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《生物化學(xué)蛋白質(zhì)研究》課件介紹歡迎來到《生物化學(xué)蛋白質(zhì)研究》課件!本課程將帶您深入了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能、分離純化、結(jié)構(gòu)分析以及生物合成等方面,并探討蛋白質(zhì)在生命活動中的重要作用,以及與疾病的關(guān)系。課程大綱1.蛋白質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)2.蛋白質(zhì)的生物功能3.蛋白質(zhì)的分離與純化4.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析1.蛋白質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)1蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)最重要的有機大分子之一2由氨基酸組成,通過肽鍵連接形成多肽鏈3具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu),賦予其特定的功能蛋白質(zhì)的組成氨基酸蛋白質(zhì)的基本組成單位,含有氨基和羧基肽鍵連接兩個氨基酸的化學(xué)鍵,由一個氨基酸的羧基與另一個氨基酸的氨基脫水形成多肽鏈多個氨基酸通過肽鍵連接形成的鏈狀結(jié)構(gòu)氨基酸的種類及性質(zhì)共有20種常見的氨基酸根據(jù)側(cè)鏈基團的性質(zhì)可分為非極性、極性、帶電荷三種類型每種氨基酸具有獨特的化學(xué)性質(zhì),影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和功能蛋白質(zhì)的一級、二級、三級、四級結(jié)構(gòu)1一級結(jié)構(gòu)氨基酸序列,決定了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能2二級結(jié)構(gòu)多肽鏈局部折疊形成的穩(wěn)定結(jié)構(gòu),如α-螺旋和β-折疊3三級結(jié)構(gòu)整個多肽鏈的完整空間構(gòu)象,由二級結(jié)構(gòu)相互作用形成4四級結(jié)構(gòu)多個多肽鏈通過非共價鍵相互作用形成的復(fù)合體結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象折疊蛋白質(zhì)的折疊是一個復(fù)雜的過程,受氨基酸序列和環(huán)境因素的影響穩(wěn)定性折疊后的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定,由氫鍵、疏水作用、離子鍵、范德華力等相互作用維持功能蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象決定其功能,任何結(jié)構(gòu)改變都可能導(dǎo)致功能喪失2.蛋白質(zhì)的生物功能酶蛋白催化生物化學(xué)反應(yīng),加速反應(yīng)速率轉(zhuǎn)運蛋白運輸物質(zhì),如氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物受體蛋白接收信號,啟動細胞反應(yīng)結(jié)構(gòu)性蛋白維持細胞和組織的結(jié)構(gòu),如膠原蛋白和角蛋白調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)生物過程,如基因表達和細胞生長酶蛋白1催化效率高酶的催化效率遠高于非生物催化劑2高度特異性每個酶通常只催化一種或一類反應(yīng)3受環(huán)境影響酶的活性受溫度、pH值、底物濃度等環(huán)境因素的影響轉(zhuǎn)運蛋白1膜轉(zhuǎn)運蛋白嵌入細胞膜,運輸物質(zhì)進出細胞2血紅蛋白運輸氧氣到全身3脂蛋白運輸脂類物質(zhì),如膽固醇和甘油三酯受體蛋白1信號識別識別特定信號分子,如激素、神經(jīng)遞質(zhì)2信號傳遞將信號傳遞到細胞內(nèi)部,啟動下游反應(yīng)3調(diào)節(jié)細胞功能影響細胞生長、發(fā)育、代謝等重要功能結(jié)構(gòu)性蛋白調(diào)節(jié)蛋白激素調(diào)節(jié)代謝和生長發(fā)育轉(zhuǎn)錄因子控制基因表達細胞因子調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)3.蛋白質(zhì)的分離與純化細胞破碎物理方法:超聲波處理、研磨、壓力沖擊化學(xué)方法:使用洗滌劑、酶等破壞細胞膜細胞分級離心1低速離心去除細胞碎片和細胞核2高速離心分離線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器3超速離心分離核糖體、病毒等更小的顆粒蛋白質(zhì)的溶解選擇合適的溶液考慮蛋白質(zhì)的性質(zhì),如溶解度、穩(wěn)定性調(diào)節(jié)溶液的pH值保持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,避免變性加入鹽類增加蛋白質(zhì)的溶解度,防止沉淀層析分離離子交換層析根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷差異分離1凝膠過濾層析根據(jù)蛋白質(zhì)的大小差異分離2疏水層析根據(jù)蛋白質(zhì)的疏水性差異分離3電泳分離SDS根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量分離等電聚焦電泳根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點分離二維電泳同時根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量和等電點分離親和層析1特異性高利用蛋白質(zhì)與特定配體的結(jié)合能力進行分離2純度高可獲得高純度的蛋白質(zhì)3應(yīng)用廣泛廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的純化、鑒定、功能研究等4.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析1測定蛋白質(zhì)的分子量2測定蛋白質(zhì)的氨基酸序列3檢測蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象4研究蛋白質(zhì)的相互作用5分析蛋白質(zhì)的功能域測定蛋白質(zhì)的分子量1凝膠過濾層析根據(jù)蛋白質(zhì)的流出體積推算分子量2SDS根據(jù)蛋白質(zhì)在凝膠中的遷移率推算分子量3質(zhì)譜法精確測定蛋白質(zhì)的分子量測定蛋白質(zhì)的氨基酸序列1Edman降解法逐步從蛋白質(zhì)的N端切除氨基酸,鑒定其序列2質(zhì)譜法通過分析蛋白質(zhì)的片段質(zhì)量,推測氨基酸序列檢測蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象X射線晶體學(xué)核磁共振冷凍電鏡研究蛋白質(zhì)的相互作用分析蛋白質(zhì)的功能域DNA結(jié)合域與DNA結(jié)合,調(diào)節(jié)基因表達催化域催化生物化學(xué)反應(yīng)跨膜域嵌入細胞膜,運輸物質(zhì)5.蛋白質(zhì)的生物合成1轉(zhuǎn)錄:DNA信息轉(zhuǎn)錄到mRNA2翻譯:mRNA信息翻譯成蛋白質(zhì)3蛋白質(zhì)折疊:多肽鏈折疊成特定空間結(jié)構(gòu)4蛋白質(zhì)的修飾及定向運輸:蛋白質(zhì)經(jīng)過修飾和轉(zhuǎn)運,發(fā)揮其特定功能5蛋白質(zhì)的降解:蛋白質(zhì)降解,維持細胞功能平衡轉(zhuǎn)錄與mRNA加工轉(zhuǎn)錄過程:RNA聚合酶識別啟動子序列,催化DNA鏈的解旋和RNA鏈的合成mRNA加工:添加5'帽子和3'polyA尾,剪接內(nèi)含子,形成成熟的mRNA,用于翻譯翻譯與蛋白質(zhì)折疊1翻譯過程核糖體識別mRNA的起始密碼子,招募tRNA,將氨基酸連接成多肽鏈2蛋白質(zhì)折疊多肽鏈折疊成特定空間結(jié)構(gòu),形成具有特定功能的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的修飾及定向運輸?shù)鞍踪|(zhì)修飾磷酸化、糖基化、乙?;刃揎?,改變蛋白質(zhì)的活性、穩(wěn)定性、定位等蛋白質(zhì)運輸?shù)鞍踪|(zhì)被轉(zhuǎn)運到細胞內(nèi)的特定位置,發(fā)揮其特定功能蛋白質(zhì)的降解泛素-蛋白酶體途徑通過泛素化標記蛋白質(zhì),將蛋白質(zhì)降解溶酶體途徑通過溶酶體酶降解蛋白質(zhì)6.蛋白質(zhì)在生命活動中的作用1代謝調(diào)控:酶蛋白催化生物化學(xué)反應(yīng),調(diào)節(jié)代謝過程2細胞信號傳導(dǎo):受體蛋白接收信號,啟動細胞反應(yīng)3免疫應(yīng)答:抗體蛋白識別抗原,清除病原體4細胞結(jié)構(gòu)維持:結(jié)構(gòu)性蛋白維持細胞和組織的結(jié)構(gòu)代謝調(diào)控酶活性調(diào)節(jié)通過調(diào)節(jié)酶的活性,控制代謝速率1酶合成調(diào)節(jié)通過調(diào)節(jié)酶的合成量,控制代謝過程2細胞信號傳導(dǎo)1信號接收受體蛋白識別特定信號分子2信號傳遞信號通過一系列蛋白傳遞到細胞內(nèi)部3信號響應(yīng)細胞根據(jù)信號做出特定反應(yīng)免疫應(yīng)答抗原識別抗體蛋白識別并結(jié)合抗原抗原清除通過抗原-抗體復(fù)合物的形成,清除病原體細胞結(jié)構(gòu)維持細胞骨架維持細胞的形狀和結(jié)構(gòu),參與物質(zhì)運輸肌肉蛋白參與肌肉收縮結(jié)締組織連接、支持和保護身體組織7.蛋白質(zhì)與疾病1蛋白質(zhì)異常與疾?。旱鞍踪|(zhì)結(jié)構(gòu)或功能異??赡軐?dǎo)致疾病2蛋白質(zhì)在診斷和治療中的應(yīng)用:蛋白質(zhì)可用于疾病的診斷、治療和預(yù)防蛋白質(zhì)異常與疾病遺傳性疾病:基因突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)或功能異常,如鐮狀細胞貧血獲得性疾?。旱鞍踪|(zhì)折疊錯誤,導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集,如阿爾茨海

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