如何提高病原菌的·陽性率課件

如何提高病原菌的陽性率

臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的任務(wù)就是對(duì)臨床送檢的感染性標(biāo)本進(jìn)行病原菌的定性或定量分析，為患者的治療提供幫助。只有分離到病原菌，才有可能進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，臨床醫(yī)生才能夠根據(jù)藥敏結(jié)果進(jìn)行針對(duì)性治療（或依據(jù)文獻(xiàn)資料進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性治療）。

正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本的采取。臨床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗(yàn)技師都必須通曉其要領(lǐng)。----引自著名的臨床微生物檢驗(yàn)專著ManualofclincalMicrbiology主編patrickmurray的話

7、盛標(biāo)本容器經(jīng)滅菌處理，但不得使用消毒劑。8、送檢標(biāo)本應(yīng)注明標(biāo)本來源和送檢目的。標(biāo)本的采集即使選擇再好，如果采集不當(dāng)也不能分離到病原菌，結(jié)果甚至?xí)晃廴揪蓴_標(biāo)本最佳采集時(shí)機(jī)1、在感染發(fā)生的早期或急性期采樣；懷疑沙門菌感染時(shí)，一般在病后2w左右采集尿液培養(yǎng)；懷疑鉤端螺旋體感染時(shí)，一般感染后2w左右采集尿液培養(yǎng)，此時(shí)采集尿標(biāo)本培養(yǎng)陽性率高。2、最好在用抗菌藥治療之前進(jìn)行采集。3、如果已經(jīng)使用抗菌藥物，應(yīng)停藥1—2次再進(jìn)行采集，若病情不允許停藥應(yīng)在下次給藥之前進(jìn)行采集（此時(shí)藥物濃度最低）。4、尿標(biāo)本的采集應(yīng)要求患者憋尿6h以上。5、痰標(biāo)本查結(jié)核桿菌，以晨痰為佳（濃縮）。血培養(yǎng)注意事項(xiàng)1.從靜脈取血；2.不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口取血；3.若導(dǎo)管設(shè)施取血*，必需同時(shí)靜脈取血，以求對(duì)比和解釋；*不要棄去初段血，不用抗凝劑沖洗4.不推薦靜脈血直接入瓶；5.不主張換針頭入瓶；6.有血的培養(yǎng)瓶不可放入冰箱和凍箱保存；7.穿刺點(diǎn)消毒：以醇類、洗必泰為好。

標(biāo)本最少采集量

（1）固體標(biāo)本不應(yīng)少于2g；（2）一般液體標(biāo)本不應(yīng)少于2ml；（3）SCF不應(yīng)少于1ml；（4）查真菌和結(jié)核菌的液體標(biāo)本不應(yīng)少于10ml；（5）用拭子采集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)同時(shí)取兩份，分別用于培養(yǎng)和涂片。（6）血液標(biāo)本，成年人采血量為10ml，新生兒與嬰幼兒為1~2ml，兒童采集3～5ml。培養(yǎng)基與血液之比以5~10∶1為宜，以稀釋血液中的抗生素、抗體等殺菌物質(zhì)。有資料顯示，每增加1ml血量平均提高陽性率3.2%。藥物與添加劑的影響1、麻醉藥和某些抗凝劑對(duì)一些病原體有抑制作用。2、0.025~0.05%聚茴香腦磺酸鈉(sodiumpolyanetholsulfonate,SPS)。具有抗凝、抗吞噬、抗補(bǔ)體及拮抗某些抗生素的作用。聚茴香腦磺酸鈉對(duì)厭氧消化鏈球菌、淋球菌、腦膜炎球菌等有毒性作用。肝素對(duì)某些厭氧菌有抑制作用。3、用拭子取材時(shí)，應(yīng)選用合成纖維（藻酸鈣）制作的“綿”拭子及簽桿（或金屬制），最好不要用天然棉纖維和木制簽桿制作的棉簽，因?yàn)樵谔烊徊牧系募庸み^程中會(huì)殘留抑菌物質(zhì)（棉花中的脂肪酸或樹脂及木棒中的甲醛等）在其中。防污染措施

(1）自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次（或硼酸漱口），以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至無菌、防滲漏、帶螺旋帽的廣口瓶?jī)?nèi)，蓋好蓋子。附：判斷痰標(biāo)本取材合格標(biāo)準(zhǔn)白細(xì)胞柱狀上皮細(xì)胞判斷或處理>25<10合格標(biāo)本<25<25可接受>2510—25可接受>25(10-25)>25重送標(biāo)本<10>25重送標(biāo)本（2）清潔中段尿采集法：①女性：采樣前應(yīng)先用肥皂和水清洗外陰部及尿道口，用滅菌紗布擦拭，用手指將陰唇分開排尿，棄去前段尿，留取中段尿于滅菌試管內(nèi)，蓋好蓋子立即送檢。②男性：用肥皂和水翻轉(zhuǎn)包皮清洗陰莖頭，滅菌紗布擦干后，棄去前段尿，留取中段尿于滅菌試管內(nèi)，蓋好蓋子立即送檢。（3）燒傷、褥瘡和傷口：應(yīng)該用無菌鹽水擦拭表面后，采集損傷底部。

（4）皮膚消毒程序嚴(yán)格執(zhí)行以下三步法：①70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上；②1%～2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑3cm以上；③70%酒精脫碘。對(duì)碘過敏的患者,用70%酒精消毒60s,待酒精揮發(fā)干燥后采血。對(duì)酒精過敏的患者可用1%新潔而滅菌消毒皮膚。（建議先用70-80%異丙醇去脂，再用葡萄糖酸氯乙定消毒）

（5）培養(yǎng)瓶消毒程序：70%異丙基乙醇（70%酒精也可）擦拭血培養(yǎng)瓶，橡皮塞,作用60s；用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞子表面殘余酒精。（6）傷口及粘膜部位標(biāo)本，取材前不應(yīng)該使用任何消毒劑進(jìn)行消毒。以血培養(yǎng)為例血培養(yǎng)是目前診斷血流感染的最好方式，而要想得到準(zhǔn)確的血培養(yǎng)結(jié)果來指導(dǎo)臨床治療，其中有幾個(gè)關(guān)鍵步驟需要格外注意。根據(jù)美國(guó)CLSI標(biāo)準(zhǔn)，采血次數(shù)、采血量、采血時(shí)間以及培養(yǎng)瓶被稱為是確保血培養(yǎng)最佳檢出率的4把“密匙”。正確的采血次數(shù)、充足的采血量、適當(dāng)?shù)牟裳獣r(shí)間和含樹脂的培養(yǎng)瓶對(duì)于血培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果都至關(guān)重要。第一是最佳采血時(shí)機(jī)的掌握。為盡量獲得陽性血培養(yǎng)結(jié)果，應(yīng)在病人寒戰(zhàn)或者體溫剛剛開始升高時(shí)采血。一旦體溫達(dá)到高峰，往往大部分細(xì)菌在血中已被清除了，會(huì)使培養(yǎng)陽性率降低。應(yīng)盡可能在抗菌藥物使用前采血；對(duì)已經(jīng)使用抗菌藥物的病人，最好在下次用藥前采集。

血培養(yǎng)的采集最好在同一時(shí)間，在患者的不同解剖部位采集兩份或兩份以上標(biāo)本。血培養(yǎng)檢測(cè)規(guī)范化操作對(duì)特殊的全身性和局部感染患者采集血培養(yǎng)作出了以下建議：1．懷疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎的患者：應(yīng)立即采集2或3份血培養(yǎng)瓶，快速進(jìn)行血培養(yǎng)。2．不明病源的發(fā)熱，如隱性膿腫，傷寒熱和波浪熱：發(fā)熱開始采集2或3份血培養(yǎng)。24h至36h后，估計(jì)溫度升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培養(yǎng)。3．懷疑菌血癥或真菌菌血癥，血培養(yǎng)結(jié)果持續(xù)陰性，應(yīng)改變血培養(yǎng)方法，以便獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物。4．感染性心內(nèi)膜炎，對(duì)急性心內(nèi)膜炎患者1h（2h內(nèi)）采集3份血培養(yǎng)，如果所有結(jié)果24h后陰性，再采集3份血培養(yǎng)瓶。入院前兩周內(nèi)接受抗生素治療的患者，連續(xù)三天采集血培養(yǎng)，每天2份。第四如果患者在就診之前已經(jīng)使用了抗菌藥，則應(yīng)選擇含樹脂培養(yǎng)瓶進(jìn)行操作，借以中和、吸附抗菌藥物，提高病原菌的陽性檢出率。最后除了以上幾個(gè)要點(diǎn)以外還要注意標(biāo)本采集時(shí)的無菌操作及采血后應(yīng)立即送檢。目前有些醫(yī)生因?yàn)榭紤]到血培養(yǎng)耗時(shí)長(zhǎng)而放棄檢查。事實(shí)上，隨著檢驗(yàn)技術(shù)的提高，大部分病原菌可以在三天內(nèi)檢測(cè)出來。我科可以根據(jù)涂片染色先進(jìn)行電話報(bào)告。我院臨床醫(yī)生可以跟我科微生物檢驗(yàn)人員積極溝通，提高血培養(yǎng)標(biāo)本的送檢質(zhì)量，最大限度改善患者的預(yù)后。標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)

1.所有標(biāo)本必須立刻送交實(shí)驗(yàn)室，最好在2h以內(nèi)小量標(biāo)本應(yīng)于采集后15~30min內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。對(duì)環(huán)境敏感的微生物要求在床邊接種，包括厭氧菌、淋球菌、腦膜炎奈瑟菌、嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、志賀氏菌、弗朗西斯氏菌屬、莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌、新型隱球菌等。2.所有標(biāo)本必須放入有分隔空間的防漏塑料袋內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。要嚴(yán)格按照生物安全要求進(jìn)行操作。3.如果標(biāo)本的運(yùn)送有所延遲，應(yīng)將標(biāo)本放入運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。標(biāo)本的儲(chǔ)存1.如果標(biāo)本的處理有所延遲，應(yīng)將標(biāo)本放入轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中在適當(dāng)條件下進(jìn)行短期儲(chǔ)存2.淺表或開放性標(biāo)本可選用需氧轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基，封閉或深部標(biāo)本應(yīng)選用厭氧轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基3.懷疑由對(duì)溫度敏感的病原菌感染的標(biāo)本應(yīng)在室溫下保存，其他標(biāo)本均可放在4℃下進(jìn)行保存標(biāo)本處理對(duì)病原菌分離率的影響1、正確的采集和處理標(biāo)本是診斷感染性疾病的關(guān)鍵。不合格標(biāo)本的結(jié)果報(bào)告可能會(huì)提供能導(dǎo)致誤診的錯(cuò)誤信息和不恰當(dāng)?shù)闹委煛?、當(dāng)標(biāo)本送達(dá)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，要檢查標(biāo)本和申請(qǐng)單（以確保符合標(biāo)本接受的要求），并在申請(qǐng)單上記錄送檢時(shí)間和日期。3、應(yīng)當(dāng)制定合格標(biāo)本的最低要求和拒收不合格標(biāo)本的指南，實(shí)驗(yàn)室必須嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本接受和拒收的制度和標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)本的拒收12項(xiàng)原則1.不正確的轉(zhuǎn)運(yùn)溫度；2.不正確的轉(zhuǎn)運(yùn)工具；3.延長(zhǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間；4.未貼標(biāo)簽或錯(cuò)貼標(biāo)簽的標(biāo)本；5.標(biāo)