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團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》(征求意見(jiàn)稿)編制說(shuō)明一、項(xiàng)目來(lái)源根據(jù)《廣西標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)關(guān)于下達(dá)2020年第十批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》桂標(biāo)協(xié)[2020](30)號(hào)文件精神,由廣西花卉協(xié)會(huì)提出,廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院、廣西上林福人湖休閑農(nóng)業(yè)集團(tuán)有限公司、廣西花卉協(xié)會(huì)、南寧市綠化工程管理中心、南寧青秀山風(fēng)景名勝旅游開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司、廣西為君開(kāi)三角梅科技有限公司、海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶園藝研究所、廣西深根建設(shè)集團(tuán)有限公司等單位共同起草制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》。二、目的意義廣西壯族自治區(qū)人民政府與國(guó)家林業(yè)和草原局聯(lián)合印發(fā)了《廣西現(xiàn)代林業(yè)產(chǎn)業(yè)示范區(qū)實(shí)施方案》,明確提出大力發(fā)展綠色富民產(chǎn)業(yè),加快培育和發(fā)展茉莉花、金花茶、羅漢松、桂花、三角梅(寶巾花)等廣西花卉種苗優(yōu)勢(shì)品種,到2025年末全區(qū)花卉種苗生產(chǎn)面積將達(dá)到180萬(wàn)畝?!稄V西林業(yè)草原發(fā)展“十四五”規(guī)劃》強(qiáng)調(diào)重點(diǎn)建設(shè)綠化觀賞苗木、盆栽盆景等一批花卉園區(qū)。《廣西花卉產(chǎn)業(yè)發(fā)展“十四五”規(guī)劃》指出全面提升廣西花卉產(chǎn)業(yè)化水平和“桂派”花卉影響力,鼓勵(lì)發(fā)展花文化旅游,將花卉產(chǎn)業(yè)打造成為廣西萬(wàn)億元林業(yè)綠色產(chǎn)業(yè)的重要組成部分。三角梅是我國(guó)南方地區(qū)重要的園林綠化樹(shù)種,其花量之大、花期之長(zhǎng),很少有植物能與之相比。三角梅適應(yīng)性強(qiáng)、耐修剪、生長(zhǎng)迅速、花期長(zhǎng)、花色豐富、觀賞價(jià)值高,在華南、西南各地都有大規(guī)模種植。目前,是海南省花及北海、梧州、玉林、深圳和廈門(mén)等多地市花。近年來(lái),隨著鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略的大力實(shí)施,三角梅已從我國(guó)南方走向全國(guó)各地,成為改善人居環(huán)境、建設(shè)美麗鄉(xiāng)村的主打植物之一,在建設(shè)森林城市、園林城市和宜居城市方面亦發(fā)揮著重大作用。一直以來(lái),三角梅多采用扦插或嫁接繁殖,但是三角梅品種繁多,個(gè)別稀有品種生長(zhǎng)速度慢,扦插成活率不高,無(wú)法滿(mǎn)足市場(chǎng)的大量需求,因此急需通過(guò)其他繁殖方法提高其成活率。而組培快繁則是獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗的有效途徑之一,也是種質(zhì)資源保存的重要手段。三角梅的組培技術(shù)研究已有諸多報(bào)道,組培生產(chǎn)系統(tǒng)也在不斷優(yōu)化和完善,研究成果正逐步應(yīng)用于種苗生產(chǎn)。目前,有關(guān)三角梅組培繁育的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)未見(jiàn)發(fā)布,也未見(jiàn)編制報(bào)道。廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《三角梅栽培技術(shù)技術(shù)規(guī)程》已發(fā)布,中國(guó)花卉協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅盆花生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程與質(zhì)量等級(jí)》已經(jīng)立項(xiàng),但是上述兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)均未涉及到三角梅的組培育苗技術(shù)。因此,制定三角梅的組培繁育技術(shù)規(guī)程,對(duì)指導(dǎo)和規(guī)范三角梅的組培苗生產(chǎn)技術(shù),對(duì)提升我區(qū)三角梅產(chǎn)業(yè)的技術(shù)水平具有重要意義。三、項(xiàng)目編制過(guò)程(一)成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》項(xiàng)目任務(wù)下達(dá)后,廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院成立團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)編制工作團(tuán)隊(duì),標(biāo)準(zhǔn)編制工作團(tuán)隊(duì)人員認(rèn)真學(xué)習(xí)《中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法》和標(biāo)準(zhǔn)編制有關(guān)文件,制定了標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)原則、技術(shù)路線和實(shí)施方案,有序地開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)編制工作。具體標(biāo)準(zhǔn)編制工作由廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院、廣西上林福人湖休閑農(nóng)業(yè)集團(tuán)有限公司、廣西花卉協(xié)會(huì)、南寧市綠化工程管理中心、南寧青秀山風(fēng)景名勝旅游開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司、廣西為君開(kāi)三角梅科技有限公司、海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶園藝研究所、廣西深根建設(shè)集團(tuán)有限公司等起草單位組成標(biāo)準(zhǔn)編制工作團(tuán)隊(duì)。團(tuán)隊(duì)主要成員包括孫利娜、林茂、陳爾、龔建英、楊開(kāi)太、尹國(guó)平、王華新、楊舒婷、武建云、李冰、黃旭光、王宇澄、歐春園、黃業(yè)超、韋能孫、張磊、尹婷輝、錢(qián)永康、楊洪葉、楊珺、陳深根。標(biāo)準(zhǔn)編制工作團(tuán)隊(duì)由資料收集組、草案編寫(xiě)組和標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施組構(gòu)成。資料收集組負(fù)責(zé)查閱、收集、整理三角梅組培技術(shù)相關(guān)文獻(xiàn),了解相關(guān)動(dòng)態(tài)。草案編寫(xiě)組負(fù)責(zé)起草標(biāo)準(zhǔn)草案、征求意見(jiàn)稿、標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明及送審稿等工作,包括后期召開(kāi)征求意見(jiàn)會(huì)、網(wǎng)上征求意見(jiàn),以及標(biāo)準(zhǔn)的不斷修改和完善。標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施組負(fù)責(zé)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布后的宣傳培訓(xùn)工作,對(duì)企業(yè)、農(nóng)戶(hù)開(kāi)展培訓(xùn),對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行詳細(xì)解讀,讓從事三角梅產(chǎn)業(yè)的企業(yè)、農(nóng)戶(hù)等相關(guān)人員了解標(biāo)準(zhǔn),并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)三角梅組培快繁技術(shù)進(jìn)行規(guī)范化操作,保證三角梅的生產(chǎn),并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施情況進(jìn)行總結(jié)分析,不斷對(duì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)提出修正意見(jiàn)。(二)研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在對(duì)收集的資料進(jìn)行整理研究之后,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究,并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵性?xún)?nèi)容進(jìn)行了初步探討。經(jīng)過(guò)研究,標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為培養(yǎng)基、母株準(zhǔn)備、接種工具消毒、培養(yǎng)條件、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽與苗期管理。(三)形成草案、征求意見(jiàn)稿在前期工作基礎(chǔ)之上,理清邏輯脈絡(luò),整合已有的參考資料,按照簡(jiǎn)化、統(tǒng)一等原則編制完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》(草案)。標(biāo)準(zhǔn)編制小組廣泛征求意見(jiàn),多次召開(kāi)會(huì)議,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)草案進(jìn)行反復(fù)修改和研究討論。修改完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》(征求意見(jiàn)稿)和編制說(shuō)明(征求意見(jiàn)稿)。四、標(biāo)準(zhǔn)制定原則遵循科學(xué)性、先進(jìn)性、合理性和適用性原則,嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求,編寫(xiě)標(biāo)準(zhǔn)文件。所制定的標(biāo)準(zhǔn)力求科學(xué)規(guī)范、指標(biāo)準(zhǔn)確、可操作性強(qiáng),既與有關(guān)國(guó)家和行業(yè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)接軌,又能滿(mǎn)足廣西生產(chǎn)實(shí)際需要,以便推動(dòng)廣西三角梅種苗生產(chǎn)。(一)實(shí)用性原則本文件是在充分收集相關(guān)資料和文獻(xiàn),分析三角梅育苗技術(shù)現(xiàn)狀,調(diào)研三角梅組培育苗的應(yīng)用情況,在現(xiàn)有國(guó)家、行業(yè)、地方標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)技術(shù)要求的基礎(chǔ)上,結(jié)合起草單位多年的研究經(jīng)驗(yàn)而總結(jié)起草的。力求做到科學(xué)規(guī)范、技術(shù)先進(jìn)、指示準(zhǔn)確、可操作性強(qiáng),既與國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)接軌,又符合廣西區(qū)情。(二)協(xié)調(diào)性原則本文件編寫(xiě)過(guò)程中注意了與三角梅育苗技術(shù)相關(guān)法律法規(guī)的協(xié)調(diào)問(wèn)題,在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。(三)規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫(xiě)本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容,保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)質(zhì)量。(四)前瞻性原則本文件參考已有的三角梅行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)、以及公開(kāi)發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn),結(jié)合多項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),兼顧到三角梅產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的趨勢(shì)和需要,在標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)了特色性和前瞻性,既與有關(guān)國(guó)家和行業(yè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)接軌,又能滿(mǎn)足廣西生產(chǎn)實(shí)際需要,以便推動(dòng)三角梅種苗生產(chǎn)。五、標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容及依據(jù)來(lái)源團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《三角梅組培苗育苗技術(shù)規(guī)程》主要內(nèi)容包括:培養(yǎng)基、母株準(zhǔn)備、接種工具消毒、培養(yǎng)條件、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽與苗期管理。母株準(zhǔn)備及外植體采集將待用母株提前放入溫室大棚,用清水將枝葉清洗干凈,并噴撒5%多菌靈,減少植株表面附帶的微生物和病蟲(chóng)害。從備用母株上選取生長(zhǎng)良好、無(wú)病蟲(chóng)害的嫩枝、頂芽作為外植體,于晴天上午采集。(二)滅菌滅菌包括外植體滅菌和接種工具滅菌。首先將外植體表面附屬物用洗潔精清洗干凈,然后在超凈臺(tái)上用75%的酒精和0.1%升汞對(duì)其消毒;利用超凈臺(tái)的紫外燈、風(fēng)扇、高溫滅菌器對(duì)剪刀、解剖刀等接種工具進(jìn)行滅菌;用75%酒精消毒手和手腕。(三)誘導(dǎo)培養(yǎng)本標(biāo)準(zhǔn)以三角梅頂芽和幼嫩莖段為外植體,頂芽留2cm~3cm,莖段切成2cm~4cm長(zhǎng)的小段,接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基,每種培養(yǎng)基接種莖段和頂芽分別50個(gè)。誘導(dǎo)率(%)=(誘導(dǎo)出愈傷或芽的外植體數(shù)/接種外植體數(shù))×100%。誘導(dǎo)培養(yǎng)基設(shè)置5個(gè)配方:(1)MS+1.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(2)MS+2.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(3)MS+3.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(4)MS+4.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(5)MS+5.0mg/L6-BA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂,pH值為5.5-6.0,培養(yǎng)7天~14天。表1接種外植體誘導(dǎo)出愈傷組織或芽的時(shí)間和誘導(dǎo)率培養(yǎng)基序號(hào)接種外植體數(shù)(個(gè))莖段愈傷出現(xiàn)時(shí)間(d)莖段愈傷組織誘導(dǎo)率(%)莖段側(cè)芽出現(xiàn)時(shí)間(d)莖段側(cè)芽誘導(dǎo)率(%)頂芽出現(xiàn)時(shí)間(d)頂芽誘導(dǎo)率(%)(1)50107014611335(2)5079610921089(3)5079011851276(4)5096313371428(5)50952\0\0試驗(yàn)表明,5種培養(yǎng)基的莖段均可誘導(dǎo)出愈傷組織,其中培養(yǎng)基的愈傷組織出現(xiàn)最早的是(2)、(3)培養(yǎng)基,均在第7天時(shí)出現(xiàn),(1)號(hào)培養(yǎng)出現(xiàn)最晚;(2)號(hào)培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高,達(dá)96%,(5)號(hào)培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最低。(2)號(hào)培養(yǎng)基莖段側(cè)芽出現(xiàn)時(shí)間最早,側(cè)芽誘導(dǎo)率最高,達(dá)92%;(5)號(hào)培養(yǎng)基未誘導(dǎo)出側(cè)芽。(2)號(hào)培養(yǎng)基頂芽出現(xiàn)時(shí)間最早,誘導(dǎo)率最高,達(dá)89%;(5)號(hào)培養(yǎng)基未誘導(dǎo)出頂芽。當(dāng)6-BA濃度高于2.0mg/L時(shí),隨著6-BA濃度的升高,愈傷組織、側(cè)芽和頂芽的誘導(dǎo)時(shí)間逐漸延長(zhǎng),誘導(dǎo)率逐漸降低??傊?)號(hào)培養(yǎng)基誘導(dǎo)效果最好,(四)增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)出的側(cè)芽和頂芽轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,培養(yǎng)周期為30天~35天。增殖培養(yǎng)基設(shè)置4個(gè)配方:(1)MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(2)MS+4.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(3)MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(4)MS+4.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂進(jìn)行培養(yǎng)。表2不同激素配比對(duì)三角梅組培芽增殖的影響培養(yǎng)基序號(hào)接種芽數(shù)增殖系數(shù)生長(zhǎng)情況(1)304.82長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)、苗健壯(2)302.44長(zhǎng)勢(shì)差、苗弱(3)302.56長(zhǎng)勢(shì)一般、苗較弱(4)302.01長(zhǎng)勢(shì)差、苗弱由表2可知,(1)號(hào)培養(yǎng)基MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂增殖效果最好,產(chǎn)生的叢生芽最多,增殖系數(shù)為4.82,苗健壯;(2)號(hào)、(3)號(hào)和(4)號(hào)培養(yǎng)基增殖系數(shù)較低,長(zhǎng)勢(shì)較差,苗弱。6-BA和生長(zhǎng)素濃度過(guò)高均不利于增殖,且苗容易玻璃化。(五)壯苗培養(yǎng)將增殖培養(yǎng)獲得的叢生芽分離成單個(gè)芽,轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基,培養(yǎng)25天~30天。壯苗培養(yǎng)基設(shè)置4個(gè)配方:(1)MS+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(2)MS+0.2mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(3)MS+0.3mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(4)MS+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂,pH值5.5~6.0。表3不同NAA濃度對(duì)三角梅組培苗生長(zhǎng)的影響培養(yǎng)基序號(hào)平均苗高(cm)平均葉片數(shù)(片)(1)3.934.16(2)4.124.94(3)5.577.13(4)4.605.68由表3可知,組培苗在(3)號(hào)培養(yǎng)基長(zhǎng)勢(shì)最好,平均苗高5.57cm,平均葉片數(shù)7.13,NAA濃度在0.1mg/L~0.3mg/L范圍內(nèi),隨著NAA濃度的升高組培苗苗高和葉片數(shù)逐漸升高和增加,但是當(dāng)濃度升至0.5mg/L時(shí)開(kāi)始苗高降低、葉片數(shù)減少。(六)生根培養(yǎng)當(dāng)幼苗高高于4cm時(shí),將其轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基,每種培養(yǎng)基接種50株,計(jì)算平均生根率、平均生根數(shù)、平均根長(zhǎng)和平均根粗。生根培養(yǎng)基設(shè)置5個(gè)配方:(1)1/2MS+1.5mg/LIBA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(2)1/2MS+2.0mg/LIBA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(3)MS+1.5mg/LIBA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(4)MS+2.0mg/LIBA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂、(5)MS+0.1mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.2mg/LGA4+7+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂,pH值5.5~6.0。表4不同激素配比對(duì)三角梅組培苗生根的影響培養(yǎng)基序號(hào)接種數(shù)(株)生根率(%)生根時(shí)間(d)根數(shù)量(條)根長(zhǎng)度(cm)根粗度(mm)(1)505438~423.233.751.09(2)504335~404.093.901.37(3)506632~375.444.381.53(4)505932~366.674.851.91(5)508127~308.125.692.01由表4可知,(5)號(hào)培養(yǎng)基生根效果最好,生根時(shí)間最早,培養(yǎng)27天時(shí)開(kāi)始生根,平均生根率高達(dá)81%,平均生根數(shù)8.12根,平均根長(zhǎng)5.69cm,平均根粗2.01mm;(1)號(hào)培養(yǎng)基生根效果最差;激素種類(lèi)和濃度相同時(shí),MS培養(yǎng)基效果優(yōu)于1/2MS培養(yǎng)基;生根培養(yǎng)基中加入激素GA4+7更有利于促進(jìn)生根。(七)移栽移栽基質(zhì)采用體積比為4:1的黃心土和濾泥,800倍液高錳酸鉀消毒,移栽成活率達(dá)96%。(八)苗期管理春秋季每天噴淋1次~2次,夏季每天噴淋2次~3次,冬季7天噴1次;移栽后30天施肥,每隔20天~30天用硫酸鉀平衡復(fù)合肥(17-17-17)水溶液淋施,或0.1%磷酸二氫鉀水溶液噴施。六、國(guó)內(nèi)同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)制修訂情況及與法律法規(guī)、強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)關(guān)系與三角梅育苗相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)有DB46/T
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