熟料消化率測(cè)定法

QB/TXXX—20XX熟料消化率的測(cè)定本文件規(guī)定了醬油、黃豆醬在制品熟料消化率的測(cè)定方法。本文件適用于醬油、黃豆醬在制品熟料消化率的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T18186釀造醬油SB/T10317蛋白酶活力測(cè)定法3原理蛋白質(zhì)原料經(jīng)蒸煮后，其中蛋白質(zhì)可被酶分解為水溶性肽類或氨基酸?？杀幻杆獾牡鞍踪|(zhì)占原料中全部蛋白質(zhì)的百分比，為該原料的消化率，該指標(biāo)可衡量原料蒸煮的質(zhì)量。4試劑與材料除非另有規(guī)定，本方法中所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水。4.1試劑4.1.1無(wú)水乙醇。4.1.2二水合磷酸二氫鈉（NaH2PO4?2H2O）。4.1.3十二水合磷酸氫二鈉（Na2HPO4?12H2O）。4.2試劑配制4.2.150%乙醇溶液取無(wú)水乙醇50mL和50mL水混合均勻備用。4.2.2pH7.2磷酸鹽緩沖溶液甲液：取磷酸二氫鈉（NaH2PO4·2H2O）31.2g，用水定容至1000mL。乙液：取磷酸氫二鈉（Na2HPO3·12H2O）71.63g，用水定容至1000mL。取甲液28mL，乙液72mL混合即成pH7.2的磷酸鹽緩沖液。4.2.3酶液（種曲浸出液）稱取約20g新鮮種曲，放入錐形瓶中，加20mL50%乙醇溶液，加180mL水?dāng)嚢杈鶆?，置?0℃水浴中浸泡1h，搖動(dòng)數(shù)次，用慢速濾紙過(guò)濾或離心機(jī)(1500r/min~2000r/min)分離5min。取濾液或上清液蛋白酶活力在100U/mL以上，全氮含量須在0.06g/100mL以下（蛋白酶活力、全氮分別按SB/T10317、GB/T18186測(cè)定）。如不在此范圍內(nèi)，則須加以調(diào)節(jié)。酶液不必每次都在測(cè)定前進(jìn)行制備?？梢淮沃苽浜?，調(diào)整好酶活力范圍以后置冰箱中備用，保存期不宜超過(guò)三天。5儀器和設(shè)備QB/TXXX—20XX5.1高速組織搗碎機(jī)。5.2恒溫水浴鍋。5.3離心機(jī)。5.4天平（感量1g，0.1mg）。5.5測(cè)定蛋白酶活力、全氮的儀器和設(shè)備按SB/T10317、GB/T18186規(guī)定。6分析步驟6.1熟料漿制備取100g熟料放入高速組織搗碎機(jī)中，加水300mL。蓋好蓋子，合上開(kāi)關(guān)，搗攪1min后停機(jī)，將飛濺在容器壁上的熟料顆粒用藥匙刮下，再繼續(xù)開(kāi)機(jī)搗碎2min，使熟料搗成均勻的料漿。停機(jī)、開(kāi)蓋，將料漿倒入燒杯內(nèi)。用四層濕紗布蓋好備用。6.2水解液的制備精確稱取熟料漿6g左右（精確到0.2mg）于150mL錐形瓶?jī)?nèi)，加入75mL酶液，再加入pH7.2磷酸鹽緩沖液20mL搖勻，在瓶□塞上橡皮塞后，置于水浴鍋中，55℃保持2h取出，拔下塞子，放在已煮沸的沸水浴中再煮沸10min。取出冷卻，移入100mL容量瓶，加水定容至100mL。注：熟料漿要盡量搗碎均勻，搗碎后要及時(shí)稱量。水解用熟料漿和測(cè)定全氮用熟料漿要緊接在一起稱量，以免水分蒸發(fā)6.3全氮的測(cè)定6.3.1水解液全氮的測(cè)定取試液（6.2）用慢速濾紙過(guò)濾或離心分離（1500r/min~2000r/min，10min）。棄去開(kāi)始濾出的濾液5mL左右，用移液管精確吸取濾液或上清液1OmL，按照GB5009.5的規(guī)定測(cè)定水解液的全氮含量，結(jié)果記為T(mén)N水。注：采用離心分離時(shí)，為使?jié)舛瘸侍荻确植嫉纳锨逡夯旌暇鶆?，離心結(jié)束后須將上清液傾出搖均后再吸取，為防止傾出6.3.2酶液全氮的測(cè)定精確吸取酶液10mL，按照GB5009.5的操作測(cè)定酶液的全氮含量，結(jié)果記為T(mén)N酶。6.3.3熟料漿全氮的測(cè)定精確稱取熟料漿2g（精確到0.2mg），按照GB5009.5的操作測(cè)定熟料漿的全氮含量，結(jié)果記為T(mén)N料。7分析結(jié)果的表述試樣的消化率按式（1）計(jì)算：料X=TN水×?酶×75×100…………（1）料式中：X——試樣的消化率，%；TN水×10O——100mL水解液全氮含量，單位為克（gTN酶×75——所加75mL酶液全氮含