血培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作課件

血培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作血流感染發(fā)病率高發(fā)病率高：盡管新型廣譜抗生素的使用不斷更新，但BSI的發(fā)病率、死亡率并未得到相應(yīng)的控制。發(fā)病率從1986年的1.6%增至2006年的3.1%，年度增長(zhǎng)率為0.1%，病死率達(dá)21.0%~48.0%1

。涉及面廣：各組織器官感染均可繼發(fā)各臨床科室均有發(fā)生。病情嚴(yán)重：發(fā)病急，病死率高。1.Rodriguez-CreixemsM,etal.Medicine(Baltimore).2008Jul;87(4):234-49.什么是血培養(yǎng)？血培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)，從患者體內(nèi)采血，并將其裝入含有培養(yǎng)基的瓶中，以此來(lái)確定導(dǎo)致患者感染的微生物（細(xì)菌或真菌）是否已經(jīng)浸入患者的血液。完整的血培養(yǎng)過(guò)程包括：收集樣本檢測(cè)、分離并鑒定導(dǎo)致血流感染的微生物為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果血培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化采集采集血培養(yǎng)的時(shí)機(jī)采血量采集血培養(yǎng)的次數(shù)厭氧瓶的應(yīng)用血培養(yǎng)的正確采集什么時(shí)候進(jìn)行血培養(yǎng)？當(dāng)懷疑血流感染或菌血癥時(shí)，應(yīng)該做常規(guī)血培養(yǎng)。懷疑患兒有血流感染的癥狀和情況有：■ 不明原因的發(fā)燒(＞38℃)或體溫過(guò)低(＜36℃)■ 嚴(yán)重的局部感染，如腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、

腹部術(shù)后感染等■ 侵入性處置，如靜脈導(dǎo)管留置、導(dǎo)尿管留置、機(jī)械通氣等■ 休克，寒顫，僵直■心率異常加快■ 低血壓或高血壓■ 呼吸頻率加快采集血培養(yǎng)的時(shí)間估計(jì)寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前（通常在下午）采血使用抗菌藥物之前采血當(dāng)可疑臨床癥狀出現(xiàn)后，應(yīng)盡可能早地采血培養(yǎng)。在應(yīng)用抗菌藥物之前采血培養(yǎng)是最理想的。如果患兒已經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療，則應(yīng)該在下一次用藥前采血培養(yǎng)。03060時(shí)間(分鐘)體溫血培養(yǎng)采血時(shí)機(jī)細(xì)菌濃度采集血培養(yǎng)的時(shí)間血培養(yǎng)的采血量VersaTREK80ml需氧瓶和厭氧瓶FDA認(rèn)可的最低的采血量0.1–10ml對(duì)于特殊病人，沒(méi)有辦法獲得足夠標(biāo)本量時(shí)，一滴血就能挽救生命！VersaTREKRedox1需氧培養(yǎng)瓶Redox2厭氧培養(yǎng)瓶采集血培養(yǎng)的次數(shù)通常推薦在短時(shí)間內(nèi)(例如1小時(shí)內(nèi))在不同位置連續(xù)采血，做2對(duì)至3對(duì)(2瓶/對(duì))血培養(yǎng)。當(dāng)懷疑感染性心內(nèi)膜炎或其它的血管內(nèi)感染(導(dǎo)管相關(guān)性)菌血癥和真菌血癥時(shí)，則間隔采血(例如每隔1-2小時(shí)采血一次)，便于連續(xù)監(jiān)測(cè)。采血量、次數(shù)與陽(yáng)性率關(guān)系一項(xiàng)最近的研究顯示，用連續(xù)血培養(yǎng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)累積統(tǒng)計(jì)血培養(yǎng)敏感性結(jié)果，觀(guān)察到多對(duì)血培養(yǎng)組合的累積檢出率（每次采血量20ml，每瓶10ml）隨采血次數(shù)增加而遞增。由于多數(shù)病例中，細(xì)菌和真菌均一過(guò)性存在于血液中，所以單次血培養(yǎng)檢測(cè)的敏感性是有限的。為了保證對(duì)菌血癥的檢出率，取兩對(duì)以上的血培養(yǎng)是必要的。Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548應(yīng)用厭氧瓶的原因：不僅培養(yǎng)厭氧菌，可以幫助提高兼性厭氧菌的陽(yáng)性率如果抽取的血液量少于推薦量，血液應(yīng)先足量接種需氧瓶，剩余的血液應(yīng)該接種到厭氧瓶中。CLSI的準(zhǔn)則認(rèn)為對(duì)于厭氧瓶目前沒(méi)有選擇性的標(biāo)準(zhǔn)，為避免漏檢，需要常規(guī)做厭氧瓶。

厭氧瓶的應(yīng)用血培養(yǎng)的盲點(diǎn)微弱生長(zhǎng)的革蘭氏陰性細(xì)菌-空腸彎曲菌，布魯氏菌等SPS抑制作用-淋球菌，腦膜炎奈瑟氏菌，陰道加德納菌，消化鏈球菌，厭氧菌和嗜麥芽寡食單胞菌。杜克大學(xué)醫(yī)學(xué)中心6000多份臨床樣本培養(yǎng)數(shù)據(jù)VersaTREK對(duì)于鏈球菌和腸球菌有更高的檢出率。ControlledClinicalComparisonofVersaTREKandBacT/ALERTBloodCultureSystem杜克大學(xué)醫(yī)學(xué)中心模擬真菌血癥培養(yǎng)數(shù)據(jù)Microorganism

TREKO2NoBlood

BacT/ALERTO2NoBlood

TREKAnO2NoBloodBacT/ALERTAnO2NoBloodGroupB?-streptococci0

0

0

0

E.faecalis

0

0

0

0

E.faecium

0

0

0

0

M.catarrhalis

0

0

3

0

N.gonorrheae

0

1

1

1

N.meningitidis

0

2

3

2

H.aphrophilus

0

1

0

0

A.actinomycetemcomitans

0

2

0

0

C.hominis

0

3

3

1

Eikenellasp.

2

3

3

0

Kingellasp.

0

3

3

1

B.bronchiseptica

0

0

1

2

C.jejuni

0

3

3

1

P.aeruginosa-ATCC27853

0

0

0

1

B.fragilis-ATCC252851101S.pneumoniae-ATCC63050000

Total3192010VersaTREK需氧瓶和厭氧瓶分別檢出34株和17株細(xì)菌，需氧和厭氧組合未能檢出部分艾肯氏菌。BacT/Alert需氧瓶和厭氧瓶分別檢出18株和27株細(xì)菌，未能檢出部分淋病奈瑟氏菌、腦膜炎奈瑟氏菌、人類(lèi)心桿菌、脆弱擬桿菌。

培養(yǎng)瓶結(jié)果(沒(méi)有加血)標(biāo)本采集的要點(diǎn)先檢查血培養(yǎng)瓶是否有損壞或污染跡象。檢查每個(gè)瓶子上印的有效日期每一對(duì)瓶血培養(yǎng)應(yīng)該從身體的不同部位采取

用來(lái)培養(yǎng)的血應(yīng)該是外周靜脈血而不是動(dòng)脈血，動(dòng)脈血診斷意義不大。根據(jù)推薦，應(yīng)該避免從靜脈導(dǎo)管或動(dòng)脈導(dǎo)管抽血，因?yàn)橥ǔ＿@些裝置污染率較高。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時(shí)從外周靜脈采集另外一個(gè)血培養(yǎng)標(biāo)本，以幫助陽(yáng)性結(jié)果的判讀。皮膚消毒種類(lèi)濃度消毒時(shí)間

過(guò)敏是否需清除嬰兒<2月

碘酊

30秒有

是

洗必泰2-4%30秒無(wú)不必不能用

次氯酸

不必

碘伏

90秒有是

異丙基乙醇70-90%30秒有不必

采集標(biāo)本前的皮膚消毒非常重要對(duì)年齡小于2個(gè)月的新生兒，需使用70%的異丙基乙醇進(jìn)行皮膚消毒。消毒劑需要有足夠的作用時(shí)間以保證消毒效果。如何減少污染皮膚消毒前，血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用70％異丙基乙醇消毒并干燥，然后再進(jìn)行穿刺部位的皮膚消毒。嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作（酒精、碘酊、酒精），并等待足夠的消毒時(shí)間嚴(yán)