的蛋白質(zhì)分子；用發(fā)紅色熒光的染料標記人細胞表面的蛋白質(zhì)分子，將小鼠細胞和人細胞融合，最終兩種顏色的熒光均勻分布，這一實驗表明細胞膜具有流動性，C正確；

D；達爾文建立了生物進化和適應形成的自然選擇解釋模型；D正確。

故選B。5、B【分析】【分析】

1；色素提取和分離過程中幾種化學物質(zhì)的作用:(1)無水乙醇作為提取液；可溶解綠葉中的色素。(2)層析液用于分離色素。(3)二氧化硅破壞細胞結(jié)構(gòu)，使研磨充分。(4)碳酸鈣可防止研磨過程中色素被破壞。

2；大多數(shù)細胞處于分裂間期；而染色體是分裂前期才出現(xiàn)的，因此只有少數(shù)細胞中能觀察到染色體。

【詳解】

A；提取綠葉中光合色素時；加入二氧化硅以幫助迅速、充分研磨，碳酸鈣可防止研磨過程中色素被破壞，A錯誤；

B；大部分細胞中處于分裂的間期；分裂間期是以染色質(zhì)形式存在，染色體是分裂期才有的結(jié)構(gòu)，因此觀察洋蔥根尖制作的臨時裝片，僅部分細胞（分裂期）中可觀察到染色體，B正確；

C；培養(yǎng)離體菊花組織；脫分化產(chǎn)生的愈傷組織通過再分化使細胞重新分化根或芽等器官，C錯誤；

D；家庭制作果酒時；不需要進行滅菌處理，原因是在缺氧、酸性的發(fā)酵液中，絕大多數(shù)的其他微生物都無法正常生活，但酵母菌可以生長、繁殖，另外菌種的來源是發(fā)酵材料的表面，因此不需要對發(fā)酵原料滅菌，D錯誤。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)6、A:B【分析】【分析】

在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進行特定抗原免疫，使機體產(chǎn)生相應的漿細胞；在誘導細胞融合時，除了異種細胞融合外，還有同種細胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞；效應B細胞不能分裂；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細胞時，可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體。

【詳解】

A；在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進行特定抗原免疫，使機體產(chǎn)生相應的漿細胞，A正確；

B；在誘導細胞融合時；除了異種細胞融合外，還有同種細胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，B正確；

C；效應B細胞不能分裂；C錯誤；

D；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細胞時；可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體，而不需要將胰蛋白酶注入小動物腹腔，D錯誤。

故選AB。7、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數(shù)的關鍵是經(jīng)梯度稀釋后的倍數(shù)要合適，計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實驗組平板進行計數(shù)。

【詳解】

A；倒置培養(yǎng)的原因是可以防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染；經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時的平板均要倒置，以防止雜菌污染，A正確；

B；為使實驗結(jié)果更準確；同一稀釋度下可以多涂布幾個平板，至少要涂布三個平板并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時計數(shù)，求平均值，B正確；

C；細菌在分裂生殖中也會產(chǎn)生基因突變；雖然一個菌落是由一個活菌繁殖而來，但是個菌落中所有細胞的遺傳信息不一定相同，C錯誤；

D；證明選擇培養(yǎng)基沒有被雜菌污染的方法是對培養(yǎng)基進行空白培養(yǎng)；即選取未接種的培養(yǎng)皿與接種樣品的培養(yǎng)皿同時培養(yǎng)，在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染，D正確。

故選ABD。8、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，所利用的原理為DNA分子的復制，因此PCR技術一般用于基因擴增；②原理：DNA復制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴增，即約2n；⑤過程：高溫變性；低溫復性、中溫延伸。

【詳解】

A；用PCR方法擴增目的基因時；只要知道目的基因前后的序列用以設計引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正確；

B；PCR過程中需要兩種引物分子；不同引物能靠堿基互補配對而形成（部分）雙鏈的話會造成引物不能同模板DNA結(jié)合，也就不能發(fā)生進一步的鏈式反應，這一點需要避免，B正確；

C；若退火溫度過高；則引物與模板DNA無法形成部分雙鏈，PCR也就不能發(fā)生，C正確；

D；PCR技術中的引物和原料是一次性添加的；不需要補充，D錯誤。

故選ABC。

【點睛】9、A:B:C【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后形成單個菌落。

【詳解】

A；為獲得長滿測試菌的瓊脂平板；需要用到的接種方法是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法需要用到酒精燈、涂布器和培養(yǎng)基，A正確；

B；MIC是指藥敏試驗中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。含有相同濃度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。說明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要達到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加濃度才行，B正確；

C；圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素Ⅳ的突變株；這些突變株在抗生素的環(huán)境下能夠存活并繁殖形成菌落。細菌是原核生物，發(fā)生變異最可能是基因突變，C正確；

D；在抑菌圈中出現(xiàn)的菌落都是對該種抗生素具有抗性的菌株；它們之間抗性的強弱無法根據(jù)題干信息進行判斷。如果要判斷它們之間抗性的強弱還需進一步實驗才能確定，D錯誤。

故選ABC。

【點睛】

本題考查的知識點包括：微生物接種，微生物培養(yǎng)及微生物的應用。10、C:D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上?；虮磉_載體常包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

【詳解】

A；啟動子是位于DNA上RNA聚合酶的結(jié)合部位；mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；

B、引物的延伸方向為3'端，擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成；B正確；

C；導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞；而是受精卵或早期胚胎細胞，C錯誤；

D；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細胞中染色體的DNA上，D錯誤。

故選CD。11、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精；醋酸菌在糖源；氧氣充足時；直接將葡萄糖氧化為醋酸；在糖源不足、氧氣充足時，可利用酒精，即乙醇作為呼吸底物，先將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔ù姿幔?/p>

【詳解】

A；制備培養(yǎng)基過程中；pH的調(diào)節(jié)應在滅菌前進行，A錯誤；

B；制作果酒時適當加大接種量；酵母菌菌體的基數(shù)增大，可使其快速形成優(yōu)勢菌群，抑制雜菌生長，提高發(fā)酵速率，B正確；

C；現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后；為滿足發(fā)酵過程的需要，還要對菌種進行擴大培養(yǎng)，之后才可進行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，C錯誤；

D；醋酸菌能夠氧化酒精產(chǎn)生醋酸；造成葡萄酒的敗壞。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天開瓶后的紅酒容易變酸，D正確。

故選AC。12、B:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備涉及細胞融合；細胞培養(yǎng)和細胞篩選；從題干信息圖可看出，過程1代表的是注射特異性抗原使小鼠免疫，從而獲得能產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞；過程2是將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程；過程3是克隆培養(yǎng)篩選后的陽性細胞，一共需要進行兩次，最終獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，此后在培養(yǎng)基或小鼠腹腔中培養(yǎng)。

【詳解】

A；圖中過程1是通過注射抗原或抗原蛋白來獲得產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞；A正確；

B；過程2是促進細胞融合的過程；其中電融合技術是用低壓電流擊穿細胞膜促使細胞融合，B錯誤；

C；c細胞為雜交瘤細胞；有三種，分別是骨髓瘤細胞-骨髓瘤細胞、骨髓瘤細胞-B淋巴細胞、B淋巴細胞-B淋巴細胞，其中骨髓瘤細胞和B淋巴細胞都有兩個染色體組，融合后的細胞都含有4個染色體組，其中e細胞是雜交瘤細胞，C錯誤；

D；過程3是專一抗體檢測及克隆培養(yǎng)篩選后獲得陽性細胞；該過程需要多次進行，D正確。

故選BC。13、B:D【分析】【分析】

細菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測前需要對水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯誤；

C；為減少實驗誤差；按照上述實驗步驟多次取樣重復進行檢測，取平均值作為實驗數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較?。徊荒苡醚毎嫈?shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測，D錯誤。

故選BD。14、B:C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織；器官或細胞經(jīng)過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株。

【詳解】

A；無菌技術包括消毒和滅菌；植物組織培養(yǎng)需要無菌操作，防止雜菌污染，所用器械需滅菌，實驗人員和外植體需消毒操作，A錯誤；

B；菊花莖段在洗滌靈稀釋液浸泡2min；用流水沖洗干凈后，在70%酒精中消毒30s，再用流水沖洗后置于10%次氯酸鈉溶液中消毒10min，然后用無菌水多次沖洗，B正確；

C；誘導培養(yǎng)愈傷組織期間一般不需要照光；在后續(xù)培養(yǎng)過程中，每日需要給予光照，目的是誘導葉綠素的形成，進一步形成葉綠體進行光合作用，C正確；

D；誘導愈傷組織形成試管苗的過程；需要將生長良好的愈份組織先轉(zhuǎn)接到誘導生芽的培養(yǎng)基上，長出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導生根的培養(yǎng)基上，進一步誘導生根，D錯誤。

故選BC。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用16、略

【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術、②.動物細胞融合與單克隆抗體17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強升高pH的變化酚紅指示劑紅18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈式反應體外擴增DNA片段20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無菌毛霉其他菌種21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7522、略

【分析】【詳解】

①克隆人是對人權(quán)和人的尊嚴的挑戰(zhàn)：

人不僅是自然人；在生物進化中人自從脫離了動物界，還成為有價值觀念的社會的人，因此人是具有雙重屬性的，是生物；心理和社會的集合體?？寺∪艘簿褪侨斯o性生殖的人，只在遺傳性狀上與原型人一致，而人的心理、行為、社會特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一個喪失自我的人，嚴重違反了人權(quán)，危害人類尊嚴；

②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念：

克隆人的出現(xiàn)將徹底攪亂代際關系和家庭倫理定位；克隆人過程中可以出現(xiàn)體細胞核供者；卵細胞供者以及孕育者三位生物學父母，以及撫養(yǎng)者的社會學父母的多種選擇，被克隆者只是生物學上復制，人類世代的傳承也將被打破，家庭倫理關系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社會地位上都不健全的人；

④克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律：

人類所以發(fā)展到如此高的進化文明程度，是由其自然發(fā)展規(guī)律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到無性生殖，這種行為如不加阻止，必將給人類種下無窮的災難?！窘馕觥竣倏寺∪耸菍θ藱?quán)和人的尊嚴的挑戰(zhàn)；②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③克隆人是制造在心理上和社會地位上都不健全的人；④克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律等。四、判斷題(共3題，共24分)23、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。24、B【分析】【詳解】

基因工程技術可以使建立移植器官工廠的設想成為現(xiàn)實；說明并未開始實際應用。

故題中描述錯誤。25、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實驗題(共2題，共18分)26、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物；僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

2；分解纖維素的微生物的分離的實驗原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖能被微生物利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

3；統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計數(shù)法：

①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；

②方法：用計數(shù)板計數(shù)；

③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）：

①原理：當樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

②操作：

a；設置重復組；增強實驗的說服力與準確性。

b；為了保證結(jié)果準確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。

③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M；其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

（1）土壤取樣時；一般選擇纖維素豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的數(shù)量。

（2）若測得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計算得知每毫升樣品中有5.1×107個纖維素分解菌，則由每mL樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M可得，該稀釋液的稀釋倍數(shù)＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應加入CR染料；它可以與纖維素形成紅色復合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大說明降解纖維素能力越強，所以圖中降解纖維素能力最強的是菌落1。

【點睛】

本題結(jié)合流程圖，考查微生物的分離和培養(yǎng)，解題關鍵是識記土壤微生物分離的原理及方法；識記培養(yǎng)基的種類及作用，能結(jié)合圖中信息準確答題。【解析】纖維素增加纖維素分解菌的數(shù)量105紅①27、略

【分析】豆豉的制作原理與腐乳的制作類似：起主要作用的是真菌中的毛霉；適宜溫度為15℃～18℃；毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【詳解】

（1）黃豆煮熟的目的主要破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu)；使蛋白質(zhì)變性，淀粉達到糊化程度，易于水解，同時可起到滅菌的作用，冷卻后再接種的原因是防止高溫殺死菌種；

（2）發(fā)酵裝置的上層含氧量比較高；發(fā)酵裝置內(nèi)上層黃豆的發(fā)酵效果比底層好，說明該發(fā)酵菌是需氧菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型；

（3）鹽能抑制微生物生長所以制作豆豉過程中要加入適量的鹽；避免變質(zhì)；

（4）大豆到豆豉的過程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用，所以其中最顯著的變化是蛋白質(zhì)被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作過程也是利用了毛霉；曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【點睛】

本題考查了豆豉制作的相關知識，要求考生能夠識記豆豉制作的原理；能夠利用酶的專一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的產(chǎn)物是解答本題的關鍵?！窘馕觥科茐拇蠖箖?nèi)部分子結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)適度變性，淀粉達到糊化程度，易于水解，同時可起到滅菌的作用防止高溫殺死菌種好氧菌抑制微生物生長蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變成氨基酸和肽。腐乳真核六、綜合題(共4題，共28分)28、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：

（1）充足的營養(yǎng)供給--微量元素；無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。

（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（3）無菌；無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（1）

生物體內(nèi)衰老細胞的及時清除體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除功能。

（2）

過程①是動物細胞培養(yǎng)；其培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外，還需添加一定量的血清；血漿等天然成分，同時要保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境中。過程②是將目的基因?qū)胧荏w細胞，導入前需要先利用PCR技術將四種目的基因擴增。iPS細胞是一類具有胚胎干細胞特性的細胞。哺乳動物的胚胎干細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，在功能上具有發(fā)育的全能性特點。過程③是細胞分化，其實質(zhì)是基因的選擇性表達。

【點睛】

本題以輸入T細胞延緩衰老為情境，考查T細胞、動物細胞培養(yǎng)和基因工程技術的流程等知識，旨在考查考生的理解能力、實驗與探究能力和綜合運用能力，以及生命觀念和科學思維的核心素養(yǎng)?！窘馕觥浚?）監(jiān)控和清除。

（2）血清或血漿無菌、無毒PCR早期胚胎或原始性腺全能性基因的選擇性表達29、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；根據(jù)PCR過程的特點可繪制1個sGFP片段復制圖示如下：

【詳解】

（1）PCR擴增sGFP的原理是雙鏈DNA復制，由于DNA兩條鏈反向平行，且DNA聚合酶只能使新合成的DNA子鏈從5′→3′方向延伸，所以該過程需要根據(jù)sGFP兩端（3′端）堿基序列設計特異性引物序列，為了保證sGFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物的5′端添加限制酶識別序列，由于質(zhì)粒大片段是利用HindⅢ和BamHⅠ共同切割得到的質(zhì)粒的長片段，所以B鏈5′是利用HindⅢ切割形成的黏性末端，根據(jù)HindⅢ識別的堿基序列可知，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5′→3′）為AGCT。

（2）擴增過程中需要用到Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）。由分析圖示可知；第一；二輪循環(huán)合成的子鏈長度均不同，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的子代DNA分子中，存在兩個含有等長的兩條核苷酸鏈的DNA分子，即僅含引物之間的序列，第三輪的DNA再進行一次半保留復制，可形成8個兩條鏈等長的sGFP片段，消耗7個引物1。

（3）過程②為構(gòu)建重組DNA；需要的工具酶是DNA連接酶。啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，而終止子是使轉(zhuǎn)錄終止的序列，而目的基因不攜帶啟動子和終止子，所以