TNAIA 0320-2024 化妝品中蘆丁等6種黃酮類(lèi)化合物的測(cè)定 高效液相色譜法

ICS71.100.70CCSC268

T/NAIA團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/NAIA0320-2024化妝品中蘆丁等6種黃酮類(lèi)化合物的測(cè)定高效液相色譜法DeterminationofRutinandotherflavonoidincosmeticsByHigh-performanceliquidchromatography2024-10-02發(fā)布 2024-10-20實(shí)施寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì) 發(fā)布T/NAIA0320-2024T/NAIA0320-2024II前 言GB/T1.1-20201則》的規(guī)定起草。本文件由寧夏回族自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院提出。本文件由寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)歸口。本文件起草單位：寧夏回族自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院（(寧夏))寧夏工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院。本文件主要起草人：肖哲麗、王寧、王寧霞、馬玲、尚博揚(yáng)、翟宇、武亦融、王榮、賀凱、劉永衡、馬宗衛(wèi)。T/NAIA0320-2024T/NAIA0320-2024PAGEPAGE1化妝品中蘆丁等6種黃酮類(lèi)化合物的測(cè)定高效液相色譜法DeterminationofRutinandotherflavonoidincosmeticsByHigh-performanceliquidchromatography1范圍662GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4原理5試劑與材料除另有說(shuō)明外，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。甲醇溶液：準(zhǔn)確量取800mL甲醇于1L磷酸溶液：準(zhǔn)確量取1.0mL磷酸于1L標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁（CAS號(hào)153-18-4）、楊梅酮（CAS號(hào)529-44-2）、異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖苷（CAS號(hào)604-80-8）、槲皮素（CAS號(hào)117-39-5）、木樨草素（CAS號(hào)491-90-3）、山奈酚（CAS號(hào)520-18-3）標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥91%。標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制-3-O-β-D-1000mg/L4℃使用三個(gè)月。（5.6.1）各2.5mL于50mL中，用甲醇定容至刻度，配制成濃度為50mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，臨用現(xiàn)配?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別準(zhǔn)確量取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（5.6.2）0.2mL、0.4mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL用甲醇稀釋至10mL，得到濃度為1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液范圍可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整），臨用現(xiàn)配。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見(jiàn)附錄A。6儀器與設(shè)備分析天平：感量0.00001g。超聲波清洗器。超純水機(jī)。多管渦旋混合儀。微孔濾膜：0.45μm，有機(jī)系。7樣品處理0.5g(0.0001g)10mL（類(lèi)樣品應(yīng)取液體部分），6mL80%甲醇溶液，渦旋震蕩使試樣與提取溶劑充分混20min80%10mL0.45μm有機(jī)微孔濾膜過(guò)濾后，濾液作為樣品待測(cè)溶液。8測(cè)定條件高效液相色譜參考條件如下：色譜柱：C18柱或等效色譜柱；b)柱溫：25℃；c)流動(dòng)相：A:0.1%磷酸（5.4），B:甲醇（5.1）,見(jiàn)表1；檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm；流速：0.8mL/min；進(jìn)樣量：10μL。表1梯度洗脫程序時(shí)間（min）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）05149105149133070203070235149285149測(cè)定9分析結(jié)果的表述試樣中蘆丁、楊梅酮、異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖苷，槲皮素、木樨草素、山奈酚6種黃酮類(lèi)化合物的含量按以下公式計(jì)算：ω=??×??×?? （1）??×1000ω——6（gρ——代入標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得試樣中蘆丁等6種黃酮類(lèi)化合物的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）；m——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；V——試樣中加入并定容的提取溶液體積的數(shù)值，單位為毫升（mL）；D——為稀釋倍數(shù)；注：測(cè)定結(jié)果用平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。10精密度在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的10%。11其他-3-O-β-D-6附錄A（資料性）-3-O-β-D6圖A.混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖1:蘆?。?.223min）;2