（高清版）DB37∕T 3032-2017 化妝品中苯菌靈和多菌靈的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法　　

Y42化妝品中苯菌靈和多菌靈的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法byliquidchromatograp2017-10-25發(fā)布2017-11-25實施山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標準由山東省化工標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位：山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗研究院、山東省食品藥品檢驗研究院。本標準主要起草人：薛霞、周莉莉、楊昊、盧蘭香、王艷麗、劉桂亮、張艷俠。1化妝品中苯菌靈和多菌靈的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本標準規(guī)定了化妝品中苯菌靈和多菌靈的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本標準適用于膏霜類、乳液和液體化妝品中苯菌靈和多菌靈的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理試樣中加入甲醇-鹽酸水溶液，恒溫水浴振蕩使苯菌靈完全轉(zhuǎn)化為多菌靈，超聲波提取，經(jīng)液-液分配除去脂溶性雜質(zhì)，以陽離子交換固相萃取柱富集、凈化后，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定和確證，外標法定量。4試劑與材料除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。4.1甲醇：色譜純。4.2正己烷。4.3甲酸。4.4氨水。4.5鹽酸。4.6乙腈：色譜純。4.7二氯甲烷：色譜純。4.80.01mol/L鹽酸溶液：移取0.9mL鹽酸，用水稀釋至1L。4.90.1%甲酸甲醇溶液：取1mL甲酸，用甲醇稀釋至1L。4.100.1%甲酸水溶液：取1mL甲酸，用水稀釋至1L。4.11初始比例流動相：量取30mL0.1%甲酸甲醇溶液(4.9)和70mL0.1%甲酸水溶液(4.10)混合均勻。4.12提取液：甲醇和0.01mol/L鹽酸溶液(4.8)等體積混合。4.130.2%甲酸水溶液：量取2mL甲酸，用水稀釋至1L。4.145%氨水甲醇溶液：量取5mL氨水和95mL甲醇，混勻，用前配制。24.15陽離子交換固相萃取柱：混合型陽離子交換固相萃取柱，基質(zhì)為苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物，60mg,3mL,或相當者。使用前依次用5mL甲醇、5mL水進行活化。4.16標準物質(zhì)：多菌靈(CAS10605-21-7)純度不低于99.0%;苯菌靈(CAS107804-35-2)純度不低于98.0%。4.17多菌靈標準儲備溶液：稱取適量多菌靈標準品，用甲醇-0.1mol/L鹽酸溶液(1:9,v:v)溶解并配制成100μg/mL的標準儲備液。-18℃避光保存，有效期6個月。4.18苯菌靈工作溶液：稱取適量苯菌靈標準品，用甲醇溶解并配制成100μg/mL的溶液。再用初始比例的流動相(4.11)逐級稀釋10μg/mL和100ng/mL的溶液。臨用現(xiàn)配。4.19微孔濾膜：有機相，孔徑0.22μm。5儀器和設(shè)備5.1液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源器。5.2固相萃取裝置。5.3電子分析天平：感量分別為0.1mg和0.01g。5.4超聲波清洗器。5.5渦旋混合器。5.6離心機，最高轉(zhuǎn)速不低于6000r/min。5.7氮氣吹干儀。5.8恒溫水浴振蕩器。6測定步驟6.1試樣處理6.1.1膏霜類化妝品提取稱取已粉碎并混勻的試樣2g(精確至0.01g)于50mL具塞塑料離心管中，加入25mL提取液(4.12),渦旋混合2min,60℃下振蕩1h,再超聲波提取15min。取出冷卻至室溫，6000r/min離心10min,準確移取15mL上清液于50mL離心管中，用15mL正己烷萃取，靜置分層，棄去正己烷相，用10mL正己烷再萃取一次，重復(fù)上述操作，甲醇-水相備用。6.1.2液體、乳液化妝品提取稱取已混勻的試樣2g(精確至0.01g)于25血容量瓶中，用提取液(4.12)定容至刻度，搖勻，渦旋混合2min,全部轉(zhuǎn)移至50mL具塞塑料離心管，以下步驟同6.1.1“60℃下振蕩1h,……甲醇-水相備用”。6.1.3凈化準確移取10mL正己烷萃取過的甲醇-水相(6.1)轉(zhuǎn)移至固相萃取柱(4.15)中，棄去流出物。依次用5mL0.2%甲酸水溶液(4.13)和5mL甲醇淋洗，抽至近干后，用5mL5%氨水甲醇溶液(4.14)洗脫。洗脫液于40℃氮氣吹濃縮至近干，用1mL初始比例的流動相(4.11)定容，渦旋混合1min,經(jīng)微孔濾膜(4.20)過濾后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。6.2基質(zhì)空白溶液的制備3準確移取適量多菌靈標準儲備液，用基質(zhì)空白溶液(6.3)稀釋成多菌靈濃度分別為1.0ng/mL、5.0b)流動相：0.1%甲酸甲醇溶液(A)、0.1%甲酸水溶液(B),梯度條件：0min~3min:保持30%A,4min:線性增至100%A,保持至6min,6.1min:30%A;d)柱溫：25℃;e)進樣體積：10μL。6.4.2質(zhì)譜條件參考條件6.5測定多菌靈的保留時間一致，定性定量離子信噪比均大于3,且定性離子對的相對豐度偏差符合表1的規(guī)定，則可判定試樣中檢出多菌靈(或苯菌靈)。以基質(zhì)標準溶液中多菌靈定量離子對的峰面積對相應(yīng)的濃度表1定性相對離子豐度的最大允許偏差允許的相對偏差6.6.1試樣中苯菌靈和多菌靈的含量(以多菌靈計)按式(1)計算：X——試樣中苯菌靈和多菌靈的含量(以多菌靈計),單位為毫克每千克(μg/kg);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g);4V?——加入提取液總體積，單位為毫升(mL);V?——過固相萃取柱的提取液體積，單位為毫升(mL)。6.6.2以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7精密度在重復(fù)性條件獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。5b)毛細管電壓：3500V;c)干燥氣溫度：325℃;d)鞘氣溫度：350℃;