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A61K36/11(2006.01)A61P35/00(2006.01)用于治療骨肉瘤的卷柏提取物及其制備方法本發(fā)明涉及用于治療骨肉瘤的卷柏提取物物和氨基酸殘基之間形成了兩個氫鍵和五個疏水相互作用,表明卷柏提取物與p53之間可能存在的潛在相互作用關(guān)系,從而通過p53通路對骨2(2)取浸出液采用大孔吸附樹脂吸附后進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出黃色3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,步驟(4)中所述真空干燥的溫度為30-50(2)取浸出液采用大孔吸附樹脂吸附后進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出黃色(2)取浸出液采用大孔吸附樹脂吸附后進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出黃色3[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及用于治療骨肉瘤的卷柏提取物及其制備方技術(shù)的進步和新輔助化療應(yīng)用,盡管新輔助化療使患者的5年生存率提高到約60%?70%,細胞的凋亡;同時研究了其對骨肉瘤細胞凋亡及轉(zhuǎn)移的影響及對p53信號通路中關(guān)鍵因子4[0009](2)取浸出液采用大孔吸附樹脂吸附后進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出[0017]作為優(yōu)選地,步驟(2)中所述梯度洗脫具體為:依次采用濃度為204060%,[0018]作為優(yōu)選地,步驟(4)中所述真空干燥[0021](2)取浸出液采用大孔吸附樹脂吸附后進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出5[0030]作為優(yōu)選地,步驟(2)中所述梯度洗脫具體為:依次采用濃度為204060%,[0032]作為優(yōu)選地,步驟(4)中所述真空干燥[0035](2)取浸出液采用大孔吸附樹脂吸附后進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出[0043]作為優(yōu)選地,步驟(2)中所述梯度洗脫具體為:依次采用濃度為204060%,[0044]作為優(yōu)選地,步驟(4)中所述真空干燥(MMP)是細胞基質(zhì)降解和促進細胞遷移的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,在多種腫瘤疾病的發(fā)生發(fā)展過程殘基(ASN200和THR231)之間形成了兩個氫鍵,和氨基酸殘基(PRO222、GLU224、THR230、6濃度為2040608090%的乙醇進行梯度洗脫;收集洗脫液進行濃縮析出黃色固7選擇合適的細胞密度,接種到96孔板中(3個重復(fù)),加入不同濃度的卷柏提取物(Saos2細[0081]線粒體膜電位(ΔΨm)的降低是細胞凋亡早期的標(biāo)志性事件。JC-1從紅色熒光向光的轉(zhuǎn)變可以作為細胞凋亡的早期檢測指標(biāo)。在利用不同濃度卷柏提取物對Saos2和U2OS提取物可通過誘導(dǎo)骨肉瘤細胞中的細胞色素c(Cyto-c)的增加(參見圖7)并激活線粒體介8(MMP)是細胞基質(zhì)降解和促進細胞遷移的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,在多種腫瘤疾病的發(fā)生發(fā)展過程(Image-ProPlus6.0)分析條好地嵌入結(jié)合位點。根據(jù)銀信云平臺(/)中的Doc和氨基酸殘基(ASN200和THR231)之間形成了兩個氫鍵,和氨基酸殘基(PRO222、GLU224、[0090]為了進一步證實卷柏提取物通過p53介導(dǎo)的線粒體凋亡途徑抑制骨肉瘤增殖的上胞凋亡涉及p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄依賴性和非依著抑制骨肉瘤細胞凋亡。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是細胞基質(zhì)降解和促進細胞遷移的關(guān)鍵調(diào)9

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